Name: İndüksiyon ve Kronik Relaps Deneysel Otoimmün Encephalomyelitis Klinik Puanlama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-04T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 48 s
Description: Öğrenin, DA sıçanlarda kronik relaps deneysel otoimmün ensefalomiyelit indüksiyonu ve klinik puanlama yöntemlerini. Bu model, multipl skleroz araştırmalarında hastalık ilerlemesini değerlendirmek için standart bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Kronik-relapsing EAE indüksiyonu ve izleme Emülsiyon takviye tam Freund adjuvan eklendi sulu çözelti antijeni 1:1 karışımıdır. Bu antijen adjuvan ve başka bir yol boyunca eklemek için çok önemlidir! Yapma ve bir emülsiyon enjekte atık bir sürü. 1.5 veya 2 kez her zaman için ihtiyaç duyduğunuz herşeyi daha fazla hazırlamak. Otoklavlanmış harç, havaneli, cam şırınga, ve köprüler kullanın. Tüm plastik steril olmalıdır. Düzenli bir laboratuvar tezgahı üzerinde hazırlık yapılabilir. 1. Takviye adjuvan hazırlanması Mycobacterium tuberculosis (Difco katalog # 231.141) ve bir havan topu yerleştirmek 30 mg tartılır. Bakteri kırılma önlemek için çok sert basmadan ince toz haline olun. Freund adjuvan H37Ra (Difco katalog # 231.131) ve karışımı tam 10 ml ekleyin. Bu takviye adjuvan 4 mg / ml, Mycobacterium tuberculosis içerir. Tüpüne aktarın. 2. Spinal kord Homojenat hazırlanması -80 Dondurulmuş DA sıçan (yaş / cinsiyet kayıtsız) ve mağaza ° C omurilik toplayın Takviye adjuvan: 1:1 (hacim ağırlığı) karıştırmak için yeterli donmuş omurilik tartılır. Bir jilet ile mümkün olduğunca ince olarak omurilik Kıyma, 1. kısımda kullanılan harç transferi ve havaneli bir hamur yapın. 3. Emülsiyon hazırlanması <ol><li> Place bir tüp Freund adjuvan tam desteklenmiştir. Yüksek hızda karıştırın. Vorteks ise omurilik Homojenat damla damla ekleyin. omurilik Homojenat tüm eklenir, 5 dakika daha karıştırın. Bu karışım hafif pembe açmalısınız. </li><li> 5 ml cam şırınga içinde koyun ve emülsiyon (Fisher katalog # 14-825-17L) 18G köprü kullanarak başka bir 5 ml cam şırınga bağlamak. (5-10 dk) sabit hale gelinceye kadar, diğer bir şırınga emülsiyon gönder. Emülsiyon 5 ml &#39;den fazla hazır ise, birkaç 5 ml şırınga büyük şırınga KULLANMAYIN kullanın. </li><li> Emülsiyon şırınga 4 ° C&#39;de 3 hafta süreyle saklanabilir. Ben onu yıkmak değildir kontrol etmek için en az 12 saat önceden hazırlanması tavsiye ederiz. Bu kalın ve 2 faz ayrı kalmalıdır. Rengi sarı veya bej bir ışık gecede değişecektir. </li></ol> 4. Sıçan, Bağışıklama <ol><li> Birkaç dakika için şırınga emülsiyon karıştırın ve enjeksiyon için kullanılan şırınga transfer. 200 ul, çok kısa süreli anestezi altında 23G iğne ve 3 ml Luer-Lock şırınga kullanarak kuyruk dibinde subkutan enjekte edilir. </li><li> Alıcılar 7-9 hafta eski kadın DA sıçan. Harlan Sprague Dawley sıçan olsun. </li><li> Sıçanlar günde iki kez gözlenen ve günlük olarak değerlendirilmelidir. Klinik bulgular emülsiyon enjeksiyondan sonra 7-15 gün bekleniyor. </li></ol> Klinik skorlama: 0: Herhangi bir hastalık 0.5: distal gevşek kuyruk 1: gevşek kuyruk 2: orta şiddette paraparezi, ataksi 3: orta derecede paraparezi, zaman zaman sıçanlarda gezileri 3.5: bir arka bacak felç, diğer hamle 4: tam arka ekstremite paralizisi 5: komple arka bacak felci ve inkontinans 6: can çekişen, nefes alma zorluğu, yemek veya içmek değildir. Hemen Euthanize.

