İlaç Takviye için yeni cihaz ve Yöntem
20 Ağustos 2010
Edimsel ilaç öz-yönetim ve klimalı yer tercihi (CPP) prosedürleri expansively, insanlarda ilaç güçlendirme, tüketimi ve bağımlılığının çeşitli bileşenleri modeline araştırma kullanılır. Bu raporda, ilaç takviye ve sıçanlarda bağımlılığı eğitimi için yeni bir yaklaşım olarak geleneksel CPP ve öz-yönetim yöntemleri kombine.
Bu video, geleneksel koşullu yer tercihi ve kendi kendine uygulama prosedürlerini birleştirerek uyuşturucu bağımlılığını inceleyen yeni bir yaklaşımı göstermektedir. İlk olarak, iki farklı operant çevre için temel tercihler belirlenir. Ardından, sıçanların yalnızca belirgin operant çevrelerden birinde kendi kendilerine kokain uyguladıkları kendi kendine uygulama seansları başlar.
Koşullandırmanın ardından, hayvanların her iki operant ortamda geçirmeyi seçtikleri süre ölçülür; ardından yer tercihindeki değişiklikler ve ilaç kendi kendine uygulama hızları ölçülerek birbiriyle ilişkilendirilebilir. Merhaba, ben Teksas Üniversitesi Austin Kampüsü Eczacılık Fakültesi, farmakoloji ve toksikoloji bölümünde Dr. Christine Elle'in laboratuvarından Allison Fiducia. Ve ben de Christine Elle.
Bugün sizlere, sıçanlarda ilaç pekiştirme ve bağımlılığını incelemek için çeşitli farklı şekillerde kullanılabilecek yeni bir düzeneği tanıtmak istiyoruz. Laboratuvarımızda, kokain kendi kendine uygulamasının durum etkilerini incelemek için bu prosedürü kullanıyoruz. Öyleyse hadi başlayalım.
İlaç pekiştirme deneylerinin hazırlıklarına başlamak için, öncelikle erkek sıçanlara yiyecek ödülü almak için bir manivela basma eğitimi verin. Ardından, ilaç kendi kendine uygulama için kullanılacak olan intravenöz kateterleri hazırlayın. Kateterler paslanmaz çelik kanül ve Celeste tüplerinden yapılır; metanol ve su ile yıkanmalıdır.
Ardından, ameliyat günündeki hazırlıkları sırasında havada kurutun ve %70 etanol ile yıkayın. Kateterlerin hazırlanması tamamlandığında, ilaçların kendi kendine uygulanabilmesi için sıçanlara juguler kateterizasyon cerrahi işlemi uygulayın. Deneyler sırasında, bir sıçanı %2,5 ila %4 izofluran ile anestezi altına alın.
Ardından, baş ve göğüs bölgesini tıraş edin ve bu alanları Betadine solüsyonu ile dezenfekte edin. Daha sonra, cerrahi işlem sonrasında hayvanı steril bir ped üzerine yerleştirin. Sıçanı, hayvan kolonisini geri döndürmeden önce birkaç saat boyunca gözlemleyin.
Kateter açıklığını korumak için her gün 0,1 mililitre %0,9'luk salin, heparin ve menton çözeltisi ile yıkama yapın. Deneylerde kullanılacak kokaini hazırlamak için, hayvan ağırlıklarına göre uygun doz konsantrasyonlarında izotonik salin çözeltisi içinde çözün; böylece hayvanlar ve ilaç iletimi hazır hale getirilir. Deneyler sırasında kullanılan düzeneğe bir göz atalım. Deneylerde kullanılan düzenek, ev ve uyarıcı ışıklarıyla donatılmış iki tek kollu hazne ve lokomotor aktiviteyi ölçmek için kullanılan üç set fotobeamden oluşturulmuştur.
Odacıklar, inşa edilmiş pleksiglas bir koridorla birbirine bağlanmıştır. Koridor; beyaz şeritli iki siyah duvardan ve iki metal duvardan, şeffaf bir pleksiglas üst kısımdan ve beyaz bir pleksiglas tabandan oluşur. İki operant odacığın çelik ızgara çubuk tabanları, çıkarılabilir metal kafes altlıkları ile donatılmıştır.
