Name: Kontrast Geliştirilmiş Gemi Görüntüleme MicroCT kullanarak (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-27T17:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Öğrenin, canlı farelerde damar ağlarını analiz etmek için kontrast ajanlı microCT görüntüleme yöntemini. Bu teknik, tümör biyolojisi ve tedavi yanıtlarının değerlendirilmesinde yüksek verimli araştırmaları destekler.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, NCI ödül 5R01CA133229-03 tarafından kısmen desteklenmiştir.

1. Hayvan Enjeksiyonlar Intravenöz kuyruk ven enjeksiyon öncesinde, kuyruk cilt, izopropil alkol scrubs sterilizasyon amaçlı ile temizlenmesi gerekir. Düşük ölü boşluk kullanılarak distal kuyruk ven yoluyla ½ CC U; Fare sonra 20 mg iyot / ml iyotlu bloodpool kontrast madde 0.2 mL/20 g (Binito Biyomedikal, Inc Ottawa, Kanada, ON eXIA 160XL) enjekte edilmelidir -100 28G ½ İnsülin Şırınga (Ürün # 329.461, Becton Dickinson ve şirket, NJ, ABD). 2. Hayvan Hazırlık 10 dakika sonra enjeksiyon, hayvanlar microCT görüntüleme için hazırlanmış olmalıdır. Birincisi, hayvan, izofluran% 2 dakikada 2,5 litre oranı% 100 oksijen kullanarak bir kutu içinde anestezi olmalıdır. Anestezi sırasında korneanın kuruma önlemek için, bir göz yağlama merhemi uygulanmalıdır. Vücut ısısı, bir ısı pedleri 37 ° C'de muhafaza edilmelidir. 3. MicroCT Görüntüleme Fare sonra canlı hayvan taramaları gerçekleştirmek için yetenekli bir microCT birim taranmalıdır. Hareket artefaktları ve istikrarın en aza indirmek için, fare, hava ve egzoz karşılığı piyasada yaygın olarak bulunan ve çok amaçlı odası (Numira Biosciences, Salt Lake City, UT) yerleştirilebilir. MicroCT taramaları, Jel Pedleri (Sıcak Soğuk Terapi Brace, CVS Eczacılık Woonsocket, RI) sırasında hayvan hipotermik bir bölüm önlemek için, (Isı Fabrikası, Vista, CA) veya Thermipaq Kil Pedleri (termiyonik lâmba, Springfield, IL) olabilir Isıtıcı Toe kullanılır. 37 fare korumak için sünger yatağın altında bu ısıtma pedleri yerleştirin ° C hayvan ile doğrudan temas kaçınarak. Küçük Hayvan İzleme ve Ayırıcı Sistemleri SA Instruments (Stony Brook, NY) gibi kullanarak, vücut ısısı, solunum ve kalp hızı gibi hayvansal Vital bulguları izlenmelidir. Aşağıdaki görüntüleme protokolü microCT birimleri için uygun tarama parametreleri belirlemeye yardımcı olmak için bir kılavuz olarak kullanılabilir. Bu deneyde kullanılan hayvanların bir hacimsel CT tarayıcı GE 93 mikron hassasiyet Locus (GE Healthcare, Londra, Ontario) keşfetmek tarandı. Bu hacimsel tarayıcı Feldkamp koni-ışını yeniden inşası için 3500 x 1750 CCD dedektör kullanır. Akım, gerilim ve maruz kalma süresi platform bağımsız parametreler sırasıyla, 450 uA, 80 kVp ve 100 ms sabit tutuldu. Maruz kalma süresi standart parametreler, görünümü ve görüntüleme sayısı başına kare çeşitlidir ve yaklaşık 20 dakika toplam tarama zamanı ile 100 ms, sırasıyla 5-8 ve 360-720 olabilir. Görüntüler, üreticinin patentli EVSBeam yazılımı ile yeniden inşa edildi. 4. Resim Oluşturma Yeniden inşa microCT veri gelişmiş isosurface, tek boyutlu, ya da Seg3D görüntü işleme yazılımı kullanarak (Seg3D, iki boyutlu bir transfer fonksiyonu oluşturma Görüntüler için <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">kullanılabilir</a> http://www.sci.utah.edu/cibc/software) . 5. Temsilcisi Sonuçlar Lütfen eXIA160XL yöntemleri bölümünde belirtilen ayarları ile taranan bir wild tip fare ekteki şekle bakınız. <img src="/files/ftp_upload/2377/2377fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. İki Boyutlu Seg3D görüntü işleme yazılımı (Seg3D, kullanılarak oluşturulan bir wild tip fare Transfer Fonksiyonu (2DTF) render görüntü <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). Hayvan eXIA160XL ile enjekte edildi ve 10 dakika sonra yöntemleri bölümünde belirtilen ayarları ile 93 mikron izometrik çözünürlükte taranmış microCT. Video 1 360 ° Imagevis3D görüntü işleme yazılımı (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software) kullanılarak oluşturulan bir wild tip fare dönme film İki Boyutlu Transfer Fonksiyonu (2DTF) render. Hayvan eXIA160XL ile enjekte edildi ve 10 dakika sonra yöntemleri bölümünde belirtilen ayarları ile 93 mikron izometrik çözünürlükte taranmış microCT. <a href="/files/ftp_upload/2377/2377_Suresh_Prajapati_Representative_Results.mov">Videoyu izlemek için buraya tıklayın</a>