CB ve KGC Airmid A.Ş. kurucularından ve danışmanlar

Bu protokol için birkaç önemli hususlar vardır. DA sıçanlarda Genetiği satın hangi damızlık bağlı olarak biraz farklı olacaktır. Bu farklılıklar, indüksiyon EAE sıçan yatkınlık artabilir veya azalabilir. Sıçanlarda EAE daha duyarlı iseniz olmayan takviye tam Freund adjuvan hatta eksik Freund adjuvan kullanarak bağışıklama gücü azaltmak istiyorsanız. Ayrıca emülsiyon hazırlarken önce enjekte emülsiyon miktarını azaltarak ya da, tuzlu su ile omurilik Homojenat seyreltilmesi düşünebilirsiniz. Sıçan, emülsiyon, konut tesisin temizliği k...

<table><tbody><tr><td>Komple Freund&amp;rsquo;s Adjuvanı</td><td>Reaktif</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF 311-360-5</td><td>Difco tarafından üretilmiştir</td></tr><tr><td>Mycobacterium tuberculosis H37Ra</td><td>Reaktif</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF3114-33-8</td><td>Difco tarafından üretilmiştir</td></tr><tr><td>DA sıçan</td><td>Hayvan</td><td>Harlan Laboratories</td><td></td><td>Dişiler, 7-9 haftalık.</td></tr><tr><td>Cam şırıngalar - 5 ml</td><td>Araç</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-823-10 B</td><td></td></tr><tr><td>Metal iğne ucu - 18G</td><td>Araç</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-825-17L</td><td></td></tr><tr><td>Luer Lok plastik şırıngalar - 3 ml</td><td>Araç</td><td>BD Biosciences</td><td>309585</td><td></td></tr><tr><td>İğneler - 20G 1 1/2</td><td>Araç</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-5C</td><td></td></tr></tbody></table>

İndüksiyon ve kronik relaps deneysel otoimmün encephalomyelitis klinik puanlama

Induction and Clinical Scoring of Chronic-Relapsing Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Multipl skleroz (MS), genç erişkinlerde sık etkileyen santral sinir sistemi (MSS) kronik inflamatuvar bir hastalıktır. Bu, beyin ve omurilikte yaygın alanlarda demiyelinizasyon ve glial korkutuyorsun tarafından karakterize edilir. Bu lezyonlar, sinir iletim değiştirebilir ve CNS (örneğin paraparezi, felç, körlük, inkontinans) demyelinated plakların yerini değişir devre dışı bırakma nörolojik defisit neden. Deneysel otoimmun ensefalomiyelit (EAE), MS için bir model. EAE ilk tavşan omurilik yetişen virüsler kullanarak, insanlarda kuduz aşılama sırasında yanlışlıkla indüklenen oldu. Inaktive virüs omurilik enjekte edilen artıklar, merkezi sinir sistemi hastalığı kaynaklı. Bu gözlemlerin ardından, EAE ilk modeli nehirleri Homojenat ve 1935 yılında Schwenther MSS ile aşılanan insan olmayan primatlar olarak tarif edilmişti. EAE bu yana türlerin çeşitli oluşturulan ve türlerin / zorlanma ve antijen kullanılan immunizing bağlı olarak farklı ders takip edebilirsiniz. Aynı antijen kobay kronik bir hastalıktır neden olur Örneğin, adjuvan ile emülsiyon miyelin temel protein Lewis sıçanlarda immunizing, EAE akut modeli neden olur. Burada açıklanan EAE modeli tam Freund adjuvan emülsiyon DA DA sıçan omurilik karşı sıçan immunizing tarafından indüklenir. Sıçanlar-bağışıklama sonrası 7-14 gün içinde artan bir flask paralizi gelişir. Klinik belirtiler birkaç hafta içinde bir relapsing-remitting seyir takip etmektedir. Patoloji, CNS ve demiyelinizasyon plaklar büyük immün infiltratlar gösterir. Videonun sonunda EAE ile hayvanların bakımı için özel dikkat edilmesi gereken noktalar açıklanmıştır.

