Name: Vivo Köpek Kas Fonksiyon Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-05T11:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 34 s
Description: Öğrenin, köpeklerde arka bacak kaslarının mekanik özelliklerini invaziv olmayan yöntemlerle ölçme ve karakterize etme tekniğini. Bu yöntem, kas fizyolojisi ve veteriner tıbbında tekrarlanabilir değerlendirmeler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ulusal Sağlık Enstitüsü (NIH), Joshua Fräse Vakfı, Müsküler Distrofi Derneği (MDA).

1. Deneme için ayarlama <ol><li> Dinamik kas Kontrol (DMC) yazılımı yükleyin. </li><li> Fizyoloji teçhizat aşağıdaki üreticinin talimatlarına kadar güç. </li><li> DMC yazılım Koşu: </li></ol> Donanım DMC yazılımı çalıştıran bir bilgisayara bağlı olduğu varsayılır ve sistem kalibre olduğunu. Yazılım zaman zaman revize edilebilir, bu nedenle, talimatlar aşağıda kullandığımız güncel yazılım sürümü ile ilgili olarak verilmektedir. Yazılım açıldığında, zaten çalışıyor. Kullanıcı başlangıçta DMC (örneğin, izometrik bir tetanoz üretmek için 1.5 s için 50 Hz uyarmak için) bir protokol yazabilir ve protokol daha sonra tekrar kullanmak üzere kaydedilebilir. Ve (2) eksantrik streç zarar protokolü (1) izometrik kasılma protokolü (örneğin, seğirme veya tetanoz): Biz iki standart protokoller kullanır. Biz seğirme için izometrik kasılma protokolü ile başlar. Seğirme optimize etmek için, Monitör Çıkışları ekranı kullanılır; elektrotlar taşınır seğirme sırasında üretilen tork görülebilir. Maksimum seğirme yanıtı elde edilir, veri ana ekran (Devam seçeneğini seçin) dönen ve seçerek başlayın ve Bitti toplanır. Dosyalar, pop-up penceresi Farklı Kaydet kaydedilir . Aynı konumda muhafaza elektrotlar sayesinde, tetanoz (50 Hz) sonra toplanan ve kaydedilir. Izometrik kasılmaları tamamlandığında, eksantrik streç yaralanma protokol yüklü ve çalıştırmak. Çünkü bu protokol, (10 kasılmaları) idam ana ekranda Çalıştır Tek tuş, tüm durum çalıştırın ortaya çıkarmak için seçilir kasılmaların bir dizi vardır . Şimdi başlayın seçildiğinde, Tüm Protokolleri penceresi açılır dosyaların kaydedileceği içine kök dosya ad ve dizin için çalıştır sorar anlaşılmaktadır. Sonra, Protokol Serisi Test başlatın ve eksantrik protokolü başlatmak için seçilen Bitti. Dosyalar seçilen Directory içine otomatik olarak kaydedilir. 2. Hayvan fizyolojisi teçhizat Konumlandırma <ol><li> Hayvanlar ile ilgili tüm prosedürler için hayvan bakımı ve kullanımı komitesi (ACUC) yönergeleri takip edilmelidir. </li><li> Onaylanmış protokole göre (örneğin, izofluran) inhalasyon anestezi ile köpek anestezisi. Hayvan derin anestezi olduğundan emin olmak için refleks yanıp kontrol edin. CO 2 izleme, pulse oksimetre ve sıcaklık bütün prosedür sırasında yakından izlenmelidir. Biz genellikle inhalasyon anestezi sevofluran indüksiyonu için propofol kullanın. </li><li> (Yani 2-3 cm büyük trokanter distal fibula başında ekstremite başından lateral uyarıcı elektrotlar alınacaktır (diz) bastırmak lateral etrafında saç tıraş. </li><li> Femur ve tibia dik açı yapmak o kadar yerleştirilmiş pelvik uzuv ve tibia ile sırt yatma fizyoloji tablo pozisyon köpek masaüstü paralel. Sağ ya da sol bacak test edilebilir Ya. </li><li> Pedal kuvveti köpek pençe ekleyerek önce, kuvvet pedal döndürmek için açık ve güvenli olmasını sağlamak için kontrol edin. Fizyoloji teçhizat için prosedür açıp pedal etkinleştirmek izleyin. Not: kullanıcı el taşımak için çalıştığında kuvvet pedalı "sert" olmalıdır. </li><li> Ayak pedalına hafifçe köpeğin pençe dinlenme, ölçü ve dönme merkezi ekseni yanal rakam sonuna kadar köpek pençe uzunluğu kayıt. </li><li> Pençe, kendinden yapışkanlı elastik sargı kullanarak ayak pedalı sabitleyin. </li></ol> 3. İzometrik seğirme tork (tibiotarsal fleksiyon) <ol><li> Bir güvenlik kontrolünden sonra, steril korumalı monopolar uyaran izolasyon ünitesi (SIU) 24-gauge uyarıcı elektrotlar bağlanır. </li><li> Stimülatörü ayarlayın: 1 Hz (saniyede 1 darbe) sürekli darbe çıkışı </li><li> Yazılım Ayarları: izometrik kasılma protokolü (ana ekran seçin Yük Protokolü) yükleyin. Çalıştır Tek tuş başlayın düğmesine yanında görünür olmalıdır. Bu protokolü sadece bir kez çalıştırmak sağlar. </li><li> Eldivenli elleriyle, alkol ile cildi temizlemek ve lateral proksimal fibula distal peroneal sinir palpe. Sinir alanında bir işaret parmağı ile, cilt altında dikkatlice katot (siyah) elektrodu takın ve periost sadece dış. Elektrot, yaklaşık 2cm derinlikte derinin yüzeyine paralel hareket el kaldırılır elektrot önlemek için yeterli yerleştirilmiş olmalıdır. </li><li> (Kırmızı), deri, paralel ve katot elektrot biraz distal altında anot elektrot yerleştirin. Her iki elektrot peroneal sinir fibula başı sadece distal iç olmalıdır. </li><li> Uyarıdan etkinleştirin1 Hz tor. Monitörde seğirme tepkileri gözlemleyin. Büyük seğirme genlik elde etmek için elektrot pozisyonları küçük ayarlamalar yapın. Elektrot en büyük seğirme yanıtı bulmak için tibia paralel 3-4 ½ cm artışlarla tamamen kaldırıldı ve yerini