Name: Omurilik Elektrofizyoloji II: Ekstrasellüler Emiş Elektrot İmalatı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-20T23:59:00.000+00:00
Duration: 8 min 47 s
Description: Öğrenin ekstrasellüler emiş elektrot imalatını ve omurilik elektrofizyolojisi kayıtları için kullanımını. Bu yöntem, PE 90 plastik tüp ve alkol lambası kullanarak in vitro ölçümler yapmanızı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Samuel L. Pfaff Salk Biyolojik Araştırmalar Enstitüsü Gen İfadesi Laboratuvarlarında Profesör ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü bir Araştırmacı. Bu çalışma, Christopher ve Dana Reeve Vakfı tarafından desteklenmiştir. Joe Belcovson, Kent Schnoeker Multimedya Kaynakları ve Salk Enstitüsü&#39;nden Mike Sullivan, fotoğraf ve düzenleme ile ilgili yardım sağladı.

Elektrofizyolojik kayıtları izole omurilik, sinir devresi, 1 genetik ve gelişimsel değişiklikler ortaya çıkarabilir . Daha önce yenidoğan fare omurilik 2 incelemek için bir yöntem olduğunu göstermiştir . Burada izole omurilik 3 kurgusal lokomosyon kayıt yararlı emme elektrotlar hazırlamak için bir yöntem mevcut. Düşük sıcaklık alkol lamba 3-5 kullanarak elle çok ince uçlu bir plastik boru elektrot ucu çizilebilir. Plastik boru (PE90, Clay Adams Intramedic TM), uysal bir forma boru yumuşatmak için ateşte tutulur . Boru erimeye başlar ve daha saydam hale geldikçe, ısı kaynağı ve uçları hafifçe dışında çekti kaldırılır. Tüp alev kaldırma zamanlaması plastik daraltmak veya çizilmiş ise bölünmüş değildir sigortalamak için önemlidir. Boru ince kısmı istenen iç çapına uygun bir tıraş bıçağı ile kesilir, numune veya kablosunun segmental düzeyde yaşına tarafından dikte. Hortumun bir o-ring yerleştirme kolaylığı için, 45 ° kesim, kalın bir jilet ile boru sonunda yapılır. Bir halkalı ve o-ring varil elektrot elektrot ucu takmak için kalın sonuna yüklenir. Özellikle büyüklükteki elektrotlar için izin ve zorlukları önlemek için el-çekme elektrot ipuçları, elektrotlar, kalın bir boru (PE90) küçük bir tüp yerleştirilir kullanılarak inşa edilebilir. Boru uzunlukları kayıt kurulum gereksinimleri için özel ve değişkendir. Biz deneyler 1-3,5 kullanılan ölçümler de sunuyorum. PTFE ince borular (Zeus, Küçük Parça) ve PE90 boru 10cm uzunluğu 1 cm uzunluğunda bir tıraş bıçağı ile kesilir. Küçük tüp biter, onlar ezilmiş veya kapalı değil emin olmak için muayene edilmelidir. Bunlar bir böcek pin (Güzel Bilim Araçları) kullanılarak açılabilir. Bir damla yapıştırıcı (JB Kaynak), PTFE tüp orta yerleştirilir. PTFE tüp ve yapıştırıcı PE90 tüp ağız emme kullanarak PE90 tüp içine çekilir. 45 ° 'lik bir kesim kalın boru sonunda yapılır ve bir halkalı ve o-ring önceki bağlıdırlar. Halkalı ve BNC konektör ticari bir emme elektrodu vida. BNC konnektör mum mühür kaldırmak için bir saat ksilen batırılmış. Konektörü, sonra suda yıkanır ve kurutulur. Düşük açılı yan port varil tarafında yapılmalıdır. Bir metal çubuk bir Bunsen beki ile ısıtılır ve düşük bir açıda varil tarafında mevcut deliğe basıldığında. 0.010 inç gümüş tel (PM Sistemleri), 15cm uzunluğunda, on beş dakika için kesilir ve çamaşır ıslatılır. Bu sinyal iletim 6 yardımcı olan bir gümüş klorür kaplama oluşturmak için yapılır. Tel, su ile durulanır, kurutulur, sonra BNC konnektörüne lehimlenmiştir. BNC konnektörü ve gümüş tel BNC konnektör varil tarafında kalması için yeterli oda emme elektrot namlu içine eklenir. Emme boru yan port 2-3cm eklenir. Varil başına yaklaşık 2-3cm silikon enjekte edilir. BNC konektörü elektrot dolgu ileri iterek namlu içine dişli. Elektrot ucu elektrot ön ucunu dişli. Shrink tüp de yan port emiş hattını güçlendirmek için eklenebilir. Elektrotlar manyetik standları bağlı ve kayıt çanak yakınına yerleştirilen mikromanipülatörler üzerine monte edilir. BNC koaksiyel kablolar bir amplifikatöre kablolu bir headstage bağlıdırlar. Amplifikatör, veri toplama yazılımı (PolyView) ile bir PC bilgisayar dijital kart için bir analog (National Instruments) bağlı bir adaptör (PolyView) bağlıdır. Elektrofizyolojik verileri kaydederken, tüm dış parazitleri ortadan kaldırmak için gerekli. Sırasıyla, elektrik ve mekanik bir girişimi önlemek için kayıt çanak, amplifikatör ve baş sahne Faraday kafesi içinde bir hava masaya yerleştirilir. Temsilcisi Sonuçlar: <img src="/files/ftp_upload/2580/2580fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1: piyasada bulunan emme elektrot alkol lambası çekilmiş, ya da piyasada bulunan belirli büyüklükteki plastik boru ile inşa ağır bir göstergesi gümüş tel ve plastik bir ucu eli ekleyerek değiştirilebilir . Buna ek olarak, parafin dolgu daha dayanıklı silikon kalafat dolgu ile değiştirilir. <img src="/files/ftp_upload/2580/2580fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 emme elektrot hava tabloya ilişkin bir şema (mekanik izolasyonu için), Faraday kafesi (elektrik isolati), amplifikatör ve bilgisayar. Bu hava masa ve Faraday kafesi başvurulan kayıt çanak ve ikinci bir zemin için başvurulan bir zemin olduğunu dikkate alınmalıdır.