<ol><li>Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+in+small+animal+and+specimen+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Micro-CT in small animal and specimen imaging.</a> Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).</li>
<li>Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+Vessel+Imaging+by+Computed+Tomography+in+Live+Transgenic+Mouse+Models+for+Human+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors.</a> Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).</li>
</ol>

Tüm hayvan işlemler Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kuralları uyarınca yapılmış ve San Antonio, Texas Sağlık Bilimleri Merkezi Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından kabul edildi.

Kontrastlı damar görüntüleme microCT kullanarak bu tekniğin en önemli hedef, canlı farelerde damar ağları analizi için yüksek kalitede veri setleri üretmek için en uygun yöntem sağlamak için. MicroCT görüntüleme, uzun tarama kat artan sayıları görüş ve view 2 başına kare sayısı elde edilir yumuşak doku daha iyi sinyal-gürültü oranı için. Gemi tanımlama doğru, yumuşak doku tanımlama ve kemik farklılaşma üzerine eleştirel bağımlı. eXIA 160XL yüksek radyo-opak olma özelliği ve farklı...

<table><tbody><tr><td>eXIA 160XL</td><td>Binito Biomedical, Inc.</td><td>eXIA160XL-01</td><td></td></tr></tbody></table>

kontrast geliştirilmiş gemi görüntüleme microct kullanarak

Contrast Enhanced Vessel Imaging using MicroCT

Mikroskobik bilgisayarlı tomografi (microCT) yüksek çözünürlüklü küçük hayvanların yaşam anatomi hacimsel görüntüleme sunmaktadır. Ancak, farklı yumuşak doku ve vücut sıvıları arasındaki karşıtlık, mikro-BT görüntüleri 1, doğası gereği kötüdür. Bu koşullar altında, kan damarlarının görüntülenmesi, neredeyse imkansız bir görev hale gelir. Bunun üstesinden gelmek için ve ekzojen kontrast ajanlar kullanılabilir kan damarlarının görselleştirme artırmak için. Burada, biz bir kemirgen modelinde vasküler ağ görselleştirmek için bir metodoloji mevcut. Uzun etkili bir sulu koloidal polydisperse kan havuzu iyotlu kontrast madde, eXIA 160XL kullanarak görüntü elde etme parametreleri ve ses işleme teknikleri, canlı hayvan, kan damarları bulmak için optimize edilmiş. Bizim bulgularımız, damar, kemik ve yumuşak doku arasındaki üstün bir kontrast elde etmek için, birden fazla kare (görüntü başına en az 5-8 / kare) ve 360-720 görünümleri (tam 360 ° rotasyon için) satın almalar zorunludur. Biz de iki boyutlu bir transfer fonksiyonu (voksel renk ve donukluk CT değeri ve degrade büyüklüğü ile orantılı olarak atandı), anatomi görselleştirme ve faiz, kan damarı ağı yapısı vurgulayarak. Göstermiştir Bu umut verici çalışma, transgenik veya xenograft Tümör taşıyan farelere kullanarak anti-anjiyogenez preklinik çalışmalar kalitatif ve kantitatif bir değerlendirme için bir temel bırakır.