olmalıdır. Bu prosedürün kritik bir bileşeni olan ve en büyük yanıtı bulmak için çok dikkatli olunmalıdır. </li><li> Monitör Çıkışları ekran (Devam seçeneğini seçin) çıkmadan seğirme yanıtları kaydedin, daha sonra başlayın seçin ve veri toplamak için Bitti. Farklı Kaydet penceresi açılır istenen dosya adı ile dosyayı kaydedin. Stimülatörü kapatın. </li></ol> 4. İzometrik tetanik tork (tibiotarsal fleksiyon) <ol><li> Elektrotlar hareket ettirmeden, 1,5 sn için 50 Hz stimülatörü ayarlarını değiştirmek ve dış tetik fonksiyonu etkinleştirin. Bu stimülatörü yazılım tarafından aktive olmasını sağlar. </li><li> Yazılım ayarları: seğirme gibi aynı izometrik kasılma protokolü tetanik yanıt toplamak için kullanılır. Uyarıcı elektrotlar taşındı başlayın varsayarsak ve Bitti tetanoz üretmek için seçilir. Tetanoz üretmek için izometrik protokolde stimülatörü doğru zamanlama korumak için yazılım tarafından tetiklenir. Farklı Kaydet penceresi açılır tetanik yanıt kaydedin. </li></ol> 5. Eksantrik protokol <ol><li> : 1 sn (100V) için 50 Hz ve dış tetik işlevini etkinleştirmek elektrotlar hareket ettirmeden, stimülatörü ayarlarını değiştirmek. Bu stimülatörü yazılım tarafından aktive olmasını sağlar. </li><li> Yazılım ayarları: eksantrik streç yaralanması protokolü, 29 derece döndürmek için (maksimum 30 derece) servo motor için bir komut yükleyin . Çalıştır'ı seçin. Başlayın seçin; kaydedilecek dosya içine eksantrik serisi için kök dosya adı ve klasör girin. Protokol Serisi Testi Başlat'ı seçin ve ardından protokol başlatmak için Bitti. </li><li> Bu protokolde stimülatörü doğru zamanlama korumak için yazılım tarafından tetiklenebilir. Her eksantrik kasılma yanıtı ekranda göründüğü gibi, otomatik olarak kaydedilir. </li><li> Dört dakikalık dinlenme süresi her on eksantrik kasılmalar izler. </li><li> 30 eksantrik kasılmaları (dört dakikalık bir dinlenme süresi ile ayrılmış her bir set üç set on kasılmaları) toplam toplayın. </li></ol> 6. İzometrik seğirme tork (tibiotarsal uzantısı) <ol><li> Yukarıdaki seğirme protokol yineleyin, ancak cilt ve fleksiyon protokolü için orijinal elektrot yerleştirme proksimal dik elektrotlar yerleştirin. Gastrocnemious kas karınlarına içinde kaudal ve distal IT kursları olarak tibial sinir uyarılır. Uyarıcı Eşleştirilmiş ve derin kas kaudal içinde referans elektrotlar yerleştirilir ve bastırmak için sadece proksimal. Bastırmak (diz) tarafından oluşturulan 90o açı iniyor bir hat boyunca yaklaşık yerleştirme noktası. Tibial sinir peroneal sinir (kaudal) derin yatıyor Çünkü, elektrotlar optimal seğirme potansiyellerini ortaya çıkarmak için çeşitli alanlarda yerleştirilmiş olmalıdır. Bu prosedürün kritik bir bileşenidir. Not: tibiotarsal seğirme ve tetani tork iz tibiotarsal fleksiyon iz göre ters görünecektir. </li></ol> 7. İzometrik tetanik tork (tibiotarsal uzantısı) <ol><li> Elektrotlar hareket ettirmeden, 1,5 sn için 50 Hz stimülatörü ayarlarını değiştirmek ve dış tetik fonksiyonu etkinleştirin. Bu stimülatörü yazılım tarafından aktive olmasını sağlar. </li><li> Yazılım ayarları: 1.5 sn için 50 Hz ve dış tetik işlevini etkinleştirmek. Bu stimülatörü yazılım tarafından aktive olmasını sağlar. </li><li> Yazılım ayarları: aynı izometrik kasılma protokolü, seğirme gibi tetanoz için kullanılır . Uyarıcı elektrotlar taşındı başlayın varsayarsak ve Bitti tetanoz üretmek için seçilir. </li><li> Tetanoz üretmek için izometrik protokolde stimülatörü doğru zamanlama korumak için yazılım tarafından tetiklenir. Pop tetanik yanıtını Dosya pencere Kaydet kaydedin. </li></ol> 8. Veri analizi <ol><li> Dinamik kas analizi (DMA) programı (Aurora Bilimsel), seğirme, tetanik ve eksantrik kasılmalar toplanan tork ve zamansal bilgileri elde etmek için kullanılır. </li><li> DMA program çalıştırıldığında: yazılım, zaman zaman revize edilebilir, bu nedenle, kullandığımız güncel yazılım sürümü ile ilgili talimatları aşağıda verilmiştir. DMA yazılım çalışmıyorsa açıldığında. Programı etkinleştirmek için, sol üst köşesinde beyaz ok düğmesini seçin. DMA yazılım fonksiyonları bir dizi var, ama bizim amacımız içinlar, sadece birkaç ilgili fonksiyonları açıklanacaktır. Analiz etmek için bir dosya yükleyin:? Güncelle son veri dosyası veya yeni bir veri dosyası açılır DMA program başlatıldığında penceresi görüntülenir. Yeni seçin; sonraki pencerede seçin Labview sonraki pencerede, uygun klasör ve dosya seçin; Aç seçeneğini seçin. Bu pencerede kaldırmak için Filtre Arsa Kaldır seçeneğini belirleyin. Cut-off Frekans kutusunda bir filtre frekansı girin. Optimum filtre frekansı değerlendirilecek belirli verilere göre tespit edilecek olurdu. Bir örnek olarak, izometrik yanıtları ve eksantrik yanıtlar için 10 Hz - 30 Hz. Kullanım süzülmüş veri düğmesini seçin. Seç Arsa Veri altında, Filtreli Kuvvetleri seçin. Ekran genişletmek ve dosyası üzerinden taşımak için altta iki slayt çubuklarını kullanın. </li><li> Seyirme analizi (Şekil 1): 3 imleçler vardır: (1) mavi (2) ve sarı (3) beyaz dosya yüklenir ve yukarıda açıklanan aşamalar