Name: Yılları arasında sinerjistik Araştırma Bioluminescent Görüntüleme kullanma Streptococcus pneumoniae Bebek Fare ve İnfluenza A Virüsü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-14T11:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Öğrenin biyolüminesan görüntüleme yöntemiyle bebek farelerde Streptococcus pneumoniae ve İnfluenza A virüsü birlikte enfeksiyonlarını izlemeyi. Bu teknik, patojen etkileşimlerini ve hastalık ilerleyişini canlı hayvanlarda zamana bağlı takip etmeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar teknik David Briles (Birmingham, AL, ABD Alabama Üniversitesi) tavsiye kabul etmek istiyorum. Yvette Chen, Melbourne Üniversitesi Hayvan Bakım Memuru ve Hayvan Tesis Yöneticisi David Taylor, açıklanan deneyler için yararlı önerileri ve tartışmalar ile ilgili hayvan refahı ve etik ve müdahale kriterlerinin ve insancıl uç noktaları geliştirilmesi için teşekkür etmek istiyorum Bu yazıda. Odilia Wijburg ve Patrick Okuma NHMRC RD Wright Bursu tarafından desteklenen, Kirsty Kısa bir GSK Lisansüstü Destek Hibe ve Puzey Burs tarafından desteklenmektedir.

<ol><li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li>
<li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza%5BTitle%5D)+AND+%22AMA+Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li>
<li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Faseb+J%22%5BJournal%5D)">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li>
<li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li>
<li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li>
<li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li>
<li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li>
<li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li>
</ol>

Bu video-makale üretim kaliper Yaşam Bilimleri sponsor oldu.

In vivo görüntüleme IVIS makine ile mikrobiyal patogenez 4, 6-9, gerçek zamanlı görüntüleme sağlayan benzersiz bir metodoloji. Burada, S. arasında sinerjistik anlamak için bu teknolojinin uygulama bebek farelerde pneumoniae ve influenza virüsü. Bu tekniğin non-invaziv doğası nedeniyle, zaman içinde her bir fare enfeksiyon ilerlemesini izlemek mümkün olmuştur. Bu, bize ortak ev sahipliği bebek fareler 3 arasında pnömokok iletim kinetiği belge sağladı . Bu tekniğin non-invaziv doğası başına daha az sayıda deney hayvanları kullanmak için araştırmacılar sağlar ve dolayısıyla hayvan kullanımını azaltmak. Bu enfeksiyonun yayılması görselleştirmek, vücutta enfeksiyon önceden bilinmeyen sitelere kolayca diseksiyon (örneğin orta kulak gibi) tarafından örneklenmiş olmayan sitelerin yanı sıra IVIS makine kullanmak da mümkündür. Görüntüleme deneyler başlamadan önce, biz bioluminescent EF3030 gerginlik kolonizasyon düzeyleri doku homojenatlarında canlı sayımı numaralandırma ebeveyn EF3030 gerginlik kolonizasyon düzeyleri ile karşılaştırılabilir olduğunu doğruladı. Buna ek olarak, ilk kez grip virüsü ile enfeksiyon nazofarenks bioluminescent EF3030 artan yük ana EF3030 suşu (sonuçlar gösterilmemiştir) ile gösterildiği gibi hayvanların kolonize doğruladı. IVIS teknoloji kullanımı kolay ve tekrarlanabilir ve kolay veri anlamak için üretir iken, deney, teknoloji duyarlılık ve yardımcı dikkatle maksimize olduğu şekilde tasarlanmış olmalıdır. Örneğin, IVIS kameranın hassasiyetini doku deneyimlerimiz, akciğerlerde kaynaklanan bioluminescent sinyaller için tespit sınırı artırır 8, derinliği ve donukluk tarafından etkilenir. Buna ek olarak, koyu kürk ve pigmentli cilt kadar 8 tüysüz fareleri göre 10 kat olarak ışık geçirgenliği azaltır. Bu yöntem geliştirirken, biz bu protokolü 5 ila 14 günlük C57BL / 6 fareler ile kullanmak için optimize etmiş ve o zamandan beri IVIS bioluminescent S. ile 20 gün eski C57BL / 6 farelerin kolonizasyonu tespit etmek için kullanılan olabileceğini göstermiştir pneumoniae EF3030. Ancak, bu deneyler, çıplak ya da BALB / c farelerde yapılmaktadır sinyal algılama artabilir. Bununla birlikte, IVIS kamera, monitör, karakterize ve sonuçta, influenza A virüs enfeksiyonu, pnömokok hastalığına in vivo gelişimi anlamak için yeni bir yaklaşım temsil eder.

yılları arasında sinerjistik araştırma bioluminescent görüntüleme kullanma streptococcus pneumoniae bebek fare ve İnfluenza a virüsü

