Name: Desenli Photostimulation Şube Noktaları Arasında Dendritik Entegrasyon Araştırma Digital Micromirror Cihazlar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-02T17:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Öğrenin, dijital mikroayna cihazları kullanarak karmaşık ışık desenleriyle nöronları uyarma ve dendritik dallanma noktalarında doğrusal olmayan entegrasyonu inceleme yöntemini. Bu teknik, sinirbilim araştırmalarında yeni olanaklar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma, C. VA Araştırma Servisi-MT NIH ve Başarı bir RO1 tarafından desteklenen ve CWL bireysel bir NRSA

Genel tasarım konuları Fotoğraf stimülasyon dalga boyu optogenetic deneyler gibi görünür aralığı ise, sistemin düzenini UV fotoliz deneyler için çok daha basit olacaktır. Bir tek mikroskop şirketlerin tüm kullanılabilir bir çift kamera port modülü satın almak gerekiyor. DMD düzlemde iki kamera limanlarından birini eşlenik görüntü düzlemine yerleştirilmiş olabilir. Ama kamera görüntüleme tüp lens, piyasada bulunan mikroskoplar herhangi bir UV dalgaboyu için düzeltilmiş çünkü UV fotoliz DMD kaynaklanan ışık, epi-aydınlatma yolu (Şekil 3A) aracılığıyla getirilen olmalıdır. 350 nm'de görüntüleme tüp lens küresel aberasyon, dar bir noktaya ışık odaklanmak için yeterli uzaysal çözünürlük oluşturmak için yeteneği engelleyecek kadar şiddetli. Collimated bir lazer ışını aynı optik eksen boyunca getirilen tüp lens kaldırılmış olduğundan, bu sorun konfokal mikroskopi karşılaşılan değildir. Orada tüp lensler, UV dalga boyunda küresel aberasyon kısmen giderilmiştir, çünkü UV aydınlatma sorunu epi-floresan yolu ışık getirmek tarafından çözülebilir. Biz herhangi bir derecede dergi dilek optik mikroskoplar genişletebilirsiniz. Bilimsel topluluk bu konuda genel hızlı ilgi ve iyi öğreten pek çok kaynak var. Mikroskop değişiklikleri en aza indirmek ve epi-floresan birim sıkı alan kısıtlamaları nedeniyle amacıyla, DMD bir röle lens (DMD ünitesi pozisyonu ile ilgili olarak işaret tarafından oluşturulan yeni oluşturulan eşlenik görüntü düzlemi yer almaktadır mikroskop). Ticari bir UV röle objektif (diyagram ve mikroskop işaret) (Özel Optik) satın alındı ​​düzeltildi. DMD aydınlatma Ikili giriş aldıktan sonra micromirror olumlu ve olumsuz bir 12 ° eğim çip düzlemine göre arasında geçiş yapabilirsiniz. Dönme eksenine çapraz köşeleri boyunca her ayna (çip taraf için 45 °). Ayna dönüş yönünü çip ön yüzeyi bir köşesinde altın renkli üçgen ile belirlenir. Micromirror eğim açısı gelen ışık demetinin pitch ve azithmus hizalama belirler. Aydınlatma demetinin adım DMD çipi ve azithmus ihtiyaçlarını ayna dönme eksenine dik dik eksen ile 24 ° olması gerekir. Hassas ışın uyum verimli çalışması için kritik öneme sahiptir. Prototip sistem tasarım ve işleme yetersizliklerini düzeltmek için izin birden fazla manuel tilt ayarlamaları tasarlanmıştır. Bu gereklidir göre çok daha hantal bir sistem sonuçlandı. Işık getirmek için alternatif, daha kompakt bir düzenleme (faydalı gördüğü takdirde alternatif tasarım) mümkündür. Fotoliz deneyler için bir lazer kaynağı, yüksek ışık yoğunlukta odaklanmış ışın hızlı uncaging için gerekli oluşturmak için gereklidir. Optogenetic deneyler için yüksek yoğunluklu keskin odaklanmış ışık gerekli değildir, tutarlı olmayan bir ışık kaynağı yeterli