tamamlandığında, imleç konumunu ayarlamak varsayılarak. Izometrik seyirmesi ve tetani veya diğer izometrik kasılmaları için dinlenme tork tork yükselir noktada, mavi, sarı tork dinlenme tork (yani, dinlenme aşamasından sonra) geri döner yerleştirilir; beyaz yerleştirilir sarı imleç (gerekli değil) sağ. Imleçleri fare depresif ve seçilen imleci istediğiniz konuma sürükleyerek sol tuşu ile kolayca taşınır. Analizi yapın: imleçler konumlandırılmış yapın Kas Analizi seçin, daha sonra Sonuçları Göster. Analiz Muscle Veri Sonuçları penceresi açılır, bir dizi değişkenin Maksimum Force gibi gösterilir; Temel Force ½ Dinlenme Zaman, vb veri imleçler 1 (mavi) ve 2 (sarı arasında yatıyor tork yanıt sunulmaktadır .) Tüm bu değişkenler veya özel değişkenler bir veri dosyasına kaydedilebilir, ancak bu süreci burada açıklanan değildir. Bir veri günlüğü değilse, veri el ile kaydedilmiş olması gerekir. Pencereyi Kapat ana ekrana dönmek için seçin. DMA kapatmak için Exit Program seçin ve sonra yeni bir dosya analizi başlamak için beyaz ok seçin. </li><li> Tetani analizi (Şekil 2): seğirme için yukarıda açıklandığı gibi aynı adımları. </li><li> Eksantrik analizi (Şekil 3): eksantrik analiz kurmak için daha fazla adım gerektirir ve her 3 imleçleri kullanır. Eksantrik tork yanıt negatif ise (yani, tork iz aşağı doğru görünür), Referans Alan -1 (cm ²) kutusu (tork değerleri değişmeden) girerek ters ve normalize seçin; düğmesi veri (bu durumda, ters) normalize edilmiş göstermek için ters çevirir. Kapalı istenen Frekans Cut (örneğin, 10 Hz) girin ve süzülmüş veri analizi için kullanılacak filtre uygulanmış verileri kullanın için düğmeye tersine çevirmek için filtrelenmemiş veriler, kullan seçeneğini seçin. Pozisyon tork döner beyaz bir imleç eksantrik streç tork izometrik plato (bkz. aşağıdaki şekil) yükselmeye başlar noktada pozisyon sarı imleç; izometrik tork dinlenme tork yükselmeye başladığı nokta mavi imleç konumu tork dinlenme. Kas Analizi seçeneğini seçin, ardından Sonuçları Göster. Pop-up pencere kas Veri Analiz Sonuçlar, izometrik tork verileri için imleçler 1 (mavi) ve 2 (sarı) arasındaki veri seçmek ya da eksantrik tork verileri için imleçler 2 (sarı) ve 3 (beyaz) arasında. Tüm bu değişkenler veya özel değişkenler bir veri dosyasına kaydedilebilir, ancak bu süreci burada açıklanan değildir. Bir veri günlüğü değilse, veri el ile kaydedilmiş olması gerekir. Pencereyi Kapat ana ekrana dönmek için seçin. DMA kapatmak için Exit Program seçin ve ardından yeni bir dosya analizi başlamak için beyaz ok seçin. </li></ol> 9 - Temsilcisi Sonuçlar <ol><li> Twitch torku: Tibial sinir stimülasyonu (1 Hz) tibiotarsal ekstansör kasları aktive tek tiki (Şekil 1). Tork (gücü ve mesafe ürün) kullanıcı tarafından hesaplanan Y-ekseni "kuvvet" işaret ettiğini unutmayın. (Dönme eksenine lateral haneli sonuna kadar) pençe uzunluğunu ölçmek. Bu uzunluk, tork (Nm) belirlemek için kullanılan mesafe (kol). </li><li> İzometrik tetanik tork (tibiotarsal uzatma): tibial sinir stimülasyonu tibiotarsal ekstansör kaslar (50hz bakliyat 1.5 sn tren) tetanized. Biz stimülasyon zamanlama kontrol etmek ve yakalamak için tork yanıtlar (Şekil 2) Dinamik Muscle Kontrol bilgisayar yazılımı (DMC, Aurora Scientific, Inc.) Kullanıldı. </li><li> Eksantrik protokolü: eksantrik kasılmalar tibiotarsal fleksörlerinin yapılmıştır. Perkütan peroneal sinir Stimulation uzatma neden aktif fleksör kasları (eksantrik kasılma; Şekil 3), ortak rotasyon bir başlangıç ​​izometrik kasılma aktif 6 </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2623/2623fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 mavi (# 1), sarı (# 2) ve beyaz (# 3) imleçler Yerleştirme seğirme analiz etmek. DMA yazılımı bir temsilcisi ekran görüntüsü sağlıklı bir 13 kg köpek tibiotarsal uzantısı seğirme gösterilmiştir. Yazılım tarafından gerçekleştirilen bir sonraki analiz için, verileri elektronik tablo ve kuvvet çıkışı (Force (g) gücünün ürünü hesaplanır tork (Nm). Tork dönüştürülür ve olabilir gibi resimde gösterildiği ihraç edilmektedir unutmayın kol mesafesi (bu mesafe = uzunluk pençe lateral haneli dönme ekseni ölçülen). <img src="/files/ftp_upload/2623/2623fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 mavi (# 1), sarı (# 2) ve beyaz (# 3) imleçler Yerleştirme tetanoz analiz. Şekil 1 de gösterildiği gibi DMA yazılımı çekilen bir temsili ekran tibiotarsal uzantısı tetani, aynı hayvan için gösterilmiştir. <img src="/files/ftp_upload/2623/2623fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 mavi (# 1), sarı (# 2) ve beyaz (# 3) imleçler Yerleştirme eksantrik bir streç zarar daralma analiz etmek. DMA yazılımı bir temsilcisi ekran görüntüsü sağlıklı bir 13 kg köpek tek bir eksantrik streç zarar daralma gösterilir. Ilk plato (yeşil hat) izometrik kasılma fazı göstermektedir. Izometrik faz yeşil hat hızlı zirve tarafından gösterildiği gibi bir eksantrik (streç) faz tarafından takip edilmektedir. Tekrarlayan eksantrik kasılmalar genellikle izometrik tork sürekli bir düşüşe neden olabilir.

