Name: Sıçanlarda Ortotopik Hind-Ekstremite Nakli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-12T17:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Öğrenin sıçanlarda ortotopik arka ekstremite nakli prosedürünü, kompozit doku alotransplantasyonu ve iskemi-reperfüzyon yaralanmalarını incelemek için. Bu yöntem greft reddi mekanizmalarını ve bağışıklık modülasyonu stratejilerini araştırmaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Donör Operasyon ve Hind-Ekstremite Hasat <ol><li> Operatif prosedür için mikrocerrahi aletlerin steril bir set kullanılmaktadır. Cerrah, steril eldiven, cerrahi işlem başlamadan önce değiştirilmesi de dahil olmak üzere uygun kıyafetleri giymeli. </li><li> Sıçan pentobarbital bir intraperitoneal enjeksiyon (50mg/kg &#39;dan IP) ile anestezi ve ısıtılmış bir çalışma alanı, tüm cerrahi prosedür boyunca istikrarlı bir hayvan vücut sıcaklığı kolaylaştırır sırtüstü yerleştirilir. </li><li> Operasyon açtı cilt insizyonu öncesinde her iki üç kez sterilize, dezenfektan ve alkol. Hayvanlarda kornealar kurumasını önlemek için, göz ameliyat öncesinde bir oftalmik merhem (Vidisic) ile yağlanır. </li><li> Sağ kasık boyunca yaklaşık inguinal ligament seviyesinde bir cilt insizyonu yapılır. Femoral damarlar bipolar koter ve künt diseksiyon ile ücretsiz disseke derin dalları 8-0 ipek ile bağlandı. </li><li> Heparin 300μl (50 IU) anti-pıhtılaşma için penil damar yoluyla enjekte edilir. </li><li> Inguinal ligament seviyesinde femoral damarların bağlandı ve ligatür distalinde kesilir. </li><li> Arka ekstremite ile temizlendi buz gibi soğuk (4 ° C) 5 dakika içinde femoral arter yoluyla HTK solüsyonu (5ml). </li><li> Tüm kas gruplarını keskin bir makas ile ayrılır ve osteotomi femur distal üçüncü düzeyinde gören bir döner elektrik ile yapılır. </li><li> Hasat uzuv nakli kadar korunması ve soğuk hava deposu için buz HTK çözüm 20ml batmış. </li></ol> Alıcı Operasyonu ve Transplantasyon <ol><li> Sıçan çalışma alanında pentobarbital ve yerleştirilen yatar intraperitoneal enjeksiyonu ile anestezi. </li><li> Sağ kasık boyunca yaklaşık inguinal ligament seviyesinde bir cilt insizyonu yapılır. Femoral damarlar bipolar koter ve künt diseksiyon ile disseke edilir. </li><li> Mümkün olduğunca distal femoral damarların bağlandı, ancak epigastrik damar kalkış proksimal. Damar kelepçeler arter ve ven inguinal ligament seviyesinde yerleştirilir. </li><li> : 0.010 mm, kol uzunluğu; ve ven (manşet iç çapı manşet duvar kalınlığı 1,151 mm polietilen manşet arter (kaf çapı: 0,912 mm, kol-duvar kalınlığı: 0.010 mm, kol uzunluğu 2,0 mm içinde) üzerinden çekilir : 2.0 mm). Damar lümeni kenarına sonra bir gemi dilatör ile çekilir ve femoral arter ve ven manşet (yaklaşık 2mm) tüm vücut üzerinde dışa dönük ve çevresel 8-0 ipek ligatür ile sabit. </li><li> Donör uzuv için bir oda yapmak için alıcı ekstremite kas gruplarının keskin diseksiyon ile kaldırılır ve orta femur osteotomi yapılır. </li><li> Donör uzuv HTK çözüm kaldırılır ve transplantasyon femur (uzunluk: 1.5-2.0 cm) 18-gauge iğne kullanılarak osteosentez ile başlar intramedüller rod olarak. </li><li> Ventral kas gruplarını yakından 4-0 vicryl veya Prolen kişlerin yaklaştırılır. </li><li> Vasküler anastomozlar alıcıların ven ve manşet kompleksi üzerinde donör ven ve arter çekerek yapılır. Çevresel 8-0 ipek ligatür anastomoz tekrar güvence altına yerleştirilir. </li><li> Venöz kelepçe, ardından arteryel kelepçe tarafından yayımlanan ve reperfüzyon distal bacak ve ayak renk dönüş yanı sıra arter yoluyla pulsatil akım tarafından görüntülenmiştir. </li><li> Kalan sırt kas grupları 4-0 vicryl veya Prolen kişlerin yeniden yaklaştırılır. </li><li> Cilt 4-0 Vicryl veya prolen kişlerin kapalıdır. </li><li> Alıcı sıçan bir ısıtma yastığı yerleştirilir ve kurtarma kadar yakından izlenmelidir. </li><li> Alıcı hayvanlar, üç posttransplant gün süreyle profilaktik antibiyotik (Sefazolin, 20 mg / gün, IM) ve Buprenex (0.1 mg / kg, SC) alırsınız. </li></ol>

