Akustik Membran mikropartikül Teknoloji Geliştirme Özel Çin Hamsteri Yumurtalık-host Hücre Proteini Tahliller

Bu prosedürün genel amacı, sınırlı uygulama süresi ile tekrarlanabilir sonuçlar için özelleştirilmiş, sağlam bir immünolojik test oluşturmaktır. Bu, önce uygun tahlil bileşenlerinin hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, tahlil parametrelerine dayalı olarak tahlili optimize etmektir.

Prosedürün üçüncü adımı, numune ve reaktif plakalarını basitçe yükleyerek ve test prosedürünü tanımlayarak testi Vibe platformunda kurmaktır. Vibe yazılımı ile prosedürün son adımı, başlatma sihirbazı ile titreşimi başlatmaktır. Sonuç olarak, Vibe platformunun kullanımı yoluyla özel antikorlarla hassas tekrarlanabilir immünolojik test sonuçları ve sınırlı uygulamalı süre gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Bu teknolojinin Eli'ninki gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, Vibe Workstation'ın standart protokollere göre walkaway işlemleri ve daha fazla tekrarlanabilir veri sağlamasıdır. NHS Kromojenik, biotin Bioatin, strep'e biyotinile antikoru hevesli ve manyetik boncuklara bağlamak için yakalama antikoru kullanarak, istenen hacimdeki boncukları bir füge tüpüne pipetlemek ve manyetik bir ayırıcı yardımıyla doyurucu hale getirmek için stripp şişesini bir ila iki dakika boyunca hevesli ve manyetik boncuklara girdaplayarak başlar. Boncukları yazılı protokole göre geri kazanmak için manyetik ayırma kullanarak boncukları PBST ile üç kez yıkayın.

PBST son yıkamadan çıkarıldıktan sonra, biyotinile antikor solüsyonunu boncuklara ekleyin ve boncukları pipetleme ile yeniden süspanse edin. Antikor hacminin en az 300 mikrolitre olduğundan emin olun. Daha azsa, PBS ile ayarlayın.

Süspansiyonu oda sıcaklığında 30 dakika çalkalama ile inkübe edin. Ardından boncukları daha önce olduğu gibi PBST ile yıkayın. Biyotinile BSA'yı daha önce gerçekleştirilen prosedürle aynı şekilde ekleyin.

Biyo biyotinile antikor, boncukları uzun süreli depolama için PBS'de 100 mikrolitre% 0.05 BSA'da yıkamadan önce yıkadığında ve yeniden süspanse ettiğinde, standart protokollere göre sodyum azit eklenebilir. NHS floresein kullanarak dedektör antikorunu florlayın. Çin hamster yumurtalık konak hücre protein testi geliştirmeye başlamak için.

İlk olarak, çalışma çözümlerini hazırlayın. HAPTEN etiketli antikor veya HAB, biyo ölçekli boncuk HAB seyreltici ile seyreltilmiş mililitre başına 1.6 mikrogramlık dört x çalışma çözeltisi olarak hazırlanır, çözeltiyi en az beş dakika döndürün. Ardından, boncuk çözeltisini hazırlayın.

Boncuk stoğu safrasını iyice girdaplayın. Tüm boncukların süspansiyon halinde olduğundan emin olmak için, biyo ölçekli boncuk HAB seyrelticisi ile seyreltilmiş mil litre başına sekiz kez 10 ila beşinci boncuktan oluşan dört x çalışma karışımı hazırlamak için bir alikotu çıkarın. Çözeltiyi en az beş dakika döndürün.

Ardından çalışan arabelleği hazırlayın. 10 milimolar kullanılarak birkaç CHO HCP testi geliştirilmiştir. O parça tampon% 1 ara pH 7.5.

Bununla birlikte, testinizi geliştirmek için kullanılan antikorlar için tamponun optimize edilmesi gerekebilir. Her beş iş istasyonu testi için bir tahlil şablonu hazırlanması önerilir. Tahlil şablonunda yedi sayfa, etiketli talimatlar, örnek kurulum notları, ham veri hesaplamaları, kalibrasyon tablosu ve sonuçlar bulunur.

Şablonu oluşturmaya başlamak için numune kurulum sayfasını seçin ve tablodaki standartların konsantrasyon aralığını doldurun. Sayfanın sol üst köşesinde, vibe iş istasyonuna talimat vermek için standartların sağındaki tabloya ek bilgiler girin, numunelerin ne kadar süreyle inkübe edilmesi gerektiğini, ne kadar hacimde reaktifin aktarılacağını, numune birikiminin uzunluğunu ve sensör koşullandırmasının ve probların ve kartuşun dekontaminasyonunun gerekli olup olmadığını belirtin. Ardından plaka düzenini doldurun, kalibratörleri ve numuneleri biyo ölçekli numune seyreltici ile seyreltin ve numuneleri plakalara yükleyin.

Reaktifleri üçüncü 96 duvar plakasına yükleyin. Plakaları kapatın. Plakaları iş istasyonu güverte çalkalayıcılarına yerleştirin ve sistemi yıkama tamponu ve rejenerasyon solüsyonu ile kurun.

Vibe iş istasyonunu açın ve sistem beslemesini ve atığını bağlayın. Sistemi hazırlamaya başlayın. Vibe kartuşunu takın.

Son olarak, tahlil Başlangıç sihirbazını çalıştırın. Ekrandaki talimatları izleyin ve başlayın Test sinyali A MMP teknolojisi ile ölçülür. Boncuk antijeni HAPTEN antikoru, hapten anti hapten etkileşimi yoluyla sensöre bağlandığında, rejenerasyon, bağışıklık komplekslerini uzaklaştırarak sensörü başlangıç durumuna geri getirir. Gösterilen.

İşte bir CHO H-C-P-A-M-M-P tahlili örneği. Kalibrasyon eğrisi analizi, tekrarlanabilir sonuçlarla biyoreaktör numunelerinde gerçekleştirilebilir. Bu kalibrasyon eğrisi artık bir protein içindir.

A-A-M-M-P testi, bir vibe rezidüel proteini, bir test kiti ile gerçekleştirilir. Aynı kit, 30 dakikalık bir inkübasyon periyodu ile daha hızlı bir test için veya daha uzun bir inkübasyon süresi ile daha hassas sonuçlar ve daha geniş dinamik aralık için kullanılabilir. Vibe Workstation, diğer A MMP testlerinden farklı olarak gerçekleştirilen bir ürün titresi testi için de kullanılabilir.

Bu tahlil, numune muamelesi veya boncuk gerektirmez ve kantitasyon, 10 milyondan fazla hücre içeren hiçbir spin numunesinde doğrulanmamıştır. Burada, Vibe platformunda rekombinant GST GAD 34 sonuçları kullanılarak Vibe Bioanalyzer veya Alpha Screen Technology tarafından elde edilen standart bir sinyal eğrisi gösterilmektedir. Burada bir kütük daha hassastı.

CWR 22 Ksenogreftlerinden GAD 34'ün indüksiyonu, Vibe, biyoanalizör veya Alfa ekranı tarafından analiz edildiği gibi bir bat proteazom inhibitörünün varlığında veya yokluğunda test edildi. Vibe platformu, in vivo tümör ksenogreftlerinde hassas tekrarlanabilir sonuçlar üretebildi, oysa alfa ekran sinyali, geliştirildikten sonra artan mikrogram protein ile söndürüldü. Bu teknik, onkoloji ilaç keşfi alanındaki araştırmacıların tümör örneklerinde ilaç inhibisyonunu keşfetmelerinin önünü açmış ve biyoproses uygulamalarında daha verimli operasyonlara izin vermiştir.