<ol><li>Childers, M. K., Okamura, C. S., Bogan, D. J., Bogan, J. R., Petroski, G. F., McDonald, K., Kornegay, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eccentric+contraction+injury+in+dystrophic+canine+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Eccentric contraction injury in dystrophic canine muscle.</a> Arch Phys Med Rehabil. 83, 1572-1578 (2002).</li>
<li>Childers, M. K., Okamura, C. S., Bogan, D. J., Bogan, J. R., Sullivan, M. J., Kornegay, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myofiber+injury+and+regeneration+in+a+canine+homologue+of+Duchenne+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Myofiber injury and regeneration in a canine homologue of Duchenne muscular dystrophy.</a> Am J Phys Med Rehabil. 80, 175-181 (2001).</li>
<li>MK, C. hilders, JT, S. taley, JN, K. ornegay, KS, M. cD. onald <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skinned+single+fibers+from+normal+and+dystrophin-deficient+dogs+incur+comparable+stretch-induced+force+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Skinned single fibers from normal and dystrophin-deficient dogs incur comparable stretch-induced force deficits.</a> Muscle Nerve. 31, 768-771 (2005).</li>
<li>Kornegay, J. N., Bogan, D. J., Bogan, J. R., Childers, M. K., Cundiff, D. D., Petroski, G. F., Schueler, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contraction+force+generated+by+tarsal+joint+flexion+and+extension+in+dogs+with+golden+retriever+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Contraction force generated by tarsal joint flexion and extension in dogs with golden retriever muscular dystrophy.</a> J Neurol Sci. 166, 115-121 (1999).</li>
<li>Liu, J. M., Okamura, C. S., Bogan, D. J., Bogan, J. R., Childers, M. K., Kornegay, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prednisone+in+canine+muscular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Effects of prednisone in canine muscular dystrophy.</a> Muscle Nerve. 30, 767-773 (2004).</li>
<li>Tegeler, C. J., Grange, R. W., Bogan, D. J., Markert, C. D., Case, D., Kornegay, J. N., Childers, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eccentric+contractions+induce+rapid+isometric+torque+drop+in+dystrophin-deficient+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Eccentric contractions induce rapid isometric torque drop in dystrophin-deficient dogs.</a> Muscle Nerve. 42, 130-132 (2010).</li>
<li>Allen, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eccentric+muscle+damage%3A+mechanisms+of+early+reduction+of+force%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand%22%5BJournal%5D)">Eccentric muscle damage: mechanisms of early reduction of force.</a> Acta Physiol Scand. 171, 311-319 (2001).</li>
<li>Friden, J., Lieber, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eccentric+exercise-induced+injuries+to+contractile+and+cytoskeletal+muscle+fibre+components%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand%22%5BJournal%5D)">Eccentric exercise-induced injuries to contractile and cytoskeletal muscle fibre components.</a> Acta Physiol Scand. 171, 321-326 (2001).</li>
<li>Merkies, I. S., Faber, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcome+measures+in+Duchenne+muscular+dystrophy%3A+are+we+ready+for+the+new+therapeutic+era%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Outcome measures in Duchenne muscular dystrophy: are we ready for the new therapeutic era?</a> Neuromuscul Disord. 19, 447-447 (2009).</li>
<li>Nagaraju, K., Willmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+standard+procedures+for+murine+and+canine+efficacy+studies+of+DMD+therapeutics%3A+report+of+two+expert+workshops+on+%22Pre-clinical+testing+for+Duchenne+dystrophy%22%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Developing standard procedures for murine and canine efficacy studies of DMD therapeutics: report of two expert workshops on "Pre-clinical testing for Duchenne dystrophy".</a> Neuromuscul Disord. 19, 502-506 (2009).</li>
<li>Proske, U., Allen, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Damage+to+skeletal+muscle+from+eccentric+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Exerc+Sport+Sci+Rev%22%5BJournal%5D)">Damage to skeletal muscle from eccentric exercise.</a> Exerc Sport Sci Rev. 33, 98-104 (2005).</li>
<li>Warren, G. L., Lowe, D. A., Armstrong, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+tools+used+in+the+study+of+eccentric+contraction-induced+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Measurement tools used in the study of eccentric contraction-induced injury.</a> Sports Med. 27, 43-59 (1999).</li>
</ol>