<ol><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).</li>
<li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> Transplantation. 86 (4), 487-492 (2008).</li>
<li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+forearm+transplantation%3A+outcome+at+3+years%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).</li>
</ol>

Onlarca yıl süren deneysel araştırma öncesinde ve yakın geçmişte başarılı bir insan eli transplantasyonu etkin. 1978 yılında, Shapiro ve ark. çeşitli patolojik, fizyolojik ve immünolojik yönleri yanı sıra kompozit doku greft fonksiyonel sonuç iyi çalışması için uygun ortotopik sıçanlarda arka bacak nakli modeli geliştirdi. Biz olmayan bir sütür manşet tekniği getirerek, prosedürün, yani en zorlu kısmı, vasküler anastomoz değiştirdiniz. , Yüksek hayatta kalma oranı (% 80-90) ile prosedürünü yürütmek için temel mikrocerra...

<table><tbody><tr><td>Nembutal&amp;#174;</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin Immuno</td><td>Ebewe Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Custodiol HTK Solüsyonu</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adventitya Makası</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;SAS-21 R-8T</td><td></td></tr><tr><td>Pens</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;JFC-7</td><td></td></tr><tr><td>Dilatör Pens</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;D-5AZ</td><td></td></tr><tr><td>Polimid Tüpler</td><td>River Tech Medical</td><td>#17; #19</td><td></td></tr></tbody></table>

sıçanlarda ortotopik hind-ekstremite nakli

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Kompozit doku allotransplantation (CTA) bir el, kol veya rakamlardan kaybından sonra artık geçerli bir tedavi seçeneği temsil eder ve rekonstrüktif cerrahide yeni terapötik bir varlık haline gelmiştir. Ancak, uzun vadeli, yüksek doz çoklu ilaç immünsupresif tedavi, geniş bir uygulama halters ciddi yan etkileri açısından risk taşıyan, greft hayatta kalmasını sağlamak için gereklidir. Bu alanda daha fazla ilerleme temel immünoloji ve kompozit doku greft iskemi reperfüzyon hasarı daha iyi anlaşılmasını bağlıdır. Bugüne kadar, sıçanlarda ortotopik arka uzuv nakli rekonstrüktif transplantasyon (RT) için tercih edilen bir kemirgen modeli olmuştur, ancak, vaskülatürü yatıştırıldı, kemikler, kaslar ve sinirler için olağanüstü mikrocerrahi becerileri gerektiren bir çok zorlu bir işlemdir. Biz arka uzuv nakli rat için hızlı ve güvenilir bir yaklaşım sağlayarak, bu model, vasküler manşet anastomoz tekniği tanıttı. Bu teknik, cerrahi prosedürü kolaylaştırır ve kısaltır ve yüksek hayatta kalma ve düşük komplikasyon oranları ile başarılı bir operasyonu gerçekleştirmek için temel mikrocerrahi deneyimi ile cerrahlar sağlar. Teknik immünolojik yanı sıra iskemi reperfüzyon hasarı (IRI) çalışmaları için de uygun görünüyor.

Burada altın standart olarak görünüyor ortotopik sıçan arka ekstremite nakli prosedürü tarif<em&gt; In vivo</em&gt; Kompozit doku allotransplantation araştırma modeli.