<ol><li>Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+rhythmic+locomotor+burst+patterns+using+a+continuous+wavelet+transform%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform.</a> Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).</li>
<li>Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Spinal cord electrophysiology.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Gallarda, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+axial+motor+and+sensory+pathways+via+heterotypic+trans-axonal+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling.</a> Science. 320, 233-236 (2008).</li>
<li>Landmesser, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+motor+projection+patterns+in+the+chick+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">The development of motor projection patterns in the chick hind limb.</a> J Physiol. 284, 391-414 (1978).</li>
<li>Myers, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+input+is+required+during+embryonic+development+to+mediate+proper+assembly+of+spinal+locomotor+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits.</a> Neuron. 46, 37-49 (2005).</li>
<li>Chanin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+determination+of+chloride+by+use+of+the+silver-silver+chloride+electrode%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode.</a> Science. 119, 323-324 (1954).</li>
<li>Goulding, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circuits+controlling+vertebrate+locomotion%3A+moving+in+a+new+direction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction.</a> Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).</li>
</ol>

Sinir sistemi geliştirme izole kemirgen omurilik kullanarak incelenebilir. Nörotransmitter varlığı, kurgusal lokomosyon desenli elektriksel aktivite 1,3 şeklinde spinal kord oluşturulabilir. Bu ritmik patlamaları 0,2 - 0,5 Hz üretilir ve sol-sağ ve fleksör ekstansör ardalanmasından desenli. Farklı gelişim aşamalarında, bu faaliyetin sağlamlık ve desenler 1 değişir. Genetik mutasyonlar da bu etkinliği 3,5,7 desenlendirme rahatsız. Bu faaliyetin Transgenik ve gelişimsel çalışmalar merkezi ...

<table><tbody><tr><td>PTFE Sub Lite İnce Cidarlı Boru (Küçük boru)</td><td>Zeus</td><td>36AWG</td><td>0.005&amp;#8221;ID x 0.003&amp;#8221; Cidarlı (Küçük Parçalar) Ayrıca 0.003&amp;#8221; ile 0.006&amp;#8221; arasında da mevcuttur</td></tr><tr><td>Büyük boru (0.86mm (0.34&amp;#8221;))</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>0.86mm (0.34&amp;#8221;) D.Ç. 1.27mm (.050&amp;#8221;)</td></tr><tr><td>Elektrot Gövdesi</td><td>A-M Systems</td><td>573000</td><td></td></tr><tr><td>Yapıştırıcı</td><td>JB Weld</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yapıştırıcı: Silikon mastik</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lehim ve havya</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çamaşır suyu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ksilen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gümüş tel: 0.010&amp;#8221;</td><td>A-M Systems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Entomoloji iğnesi: Austerlitz 0.1mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-10</td><td></td></tr><tr><td>Manyetik Stand</td><td>Narishige International</td><td>GJ-8</td><td></td></tr><tr><td>Mikromanipülatör</td><td>Narishige International</td><td>MN 151</td><td></td></tr><tr><td>Miniboard (Kafa katı)</td><td>Grass Technologies</td><td>F-15EB/B1</td><td></td></tr><tr><td>Polyview Adaptör Ünitesi</td><td>Grass Technologies</td><td>PVA 8</td><td></td></tr><tr><td>Bipolar Taşınabilir Physiodata Amplifikatör Sistemi</td><td>Grass Technologies</td><td>15LT</td><td></td></tr><tr><td>ANALOG-DİJİTAL DÖNÜŞTÜRÜCÜ KART</td><td>National Instruments</td><td>6035E</td><td></td></tr><tr><td>Hava Tablası; Vibraplane</td><td>Kinetic Systems</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