DA sıçanlarda kronik relapsing deneysel otoimmün ensefalomyelit: Bu video, multipl skleroz bir hayvan modeli indüksiyonu ve klinik skorlama göstermektedir. Tüm sıçan omurilik ve tam Freund adjuvan içeren bir emülsiyon immunizing fareler tarafından uyarılan hastalık, insan hastalığına benzer klinik belirtiler sunar.

İndüksiyon ve Kronik Relaps Deneysel Otoimmün Encephalomyelitis Klinik Puanlama

Multiple skleroz (MS), genellikle genç yetişkinleri etkileyen, merkezi sinir sisteminin (MSS) kronik inflamatuar bir hastalığıdır. ... ile karakterize edilir.

Ben Christine Beaton. University of California at Irvine'ın Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nde, George Chen'in laboratuvarında araştırma asistanıyım. Önümüzdeki birkaç gün içinde size, DA sıçanlarda deneysel otoimmün ensefalomiyelit olan kronik relapslı EAE'nin nasıl indükleneceğini ve izleneceğini göstereceğim.Bu, multipl skleroz için bir hayvan modeli veya daha doğrusu, multipl skleroz için kullanılan hayvan modellerinden biridir. Bu model, söz konusu hayvanlarda yükselen flaksid paralizi ve insan hastalığına benzeyen histolojik özellikler ile karakterize edilir. Bu işlem birkaç gün sürecektir.İlk gün size, complete trans adjuvant içerisinde naif kırmızı omurilik homojenatı ile genik emülsiyonun nasıl hazırlanacağını göstereceğim. İkinci gün, sıçanların UCAE'ye karşı nasıl immunize edileceğini göstereceğim ve ardından bu hayvanlarda ilk klinik belirtileri görmek için yedi ila 15 gün bekleyeceğiz; bu noktada, farklı hayvanlarda EAE'nin farklı ilerleme aşamalarını size göstereceğim. Öncelikle, emülsiyonu hazırlamak için gerekli olan tüm reaktifleri ve malzemeleri göstereceğim.Kullandığım madde komple ön adjuvan H 37 ra; ancak, halihazırda mycobacterium tuberculosis içerse de, bunu d

induction-clinical-scoring-chronic-relapsing-experimental-autoimmune

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video sıçanlarda deneysel otoimmün ensefalomyelit ile merkezi sinir sistemi mononükleer hücreleri izole etmek için nasıl göstermektedir.

EAE Ratlarda Merkez Sinir Sistemi Mononükleer Hücreleri İzolasyon

Video, miyelin oligodendrosit glikoproteinleri ve inaktive edilmiş Mycobacterium tuberculosis'in bir kombinasyonunu enjekte ederek bir fare modelinde deneysel otoimmün ensefalomiyelit indüksiyonunu göstermektedir. Model, araştırmacıların hastalık mekanizmalarını incelemelerine ve terapötik müdahaleleri test etmelerine olanak tanır.

Bir Fare Modelinde Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit İndüksiyonu

Bu videoda, deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) kullanılarak multipl sklerozun bir fare modeli oluşturulmuştur. Fareye, otoreaktif T hücrelerini aktive eden bir bağışıklık tepkisini tetikleyen bir nöronal peptit ve bir adjuvan içeren bir emülsiyon enjekte edilir. Bunu, otoreaktif T hücrelerinin beyne sızmasına izin vererek kan-beyin bariyeri geçirgenliğini artırmak için bir boğmaca toksini (PTX) enjeksiyonu takip eder. Bu infiltrasyon, multipl sklerozun demiyelinizan durumunu taklit ederek...

