26 Haziran 2011
Bilim yerli ve minyatür domuz kullanımı son yıllarda önemli ölçüde artmıştır. Entübasyon, transüretral mesane kateterizasyonu, femoral arter ve ven kateterizasyon, yanı sıra transcardial perfüzyon nasıl gerçekleştirileceğinin ortaya koyarak, biyomedikal araştırma Göttingen minipigs değerini daha da artırmayı hedefliyoruz.
Endotrakeal entübasyon, bir mini domuz ameliyatı kolaylaştırmak için genel anestezi aldığında yapılmalıdır, çünkü patentli bir hava yolunu korur, destekli ventilasyona izin verir ve hava yollarını aspirattan korur. Mini domuzlar çeşitli pozisyonlardan entübe edilebilir, ancak hayvanın sırtında olması, yardımlı ventilasyonun yanı sıra hava yolunu benzer şekilde sunduğu için düzenli olarak insan entübasyonu yapanlar için daha kolay olma eğilimindedir. Endotrakeal entübasyon için gerekli ekipman, ağzı açmak için askılar, künt uçlu düşük basınçlı emme, 17 ila 25 santimetre uzunluğunda düz bıçaklı veteriner laringoskopu, hava stetoskopu ve yapışkan bantlı şırıngadır.
Yetişkin bağırsakları ve mini domuzlar için. Beş ila yedi milimetre boyutunda bir endotrakeal tüp uygundur. Bu videoda 5,5 milimetrelik bir tüp kullanıldı.
Mini domuz sırt üstü yatırılır ve uygun şekilde desteklenir. Gırtlak pasajının düz tutulmasını sağlamak için, dil hafifçe dışarı çekilir ve çene bir asistan tarafından açık tutulur. Kafayı aşırı uzatmadan, hava yollarının rotasyonu veya başın aşırı uzaması hava yollarını tıkayabilir ve bu da gırtlak açıklığının tanımlanmasını zorlaştırabilir.
Laringoskop dili bastırmak için kullanılır ve emme ucu epiglotu yumuşak damaktan çıkarmak için kullanılır. Laringoskopun ucu daha sonra epiglotu dilin tabanına doğru yukarı doğru bastırmak için kullanılır ve gırtlak açıklığı ortaya çıkarır. Retinoidlerin açılması, kıkırdaklar ve ses telleri görünür hale gelir ve endotrakeal tüp, trakeaya hafif bir dönüş ile hafifçe ilerletilir.
Son kullanma sırasında, tüp manşeti üreticinin özelliklerine göre şişirilir. Hava yollarının şişmesine ve ödemine neden olabilecek aşırı şişirmeyi önlemeye özen gösterirken, domuzların sağ kraniyal pulmon lobunu havalandırmak için bir bronşları vardır. Bu nedenle tüpü trakeal bifurkasyonun üzerine yerleştirmek önemlidir.
Bu, doğru tüp boyutu kullanılarak ve tüpün proksimal ucunun yapışkan bant kullanılarak burun hizasında sabitlenmesiyle kolaylaştırılır. Mini domuz uygun şekilde entübe edildiğinde, tüpten serbest bir hava geçişi hissedilmeli ve göğüs oskültasyonu, göğüs kafesinin hem sol hem de sağ tarafındaki solunum seslerini ortaya çıkarmalıdır. Monitörizasyon sistemli ventilatör mini pige bağlandıktan sonra fizyolojik ekspiratuar, karbondioksit değerleri ölçülebilir olmalı ve ventilatör ayarlarının karar verdiği solunum paternini takip eden karbondioksit eğrisi gözlenebilmelidir.
Mini domuzların endotrakeal entübasyonu zor olabilir, çünkü gırtlak geçidi dardır ve ses telinin mukus zarı kolayca travmatize edilir. Çok büyük bir tüp veya çok fazla kuvvet kullanılıyorsa, Ksilokain spreyi veya kas gevşetici kullanımı tüpün yerleştirilmesini kolaylaştırabilir. Ancak nöromüsküler blokerlerin kullanımı sadece bu tür prosedürlerde iyi eğitimli personel tarafından yapılmalıdır.