olacaktır. Fotoliz deneyi burada açıklanan yarı-sürekli bir diyot frekansı NdVO4 lazer (1 W, 355 nm) üçe katı hal (DPSS) pompalanır kullandı. (Fotoliz ışık kaynağı seçenekleri ayrıntılı bir tartışma için bkz. Referansı 2). Nispeten yüksek güçlü lazer DMD bir sistemi kullanarak lazer çıkışı sadece küçük bir bölümünü aslında numune teslim edilir, çünkü burada açıklanan deneyler gereklidir. Miktar numune teslim ışık, lazer ışını ile aydınlatılan bölgenin içinde ON / OFF aynalar sayısının oranına orantılıdır. Bir lazer ışık kaynağı gerekiyorsa, DMD aydınlatmak için doğru ekseni boyunca kolayca konumunu ve odaklı böylece multimode fiber lazer çıkış başlatmak için en iyisidir. Fiber optik ışık Verici tutarlı aydınlatma doğasında speckle desenler nasıl ortadan kaldırmak için, ikinci bir sorunu çözer. Fiber ~ 40 kHz dolaşacaktır bir piezoelektrik fiber sedye (model 915, Kanada Enstrümantasyon ve Araştırma Ltd) etrafında sarılır. (Teçhizat nokta bu dışarı) fiber uzanan mikroskopik bu nedenle etkili speckling etkisini ortadan kaldırarak, her fotoğraf stimülasyon darbe milisaniye süresince pek çok kez desen speckle hamle için yeterli. Fiber optik çıkış, daha sonra bir UV mikroskop (Olympus DApo20UV) amacı ile collimated. (Bu çıkış noktası), sistemin optik çözünürlük bir kalibrasyon Şekil. 3b. Etkili fizyolojik çözünürlük fotoğraf spot pozisyonun bir fonksiyonu olarak akım genliği ölçülenstimülasyon Şekil. 3C. Şekil farklı yoğunluklarda photostimulation mevcut tepkiler gösterilmiştir. 3D. Sistemin işleyişi: DMD aynalar ile birlikte kayıt CCD piksel Bir in-house yazılım görüntüleme CCD kamera belirli piksel bireysel DMD ayna yazışmalar belirler yazılmıştır. Bu yazılım içinde grafik kullanıcı arayüzü (GUI) sonra kullanıcının fare ile etiketlenen CCD görüntü bölgeye karşılık gelen DMD aynalar atamanıza olanak sağlar. Böylece, fotoğraf uyarılması için yerini sadece bilgisayar ekranında görüntülenen resmin üzerine imleci hareket ve ilgi etiketli bölge tıklayarak etiketlenir. (Dendritik çardak Bir floresan görüntü bilgisayar ekranında görüntülenir. Öğrenci, bilgisayar ekranındaki görüntü üzerinde bir takım yerlerden işareti olacaktır.) Işık teslimat için desen Programlama Operatör tarafından bilgisayar ekranında işaretlenmiş desen ayrı bir görüntü bir dizi olarak saklanır. Her mekansal desen için lazer darbeleri zamanlaması sonra, veri toplama programı (pClamp) ile entegre yazılımı içine programlanmıştır. (Bunu göstermek). DMD desen lazer bakliyat Koordinasyon Veri toplama programı başlatan ve hedef nöron elektrik sinyali kelepçeli DMD elektronik, lazer yolluk ve yama satın alma zamanlaması koordinatları. (Bilgisayarda bu sıra taklit) Deneysel veriler: Distal dendritik dallanma noktaları arasında non-lineer toplamı Elektrotlar ile Dendritik entegrasyon geleneksel yerine ayrık noktada stimülasyon genliği değişen sabit bir yoğunluğunu korurken stimülasyon alanında genişleyen yapılmıştır. Electrogenesis doygunluğu ve konum bağımlı kanallar alımı ile ilgili Sorunlar ve sonuç sonucu etkileyebilir. Dağıtılmış dendritik stimülasyon DMD tabanlı bir sistem (Şekil 4A) kullanarak kolayca uygulanabilir. Giriş yoğunluğu photostimulation, noktaların sayısını artırarak göre değişmektedir. Biz mekansal toplamı iki kızı dallar üzerinde gelen artan girdi genlikleri ile giderek