Sıçanlarda Ortotopik Hind-Ekstremite Nakli

Kompozit doku allotransplantasyonu (CTA), günümüzde el, ön kol veya parmak kaybı sonrası geçerli bir terapötik seçenek teşkil etmekte ve yeni bir ...

Ben, Innsbrook Tıp Üniversitesi Viseral Transplantasyon ve Toraks Cerrahisi Bölümü'nden Daniels Roski Araştırma Laboratuvarı'ndan Robert Suha. Bugün size, revaskülarizasyon için bir manşet tekniğinin tanıtıldığı, farede ekstremite transplantasyonu prosedürünü göstereceğiz. Bu ekstremite transplantasyonu cerrahisi, şahsım da dahil olmak üzere cerrahi asistanlarımız tarafından gerçekleştirilmektedir.Bu hayvan modelini, kompozit doku allogreftinde iskemi ve reperfüzyonla ilişkili yaralanmaları incelemek için kullanıyoruz. Ayrıca bu prosedürü, kompozit doku allogreft reddinin immünolojik olaylarını ve reddin gerçekleşmesini önlemeye yönelik stratejileri araştırmak için kullanmaktayız. Bu stratejiler, hedefe yönelik immünomodülatör rejimlerin kullanımıyla idame immünosüpresyonun minimize edilmesini hatta tamamen ortadan kaldırılmasını içerir.Kırmızı arka bacak nakil prosedürü, donör sıçanın sağ arka bacağının çıkarılıp buz üzerinde saklandığı donör kompozit doku greftinin hasadı ile başlar. Ardından, donör bacağa yer açmak için alıcı sıçanın sağ arka bacağı çıkarılır. Daha sonra donör bacak buzdan çıkarılarak alıcı sıçana nakledilir.Bu modelde, vasküler anastomozlar kılıf (cuff) tekniği kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Deneylerimizde, 250 gram ağırlığında erkek Louis Reds kullanılmıştır. Anestezi, kilogram başına 50 miligram intraperitonal pentobarbital enjeksiyonu ile indüklenmiştir.Anestezilenmiş sıçanın kasık ve arka bacak bölgesi prosedür için tıraş edilir ve sterilize edilir. Düz mikrocerrahi makaslar, damar genişleticiler ve iki adet kavisli pens dahil olmak üzere tam bir mikrocerrahi alet seti gereklidir. Ayrıca, en önemli aletler burada gösterilen mikrocerrahi damar klempeleridir.Anestezi derinliğini test etmek için ayak parmağı sıkıştırma refleksi kullanılır. Sırt, steril bir platform üzerine yerleştirilir ve insizyondan önce dört uzvu da tam ekstensiyonda olacak şekilde sabitlenir. Kontaminasyonu önlemek için uzuv, herhangi bir tüyden arındırılır.Sağ kasık bölgesinde, yaklaşık olarak inguinal ligament seviyesinde bir insizyon yapılır. Femoral damarlar ciltin hemen altında görülür ve bipolar koter ile künt diseksiyon kullanılarak serbestleştirilir. Ardından epigastrik damarlar diseke edilerek serbest bırakılır ve koterize edilir.Ayrıştırma işleminden sonra damarları enstrümanlarla doğrudan tutmadan traksiyon uygulanabilmesi için, ven ve arterin çevresine tutucu sütur olarak tek bir halka yerleştirilir. Donör ekstremite hasadından önce, arter ve venin derin dalları proksimalden sekiz sıfır ipek sütur ile ligatize edilir ve distalden koterize edilir. Pedal ven yoluyla 50 ünite heparin uygulanır.Bir dakika sonra, dikkat femoral damarlara yöneltilir. Femoral arter, sekiz sıfır ipek sütür kullanılarak mümkün olduğunca sıkı bir şekilde bağlanır ve aynı işlem femoral ven için de tekrarlanır. Ardından her iki damar, ligatürün distalinden kesilir ve arka ekstremite, beş dakika boyunca heparinli buz soğukluğunda HDK solüsyonu ile arter yoluyla