Bu video-makale üretimi Aurora Scientific, Inc tarafından sponsor oldu

Bu protokol, değerlendirmek, analiz etmek, in vivo büyük hayvan kas fonksiyonu belge ve tedavi müdahalelerin etkinliğini belirlemek ya da hastalığın ilerlemesi biyolojik özellikleri belgelemek için kullanılır. Hayvan 1-6 konumlandırma, kol, bacak yerleşim ve elektrot yerleştirme anahtar değişkenlerin önemli ölçüde etkili sonuçlar. Bir ön çalışma, izofluran kuvvet ölçümleri (Schueler RO, Koch H, Kornegay JN, yayınlanmamış veri, 1993) önemli ölçüde etkiler vermedi alveoler konsantrasyon (MAC) ortalama değerleri Donanım ve yazılım piyasada bulunan ve yöntemleri köklü. 7 1,2,8,4,9-11,6,12 Bu protokol, kullanıcıların almak ve yukarıda açıklanan yazılım ve ekipman kullanımı tavsiye edilir. Değişiklikler: sınırlamalar mevcut servo motor, yaklaşık 23 kg ve 20 cm pençe uzunluğu vücut kitle içerir. Tork sınırı tork dönüştürücü (model 310LR) ~ 8 N-metre Burada anlatılan olduğunu unutmayın. Bu değer, 6 ay veya daha büyük normal köpekler tarafından aşılabilir. Geçerli protokol Olası değişiklikler yazılım güncelleme içerir ve transdüser tork aralığı artırmak için. Aurora Bilimsel büyük hayvanlar için geçerli protokol kullanılan stereotaktik çerçeve için ikame edilebilir bir uzuv konumlandırma cihazı üretmektedir. Bu yöntemi, insan olmayan primatlar da dahil olmak üzere diğer hayvan modellerinde başarıyla uygulanan olmuştur.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Uyarıcı elektrot </td><td> Teca </td><td> 25mmx26G </td><td> Tek kullanımlık steril monopolar iğne elektrotlar </td></tr><tr><td> Stimülatör </td><td> Çim </td><td> S88X </td><td></td></tr><tr><td> Stimulus izolasyon ünitesi </td><td> Çim </td><td> SIU-C </td><td></td></tr><tr><td> Kas kolu sistemi </td><td> Aurora Bilimsel </td><td> 310C-LR </td><td> Ayak plakası seçeneği </td></tr><tr><td> Sinyal arayüzü </td><td> Aurora Bilimsel </td><td> Seri 604A </td><td></td></tr><tr><td> Dinamik kas Kontrol ve Analiz Yazılımı </td><td> Aurora Bilimsel </td><td> Aurora Bilimsel </td><td></td></tr><tr><td> PC / Monitör </td><td> Aurora Bilimsel </td><td> Windows XP yüklü bilgisayar </td><td></td></tr><tr><td> Uzuv pozisyon cihaz </td><td> Aurora Bilimsel </td><td> NA </td><td> Stereotaktik çerçeve için ikame edilebilir </td></tr><tr><td> Tablo </td><td> Northstar Gümrük, LLC </td><td> NA </td><td> Özel yapılmış tablo </td></tr><tr><td> Esnek sargı pençe eki için pedal </td><td> Andover </td><td> PetFlex (5cmx2m) </td><td> Bir ya da iki kez tekrar edilebilir </td></tr></tbody></table>

vivo köpek kas fonksiyon testi

In Vivo Canine Muscle Function Assay

Biz köpek pelvik ekstremite kas gücü ve tekrarlanan eksantrik kasılmalar kas yanıtı ölçmek için bir minimal invaziv ve tekrarlanabilir bir yöntem tarif. Stereotaktik çerçeve içinde doğru bir açıyla femur tibia hizalamak için bir anestezi köpek Pelvik ekstremite immobilize. Yapıştırıcı sarın servo motor tork ölçmek için bir şaft üzerine monte edilmiş bir pedal pençe yapıştırıyor. Perkütan sinir stimülasyonu, izometrik tork üretmek için pedal karşı ya push (genişletmek) veya (flex) çekin pençe pelvik bacak kasları harekete geçirir. Perkütan tibial sinir stimülasyonu tibiotarsal ekstansör kasları harekete geçirir. Tekrarlanan eksantrik (uzun) kasılmaları tibiotarsal fleksör kasları perkütan peroneal sinir stimülasyonu ile indüklenen. Eksantrik protokol servo motor tarafından dayatılan zorunlu bir streç tarafından izlenen bir başlangıç ​​izometrik kasılma oluşur. Sözleşmeler, örneğin, bir eksantrik kasılma sırasında dönme etkili kas uzatır. Fleksör kasların uyarılması sırasında 800 msn izometrik ve 200 msn eksantrik kasılma tabi tutulur. Bu prosedür, her 5 saniyede tekrarlanır. Yorgunluk önlemek için, 4 dakika kalan toplam 30 kasılmaları yapılan her 10 kasılmalar izler.

