Farelerde Motor Koordinasyon Ölçüm

Bu prosedürün genel amacı, farelerde motor koordinasyonu ölçmektir. Bu, ilk olarak hızlanan rotor çubuğu üzerinde test edilerek gerçekleştirilir. Daha sonra motor koordinasyonu onal bar üzerinde test edilir.

Hayvan ayrıca statik çubuklar üzerinde de test edilebilir. Son olarak, paralel çubuklardaki performans ölçülebilir. Sonuç olarak, farenin motor koordinasyonunda herhangi bir bozukluğu olup olmadığını gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Genel olarak, bu tekniğe yeni olan kişiler, fareyi cihaza doğru bir şekilde yerleştirmenin zorluğu nedeniyle mücadele edeceklerdir Aşağıdaki testlerin tümü için. Tamamen uyanık olduklarından emin olmak için fareleri testten beş ila 20 dakika önce deney odasına getirin. Buradaki rotor çubuğu sahnesi Oxford Üniversitesi'nde inşa edildi.

Çubuğun çapı üç santimetredir ve yüzeyinde farelerin onu daha etkili bir şekilde kavramasına yardımcı olan bir dizi paralel çıkıntı vardır. Her iki taraftaki bir flanş, farenin çubuktan ayrılmasını önler. Çapı 30 santimetre ve birbirinden altı santimetre uzaktadırlar.

Çubuk, aparatın tabanından 30 santimetre uzağa sabitlenir. Denemeye başlamadan önce herhangi bir düşüşü yumuşatmak için tabana yumuşak yastıklı bir yüzey yerleştirilir. Dakikada dört dönüşlük bir başlangıç hızı ve dakikada 20 dönüşlük bir hızlanma hızı ayarlayarak rotor çubuğunu hazırlayın.

Başlamak için, fareyi kuyruğundan tutun ve yataydan 45 derecelik bir açıyla çubuğa doğru getirin. Neredeyse çubuğa dokunduğunda hayvanı hızla serbest bırakın. Alternatif olarak, fare bir dübel üzerine indirilebilir ve dübel, hayvanı çubuğa aktarmak için kullanılacaktır.

Fareyi çubuğa yerleştirdikten 10 saniye sonra hızlanmayı başlatın ve farenin düşme hızına dikkat edin. Fare beş saniyeden önce düşerse ve muhtemelen deneycinin yanlış yerleştirilmesinden kaynaklanıyorsa, sonuç kaydedilmemeli ve fare 10 saniyeden önce düşerse deneme yeniden başlatılmalıdır. Zamanı not edin ve hayvanın iki kez daha denemesine izin verin.

10 saniyeyi geçen hayvanlar için, hayvanın düşme hızını kaydedin. Bazen fare yürümeyi durdurabilir ve sonuç olarak, sonunda düşmeden önce çubuğun etrafına bir miktar saldırır. Bu oluşumun hızına dikkat etmekte fayda var.

Performans, denemeler arasındaki ortalama hız olarak hesaplanır. Örneğin, bir kez 10 saniyeden önce düşen ve ardından dakikada 12 dönüşe kadar açık kalan bir fare. İkinci kez dört artı 12 puan, ikiye bölünür ve dakikada sekiz dönüşe eşittir.

Yatay çubuk, düşme uzuv kuvvetini ve koordinasyonunu ölçerken, en yaygın olarak iki milimetre çapında bir çubuk kullanılır. Daha büyük çaplı çubuklar daha rafine performans puanları sağlayabilir. 38 santimetre uzunluğundaki pirinç çubuklar, ahşap bir destek sütunu ile tezgah yüzeyinin 49 santimetre üzerinde tutulur.

Çubuklar, hafifçe birbirine çekilen desteklerin çentiklerine takıldığında gerilim altında tutulur. İki milimetrelik çubukla teste başlayın. Fareyi kuyruğundan tutun ve aparatın önündeki bankın üzerine yerleştirin.

Hızlı bir şekilde kaydırın. Gövdesini çubuğa hızlı bir şekilde dik olarak hizalamak için yaklaşık 20 santimetre geriye doğru. Hayvanı, merkezdeki yatay çubuğu sadece dört gözeneği ile kavramasına izin verecek şekilde kaldırın.

Aynı anda bir durdurma saati başlatırken kuyruğu serbest bırakın. Fare çubuğu kavrayamazsa ve deneycinin yerleşimi bunun nedeni olabilir. Düşüşü kaydetmeyin ve kısa bir dinlenmeden sonra hayvanı tekrar test edin.

Fare beş saniyeden önce düşerse ve bu görünüşe göre deneycinin kötü yerleştirmesinden kaynaklanmıyorsa, beş saniyeden daha büyük bir puan elde etmek için üç defaya kadar tekrarlayın. Farenin düştüğü zamanı veya maksimum 30 saniyelik test süresi ile bir dört zayıfın bir sütuna dokunduğu süreyi kaydedin, yatay çubuğu puanlamak için datu Sağ olarak en iyi puanı alın. Kütle bir ila beş saniye arasında düşerse, altı saniye ile 10 saniye arasında bir puan alın.