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

, Dünya çapında yaklaşık 50 milyon kişi öldürüldü 1918 grip virüsü salgını, sırasında, ölümlerin büyük çoğunluğu, grip virüsü yalnız ile enfeksiyon sonucu değildi. Bunun yerine, en bireyler, ağırlıklı olarak, bakterinin Streptococcus pneumoniae (pnömokok) yol açtığı ikincil bir bakteriyel enfeksiyon yenik düştüğü düşünülmektedir . , Grip virüsü ve pnömokok yol açtığı enfeksiyonlar arasında sinerjik bir ilişki daha sonra (1, 2 gözden) yanı sıra virüs mevsimsel salgınlar sırasında, 1957, Asya influenza virüsü pandemisi sırasında gözlenen olmuştur. Burada, biz (ler), eş zamanlı influenza A virüsü ve S. bir sonucu olarak artmış morbidite ile ilgili olabilecek mekanizması araştırmak için kullanılan bir protokol tarif pneumoniae. Biz güvenilir bir bebek fare modeli geliştirdi ve tekrarlanabilir S. ile kolonize farelerin grip virüsü enfeksiyonu etkilerini göstermek pneumoniae. Bu protokolü kullanarak, in vivo görüntüleme 3 ile ortak ev sahipliği, yenidoğan farelerin arasında pnömokok iletim kinetiği ilk içgörü sağladı.

Influenza A virusu ile aynı anda enfeksiyon asemptomatik sırasında invazif pnömokok hastalığına indüksiyonu karıştığı faktörlerden biridir<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Değmiyor. Burada, bu iki solunum patojenleri arasındaki sinerjistik araştırmak için bebek farelerin kullanarak karışık enfeksiyon yöntemi açıklar.

Yılları arasında sinerjistik Araştırma Bioluminescent Görüntüleme kullanma Streptococcus pneumoniae Bebek Fare ve İnfluenza A Virüsü

Dünya çapında yaklaşık 50 milyon insanı öldüren 1918 influenza virüsü pandemisi sırasında, ölümlerin çoğunluğu ... sonucunda gerçekleşmemiştir.

<a class="grey_button" href="/video/3352">Çince</a>

using-bioluminescent-imaging-to-investigate-synergism-between

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Yaşayan hayvanların bakteriyel enfeksiyonlar biyoparlaklık görüntüleme yöntemleri açıklanmıştır. Patojenler, canlı hayvanlarda enfeksiyon optik tüm vücut görüntüleme sağlayan lusiferaz ifade etmek için modifiye edilmiştir. Hayvan modelleri lusiferaz ifade patojenler ile enfekte olan ve hastalık ortaya çıkan ders biyoparlaklık görüntüleme ile gerçek zamanlı olarak görüntülenebilmekte.

Farelerde Görüntü Bakteriyel Enfeksiyonlar Lusiferaz Kullanımı

Kaynak: de Vries, C. R. ve ark., Kronik Pseudomonas aeruginosa Yara Enfeksiyonunun Gecikmiş Aşılama Modeli. J. Vis. Exp. (2020).Bu video, canlı bir fare modelinde bakteriyel enfeksiyon ilerlemesini izlemek için biyolüminesans görüntüleme tekniğini gösteriyor. LuxABCDE raporlayıcı sistemiyle tasarlanmış patojenik bakteriler, enfeksiyon bölgesinde ışık yayarak metabolik olarak aktif bakterilerin görselleştirilmesini sağlar. Araştırmacılar, fareyi zamanla görüntülemekle, enfeksiyon dinamiklerini...

Farelerde Bakteriyel Enfeksiyonların Biyolüminesans Görüntülemesi

Kaynak: Seman, B. G. ve diğerleri. Gram-negatif bakteriyel sepsisin neonatal görüntüleme modeli. J. Vis. Exp. (2020)Video, kapsüllü biyolüminesans bakteriler kullanılarak sistemik enfeksiyonu incelemek için yeni doğumlu fare modelini gösteriyor. Yenidoğan yavrulara yüksek veya düşük dozlu bakteriyel askı enjeksiyonu yapılır ve doğum sonrası bakım için annelerine geri verilir. Kapsüllü bakteriler erken bağışıklık tespitinden kaçınır, sistematik olarak yayılır ve zamanla lüminesans görüntüleme...

Kapsüllenmiş Biyolüminesans Bakterilerle Yenidoğan Farelerde Enfeksiyonun Modellenmesi

Kaynak: Valentine, M. E. ve diğerleri, Pseudomonas aeruginosa'da Çerçeve İçi Gen Silinme Mutantlarının Üretimi ve Basit Fare Enfeksiyon Modelinde Virulans Zayıflamasının Testi. J. Vis. Exp. (2020)Bu video, canlı bir fare modelinde bakteriyel enfeksiyonu izlemek için biyolüminesans tabanlı görüntüleme yaklaşımının kullanıldığını göstermektedir. Ardışık biyolüminesans ve X-ışını görüntüleme, konak genelinde yayılan enfeksiyonun gerçek zamanlı görselleştirmesi ve anatomik lokalizasyonu mümkün...