MicroCT tarafından Kontrastlı küçük hayvan damar görüntüleme seri için hızlı, düşük maliyetli ve yüksek verimli tekniği<em&gt; In situ</em&gt; Muayene, tümör gelişimi için onları besleyen kan damarları ağı analiz ve preklinik terapötik girişim (ler) tümörlerin yanıt aşağıdaki.

Kontrast Geliştirilmiş Gemi Görüntüleme MicroCT kullanarak

Mikroskobik bilgisayarlı tomografi (mikroBT), canlı küçük hayvanların anatomisinin yüksek çözünürlüklü hacimsel görüntülemesini sağlar. Ancak, ... arasındaki kontrast

Mikroskobik bilgisayarlı tomografi veya mikro BT kullanılarak gerçekleştirilen bu kontrast artırımlı damar görüntüleme tekniğinin amacı, canlı farelerdeki vasküler ağların analizi için yüksek kaliteli veri setleri oluşturmaya yönelik optimal bir yöntem sağlamaktır. Bu, in vivo olarak radyoopak bir kontrast maddenin intravenöz enjeksiyonu ile gerçekleştirilir. Ardından, mikro BT taramaları sırasında hareket artefaktlarını azaltmak için anestezi uygulanarak ve hayvan çok modlu bir hazneye güvenli bir şekilde yerleştirilerek hayvan mikro BT görüntüleme için hazırlanır.Taramaların ardından, mikro CT verileri yeniden yapılandırılır ve görselleştirme yazılımına yüklenir. Prosedürün son adımı, kan damarlarının görünürlüğünü artırmak ve ayırt etme amacıyla kan damarları, kemik ve yumuşak dokuya farklı renkler atamak için iki boyutlu transfer fonksiyonu parametrelerini ayarlamaktır. Nihayetinde, CT opak kontrast artırımlı görüntüleme ve iki boyutlu transfer fonksiyonu işlemesi aracılığıyla canlı hayvanlardaki vasküler ağı gösteren sonuçlar elde edilebilir.Merhaba, ben San Antonio'daki Texas Sağlık Bilimleri Merkezi Üniversitesi, Greehey Çocuk Kanser Araştırmaları Enstitüsü, Küçük Hayvan Görüntüleme Çekirdek Ünitesi'nden Sue Resh, PJA Patti. Ben de yine San Antonio'daki Texas Sağlık Bilimleri Merkezi Üniversitesi, Greehey Çocuk Kanser Araştırmaları Enstitüsü'nden Charles Keller. Bugün sizlere, radyoopak kan havuzu kontrast maddesi kullanarak canlı hayvanlarda kan damarlarının görüntülenmesi prosedürünü göstereceğiz.Transgenik farelerimizdeki kompleks spontan tümörlerin orta ve büyük damarlarını incelemek için laboratuvarlarımızda bu prosedürü kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım. Bu prosedüre başlamak için, düşük ölü hacimli 28,5 gauge yarım cc'lik bir insülin şırıngası kullanarak, mililitrede 20 miligram iyot içeren kan havuzu kontrast maddesi Xia one 60 xl'den 20 gram başına 0,2 mililitre alın.Kontrast maddeyi canlı bir fareye distal kuyruk veninden enjekte edin. Enjeksiyondan 10 dakika sonra hayvanları mikro CT görüntüleme için hazırlayın.İlk olarak, hayvanları dakikada 2.5 litre hızında %100 oksijen içinde %2 isofluorine bağlı bir akrilik kutu içerisinde anestezi altına alın. Birkaç dakika sonra, anestezinin derinliğini doğrulamak için ayak parmağı sıkıştırma testi uygulayın. Ardından, hareket artefaktlarını en aza indirmek için fareyi, hava girişi ve tahliye imkanına sahip, özel yapım ve ticari olarak temin edilebilen bir multimodalite odasına yerleştirerek sabitleyin.Tarama sırasında hayvanın sürekli anestezi altında kalmasını sağlamak için %2 isofloran ve %100 oksijen içeren bir hava kaynağı sağlayın. Fare hazırlandıktan sonra, canlı hayvan taramaları yapabilen bir mikro BT cihazında taranabilir. Fareyi içeren multimodalite odasını egzoz borularına bağlayın.GE Explorer locus volumetrik BT tarayıcısı kullanılarak, hayvan 93 µm çözünürlükte taranabilir. Bu volumetrik tarayıcı, Feld Camp konik ışın rekonstrüksiyonu için 3.500 x 1750 CCD dedektör kullanır; platformdan bağımsız parametreler 450 µA akım, 80 kV voltaj ve 100 ms pozlama süresi olarak sabitlenir. Damardaki yumuşak doku ile kemik arasında üstün bir kontrast elde etmek için standart parametreler, görüntü başına beş ila sekiz kare ve tam 360 derecelik bir rotasyon için 360 ila 720 görüntü sayısı şeklinde değiştirilebilir; BT taramasını takiben toplam tarama süresi yaklaşık 15 ila 20 dakika olarak belirlenir.Üreticinin tescilli EVS demet yazılımı ile görüntüleri yeniden oluşturun. Fare anesteziden tamamen çıkana kadar izlemeye devam edin. Yeniden oluşturulan mikro CT verileri, gelişmiş izoyüzey tek boyutlu veya iki boyutlu transfer fonksiyonu için kullanılabilir.Üç boyutlu veri setinin iki boyutlu bir projeksiyonunu oluşturmak için SEG 3D görüntü işleme yazılımını kullanarak görüntüleme yapın; damar ve kemik arasındaki ayrımı daha da iyileştirmek için iki boyutlu bir transfer fonksiyonu kullanın. Görüntüleme sırasında, CT değeri ve gradyan büyüklüğüne dayanan transfer fonksiyonuna göre ışın örneğine renkler ve opaklıklar atayın. Gösterilen ilgi çekici alanları ve nesneleri vurgulamak için transfer fonksiyonlarını, CT değeri histogramlarının sağladığı kılavuza göre manuel olarak ayarlayın.Burada, Xia one 60 xl enjekte edilmiş vahşi tip bir farede gerçekleştirilen mikro CT taramasında, iki boyutlu bir transfer fonksiyonu işleme görüntüsünü gösteren temsili sonuçlar yer almaktadır. Canlı farelerde vasküler ağların analizi için nasıl yüksek kaliteli veri setleri oluşturulacağını göstermiş olduk. Bu teknik, transgenik veya ksenogreft farelerin kullanıldığı preklinik çalışmalarda, anti-anjiyogenezin kalitatif ve kantitatif değerlendirmesi için oldukça etkili bir şekilde kullanılabilir.Bu prosedürü uygularken, kontrast maddenin kuyruk venine mükemmel bir şekilde enjekte edildiğinden emin olmak ve hayvanı, solunuma bağlı olarak oluşabilecek hareket artefaktlarını en aza indirecek şekilde konumlandırmak önemlidir. Hepsi bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