Bu makale, deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) modelinin indüksiyon ve skorlama yöntemlerini, çeşitli hastalık evrelerinde sırasıyla akış sitometrisi ve kantitatif PCR kullanılarak lenf düğümleri, dalak, kan ve omurilikteki immün hücre dağılımı ve mRNA sitokin seviyelerinin değerlendirilmesi ile birlikte açıklamaktadır.

Çeşitli Dokularda Bağışıklık Hücreleri Hastalık bağımlı Dağıtım Fareler ve Değerlendirilmesi Deneysel Otoimmün Ensefalomyelitli indüksiyon

Burada, nörovasküler birim bozulma deneysel otoimmun ensefalomiyelit içinde vivo sırasında araştırmak için protokolleri mevcut. Biz özellikle kan - beyin bariyerini geçirgenliği ve gelatinase etkinlik lökosit göç dahil glia limitans belirlemek nasıl adres.

Nörovasküler biriminin endotel ve gliyal engelleri bozulma Vivo deneysel otoimmun ensefalomiyelit sırasında görüntülenmesi

Bu el yazması farelerde aktif deneysel deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) indüklemek için bir protokol sunar. Merkezi sinir sisteminde (CNS) infiltrasyon lenfositlerin izolasyon ve karakterizasyonu için bir yöntem de lenfositler CNS otoimmün hastalığın gelişiminde nasıl rol olduğunu göstermek için sunulmaktadır.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit Sırasında Merkezi Sinir Sisteminde Lenfosit Infiltrasyonunun Akış Sitometrik Analizi

Bu protokol, miyelin oligodendrosit glikoprotein kullanılarak bir fare modelinde deneysel otoimmün ensefalomiyelitin indüklenmesini ve klinik bir skorlama sistemi kullanılarak hastalık sürecinin izlenmesini açıklamaktadır. Deneysel otoimmün ensefalomiyelit ile ilişkili semptomlar, hastalık sürecini kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için fare femur mikro-bilgisayarlı tomografi analizi ve açık alan testi kullanılarak analiz edilir.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelitin İndüksiyonu ve Çeşitli Değerlendirme Göstergeleri

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE), multipl sklerozun bir hayvan modeli olarak hizmet eder. Bu makalede EAE'de spinal kord inflamasyonu, demiyelinizasyon ve aksonal yaralanmayı skorlamaya yönelik bir yaklaşım anlatılmaktadır. Ek olarak, canlı farelerde aksonal hasarın değerlendirilmesini kolaylaştıran, fare serumundaki çözünür nörofilament ışık seviyelerini ölçmek için bir yöntem sunulmaktadır.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelitte Merkezi Sinir Sistemi İnflamasyonu, Demiyelinizasyon ve Akson Hasarının Skorlanması

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit, multipl sklerozun en yaygın kullanılan murin modellerinden biridir. Mevcut protokolde, her iki cinsiyetten C57BL / 6J fareleri, miyelin oligodendrosit glikoprotein peptidi ile aşılanır ve bu da esas olarak kuyruk ve uzuvların artan parezi ile sonuçlanır. Burada EAE indüksiyonu ve değerlendirme protokolünü tartışıyoruz.

İki Cinsiyette Multipl Sklerozun Modellenmesi: MOG35-55 ile İndüklenen Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit

Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE), insan hastalığı ile güçlü bir humoral otoimmün yanıtı paylaşan bir multipl skleroz (MS) hayvan modelidir. Burada, EAE ile aşılanmış farelerin serumundaki otoantikorları ölçmek için basit ve esnek bir ELISA protokolü bildiriyoruz.

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit Üzerine Farelerde Otoreaktif Antikorların Miktar Tayini

Öğrenin, DA sıçanlarda kronik relaps deneysel otoimmün ensefalomiyelit indüksiyonu ve klinik puanlama yöntemlerini. Bu model, multipl skleroz araştırmalarında hastalık ilerlemesini değerlendirmek için standart bir yaklaşım sunar.

İndüksiyon ve Kronik Relaps Deneysel Otoimmün Encephalomyelitis Klinik Puanlama

Daha fazla video keşfet