yıkanır.Ardından, tüm kas grupları makasla dikkatlice ayrılır. Osteotomi, femur distal üçte bir seviyesinde döner elektrikli testere kullanılarak gerçekleştirilir. Hasat edilen ekstremite, transplantasyona kadar koruma ve soğuk depolama amacıyla 20 milliliters buz soğukluğunda HDK çözeltisine daldırılır.Alıcı operasyonu, femoral damarların izole edilmesi ve diseksiyonu ile donör operasyonuna benzer şekilde başlar. Dikkatli bir diseksiyonun ardından damarlar, mümkün olduğunca distalden ancak epigastrik damarların başlangıç noktasının proksimalinden 8-0 ipek kullanılarak ligatize edilir. Ardından, polilin manşet damarın üzerine çekilerek alıcı venin manşet montajı işlemine geçilir.Tam hemostazı sağlamak için, ven üzerindeki manşetin ve manşet sapının proksimaline tek bir ven klempi uygulanır. Venin distal ucundaki ligatür kesilir ve ardından ven manşetin üzerine çevrilir. Alıcı veni yerinde sabitlemek için damar ve manşetin çevresine dairesel olarak 8-0 ligatür bağlanır.Daha küçük çaplı manşetle arter için de tamamen aynı prosedür uygulanır. Alıcının ekstremitesi, kas gruplarının keskin diseksiyonu ve femurun orta kısmında osteotomi gerçekleştirilerek, donör ekstremitesine benzer şekilde disseke edilir. Artık arka ekstremiteyi transplante etmeye hazırız.Donör ekstremite HDK solüsyonundan çıkarılır. Transplantasyon, 18 gauge bir iğnenin intramedüller çubuk olarak kullanılmasıyla femur osteosentezi ile başlar. İğnenin ucu kesilir ve kalan kısım bir buçuk ila iki santimetre uzunluğunda olacak şekilde kesilir.Uzvun stabilize edilmesi ve vasküler anastomoze hazırlanması için ventral kas grupları, 4-0 Vicryl veya proline kesikli sütürlerle birbirine yaklaştırılır. Manşet (cuff) R anastomozu için donör ven genişletilir, alıcının veninin ve manşetinin üzerine çekilir ve başka bir sirkümferansiyel 8-0 ligatürle sabitlenir. Aynı prosedür donör arter için de uygulanır.Son olarak, her iki damar da klemplendiğinde, önce venöz klempe, ardından arteriyel klempe serbest bırakılır. Reperfüzyon hemen gerçekleşir ve distal ekstremite ile ayağın renginin geri gelmesinin yanı sıra arterdeki pulsasyonel akış ile kolayca gözlemlenir. Geri kalan dorsal kas grupları yeniden yaklaştırılır.Cilt, 4-0 Vicryl veya proline kesikli dikişlerle kapatılır ve transplantasyon işlemi tamamlanır. Ameliyat sonrası sıçan bir ısıtma pedi üzerinde ısıtılır, analjezik ve antibiyotik uygulanır. Sıçan, distress belirtileri veya cerrahi komplikasyonlar açısından 48 ila 72 saat boyunca yakından izlenir.Manşet tekniği ile yeniden anastomoz, son on yıllarda denizel böbrek nakli modellerinden heterotopik kalp nakli modellerine kadar farklı cerrahi araştırma alanlarında yaygın olarak uygulanmıştır. Bu teknik, iskemi-reperfüzyonla ilişkili yaralanmaların yanı sıra immünolojik fenomenlerin çeşitli yönlerinin incelenmesine olanak tanır. Nakil işlemimizi takiben.Burada, bu benzersiz manşet tekniğinin ekstremite kompozit doku transplantasyonuna ilk uygulamasını sunmaktayız. Küçük hayvan modelinde manşet tekniği, anastomoz için kullanılan geleneksel sütür teknikleriyle karşılaştırıldığında operasyon süresini, operatörün ihtiyaç duyduğu mikrocerrahi uzmanlığını ve intraoperatif kan kaybını önemli ölçüde azaltmaktadır.