supra-lineer hale dallanma noktaları arasında non-lineer olabilir görebilirsiniz. Supra-doğrusallık büyük ölçüde NMDA reseptörleri aracılık eder ve kapılı kanalları (Şekil 5) gerilimi Temsilcisi Sonuçlar <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 DMD micromirrors Operasyonu. (Yandan görünüm) bireysel aynalar yönelik Elektrostatik kuvvetler, iki olası yönelimleri 12 ° yatay bir ayna yatırılabilir neden olur. ON konumunda bir olay ışını çip optik eksen dik boyunca yönetti. KAPALI konumunda olay ışın 48 ° off eksen yönlendirilir. Işık aynalar arasında ince boşluklar vurur 24 ° eksen yönlendirilir. (Üstten görünüm) eğim yönelik 45 ° aynalar ve çip taraf için saygı ile. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 modern floresan mikroskop Temel düzen. Filtre küp, nesnel ve tüp objektif arasındaki "sonsuz alan" bir konuma sahiptir. Kamera yol açar ve örnek ışık getiren bir aydınlatma yolu bir görüntüleme yolu yoktur. Bu iki ışık yolu için tüp lens genellikle tasarım ve odak uzaklığı farklıdır. Aydınlatma, ama görüntüleme, tüp lens UV spektrumu içinde çalışması için tasarlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 UV bazlı DMD sistemi için Düzen. Aydınlatma UV spektrumu ise, o zaman UV düzeltilir tüp lens aracılığıyla getirilen olmalıdır. Görüntüleme yolu tüp lens UV için dizayn edilmemiştir. Bir röle sistemi kolayca erişilebilir bir eşlenik görüntü düzlemi oluşturmak için gerekli. Mikroskop farklı eşlenik görüntü uçakları noktalı kırmızı bir çizgi ile işaretlenir. Parlak bir görüntü düzlemi modellerini diğer konjuge uçakları tahmin edilmektedir. Görüntüleme sırasında örnek düzlemde desen dedektör / kamera yansıtılıyor. Aydınlatma için DMD tarafından oluşturulan desen örnek yansıtılıyor. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4, görünür ışık DMD projeksiyon sistemi için Düzen . Aydınlatma ışığı görünür aralığı ise, görüntüleme ışık yolu DMD oluşturulan ışık deseni getirmek mümkündür. Bu commerci ile kolayca uygulanabiliral çift kamera takılabilir ve uygun dikroik ayna. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5"> Şekil 5 sistem Lateral çözünürlük. (A) floresan hedef Optik çözünürlük ~ 2 mm. (B) bir dendrit arasında kafesli glutamat fotoliz tarafından ölçülen Etkin çözünürlük ~ 5 mm. Mesafenin artması glutamat difüzyon ve dendrit sonlu genişlikte bir kombinasyonu kaynaklanmaktadır. (C) Fotoliz kinetiği sinaptik olayların taklit edebilir. Gerilim aile mevcut yanıtları dendrit teslim ışık enerjisi farklılıklar nedeniyle kelepçeli. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig6.jpg" alt="Şekil 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 6"> Şekil 6 dendritik dallanma noktaları arasında non-lineer toplamı. (A) Dağıtılmış girişleri iki dendritik dalları için ayrı ayrı uygulanır. Kendi gerilim yanıtları aşağıda gösterilmiştir. (B) uyaranlara daha sonra aynı anda verilmiştir. Ölçülen tepki (kırmızı eser) iki ayrı yanıtlar (gri iz) aritmetik toplamından daha farklı. <img src="/files/ftp_upload/2003/2003fig7.jpg" alt="Şekil 7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 7"> Şekil 7 Supralinear toplamı NMDA reseptör bağımlı. (A) APV, seçici bir NMDA reseptör antagonisti supralinear toplamı engeller. (B) uyaran yoğunluğu ilişki ve NMDA reseptör antagonisti olan duyarlılığını çizilir.