omurilik elektrofizyoloji ii: ekstrasellüler emiş elektrot İmalatı

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Nöral devrelerin ve hareket gelişimi, yenidoğan kemirgen omurilik merkezi desen üreteci (CPG) davranışını kullanarak incelenebilir. Biz disseke kemirgen omurilik, emme, CPG aktivitesinin incelemek için kullanılan elektrotlar, ya da kurgusal lokomosyon imal etmek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Kemirgen omurilik yapay beyin omurilik sıvısı konur ve ventral kökleri emme elektrot içine çekilir. Elektrot, piyasada yaygın olarak bulunan emme elektrot değiştirerek inşa edilmiştir. Ağır bir gümüş tel, piyasada bulunan elektrot tarafından verilen standart tel yerine kullanılır. Ticari elektrot cam ucu artan dayanıklılık için plastik bir ucu ile değiştirilir. Biz tutarlılık ve tekrarlanabilirlik sağlayan boru belirli boyutlarda yapılan elle çizilmiş elektrotlar ve elektrot hazırlar. Veri, bir amplifikatör ve neurogram kazanım yazılım kullanarak toplanır. Sırasıyla, mekanik ve elektrik girişimi önlemek için Kayıtlar Faraday kafesi içinde bir hava tablo yapılır.

Yenidoğan kemirgen omurilik elektrofizyolojik kayıtlar ölçmek için kullanılan ekstraselüler emme elektrot üretimi ve kullanımı bir gösteri<em&gt; In vitro</em

Omurilik Elektrofizyoloji II: Ekstrasellüler Emiş Elektrot İmalatı

Sinir devrelerinin gelişimi ve lokomosyon, yenidoğan kemirgen spinal kord merkezi patern jeneratörü (CPG) davranışı kullanılarak incelenebilir. Biz ...'yı gösteriyoruz.

Merhaba. Benim adım Resh Gary Dory; Salk Biyolojik Çalışmalar Enstitüsü'ndeki faf Laboratuvarı'nda araştırma asistanıyım. Bugün size iki farklı yöntem kullanarak hücre dışı vakumlu elektrotların nasıl üretileceğini göstereceğim. Bu elektrotlar, spinal kordların in vitro elektrofizyolojik kayıtlarını almak için kullanılabilir.PE 90 plastik tüpü istenilen genişliğe getirmek için ısı kaynağı olarak bir alkol lambası kullanın. Tüpü yanmakta olan alevin üzerinde tutun ve erimeye başladığında çekin; orta kısmını koparmamaya dikkat ederek uçlarını nazikçe birbirinden ayırın. Bu işlem tekrar gösterilmiştir.Tüpler yumuşayıp eridikçe çıkarın ve uçlarını nazikçe birbirinden ayırın. Tüpü, keskin bir jiletle, tüpün kalın ucunda ölçülecek örneğin yaklaşık genişliğine karşılık gelen noktadan kesin. Kesimi 45 derecelik bir açıyla yapın.Şimdi kalın uca bir ferül ve O-ring takılmalıdır. Borunun bu ucunu ferülün altıgen açıklığından geçirin. Ardından borunun ucunu kauçuk O-ring'in içine yerleştirin.Bu düzenek, elektrodun ön kısmına vidalanacaktır. Keskin bir jiletle bir santimetre uzunluğunda Zeus küçük tüp kesin ve uçların temiz kesildiğini ve açıklığın açık olduğunu kontrol edin. Keskin bir jilet k

spinal-cord-electrophysiology-ii-extracellular-suction-electrode

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Elektrofizyolojik çalışmalar için yenidoğan fare omurilik izolasyonu bir gösteri.

