Değerlendirilmesi Fare, Nest İnşaat ve İstifçiliğine Sığıntı

Bu prosedürün amacı, farelerdeki türe özgü davranışları karakterize etmektir. İlk olarak, bir tüp materyal ile doldurulup hayvan tarafından ne kadarının uzaklaştırıldığı ölçülerek kazma davranışı incelenir. Kafese yuva materyalleri yerleştirilir ve yuva yapma davranışının bir ölçütü olarak yuvanın tamamlanma derecesi nicelleştirilir.

İstifleme davranışı, bir fareyi yiyecek peletleri ile dolu bir tünele erişimi olan bir kutuya yerleştirerek ve hayvanın tünelden ne kadar yiyecek çıkardığını ölçerek incelenir. Bu test serisinden elde edilen sonuçlar, farelerin günlük yaşam aktivitelerini gerçekleştirip gerçekleştirmediklerini gösterir. Normalde, benzer fonksiyonel davranışların hem farelerde hem de insan türünde bozulması nedeniyle, bu tekniğin çıkarımları demans tedavileri arayışına kadar uzanabilir.

Farelerdeki tipik davranışlar, insanların günlük yaşam aktivitelerine benzetilebilir. Alzheimer hastalığının ilk etkileri; kahvaltı hazırlamak, ayakkabı bağcıklarını bağlamak, bir öğün planlamak veya alışverişe çıkmak gibi normal günlük yaşam aktivitelerinin gerçekleştirilmesini engellemektir. Model Alzheimer farelerimizle yaptığımız çalışmalarda, türe özgü tipik davranışların büyük ölçüde engellendiğini görmekteyiz.

Burada, Alzheimer hastalarının evde ve klinikte sergilediği günlük yaşam aktiviteleri ile farelerdeki tipik davranışların inhibisyonu arasında doğrudan, neredeyse homolog bir modelimiz var. 68 milimetre çapında ve 20 santimetre uzunluğunda plastik borudan bir tünel oluşturun. Bir ucunu 12 milimetre kalınlığında MDF'den yapılmış bir tıpa ile kapatın.

Ardından, kazıcı tüpün açık ucundan bir santimetre uzağa, 90 derecelik bir açıyla iki delik açın. Her bir deliğe beş santimetre uzunluğunda bir makine vidası yerleştirin ve bunları sıkıştırarak sabitleyin. Tüp şu anda yerden yaklaşık üç santimetre yükseklikte olmalıdır.

Bir uca 200 gram yem peleti doldurun ve gece boyunca alışmaları için hayvanların kafesine yerleştirin. Fareler grup halinde besleniyorsa, sosyal kolaylaştırma etkisi nedeniyle alışma süreci daha hızlı ve kapsamlı olacaktır. Buna rağmen, tek başına barındırılan farelerde temel düzey testleri hala uygulanmalıdır.

Ardından, kazma davranışını ölçmek için gıda dışı maddeler de kullanılabilir. Kil topları, bezelye çakılları ve kum bunlara örnek teşkil etmektedir. Hayvanlar alıştıktan sonra, bazal testi gerçekleştirmek için saat 16:00 civarında test kafesine tam bir kazma alanı yerleştirin.

48 saat arayla iki bazal test yapılması önerilir. İki saat sonra, yuva içinde kalan materyalin ağırlığını, içeriği darası alınmış bir kaba boşaltarak ölçün.

Ödünç alınmayan materyali tüpe geri koyun ve ertesi sabah ana kafese yerleştirin. Tüpü çıkarın ve test için kalan tüm materyali tartın. Bu işlemi, son bazal ölçümden en az 48 saat sonra tekrarlayın.

C 57 black six fareleri tipik olarak ilk iki saatte yaklaşık 70 gram ve gece boyunca yaklaşık 200 gram toprak kazar. Hipokampal lezyonlu fareler genellikle beş gramdan daha az toprak kazar. Lipopolisakkarit gibi, Pion hastalığı da toprak kazma davranışını inhibe eder.

Tünelleme davranışının değerlendirilmesi, hastalıklı beyin homogenatı enjeksiyonundan 10 ila 12 hafta sonra pion hastalığını tespit edebilirken, klinik belirtiler ancak 22. haftada ortaya çıkmaktadır. Tünelleme davranışının, suş farklılıklarına ve potasyum iyon kanalı alt birimlerinin nakavt edilmesine karşı duyarlı olduğu gösterilmiştir. Yuva yapma davranışını ölçmek için bireysel kafesler hazırlayın ve tabanı 0,5 santimetre kalınlığında altlık malzemesi ile kaplayın.

Her kafesin içine yuva olarak adlandırılan beş santimetrekarelik basılmış pamuk elyaf yerleştirin. Karanlık fazdan yaklaşık bir saat önce her yuvalama kafesine bir fare yerleştirin ve ertesi sabah sonuçları değerlendirin.

Yırtılmamış yuva malzemesinin miktarını tartın ve yuvayı beş puanlık bir ölçeğe göre değerlendirin. Yuva malzemesi büyük ölçüde dokunulmamış olduğunda bir puan verilir ve yuva malzemesinin %90'ından fazlasının parçalandığı neredeyse mükemmel bir yuva için beş puan verilir. Hem erkekler hem de dişiler, amaçları termoregülasyon olmasının yanı sıra üremeyle ilişkili olduğu için yuva yaparlar.

C 57 black six farelerin erkek ve dişiler için yuva skorları aynı aralıktadır. Tek bir grup içinde kontrollü bir karşılaştırma yapmamış olsak da, C 57 black six farelerinin çoğu yuva yapımında dört ila beş puan alır. Ancak hipokampus lezyone edildiğinde, medyan skor iki civarına düşer.

Üç puanın aşılması pek olası değildir. İstifleme davranışını ölçmek için, içine bir su şişesi yerleştirerek ve istifleme tüpünün takılacağı yan tarafa bir delik açarak ana yuva olarak hizmet edecek kutuyu hazırlayın. 45 santimetre uzunluğundaki tel örgü bir parçayı 40 milimetre çapındaki bir tüpün etrafına sararak bir istifleme tüpü oluşturun.

Allen klipsleri veya tel bükümlerle sabitleyin. Ardından, 40 milimetrelik siyah tüpün 10 santimetrelik bir parçasına geçirme yoluyla yerleştirin. Sonrasında, toplama tüpünü daha önce hazırlanan kutuya bağlayın ve proksimal ucu çıkarılabilir ahşap bir tıpa ile kapatın.

Ev kutusunu, karton bir tünel ve ev kafesinden alınmış kirli altlıkla hazırlayın. İstifleme tüpüne erişimin engellendiğinden emin olun. Fareyi, daha sonraki alıştırma süreci için günün erken saatlerinde kutuya yerleştirin, istifleme tüpünü çıkarın ve tüpün distal ucunu toplam 100 gram olacak şekilde büyük ve küçük yem peletleri karışımıyla doldurun.

Karanlık evrenin başlangıcından hemen önce. Farelerin ertesi sabah istifleme tüpüne erişebilmeleri için ahşap tıpayı çıkarın. Yine, zamanlama kritik değildir.

Yuva kutusunda istiflenmiş olan yem peletlerini toplayın ve tartın. Dişi C 57 black six fareler kullanılmıştır. İstiflenen medyan miktar yaklaşık 50 ila 70 gram olacaktır.

Hipokampal lezyonlar istifleme davranışını güçlü bir şekilde baskılarken, prefrontal korteks lezyonlarının etkisi zayıftır. Bu videoyu izledikten sonra, kütle içerisindeki türe özgü davranışların nasıl değerlendirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.