<ol><li>Scanziani, M., Hausser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiology+in+the+age+of+light%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Electrophysiology in the age of light.</a> Nature. 461, 930-939 (2009).</li>
<li>Tang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photolysis+of+caged+neurotransmitters%3A+Theory+and+procedures+for+light+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Prot.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Photolysis of caged neurotransmitters: Theory and procedures for light delivery.</a> Curr. Prot. Neurosci. , 6.21.1-6.21.12 (2006).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nature+Technology+Feature%2C+Cell+imaging%3A+Light+activated%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Nature Technology Feature, Cell imaging: Light activated.</a> Nature. 456, 826-827 (2008).</li>
<li>Lutz, C., Otis, T. S., DeSars, V., Charpak, S., DeGregorio, D. A., Emiliani, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Holographic+photolysis+of+caged+neurotransmitters%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Holographic photolysis of caged neurotransmitters.</a> Nature Methods. 5, 821-827 (2008).</li>
<li>Hornbeck, L. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHornbeck%2C+LJ+%22Digital+Light+Processing+and+MEMs%3A+An+overview%22">Digital Light Processing and MEMs: An overview</a>. , Texas Instrument White Papers. Forthcoming.</li>
</ol>

DMD tabanlı photostimulation yaklaşımın avantajı en belirgin durumlar için hedef, göreceli olarak büyük bir alanı kaplar. Ilgi hedef birkaç dendritik dikenler gibi, çok küçük ise, sıralı tarama konfokal ve 2-foton sistemleri daha iyi bir yaklaşım olması muhtemeldir. DMD yaklaşım önemli zayıflık mevcut ışık verimsiz kullanımı. Mevcut ışık toplu mutlaka OFF aynalar ve kullanılmaz. DMD tabanlı sistem, en iyi görünür aralığında işlem için uygundur. Biz optogenetics deneyler ile istihdam DMD taba...

Erratum: Patterned Photostimulation with Digital Micromirror Devices to Investigate Dendritic Integration Across Branch Points

<table><tbody><tr><td>Modern dik floresan mikroskop</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CCD kamera ve görüntüleme yazılımı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bilgisayar ve veri toplama/arayüz sistemi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DLP Discovery Geliştirme Kiti</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ALP3 USB arayüzü</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>LED'li S2 + Optikler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çift kamera port ünitesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>355nm frekans üçlenmiş NdVO4 lazer (~1 W)</td><td>DPSS Laser Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lazer kepengi Model LS6</td><td>Uniblitz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çok modlu optik fiber ve fiber gerdirici Model# 915</td><td>Canadian Instrument and Research, Ltd</td><td></td><td>100 um çekirdekli çok modlu fiber</td></tr><tr><td>Çok modlu fiber başlatıcı</td><td>Oz Optics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sinyal jeneratörü</td><td></td><td></td><td>50 kHz'e kadar</td></tr><tr><td>Işın kolimatörü</td><td>Olympus Corporation</td><td>DApo20UV340</td><td></td></tr><tr><td>UV röle merceği</td><td>Special Optics</td><td>#: 54-25-60-355</td><td></td></tr></tbody></table>

desenli photostimulation Şube noktaları arasında dendritik entegrasyon araştırma digital micromirror cihazlar

Patterned Photostimulation with Digital Micromirror Devices to Investigate Dendritic Integration Across Branch Points

Işık nöronal eksitabilite kontrol etmek için çok yönlü ve hassas bir araçtır. Kanal rodopsin ve kafesli nörotransmitterlerin gibi ışığa duyarlı etkileyiciler son giriş, ışık alan ve deneysel nörobilim için yararlı kalıplarını kontrol etmek için daha iyi anlamına gelir gelişmekte olan çıkarları için yol açmıştır. Konfokal ve 2-foton mikroskopi çalışan geleneksel bir strateji, bir kırınım sınırlı noktaya ışık odaklanma ve daha sonra ilgi bölge üzerinde sırayla o tek nokta tarama. Bu yaklaşım, geniş alanlar kısa bir zaman penceresi içinde, görüntüleme için daha photostimulation daha uygulanabilir bir sorun uyarılmış olması durumunda sorunlu olur. Alternatif bir strateji, bir dijital micromirror cihazı (DMD) yardımı ile hedef tam mekansal desen proje. DMD yaklaşım donanım bileşenleri nispeten ucuz olduğu için cazip ve ticari çıkarları tarafından desteklenmektedir. Böyle bir sistemin dik mikroskoplar için geçerli değildir, çünkü biz böyle bir DMD sisteminin inşaat ve operasyonlarında kritik konular ele alınacaktır. Optogenetic deneyler için çok daha basit görünür ışık sistemi oluşturmak için, öncelikle UV fotoliz sisteminin inşaat açıklayan olacak olsa da, değişiklikler de sağlanacaktır. UV fotoliz sistemi nörobilim temel bir soru çalışma deneyleri carryout için kullanılan mekansal distal dendritik dallanma noktaları arasında entegre girişleri nasıl dağıtılır. Entegrasyon şube noktaları arasında doğrusal olmayan ve supralinearity büyük ölçüde NMDA reseptörleri aracılık öneririz.

