Kontrast Geliştirilmiş Gemi Görüntüleme MicroCT kullanarak

MicroCT tarafından Kontrastlı küçük hayvan damar görüntüleme seri için hızlı, düşük maliyetli ve yüksek verimli tekniği

Mikroskobik bilgisayarlı tomografi veya mikro BT kullanılarak yapılan bu kontrastlı damar görüntüleme tekniğinin amacı, canlı farelerde vasküler ağların analizi için yüksek kaliteli veri setleri oluşturmak için optimal bir yöntem sağlamaktır. Bu, in vivo bir radyo opak kontrast maddesinin intravenöz enjeksiyonu ile gerçekleştirilir. Daha sonra hayvan, mikro BT taramaları sırasında hareket artefaktlarını azaltmak için anestezi indüklenerek ve hayvanı multimodalite odasında güvenli bir şekilde konumlandırarak mikro BT görüntülemeye hazırlanır.

Taramaların ardından, mikro BT verileri yeniden oluşturulur ve görselleştirme yazılımına yüklenir. Prosedürün son adımı, kan damarlarının görünürlüğünü artırmak ve ayrım amacıyla kan damarlarına, kemiğe ve yumuşak dokuya farklı renkler sağlamak için iki boyutlu transfer fonksiyonu parametrelerini ayarlamaktır. Sonuç olarak, BT opak kontrastlı görüntüleme ve iki boyutlu transfer fonksiyonu render ile canlı hayvanlarda vasküler ağı gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Merhaba, ben Sue Resh, San Antonio'daki Texas Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi'ndeki Khe Çocuk Kanseri Araştırma Enstitüsü Bölümü'ndeki Küçük Hayvan Görüntüleme Çekirdeği'nden PJA Patti. Ben Charles Keller, aynı zamanda San Antonio'daki Texas Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi'ndeki Greehey Çocuk Kanseri Araştırma Enstitüsü'ndenim. Bugün size radyo opak kan havuzu kontrast maddesi kullanarak canlı hayvanlarda kan damarlarının görselleştirilmesi için bir prosedür göstereceğiz.

Bu prosedürü laboratuvarlarımızda, transgenik farelerimizdeki karmaşık spontan tümörlerin orta ve büyük damarlarını incelemek için kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım. Bu işleme başlamak için, iyotlu kan havuzunun mililitresi başına 20 miligram iyotun 20 gramında 0.2 mililitre elde edin Düşük ölü boşluk 28 buçuk gauge yarım cc insülin şırıngası kullanarak kontrast madde Xia one 60 xl.

Kontrast maddeyi enjeksiyondan 10 dakika sonra distal kuyruk damarı yoluyla canlı bir fareye enjekte edin. Hayvanları mikro BT görüntülemesi için hazırlayın.

İlk olarak, hayvanları dakikada 2,5 litre hızla% 100 oksijen içinde% 2 flor içine bağlı akrilik bir kutuda uyuşturun. Birkaç dakika sonra, anestezi derinliğini doğrulamak için bir ayak parmağınızı sıkıştırın. Hareket artefaktlarını en aza indirmenin ardından, fareyi hava ve egzoz hükmü olan özel olarak üretilmiş, ticari olarak temin edilebilen çok modlu bir odaya yerleştirerek sabitleyin.

Tarama sırasında hayvanın sürekli anestezi almasını sağlamak için %2 flor ve %100 oksijen içeren bir hava beslemesi sağlayın. Fare hazırlandıktan sonra, canlı hayvan taramaları yapabilen bir mikro CT ünitesinde taranabilir. Fareyi içeren multimodalite odasını ayak işleri egzoz borularına bağlayın.

Hacimsel CT tarayıcı GE Explorer lokusu kullanılarak, hayvan 93 mikrometre çözünürlükte taranabilir. Bu hacimsel tarayıcı, Feld Camp koni ışını rekonstrüksiyonu için 3.500 x 1750 CCD dedektörü kullanır ve platformdan bağımsız parametreleri 450 mikroamperlik bir akım, bir DP kilo voltajı voltajı ve 100 milisaniyelik bir maruz kalma süresi ile sabit tutar. Damardan kemik ve yumuşak doku arasında üstün bir kontrast elde etmek için, standart parametreler görünüm başına beş ila sekiz kare ve tam 360 derece dönüş için 360 ila 720 görüntüleme sayısı ile değiştirilebilir, CT taramasını takiben yaklaşık 15 ila 20 dakikalık bir toplam tarama süresi kullanın.

Üreticinin tescilli EVS ışın yazılımıyla görüntüleri yeniden oluşturun. Anesteziden tamamen kurtulana kadar fareyi izlemeye devam edin. Yeniden yapılandırıldıktan sonra, mikro CT verileri gelişmiş izoyüzey tek boyutlu veya iki boyutlu transfer fonksiyonu için kullanılabilir.

Üç boyutlu veri setinin iki boyutlu bir projeksiyonunu oluşturmak için SEG 3D görüntü işleme yazılımını kullanarak görüntüleri işlemek, damar ve kemik arasındaki ayrımı daha da geliştiren iki boyutlu bir transfer işlevi kullanır. Görüntü oluşturma sırasında, aktarım işlevine dayalı olarak ışın örneğine renkler ve opaklıklar atayın, bu da CT değerine ve gradyan büyüklüğüne dayanır. Gösterilen ilgi alanlarını ve nesneleri vurgulamak için CT değer histogramları tarafından sağlanan kılavuza dayalı olarak aktarım işlevlerini manuel olarak ayarlayın.

Burada, Xia one 60 xl enjekte edilmiş vahşi tip bir farenin mikro CT taramasında görüntü oluşturan iki boyutlu bir transfer fonksiyonunu gösteren temsili sonuçlar verilmiştir. Canlı farelerde vasküler ağların analizi için yüksek kaliteli veri kümelerinin nasıl oluşturulacağını gösterdik. Bu teknik, transgenik veya ksenogreft fareler kullanılarak yapılan klinik öncesi çalışmalarda anti-anjiyogenezin kalitatif ve kantitatif değerlendirmesi için çok iyi kullanılabilir.

Bu prosedürü yaparken, kontrast maddenin mükemmel bir kuyruk damarı enjeksiyonu yapmayı ve hayvanı nefes alma nedeniyle oluşabilecek hareket artefaktını en aza indirecek şekilde konumlandırmayı unutmamak önemlidir. İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde iyi şanslar.