Mesane kateterizasyonu, idrar üretimini izlemenin bir yolu olarak kullanılabilir, bu da uzun cerrahi prosedürler sırasında hidrasyon durumunun yanı sıra böbrek ve kardiyovasküler fonksiyon hakkında yararlı bilgiler sağlayabilir. İdrar kesesinin üretra yoluyla kateterizasyonu dişi domuzlarda kolayca yapılır. Bu prosedür son derece zor, belki de erkeklerde yetişkin mini domuzlar için imkansız olsa da, dış üretralin eğriliği ve boyutu nedeniyle Fransız sekiz veya 10 numara bir Foley kateteri uygundur.
Stile ile bir kateter açılması tercih edilir. Gerekli ekipman spekulum künt uçlu forseps, tuzlu su kayganlaştırıcı içeren bir şırınga ve kapalı sistem idrar boşaltma torbası içerir. Kateterizasyon sırasında dış üretra deliğinin en iyi şekilde görüntülenmesi için mini domuz, bel bölgesinin altındaki destekle birlikte sırt üstü yatırılır.
Bir asistan arka bacak kranını çekerken, kadın dış üretral açıklık vajinanın tabanında, rahim ağzına olan mesafenin yaklaşık üçte biri ila yarısı arasında bulunur. Bununla birlikte, hayvan sırt üstü yerleştirildiğinden, üretral açıklığın konumu ters çevrilmiş gibi görünecektir. Kateter künt uçlu forseps ile kontrol edilir, bu nedenle kateterin ucu forsepsin devamı niteliğindedir.
Kateteri üretral açıklığa dikkatlice yerleştirin. Kateterizasyon sırasında çok fazla kuvvet kullanılırsa üretra kolayca travmatize olur, ancak kateter dış üriner sfinkteri geçene kadar başlangıçta hafif bir direnç hissedilebilir. Bu sorun devam ederse, bu, hayvanın yeterince derinlemesine sakinleştirilmediğini gösterebilir.
Çözüm, bir süre beklemek ve anestezinin etkisini göstermesine izin vermektir. Kateter mesaneye ulaştığında, stili çıkarın ve idrarın aktığı görülecektir. Balonu üreticinin özelliklerine göre salinle şişirin ve balon mesane boynuna takılana kadar kateteri yavaşça dışarı çekin.
Kapalı sistem idrar drenaj torbasını takın, kateterin yanlışlıkla yer değiştirmesini önlemek için kateteri kuyruğa bantlayın. Hayvanı uygun eğitim ve deneyimle ele alırken, transüretral mesane kateterizasyonu çok az zorlukla yapılabilir. Bu minimal invaziv prosedür, hassas tıbbi teknik ekipmanın kontaminasyonunu ve ağrılı mesane ekstansiyonunu önleyebilir, bu da hayvana zarar verebilir ve artan vagal tonus ve değişen fizyolojik parametreler nedeniyle deneyi etkileyebilir.
Arteriyel ve venöz kateterizasyon, tekrarlanan kan örnekleri elde etmek ve çeşitli fizyolojik parametreleri izlemek için yararlıdır. Sağkalım çalışmalarında damar kateterizasyonu yapılırken, enfeksiyonları önlemek için sıkı aseptik teknik kullanılmalıdır. Gerekli ekipmanlar arasında neşter, künt uç, cerrahi makas, doku forsepsleri, küçük künt uç, cerrahi forseps, küçük kendini tutan doku ekartörleri, iğne tutucu cerrahi takaslar, kateter açıklığını korumak için yıkama sıvısı olarak iğne heparinize salin ile sütür bulunur.
İki adet 18 gauge IV kanül, iki adet dört Fransız parlak uçlu kılıf, introdüser ve seldinger G telli. Anestezi derinliği, interdigital ağrı refleksi test edilerek değerlendirilir. Femoral arter ve toplardamar, mini domuz sırt üstü yatırılarak ve arka bacak yanal olarak geri çekilerek yaklaşılır.