contrast-enhanced-vessel-imaging-using-microct

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Koroner damarların görüntülenmesi kardiyovasküler hastalıkların bizim anlayışın geliştirilmesi için çok önemlidir. Burada mikro-Bilgisayarlı Tomografi (μCT) görüntüleme için hazırlık, bir radyoopak silikon kauçuk (Microfil) ile sıçan koroner damar perfüze için bir yöntem açıklanmaktadır.

Mikro Bilgisayarlı Tomografi Görüntüleme için hazırlık olarak retrograd perfüzyon ve Fare Koroner damarları doldurulması

Kaynak: Choi, J. P.  ve diğerleri.  Fare Modelinde Serebral Kavernöz Malformasyonların İndüksiyonu ve Mikro-BT Görüntülemesi. J. Vis. Uzm.  ( 2017)Bu video, bir fare beynindeki serebral kavernöz malformasyon (CCM) lezyonlarını görselleştirmek için mikro-BT görüntülemenin kullanımını göstermektedir. Beyin dokusundaki CCM lezyonlarının yoğunluğunu ve yerini değerlendirmek için numune hazırlama, görüntüleme ve 3D görüntü rekonstrüksiyonu adımlarını detaylandırır.

Bir Fare Beyninde Serebral Kavernöz Malformasyon Lezyonlarının Kontrastlı Mikro-BT Görüntülemesi

Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu, perfüzyonu, metabolizmayı ve iyotlu kontrast madde ile canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MikroBT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, insan kalbi hastalığının çeşitli hayvan modellerinin tahribatsız, yüksek verimli uzunlamasına in vivo görüntülenmesi için uygulanabilir.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

Bu protokol serebral emboli görselleştirmek için kombine yakın kızılötesi floresan (NIRF) görüntüleme ve mikro-bilgisayarlı tomografi (mikroBT) uygulanmasını açıklar. Bu teknik trombüs yükü ve evrim ölçümü sağlar. MikroBT'lerin tekniği altın nanopartiküller kullanarak canlı hayvan içinde trombüs görüntüler ise NIRF görüntüleme tekniği floresan, eksize beyinde trombüs etiketli görselleştirir.