Biz köpek hindlimb kas gücü ve tekrarlanan eksantrik kasılmalar kas yanıtı ölçmek için bir minimal invaziv ve ağrısız bir yöntem açıklanmaktadır.

Vivo Köpek Kas Fonksiyon Testi

Köpeklerde pelvik ekstremite kas gücünü ve tekrarlanan eksantrik... karşısındaki kas yanıtını ölçmek için minimal invaziv ve tekrarlanabilir bir yöntemi tanımlıyoruz.

Bu prosedürün genel amacı, invaziv olmayan yöntemler kullanarak canlı köpeklerde arka ekstremite kaslarının mekanik özelliklerini ölçmek ve karakterize etmektir. Bu işlem, öncelikle köpeğin fizyoloji düzeneğine uygun şekilde yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, izometrik seyirme torkunun ve titanik tibial tarsal fleksiyon torkunun ölçülmesi ve kaydedilmesidir.Prosedürün üçüncü adımı, eksentrik kontraksiyonların gerçekleştirilmesidir. Prosedürün son adımı ise tibial tarsal ekstansiyon sırasında izometrik seyirme, tork ve titanik torkun ölçülmesi ve kaydedilmesidir. Sonuç olarak, non-invaziv bir fizyolojik yöntem aracılığıyla arka ekstremite kas gücünü ve tekrarlayan eksentrik kontraksiyonlara verilen yanıtı gösteren sonuçlar elde edilebilir.Bu tekniğin, terminal çalışmalar olan ex vivo izole kas analizleri gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, non-invaziv olması ve iyi tolere edilmesi nedeniyle kullanılan yöntemin zaman içinde tekrarlanabilmesidir. Bu yöntem, kas fizyolojisi alanında, kasların kontraksiyonla tetiklenen yaralanmaya veya yorgunluğa verdiği yanıt gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Yöntem, köpeklerde veya diğer büyük memelilerde kas fonksiyonlarını ölçtüğü için bu tekniğin etkileri, kas distrofilerinin tedavisine veya teşhisine kadar uzanmaktadır.Birçok yeni tedavinin klinik deneyler ve hastalar öncesindeki preklinik çalışmalarında bu denli büyük hayvanlara ihtiyaç duyulur. Bu yöntem köpek modelleri hakkında bilgi sağlayabilse de, insan dışı primatlar gibi diğer hayvan model sistemlerine de uygulanabilir. Genel olarak, bu yöntemde yeni olan kişiler, stimülasyon elektrotlarının yerleştirilmesinde gereken özen ve tork izlerinden ne beklenmesi gerektiğine dair bilgi eksikliği nedeniyle zorluk yaşayacaklardır. Kaslardan maksimum tork yanıtını almak için gereken hassasiyet nedeniyle elektrot konumlandırma adımlarının öğrenilmesi zor olduğundan, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşımaktadır.Çalışma kapsamında, stimülasyon ve veri kayıt parametrelerini tanımlamak için Dynamic Muscle Control (DMC) yazılımında yazılmış iki protokol kullanılmaktadır. İlk protokol olan izometrik kontraksiyon protokolü, hem seğirme (twitch) hem de tetanos kontraksiyonları için kullanılır. Eksantrik germe yaralanması protokolü olarak adlandırılan ikinci protokol ise eksantrik kontraksiyonlar için kullanılır; her bir protokol için kullanılan stimülatör ayarları ve yazılım dizileri burada gösterilen tabloda verilmiştir; seğirme kontraksiyonları 1 Hz stimülasyon ile oluşturulur.Titanic ve eksantrik kasılmalar 50 hertz stimülasyon ile ortaya çıkarılır. Eksantrik kasılma durumunda, kasılan kas üzerine bir germe uygulanır. Bu deneyler; bir fleksör kasın seyirme, Titanic veya eksantrik kasılmalarını ortaya çıkarmak için peroneal sinirin stimüle edilmesini ve bir ekstansör kasın seyirme veya Titanic kasılmalarını ortaya çıkarmak için tibial sinirin stimüle edilmesini içeren çeşitli kasılma türlerinin tetiklenmesini kapsar.Köpeği anesteziye aldıktan sonra, hayvanın derin anestezide olduğundan emin olmak için göz kırpma refleksini kontrol edin. Karbondioksiti, nabız oksimetresini ve sıcaklığı yakından izleyin. Prosedür sırasında, uyarıcı elektrotların yerleştirileceği lateral diz bölgesindeki tüyleri tıraş edin.Ardından, köpeği fizyoloji masasına yerleştirin. Femur ve tibianın dik açı oluşturduğu ve tibianın masa yüzeyine paralel olduğu sırtüstü yatar pozisyonda pelvik ekstremiteyi konumlandırarak, kuvvet pedalının güvenli bir şekilde dönebildiğini kontrol edin. Pedal, manuel olarak hareket ettirildiğinde sert hissettirmelidir.Ardından, fizyoloji düzeneğini açın ve pedalı aktifleştirin. Pedalın hareketi, bilgisayar tarafından kontrol edilen servo motor ile yönetilir. Şimdi, köpeğin patisini nazikçe ayak pedalına yerleştirin; köpeğin patisinin uzunluğunu rotasyonun merkez ekseninden lateral dijitin ucuna kadar ölçün ve kaydedin.Ardından, köpeğin patisini elastik kendinden yapışan sargı kullanarak ayak pedalına sabitleyin. Pedalın içindeki transduser, bacak kas kasılmalarının kuvvetini kaydeder. Ekranlı monopolar 24 gauge elektrotları stimulus izolasyon ünitesine bağlayarak stimülasyon elektrotlarını hazırlayın.Eldivenli ellerle köpeğin cildini alkol ile temizleyin ve lateral proksimal fibulanın hemen distalindeki common