Omurilik Elektrofizyoloji

Elektrot İmalat ve İmplantasyon Aplysia californica Bozulmamış, Serbestçe Behaving Hayvanlar Çok kanallı Sinir ve Kas Kayıtlar

Bu video, çok elektrotlu bir dizi veya MEA cihazı kullanılarak yakalanan, omurilik dilimlerinin organotipik ko-kültürlerinden alınan elektrofizyolojik kayıtları sunar. Bu kayıtlar, dilimler arasındaki nöronal rejenerasyonu değerlendirir. Gözlenen senkronize elektriksel aktivite, başarılı nöral rejenerasyonu doğrular.

Birlikte Kültürlenmiş Omurilik Dilimlerinde Nöronal Rejenerasyonları Değerlendirmek İçin Elektrofizyolojik Kayıtlar

Bu video, düz bir sinir sarma elektrodunun üretimini göstermektedir. Etkili bir kayıt yüzeyi için koruyucu metal ve hassas polimer katmanlamanın entegrasyonunu sergiler. İşlem, optimum sinir teması ve doğru sinyal kaydı için polimer katmanların takılmasını, sertleştirilmesini, kırpılmasını ve kesilmesini içerir.

Nöral Aktivitenin Kaydedilmesi için Düz Arayüzlü Sinir Elektrotlarının İmalatı

Bu video, gerçek zamanlı nöbet tespiti için anestezi uygulanmış bir sıçana kafa üstü elektrot sistemi yerleştirme yöntemini göstermektedir. Prosedür, stimülasyon ve kayıt elektrotlarının yerleştirilmesini, diş çimentosu ile sabitlenmesini ve başa takılan bir amplifikatöre bağlanmasını içerir.

Gerçek Zamanlı Nöbet Tespiti için Bir Sıçan Modeline Kafa Üstü Elektrot Sisteminin İmplante Edilmesi

Ekstraselüler bir kas Motor Pool için motor nöronlar belirlenmesi<em&gt; Aplysia&#39;nın californica</em

Bu makalede, yüksek temas yoğunluklu düz arayüz sinir elektrot (GÜZEL) fabrikasyonu süreci hakkında ayrıntılı bir açıklama sağlar. Bu elektrot kayıt ve periferik sinirler içinde seçici nöral aktiviteyi teşvik etmek için optimize edilmiştir.

Kayıt ve Stimülasyon Uygulamaları için Yüksek İletişim-Yoğunluk Fabrikasyon, Düz Arayüz Sinir Elektrotlar

Bu ayrıntılı protokolünü transkranyal uyarım elektrot yerleştirme temporal kemik üzerinde kısa ve uzun vadeli etkileri Transkraniyal elektriksel stimülasyon fareler serbestçe hareket araştırmak için açıklar.

Kronik Transkraniyal elektriksel stimülasyon ve Sıçanlarda Intracortical kayıt

Burada uyarılmış ve spontan elektromiyografik potansiyellerin in vivo kronolojik kayıt için implante edilebilir bir sistemin üretimi için bir protokol sunulmaktadır. Sistem sinir yaralanması sonrasında laringeal kasların reinnervasyon araştırılması için uygulanır.

Vivo Elektromiyografide Kronik İçin İmplante Edilebilir Bir Sistem

Bu protokol, motor nöronların omurilik stimülasyonuna (SCS) elektriksel tepkilerini yüksek uzay-zamansal çözünürlükle incelemek için bir yama kelepçesi kullanan bir yöntemi açıklar ve bu da araştırmacıların omuriliği ayırma ve aynı anda hücre canlılığını sürdürme becerilerini geliştirmelerine yardımcı olabilir.

Spinal Kord Stimülasyonu Sırasında Motor Nöronlarda Tüm Hücre Yama-Klemp Kaydı için Omurilik Diliminin Ex vivo Hazırlanması

Amacımız, epimisyal elektromiyografi elektrotlarının üretimi ve test edilmesi hakkında güncellenmiş, takip etmesi kolay bir kılavuz sağlamaktı. Bu amaçla, malzeme tedariki için talimatlar ve üretim ve test sürecinin ayrıntılı bir incelemesini sağlıyoruz.

Düşük Maliyetli Bir Epimisyal Elektromiyografi Elektrodunun Geliştirilmesi: Üretim ve Test için Basitleştirilmiş Bir İş Akışı

Öğrenin ekstrasellüler emiş elektrot imalatını ve omurilik elektrofizyolojisi kayıtları için kullanımını. Bu yöntem, PE 90 plastik tüp ve alkol lambası kullanarak in vitro ölçümler yapmanızı sağlar.

Omurilik Elektrofizyoloji II: Ekstrasellüler Emiş Elektrot İmalatı

Daha fazla video keşfet