Biyolüminesans kullanarak fare modelinde bakteriyel enfeksiyonun gerçek zamanlı görüntülemesi

Kaynak: Lenhard, A. ve diğerleri. Streptococcus pneumoniae'nin viral eş-enfeksiyon sonrası kolonizerden patojene geçişi için fare modeli, yaşa bağlı hastalığı özetliyor. J. Vis. Exp. (2022)Bu video, grip virüsünün Streptococcus pneumoniae'nin kolonizatordan patojene geçişini tetiklediği bir fare ortak enfeksiyon modelini gösteriyor. Bakteriyel kolonizasyon, viral enfeksiyon ve hastalık ilerlemesiyle ilgili adımları özetler.

Viral Ortak Enfeksiyon Sonrası Streptococcus pneumoniae'nin Patojenik Geçişini İnceleyen Fare Modeli

Bu videoda, rekombinant lusiferaz ve floresan protein eksprese eden bi-raportör Influenza A virüsü kullanılarak fare modellerinde viral enfeksiyonları izlemek için bir yöntem gösterilmektedir. Bu yöntem, hem in vivo hem de ex vivo çalışmalara olanak tanıyarak araştırmacıların viral dinamikler ve müdahalelerin etkileri hakkında bilgi edinmelerini sağlar.

Viral Enfeksiyonları İzlemek için Bir Luciferase-Floresan Muhabir İnfluenza Virüsü

Streptococcus pneumoniae ciddi toplum kökenli pnömoni ve dünya çapında 2 milyondan fazla kişinin ölümünden sorumludur neden lider patojen olduğunu. Spor ya da virülans karıştığı bakteriyel faktörlerin etkisi biyolüminesens bakterileri kullanarak akut fare pnömoni veya bakteriyemi modelinde gerçek zamanlı olarak izlenebilir.

Biyoluminesen Bakteriler Kullanılarak Gerçek Zamanda Bir Akut Fare Pnömoni Modelinde Pnömokok virulans faktörlerinin etkisi aşağıdaki

Bu çalışmada, biz iki fotonlu intravital görüntüleme ve hücre etkileşim fare trakeal mukoza grip virüsü ile enfeksiyon sonra çözümlemesi için bir protokol mevcut. Bu iletişim kuralı bağışıklık hücre dynamics sırasında solunum yolu enfeksiyonları eğitim araştırmacılar için ilgili olacaktır.

İki fotonlu Intravital mikroskobu kullanılarak grip virüsü enfeksiyonu sırasında trakeal mukozasında görüntüleme hücre etkileşimi

Influenza A virüsleri (IAVs) yıllık salgınlara ve ara sıra salgınlara neden olan bulaşıcı solunum patojenleridir. Burada, yeni bir rekombinant luciferase ve floresan ifade iki muhabir IAV (BIRFLU) kullanarak vivo viral enfeksiyonları izlemek için bir protokol açıklar. Bu yaklaşım in vivo IAV çalışma için mükemmel bir araç ile araştırmacılar sağlar.

Canlı Görüntüleme ve Viral Enfeksiyon Quantification için Bir Luciferase-floresan Reporter Grip Virüsü

Neonatal farelerin biyolüminesans E. coli O1:K1:H7 ile enfeksiyonu, önemli pulmoner inflamasyon ve akciğer patolojisi ile septik enfeksiyona neden olur. Burada, sistemik bakteriyel yüklerin numaralandırılmasına paralel olarak uzunlamasına intravital görüntüleme, inflamatuar profilleme ve akciğer histopatolojisi ile birlikte neonatal sepsisin modellenmesi ve incelenmesi için yapılan prosedürleri açıklıyoruz.

Gram-Negatif Bakteriyel Sepsisin Yenidoğan Görüntüleme Modeli

Bu yazıda, viral enfeksiyon sırasında pnömokokların asemptomatik bir kolonizatörden hastalığa neden olan bir patojene geçişi için yeni bir fare modeli açıklanmaktadır. Bu model, hastalık progresyonunun farklı aşamalarında ve çeşitli konakçılarda polimikrobiyal ve konakçı-patojen etkileşimlerini incelemek için kolayca uyarlanabilir.

Streptococcus pneumoniae'nin Viral Ko-Enfeksiyon Üzerine Kolonizatörden Patojene Geçişi İçin Bir Fare Modeli, Yaşın Şiddetlendirdiği Hastalıkları Özetler

Öğrenin biyolüminesan görüntüleme yöntemiyle bebek farelerde Streptococcus pneumoniae ve İnfluenza A virüsü birlikte enfeksiyonlarını izlemeyi. Bu teknik, patojen etkileşimlerini ve hastalık ilerleyişini canlı hayvanlarda zamana bağlı takip etmeyi sağlar.

Yılları arasında sinerjistik Araştırma Bioluminescent Görüntüleme kullanma Streptococcus pneumoniae Bebek Fare ve İnfluenza A Virüsü (Video) | JoVE Journal

Yılları arasında sinerjistik Araştırma Bioluminescent Görüntüleme kullanma Streptococcus pneumoniae Bebek Fare ve İnfluenza A Virüsü

Daha fazla video keşfet