peroneal nerve'ü palpasyonla belirleyip parmağınızla sinir bölgesini işaretleyin; siyah katot elektrodunu dikkatlice cildin altına yerleştirin ve kırmızı anot elektrodunu periosteumun hemen dışına, cildin altına, katot elektroduna paralel ve hafifçe distal olacak şekilde yerleştirin. Her iki elektrot şimdi fibular başın hemen distalinde, common peroneal nerve'ün iç kısmında olmalıdır. Ardından, stimülatörü bir hertz seviyesinde aktive edin ve monitördeki seyirme yanıtını gözlemleyin.Mümkün olan en büyük seğirme genliğini elde etmek için elektrot konumlarında gerektiğinde küçük ayarlamalar yapın. Elektrotlar iyi yerleştirildikten sonra, bir seğirme yanıtı toplamak için DMC yazılımını etkinleştirin. Bir sonraki adım, elektrotları hareket ettirmeden tetanik bir kontraksiyon oluşturmaktır.Stimülatörü, titanik kasılma için tabloda belirtilen şekilde ayarlayın. Ardından, kasın izometrik titanik kasılmasını gerçekleştirmek için yazılımdaki izometrik kasılma protokolünü etkinleştirin. Bir sonraki deney olan eksantrik germe yaralanması protokolü de elektrotlar hareket ettirilmeden gerçekleştirilir.Stimülatörü eksantrik kontraksiyon için ayarlayın ve stimülasyonu başlatın. Bu protokolde, sinir 50 hertz frekansında bir saniye boyunca 10 kez stimüle edilir. Bu bir saniyelik sürenin ilk 800 milisaniyesinde fleksör kaslar izometrik olarak kasılır ve ardından son 200 milisaniyede kas gerilir.10 eksantrik kontriksiyondan oluşan bir setin ardından kasın dört dakika dinlenmesine izin verin. Ardından, ekstansör kası uyarmak için, her set arasında dört dakikalık dinlenmelerle eksantrik germe yaralanması protokolünü iki kez daha tekrarlayın; elektrotları, cilde dik ve fleksiyon için kullanılan orijinal elektrot yerleşim yerinin proksimaline yerleştirerek tibial sinire taşıyın. Yaklaşık yerleşim noktası, diz tarafından oluşturulan 90 derecelik açıyı ikiye bölen bir çizgi üzerindedir.Tibial sinir, common peroneal sinirin daha derininde ve yanında yer alır. Optimal seğirme potansiyellerini elde etmek için elektrotları gerektiği şekilde hareket ettirin. Elektrotlar yerleştirildikten sonra, elektrotları hareket ettirmeden izometrik protokolü kullanarak maksimal bir seğirme oluşturun.Stimülatör ayarlarını titanik kasılmalar için belirtilen şekilde değiştirin. Ardından, tibial tarsal ekstansör kasın titanik bir kasılmasını aktive edin ve kaydedin. Kas kasılmalarından elde edilen tork ve zamansal bilgileri analiz etmek için dinamik kas analizi veya DMA programı kullanılır.Bu şekilde, veri analizi için 1 Hz'lik tibial sinir stimülasyonu tibial tarsal ekstansör kasların tekil seğirmelerini aktive etmiştir; üç imlecin konumları şu şekilde ayarlanmıştır. Mavi imleç, torkun dinlenme torkundan yükseldiği noktaya ayarlanmıştır. Sarı imleç ise torkun dinlenme torkuna döndüğü noktaya yerleştirilmiştir.Gevşeme evresinden sonra, beyaz imlece ihtiyaç kalmadığından sarı imlecin sağına yerleştirilmiştir. Bu şekil, tibial sinirin 50 hertz'lik darbelerden oluşan 1,5 saniyelik bir serisiyle yapılan izometrik tetanik tork stimülasyonunun, tibial tarsal ekstensör kasında tetanik bir kontraksiyona yol açtığını göstermektedir. Veri analizi için mavi ve sarı imleçler yerleştirilir.Bu şekildeki seğirme analizine gelince, tibial tarsal fleksörlerde eksantrik kontraksiyonlar indüklenmiştir. Perkütan perineal sinir stimülasyonu, 800 milisaniye boyunca başlangıç bir izometrik kontraksiyonu aktive etmiş ve bu noktada bacağa zorunlu bir germe uygulanmıştır. Bu veri analizi için mavi imleç, izometrik torkun dinlenme torkundan yükselmeye başladığı noktaya yerleştirilmiştir.Sarı imleç, eksantrik germe torkunun izometrik platodan yükselmeye başladığı noktaya yerleştirilir. Beyaz imleç ise torkun dinlenme torkuna döndüğü noktaya yerleştirilir. Bu teknik ustalaşıldığında, uygun şekilde gerçekleştirilirse yaklaşık bir saat içinde tamamlanabilir. Bu prosedürü uygularken, adım adım kontrol noktaları içeren basılı bir protokolu takip etmenin önemli olduğunu unutmamak gerekir.Kas lifi tipi veya transgenin gelişimi sonrası ekspresyonu gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla kas biyopsileri gibi diğer yöntemler uygulanabilir. Bu teknik, kas fizyolojisi alanındaki araştırmacıların, musküler distrofili köpeklerde egzersize verilen yanıtları keşfetmelerinin önünü açmıştır. Bu videoyu izledikten sonra, köpeklerde invaziv olmayan bir kas fizyolojisi analizinin nasıl gerçekleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

İzole İskelet Kası Myo-mekanik Analizi

Bir In vivo</emDaralma indüklenen Sakatlık ve Kurtarma Non-invaziv İzleme> Kemirgen Model

Biz doğrudan kas kuvveti, kas gücü, kasılma kinetiği ve izole iskelet kaslarında yorulma ölçmek için bir yöntem...