11 saniye ile 20 saniye arasında iki puan alın. 21 saniye ile 30 saniye arasında üç puan alın. 30 saniye sonra düşerek veya sadece 30 saniyeye kadar çubukta kalarak dört puan alın.

Beş puan alır ve fare bir uca dokunursa da beş puan alır. Test sırasında herhangi bir zamanda dört bağlantı noktası ile destek. İki milimetrelik çubukta beş puan elde edilirse, hayvan kısa bir dinlenmeden sonra daha kalın çubuklar üzerinde test edilebilir.

Dört ve altı milimetre çubukları için puanlama sistemi, iki milimetre çubuğu ile aynıdır ve nihai puan kümülatif toplamdır. Böylece, iki milimetre çubuğunda beş puan alan ancak 13 saniye sonra dört milimetre çubuğundan düşen bir fare. Beş artı sekiz puandır.

Motor koordinasyonu için yapılan bu testte, her biri 35 santimetre uzunluğunda, 22, 15 ve dokuz milimetre çapında, her biri 60 santimetre uzunluğunda, yerden 60 santimetre yükseklikteki bir laboratuvar rafına bir G kelepçesi ile tutturulmuş, değişen kalınlıklarda ahşap dowlar veya çubuklar. Bitiş çizgisini belirtmek için bankın yanında uçtan 10 santimetre uzakta bir işaret yapılır. Başlamak için, fareyi raftan uzağa bakacak şekilde en geniş çubuğun en ucuna yerleştirin, hayvanın rafa doğru yönelmesi için geçen süreyi ve toplam geçiş süresini kaydedin.

Yönlendirme sırasında fare ters döner ve çubuğun altına yapışırsa, keyfi olarak maksimum 120 saniyelik puana atayın. Hayvan diğer çubuklar üzerinde test edilmez ve aynı zamanda maksimum bir geçiş değeri alır. Fare yönettikten sonra düşerse veya maksimum 120 saniyelik test süresine ulaşırsa, daha dar çubuklar üzerinde test etmeyin.

Yönlendirmeden sonra çubuğu değiştirirken fare ters dönerse, fareyi ev kafesine geri döndürür ve testten önce dinlenmesine izin verirse de maksimum puan verilir. Bir sonraki küçük çubuk. Hayvanı daha önce gösterildiği gibi daha küçük çubuğun üzerine yerleştirin.

Fare beş saniyeden önce düşerse, değiştirin ve en fazla iki denemeye daha izin verin. Çubuğu tersine çevirmek için veya fare düşene kadar geçen süreyi kaydedin. Paralel çubukları kurmak için, ahşap destek üzerinde 30 milimetre aralıklı, bir metre uzunluğunda ve dört milimetre çapında iki çubuğu destekleyin.

Yerden 60 santimetre yükseklikte sütunlar. Fareyi, uzunlamasına ekseni çubuklara dik olacak şekilde iki çubuğun ortasına yerleştirin. Her iki ön gözenek bir çubukta, her iki arka gözenek diğer çubukta olmalıdır.

Puanlama, statik çubuklar için olana benzer. İki önlem alınır: farenin başlangıç konumuna 90 derece yönelmesine kadar geçen süre ve uç desteklerden birine ulaşana kadar geçen süre. Benzer şekilde, oryantasyon ve geçiş, hayvan ters dönmeden sağlanmalıdır, aksi takdirde maksimum süre ayrılır.

Hayvan beş saniyeden önce düşerse, bunun nedeni muhtemelen kötü yerleştirmedir ve hayvanın tekrar test edilmesi gerekir. Statik bir çubuk başlangıçta, ev kafeslerinde çevresel zenginleştirme olsun ya da olmasın mutant farelerde hastalığın ilerlemesini izlemek için kullanıldı. Zenginleştirme programı, çubuk üzerindeki motor disfonksiyonun başlangıcını önemli ölçüde geciktirdi, bu da arka zayıf tokalaşmanın başlangıcındaki bir gecikme ile paraleldi.

Nörolojik mentin genel bir belirtisi, sıyırıcı enfekte fareler, enjeksiyondan sonraki 16. haftadan itibaren yatay çubuk performansında, rotor çubuğu testinde 18. haftadan itibaren ve statik çubuklarda en az 19. haftadan itibaren bir azalma gösterdi. Hipokampal lezyonların motor yeteneğin herhangi bir ölçüsü üzerinde etkisi yoktu, ancak 1 2 9 s iki SV faresi, geliştirilmesinden sonra rotor çubuğu ve statik çubuklar üzerindeki C 57 siyah altı suşuna göre bozuldu. Bu teknik, Huntington hastalığındaki araştırmacıların, Huntington hastalığı mutant farelerinde çevresel zenginleşmenin etkilerini incelemelerinin yolunu açtı.