orthotopic-hind-limb-transplantation-in-rats

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Biz sıçan kadavradan karaciğer nakli için klasik iki manşet tekniğinin kolay bir tesis revizyonu sunuyoruz.

Sıçanlarda Ortotopik Karaciğer Nakli

Sıçanlarda heterotopik abdominal kalp-akciğer nakli (HAHLT) için yeni bir teknik tanımladık. Nakil konfigürasyonu, kısmen yüklü bir greft sirkülasyonu ile sonuçlanır ve doğrudan fonksiyonel değerlendirmeye izin verir. Bu model, nakledilen greftin fonksiyon ve immünolojik durumu ile ilgili akut veya kronik çalışmalar için kullanılabilir.

Sıçan Heterotopik Abdominal Kalp / Bir Ses yüklenen Yapılandırması Tek akciğer transplantasyonu

Süper mikrovasküler anastomoz olmayan bir dikiş manşet tekniği uygulayarak fare ortotopik arka uzuv nakli için bu yeni model, vaskülarize kompozit doku yamasında (VCA) ile ilgili in vivo mekanik immünolojik araştırmalar için güçlü bir araç sağlar.

Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli

Bu yazının ve protokolün amacı, farelerde ortootopik böbrek transplantasyonunun cerrahi prosedürünü ayrıntılı olarak açıklamak ve göstermek. Bu yöntem, donör böbreğin doğru perfüzyon elde etmek ve venöz ve üreteral manşet anastomoz tekniği kullanarak reperfüzyon süresini kısaltmak için basitleştirilmiştir.

Ortootopik Rat böbrek nakli: bir roman ve Basitleştirilmiş cerrahi yaklaşım

Bu protokol, immünoloji ve fonksiyonel iyileşme nin eşzamanlı çalışmasına yönelik sağlam, tekrarlanabilir vasküler kompozit allotransplant (VCA) modelini sunmaktadır. El dikilmiş vasküler anastomozlar ve nöral coaptation ile sağ orta uyluk arka ekstremite ortopik nakli titiz tekniği yatırım zaman fonksiyonel kurtarma çalışma yeteneği verir.

Sonraki Adım Taking: Bir Nöral Coaptation Ortotopic Hind Limb Transplant Modeli Sıçan Fonksiyonel Kurtarma Maksimize etmek

Sıçanlarda heterotopik karın kalp transplantasyonunun bir modelini açıklayarak, basitleştirilmiş bir cerrahi yaklaşıma yol açan mevcut stratejilerde değişiklik ima ediyoruz. Ayrıca, hayati kardiyak kas hücrelerinin kulak içi enjeksiyonu ile yeni bir ret modeli tarif, sıçanlarda daha fazla nakil immünolojik analizler sağlayan.

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Bu makale sıçanlarda kısmi heterototopik osteomiyokutanöz flap transplantasyon protokolünü ve orta vadeli takipte potansiyel sonuçlarını sürmektedir.

Sıçanlarda Kısmi Heterotopik Hindlimb Transplantasyon Modeli

Sıçan ortotopik renal transplantasyon modeli, renal allogreft reddinin mekanizmasının araştırılmasına katkıda bulunur. Mevcut model, böbrek implantasyonunun uçtan uca anastomozu ve üreter-mesane anastomozunun uçtan uca "tünel" yöntemini kullanarak kan akımına ve alt vücudun venöz reflüsüne müdahale etmeden alıcıların sağkalımını arttırmaktadır.

Renal Allogreft Rejeksiyonu için Sıçan Ortotopik Böbrek Transplantasyonu Modeli

Bu yazıda heterotopik vaskülarize kardiyak transplantasyon için modifiye edilmiş bir teknik, güncel aseptik teknik, analjezi ve anestezi anlatılmaktadır.

Çağdaş Aseptik Teknik, Anestezi ve Analjezi Standartlarına Uygun Modifiye Murin Heterotopik Kalp Nakli Protokolü

Bu protokol, sıçanlarda ortotopik sol akciğer nakli için operasyonel zorluğu azaltmaya ve sağkalım oranlarını iyileştirmeye odaklanan gelişmiş bir tekniği tanımlar.

Sıçanlarda Ortotopik Sol Akciğer Nakli

Öğrenin sıçanlarda ortotopik arka ekstremite nakli prosedürünü, kompozit doku alotransplantasyonu ve iskemi-reperfüzyon yaralanmalarını incelemek için. Bu yöntem greft reddi mekanizmalarını ve bağışıklık modülasyonu stratejilerini araştırmaya yardımcı olur.

Sıçanlarda Ortotopik Hind-Ekstremite Nakli

Daha fazla video keşfet