Dijital micromirror cihazları (DMD) nöronal eksitabilite kontrol etmek için zaman ve mekan karmaşık desenleri oluşturabilirsiniz. Tasarım, inşaat, ve DMD sistemlerinin işletilmesi ile ilgili konular görüşülüyor. Böyle bir sistem, distal dendritik dallanma noktaları arasında doğrusal olmayan entegrasyon gösteri sağladı.

Desenli Photostimulation Şube Noktaları Arasında Dendritik Entegrasyon Araştırma Digital Micromirror Cihazlar

Işık, nöronal uyarılabilirliği kontrol etmek için çok yönlü ve hassas bir araçtır. Kanal-rodopsin gibi ışığa duyarlı efektörlerin yakın zamanda tanıtılması...

Bu prosedürün genel amacı, nöronları uyarmak için kullanılabilecek şekilde, ışığın zaman ve mekan içindeki karmaşık modellerini kontrol etmektir. Bu, öncelikle optik yol üzerindeki uygun bir konjugat görüntü düzlemine bir DMD çipi yerleştirilerek gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, DMD'nin lazer gibi yoğun bir ışık kaynağı ile uygun şekilde aydınlatılmasıdır.Prosedürün üçüncü adımı, koherent aydınlatmanın beneklenme etkisini ortadan kaldırmaktır. Prosedürün son adımı ise DMD çipini kontrol etmek için bir grafik kullanıcı arayüzü entegre etmektir. Sonuç olarak, daha önce gerçekleştirilmesi zor olan deneylerin, DMD sistemi kullanılarak kafesli nörotransmitterlerin çok bölgeli lizizi aracılığıyla artık nispeten kolay bir şekilde tamamlanabildiğini gösteren sonuçlar elde edilebilir.Merhaba, ben Michael Mohammed; University of Maryland Nöroloji Bölümü'ndeki Dr. Chaman Tang'in laboratuvarındayım. Bugün size, bir optik mikroskobunda karmaşık eliminasyon paternleri oluşturma prosedürünü göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürü dendritik entegrasyonu incelemek için kullanıyoruz.Hadi başlayalım. Bu protokol, deneysel nörobilim için dijital mikro ayna aygıtı veya DMD aydınlatma sis

patterned-photostimulation-with-digital-micromirror-devices-to

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Bu kağıt sınırlı inhibitör nöron toplulukları GFP ifade transgenik farelerin tüm hücre kayıtları ile photostimulation lazer tarama birleştiren bir yaklaşım getirmektedir. Tekniği spesifik inhibitör kortikal nöronların yerel sinaptik devrelerin kapsamlı haritalama ve kantitatif analiz için izin verir.

Lazer Tarama Photostimulation tarafından inhibitör nöronal devreler Haritalama

Bu videoda, fonksiyonel nöromüsküler kavşakları değerlendirmek için bir yöntem gösterilmektedir. Floresan mikroskobu ile birlikte kas dokusu ve motor nöronları içeren bir biyoreaktör kullanılarak, nöronlardaki ışığa duyarlı kanallar elektrik sinyalleri üretmek için uyarılır ve kas lifi kasılmalarına neden olur.

Eş Zamanlı Optik Stimülasyon ve Video Kaydı Yoluyla Fonksiyonel Bir Nöromüsküler Kavşağın Değerlendirilmesi

Kaynak: Kato, D. et. al., İki Fotonlu Holografik Mikroskopi Kullanılarak Nöral Aktivitenin Değerlendirilmesi ve Manipülasyonu. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, holografik mikroskopi kullanılarak optogenetik ile birleştirilen iki fotonlu görüntüleme tekniğini göstermektedir. Uzamsal bir ışık modülatörü kullanan bu teknik, kırmızı ışığa duyarlı proteini ve kalsiyum görüntülemeyi minimum foto hasarla ifade eden hassas nöronal stimülasyon sağlar. Bu yaklaşım, sinir ağlarının işlevsel bağlantısı ve...

Bir fare modelinde nöral aktiviteyi ve bağlantıyı incelemek için iki fotonlu holografik mikroskopi

Yarı sağlam motor çıkış değişiklikleri (kas kasılması) izlerken Burada motoneuronal faaliyet optogenetic manipülasyon için bir protokol...