İzole İskelet Kaslar Kasılma, çabuk yorulma ve Alternans Ex Vivo Değerlendirilmesi

Ekstremite kas kasılma ve pasif mekanik özelliklerinde değişimler kas hastalıkları için önemli belirteçler vardır. Bu yazıda murin ekstansör digitorum longus ve tibialis anterior kaslar bu özellikleri ölçmek için fizyolojik testler anlatılmaktadır.

Ekstansör digitorum longus kas ve kas Fonksiyonunun Değerlendirilmesi<em&gt; Ex vivo</em&gt; Ve tibialis anterior kas<em&gt; Yerinde</em&gt; Farelerde

Ekson atlama şu anda Duchenne kas distrofi (DMD) için en umut verici bir tedavi seçeneğidir. DMD hastalarında için uygulanabilirlik genişletmek için ve sonuçta elde edilen kesilmiş distrofin protein stabilitesi / fonksiyonu optimize etmek için, kokteyl antisens oligonükleotidler kullanılarak bir yaklaşım atlama çok ekson geliştirilmiş ve bir köpek modelinde sistemik distrofin kurtarma gösterilmiştir.

Köpek X-bağlantılı Musküler Distrofi Kokteyl Antisens oligonükleotidleri kullanılarak atlanıyor Çok ekson

Peroneal sinirin uyarılmasını ve sıçan arka ayağının anterior krural kompartmanının kasılmasını takiben ayağın dorsifleksiyonunu ölçmek için bir in vivo protokol tarif ediyoruz. Bu tür ölçümler, iskelet kası patolojisini ve kas onarımı ve rejenerasyonuna yönelik doku mühendisliği yaklaşımlarını değerlendirmek için vazgeçilmez bir translasyonel araçtır.

Uygulamaları<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku değerlendirilmesi için Rat Tibialis Anterior Fonksiyonel Test İskelet Kası Onarım Engineered

Ölçüm kemirgen iskelet kası contractile işlevinin hastalık ilerleme ve terapötik müdahale etkinliğini izlemek için kullanılan yararlı bir araçtır. Burada zaman içinde aynı fare tekrarlanan dorsiflexor kasları non-invaziv, vivo içinde değerlendirilmesi açıklayın.

Non-invaziv Dorsiflexor kas fonksiyonu farelerde değerlendirilmesi

Diz ekstensor maksimal gücünün ölçülmesi yaşlanma, hastalık, yaralanma ve rehabilitasyona fonksiyonel adaptasyonları anlamak için zorunludur. In vivo diz uzatma izometrik tepe tetanik tork tekrar tekrar ölçmek için yeni bir yöntem sunuyoruz.

Farelerde Diz Ekstensör Kas fonksiyonunun in vivo ölçümü

Bu protokol, anestezi uygulanan domuzlarda ortak peroneal sinirin elektriksel stimülasyonu yoluyla elde edilen in vivo tork verilerinin değerlendirilmesi ve yorumlanması ile ilgili kısa deneysel ayrıntıları açıklamaktadır.

İn Vivo Domuzdan Hindlimb Dorsiflexor İzometrik Tork Ölçümü

Bu makalede, kemirgen gastroknemius kası üzerinde in vivo (yüzey ve iğne elektrot dizileri kullanılarak) ve ex vivo (dielektrik hücre kullanılarak) elektriksel empedans miyografisinin nasıl yapılacağı açıklanmaktadır. Hem farelerde hem de sıçanlarda tekniği gösterecek ve mevcut modifikasyonları detaylandıracak (yani, obez hayvanlar, yavrular).

Kemirgenlerde In Vivo ve Ex Vivo Elektriksel Empedans Miyografisi Gerçekleştirme

Hacimsel kas kaybı (VML) yaralanmaları endojen rejeneratif yeteneği aşarak kalıcı fonksiyonel eksikliklere neden olur. Mevcut VML araştırması öncelikle uzuv ve gövde kaslarına odaklanmaktadır. VML'nin mekanik çalışmalarını kraniyofasiyal kaslara genişletmek için, bu makale, VML hasarı öncesi ve sonrası masseter kas fonksiyonunun uzunlamasına değerlendirilmesi için in vivo bir yöntemi açıklamaktadır.

Hacimsel Kas Kaybı (VML) Yaralanmasının Cerrahi Olarak Oluşturulmasını Takiben Sıçan Masseter Kasının İn vivo Fonksiyonel Değerlendirmesi

Öğrenin, köpeklerde arka bacak kaslarının mekanik özelliklerini invaziv olmayan yöntemlerle ölçme ve karakterize etme tekniğini. Bu yöntem, kas fizyolojisi ve veteriner tıbbında tekrarlanabilir değerlendirmeler sağlar.

Vivo Köpek Kas Fonksiyon Testi

Daha fazla video keşfet