Benzersiz ve ayırt edilebilir ortamlar oluşturmak için operant hazne içerisine görsel ve koku uyaranları yerleştirilir. Ortamlardan birinde, denek kokain enjeksiyonlarına erişebilecektir. Diğer ortamda ise denek yalnızca salin enjeksiyonlarına erişebilecektir.
Görsel ipuçları, ön ve arka duvarlara ve kafes üstüne tutturulmuş beyaz veya siyah keçe malzemeden oluşur. Koku ipuçları ise haznenin çubuk tabanının altına yerleştirilmiş, gül veya tarçın yağı ile doyurulmuş bir pamuk yumağıdır. Deneyler sırasında, Libra yanıtları ve lokomotor aktivite verileri, med PC yazılımı yüklü Med Pentium 100 megahertz bir bilgisayar ile kaydedilir.
Deney düzeneğini gördüğümüze göre, şimdi veri toplama sürecine bakalım. Deneysel prosedür; iki gün süren bazal tercih testleriyle başlayan, ardından sekiz veya 16 gün süren ilaç kendi kendine uygulama seanslarıyla devam eden ve koşullu yer tercihi testi ile sona eren birden fazla güne yayılmaktadır. Bazal tercih ölçümlerini toplamaya başlamak için, sıçanı her iki operant hazneye erişimi olacak şekilde 20 dakika boyunca orta koridora yerleştirin.
Sıçağı hazneye yerleştirdikten hemen sonra, video kamerayı, med PC yazılım programını ve zamanlayıcıyı eş zamanlı olarak çalıştırın. 20 dakika sonra sıçağı hazneden çıkarın ve tekrar ana kafesine yerleştirin. Son bazal testten bir gün sonra, ilaç kendi kendine uygulama seanslarına başlayın.
İlk olarak duyusal ipuçlarını yerleştirin ve ardından pleksiglas orta koridordan hazneye erişimi engellemek için bir panel koyun. Oturumu başlatmak için hayvanın kateter girişini monte edilmiş ilaç şırıngasına bağlayın. İlk olarak, hayvanı hazneye yerleştirin.
Operant oda kapısını kapattıktan sonra, kokain erişiminin bir saat boyunca sağlanması için med PC programını ve zamanlayıcıyı başlatın. Kokain, progresif oranlı bir pekiştirme çizelgesi kullanılarak uygulanır. Bu çizelge, her bir ardışık kokain enjeksiyonunu almak için kademeli olarak daha fazla kaldıraç tepkisi verilmesini gerektirir.
Her bir enjeksiyon, ardışık günlerde kilogram başına 0.75 miligramlık bir dozdan oluşur. Alternatif ortamda, salin enjeksiyonları için de progresif oran çizelgesi kullanılır. Her kendi kendine uygulama oturumunun sonunda, sargıyı ilaç tüplerinden ayırın, hayvanı bölmeden çıkarın ve tekrar ev kafesine yerleştirin.
Son kendi kendine uygulama seansından bir gün sonra, koşullu yer tercihi testi gerçekleştirin. Bu testin prosedürü, bazal ölçümlerle aynıdır. Şimdi verilerin nasıl değerlendirileceğini ve analiz edileceğini görelim.
Veri değerlendirmesi ve deneycinin kör grup atamaları sırasında, hayvanın her bir bölmede geçirdiği sürenin miktarı belirlenir. Deneyci, hayvanın aparata yerleştirilmesinden beş dakika sonra başlayan 15 dakikalık süre boyunca bölmeler arasındaki giriş ve çıkışları saymak için video kaydını inceler. Bazal tercihi ve CPP test skorlarını belirlemek için de aynı prosedürler uygulanır.
İlaç koşullanma etkilerini belirlemek için bazal ölçümler ile koşullanma sonrası CPP skorları arasındaki farklar kullanılır. Koşullanma sonrası fark skorları, CPP testi sırasında ilaçla eşleştirilmiş bölmede geçirilen süreden, belirgin eşleştirilmiş bölmede geçirilen sürenin çıkarılmasıyla hesaplanır. Bazal fark skorları da benzer şekilde hesaplanır ve CPP fark skorlarından çıkarılır.