Yarı sağlam Lazer Aydınlatma ile Sinir Faaliyet optogenetic Pertürbasyon<em&gt; Drosophila</emMotion&gt; Larva

Nöronal popülasyonları in vitro olarak fotostimül etmek için optogenetik bir yaklaşım kullanarak ön beyin devrelerinin fonksiyonel topografyasını ve sinaptik özelliklerini karakterize etmek için bir yöntem açıklıyoruz.

Optogenetically Hedeflenen Önbeyin Devreler Lazer tarama photostimulation

Canlı hayvanda hızlandırılmış görüntüleme, sağlam beyindeki yapısal yeniden yapılanma hakkında değerli bilgiler sağlar. Burada, canlı fare korteksindeki floresan etiketli sinaptik yapıların iki foton mikroskobu ile transkraniyal görüntülenmesine izin veren inceltilmiş bir kafatası preparatını tanıtıyoruz.

İki-Foton<em&gt; In vivo</em&gt; Bir inceltilmiş-kafatası Hazırlık kullanarak Fare Cortex dendritik dikenler Görüntüleme

Sinaptik akımları, Drosophila Üçüncü INSTAR larva nöromüsküler kavşak görüntülenmeyecektir sinaptik boutons üzerinden focally kaydedilebilir. Bu teknik, tek bir sinaptik bouton etkinliğini izleme sağlar.

Drosophila larva nöromüsküler kavşak sinaptik akımlardan Fokal Macropatch kayıtları

Burada, Drosophila larva beyninin canlı bir hazırlığında son derece hareketli dendritik filopodia'yı görüntülemek için uyguladığımız yöntemi ve dendritin kantitatif değerlendirmeleri için hızlandırılmış 3D görüntüleme veri kümelerini ölçmek için geliştirdiğimiz protokolü anlatıyoruz. nöronlar gelişmekte dinamikleri.

Drosophila Nöronlarının Geliştirilmesinde Hızlı Dendritik Dal Dinamiğinin Hızlandırılmış Canlı Görüntüleme ve Nicelleştirilmesi

Bu protokol, transgenik olmayan omurgasız türlerde, absorbans voltajı duyarlı boyalar ve bir fotodiyot dizisi kullanılarak nöronal popülasyon aktivitesini tek hücreli çözünürlükle görüntüleme için bir yöntem sunar. Bu yaklaşım, görüntüleme ve analizin tek bir gün boyunca takip edilebildiği hızlı bir iş akışı sağlar.

Transgenik Olmayan Omurgasızlarda Tek Nöron Çözünürlüğü ile Ağ Dinamiklerini Kaydetmek için Fotodiyot Tabanlı Optik Görüntüleme

Anormal nöral aktivite ile ilişkili nöropsikiyatrik bozuklukların patogenezini aydınlatmak amacıyla, yüksek mekansal zamansal çözünürlük kullanarak nöral aktiviteyi görselleştirebilen, değerlendirebilen ve manipüle edebilen iki fotonlu bir holografik mikroskop geliştirdik.

İki Foton Holografik Mikroskopi Kullanılarak Nöral Aktivitenin Değerlendirilmesi ve Manipülasyonu

Birçok Caenorhabditis elegans solucanından esnek kimyasal ve multimodal stimülasyon ve eşzamanlı nöral aktivitenin kaydedilmesi için bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, adaptasyon, zamansal inhibisyon ve uyaran çapraz konuşması gibi nöronal fenomenlerin ölçülmesini sağlamak için mikroakışkanlar, açık kaynaklı donanım ve yazılım ve denetimli otomatik veri analizi kullanır.

Otomatik Multimodal Stimülasyon ve Birden Çok Küçük Organizmadan Eşzamanlı Nöronal Kayıt

Öğrenin, dijital mikroayna cihazları kullanarak karmaşık ışık desenleriyle nöronları uyarma ve dendritik dallanma noktalarında doğrusal olmayan entegrasyonu inceleme yöntemini. Bu teknik, sinirbilim araştırmalarında yeni olanaklar sunar.

Desenli Photostimulation Şube Noktaları Arasında Dendritik Entegrasyon Araştırma Digital Micromirror Cihazlar

Daha fazla video keşfet