Doğrudan Serebral emboli görselleştirme için Kombine Yakın kızılötesi Floresan Görüntüleme ve Mikro bilgisayarlı Tomografi

Bu makalede ayrıntılı bir metodoloji radyoopak .Kurşun bazlı silikon kauçuk fare damarlara aort çapı miktar aort anevrizması ve diseksiyon, bir fare modeli için sıvı için kullanma.

Aortopathy aort anevrizması β-aminopropionitrile-indüklenen ve diseksiyon, fare modeli nicel mikro-CT Analizi

Bu tekniğin amacı, erken postnatal ve erişkin farelerin pulmoner arter ağlarının akciğer şişmesi yoluyla ex vivo görselleştirilmesi ve pulmoner arter yoluyla radyoopak polimer bazlı bileşiğin enjeksiyonudur. Döküm dokular için potansiyel uygulamalar da tartışılmıştır.

Mikro-BT Görüntüleme için Erişkin ve Erken Postnatal Fare Akciğerlerinin Vasküler Döküm

Burada, kollajen seçici kontrast artırımı ile sağlıklı ve patolojik büyük memeli tüm kalplerinin yüksek çözünürlüklü mikro bilgisayarlı tomografi görüntülerini elde etmek için bir protokol sunuyoruz.

Kronik Hastalığı Olan Büyük Memeli Kardiyak Modellerinin Kontrastlı Mikro Bilgisayarlı Tomografi Görüntülemesinde Doku Hazırlama Teknikleri

Çift reçine döküm mikro hesaplamalı tomografi veya DUCT, organ mimarisinin 3D analizini kolaylaştırmak için aynı anda iki borulu sistemin görselleştirilmesini, dijitalleşmesini ve segmentasyonunu sağlar. DUCT, iki radyopak reçinenin ex vivo enjeksiyonunu ve ardından tomografik verilerin mikro bilgisayarlı tomografi taramasını ve segmentasyonunu birleştirir.

DUCT: Çift Reçine Dökümü ve ardından 3D Karaciğer Analizi için Mikro Bilgisayarlı Tomografi

Burada, mikro-X-ışını bilgisayarlı tomografi kullanarak murine arka eks uzuv damarları için bir görselleştirme ve niceleme yöntemini açıklıyoruz.

Murine Hind-limb Damarlarının Bilgisayarlı Tomografi Tabanlı Üç Boyutlu Görselleştirilmesi için Örnek Hazırlık

Diyete bağlı alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD) fare modeli kullanarak, NAFLD'nin progresyon aşamalarını değerlendirmek için non-invaziv bir yöntem olarak yeni in vivo mikro-bilgisayarlı tomografi görüntüleme tekniklerinin kullanımını, ağırlıklı olarak hepatik vasküler ağa odaklanarak tanımladık.

Alkole Bağlı Olmayan Yağlı Karaciğer Hastalığının Progresyonunu Değerlendirmek İçin Yeni In Vivo Mikrobilgisayarlı Tomografi Görüntüleme Teknikleri

Bu protokolde, farelerde başarılı bir ortotopik karaciğer transplantasyonu (OLT) modelinin uygulanmasını tartışıyoruz. Ek olarak, bir farede başarılı OLT'den sonra allogreft açıklığını daha fazla analiz etmek için adjuvanlar, özellikle mikrobilgisayarlı tomografi (mikroBT) taramaları kullanılarak tartışılmaktadır.

Mikrobilgisayarlı Tomografi Anjiyografi Kullanan Farelerde Başarılı Ortotopik Karaciğer Nakli

Öğrenin, canlı farelerde damar ağlarını analiz etmek için kontrast ajanlı microCT görüntüleme yöntemini. Bu teknik, tümör biyolojisi ve tedavi yanıtlarının değerlendirilmesinde yüksek verimli araştırmaları destekler.

Kontrast Geliştirilmiş Gemi Görüntüleme MicroCT kullanarak

Daha fazla video keşfet