İlaç koşullanmasının etkilerini belirlemek için başlangıçtan test oturumlarına kadar olan farklı skor değişiklikleri üzerinde istatistiksel analizler yapılabilir. Burada başlangıç ve CPP test skorlarının temsili bir grafiği gösterilmiştir. CPP test skorları, kokain ortamına yönelik bir tercihi belirterek başlangıç skorlarından anlamlı derecede daha yüksek çıkmıştır.
Toplam ilaç terk yanıtları ve CPP fark testi skorları için koşullandırma korelasyon analizi burada gösterilmiştir. Kokain uzun dönem grubu, ilaç terk yanıtları ile CPP test skorları arasında anlamlı pozitif korelasyon gösteren tek grup olmuştur. Sıçanlarda ilaç pekiştirmesini incelemek için geleneksel koşullandırma, yer tercihi ve kendi kendine uygulama yöntemlerini yeni bir yaklaşım için nasıl birleştireceğinizi göstermiş olduk.
Bu prosedür uygulanırken, düzenli kayıt tutmaya özen göstermek önemlidir. Hepsi bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.
Genel Bakış
Bu çalışma, geleneksel koşullu yer tercihi (CPP) ve kendi kendine uygulama yöntemlerini entegre ederek, sıçanlarda ilaç pekiştirmesi ve bağımlılığını inceleyen özgün bir yaklaşım sunmaktadır. Uygulanan metodoloji, ilaç arama davranışı ve tercihinin kapsamlı bir şekilde analiz edilmesine olanak tanır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Sinirbilim
- Farmakoloji
- Davranış Psikolojisi
Arka Plan
- Operant ilaç kendi kendine uygulama ve CPP, bağımlılık araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.
- Bu yöntemler, ilaç pekiştirme ve tüketim davranışlarının modellenmesine yardımcı olur.
- Bu davranışların anlaşılması, bağımlılık tedavilerinin geliştirilmesi için kritik öneme sahiptir.
- Bu çalışma, daha güçlü bir analiz için her iki yöntemi birleştirmektedir.
Çalışmanın Amacı
- Sıçanlarda kokain kendi kendine uygulamalarının yer tercihine etkilerini araştırmak.
- İlacın kendi kendine uygulaması ile çevresel tercihler arasındaki ilişkiyi değerlendirmek.
- Madde bağımlılığı mekanizmalarına dair içgörüler sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- İki farklı operant ortam için bazal tercihler belirlendi.
- Erkek sıçanlar, bir ortamda kokain ve diğer ortamda salin kendi kendine uygulamak üzere eğitildi.
- Lokomotor aktivite ve kol basma verileri, özel bir yazılım kullanılarak toplandı.
- Kendi kendine uygulama oturumlarının ardından koşullu yer tercihi testleri gerçekleştirildi.
Ana Sonuçlar
- Sıçanlar, kokain uygulamasıyla ilişkilendirilen ortama karşı belirgin bir tercih göstermiştir.
- Veriler, kendi kendine uygulama oranları ile ilaçla eşleştirilmiş ortamlarda geçirilen süre arasında bir korelasyon olduğunu göstermiştir.
- Sonuçlar, CPP ve kendi kendine uygulama yöntemlerinin birleştirilmesinin geçerliliğini desteklemektedir.
- Bulgular, ilaç bağımlılığının davranışsal yönlerinin anlaşılmasına katkıda bulunmaktadır.
Sonuçlar
- Kombine metodoloji, ilaç pekiştirmesini incelemek için değerli bir araç sağlamaktadır.
- Elde edilen bulgular, gelecekteki bağımlılık araştırmalarına ve terapötik stratejilere temel oluşturabilir.
- Farklı maddeleri ve etkilerini araştırmak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Sıkça Sorulan Sorular
Yönetici Endüstriyel Uygunluğu
Koşullu yer tercihi (CPP) ve operant kendi kendine uygulama yöntemlerinin tek bir düzenekte entegre edilmesi, preklinik modellerdeki ilaç pekiştirme mekanizmalarının daha ayrıntılı bir şekilde incelenmesine olanak tanır. Bu çift modlu yaklaşım, bağımlılık araştırmaları süreçlerinde hedef doğrulaması ve mekanistik risk azaltma için öngörü güvenini artırır. Söz konusu yöntem, insan madde kullanım bozukluklarıyla ilgili motivasyonel ve ilişkisel davranışsal son noktaları uyumlu hale getirerek translasyonel sürekliliği destekler.
Biyofarmasötik Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- İlaç pekiştirmesi ve motivasyonel yolaklarla ilgili terapötik hipotezlerin sağlam bir şekilde test edilmesini sağlar.
- Operant davranışı koşullu çevresel tercih ile ilişkilendirerek biyolojik risk azaltımını kolaylaştırır.
- Kantitatif davranışsal uç noktalar aracılığıyla fonksiyonel hedef doğrulamasını destekler.
- Bağımlılıkla ilgili hedeflerin ilerletilmesine yönelik öngörü güvenini artırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Bağımlılık modellerinde bileşik taraması için valide edilmiş davranışsal sistemler hazırlar.
- Tekrarlanabilirlik için hem operant hem de koşullu yanıtların ölçümünü standartlaştırır.
- Güvenilir bileşik değerlendirmesi için kantitatif çıktılar (kol kaldırımları, bölmede geçirilen süre) üretir.
- Çeşitli ilaç sınıfları ve davranışsal paradigmalar için ölçeklenebilir ve yeniden kullanılabilir bir platform sağlar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Preklinik son noktaları, hastalıkla ilgili motivasyonel ve asosiyatif davranışlarla uyumlu hale getirir.
- Erken keşif aşamasından bağımlılık terapötiklerinin preklinik validasyonuna kadar olan sürekliliği destekler.
- Çok boyutlu davranışsal verilere dayalı, riskle uyarlanmış ilerleme kararlarını kolaylaştırır.
- İlaç alımını çevresel koşullanma gücüyle ilişkilendirerek mekanistik risk azaltma sağlar.
İş Akışı ve Boru Hattı Entegrasyonu
Bu aparat, operant ilaç alımının ve koşullu yer tercihinin eş zamanlı değerlendirilmesine olanak sağlayarak, erken keşif ve preklinik doğrulama arasındaki boşluğu doldurur. Bağımlılık araştırmalarında hipotez testinden öncü bileşik tanımlamaya kadar olan iş akışlarını destekler.
- Keşif Biyolojisi: Pekiştirme ve ilişkisel öğrenme mekanizmaları üzerindeki hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Bileşik değerlendirmesi için tekrarlanabilir, kantitatif davranışsal çıktılar sağlar.
- Analitikler: Kaldıraç yanıtları ve tercih skorlarını ilişkilendiren istatistiksel çıktılar sunar.
- Translasyonel Araştırma: Preklinik davranışsal sonlanım noktalarını insan bağımlılık fenotipleriyle uyumlu hale getirir.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Çeşitli ilaç sınıflarına ve davranışsal paradigmalara uyarlanabilen esnek, maliyet etkin bir platform sunar.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Bağımlılık hedef doğrulamasında öngörü güvenini artırır ve mekanizmaya yönelik belirsizlikleri azaltır.
- Operasyonel Değer: Davranışsal analizlerin standardizasyonunu, tekrarlanabilirliğini ve ölçeklenebilirliğini geliştirir.
- Stratejik Değer: Devam/tamam kararlarını bilgilendirir ve bağımlılık Ar-Ge portföylerinde sermaye verimliliğini artırır.
- Portföy Etkisi: Bağımlılık terapötiklerinin risk ayarlı önceliklendirilmesini ve geliştirilmesini sağlar.
Uygulama Hususları
- Davranışsal farmakoloji ve operant koşullanma tekniklerinde uzmanlık gerektirir.
- Operant odacıklar, duyusal ipuçları ve veri toplama yazılımına sahip özel düzenekler gereklidir.
- Veri toplama ve analizi için ekipler arası titiz bir standardizasyon gerektirir.
- Uygun validasyonlar ile farklı ilaç sınıflarına ve davranışsal modellere uyarlanabilir.
- Deneyler boyunca kateter açıklığının korunmasına ve hayvan refahına bağlıdır.