Medial safen arterin yüzeysel kısmının nabzının kaybolduğu gracilis ve sartorian kas arasındaki deri kıvrımını tanımlayın. Bu noktaya kadar uzunlamasına yüzeysel bir cilt insizyonu yapın, böylece medial safen damarlarına yanlışlıkla zarar vermekten kaçının. Altta yatan deri altı dokusunu incelemek için künt uçlu bir makas kullanın.
Sartorius ve gracilis kasının fasya bölümü, medial safen damarlarının penetrasyon bölgesine kraniyal olarak bölünmüştür. Önce küçük bir künt uç, cerrahi forseps ile daha sonra dijital olarak küçük bir kendinden tutucu doku ekartörü ile iki kas grubu ayrılırken, femoral sinir ve damarlara zarar vermemeye özen gösterilerek atardamar yaklaşık bir ila iki santimetre uzunluğunda izole edilir. Künt diseksiyon kullanarak, eğimli ven flon iğnesini lümen yukarı bakacak şekilde döndürün.
İğneyi biraz bükün, böylece damar eğriliğini daha kolay takip edecektir. İğnenin hala ileri geri hareket edip edemediğini test etmeyi unutmayın. Arter delinir.
İğne geri çekilir ve seldinger kılavuz teli havalandırma borusundan sokulur. G telinin sabitlenmesini sağlamak için artere hafifçe baskı uygularken ven flon tüpünü çıkarın. Tanıtıcılı kılıf, tuzlu telin üzerine yerleştirilir ve istenen konuma ilerletilir, ardından tanıtıcı ve ayırıcı veya tel çıkarılır.
Femoral ven, arterin hemen altında ve medialinde bulunur. Künt diseksiyon kullanılarak damar izole edildikten sonra, damar daha önce arter için tarif edildiği gibi kanüle edilir. Hem arterin hem de venin doğru şekilde kateterize edildiğini doğrulamak için her iki kılıftan kan alın ve numunelerin rengini karşılaştırın.
Bir kan örneği alırken, daha sonra kateterleri heparinize salin ile yıkamayı unutmayın. Kateter açıklığını korumak için kateterler sabitlenir ve cilt kapatılır. Birkaç dikişle, delinmeden önce damarları sabitlemek için arter ve ven etrafına bir damar halkası yerleştirilebilir.
Avantajlarına rağmen, genellikle bu ek adımdan kaçınırız çünkü damarların aşırı diseksiyonunu gerektirir ve yan ve derin dallara zarar verme riskini artırır. Mevcut görüntüler femoral damarların nasıl kateterize edileceğini göstermektedir. Femoral damarların kateterizasyonu, erişim kolaylığı için boyun damarlarının kateterizasyonuna tercih edilir.
Çerçeve tabanlı stereotaksik nöroşirürji ve beyin görüntülemeyi içeren deneyler yapılırken, trans kardiyal perfüzyon en etkili fiksasyon yöntemidir ve üstün sonuçlar verir. Mini domuz organlarını histoloji ve histokimya için hazırlarken, prosedür için aşağıdaki ekipmanlara ihtiyaç vardır. Perfüzyon sistemi ile ilgili füzyon sıvıları, IV kanül şırıngası, pentobarbital neşter, künt uç, cerrahi makas, kemik makası ve en az biri kavisli uca sahip iki büyük kendinden tutucu forseps.
Kendiliğinden tutucu bir sternal ekartör mutlaka gerekli değildir, ancak prosedürü önemli ölçüde kolaylaştırır. Trans kardiyal perfüzyon, yüksek güçlü bir duman emme sistemi ve daha sonra güvenli bir şekilde bertaraf edilmek üzere bol miktarda sekiz sıvı ve kan toplanmasına izin veren tesislere sahip iyi havalandırılan bir odada yapılmalıdır. Ölümcül bir dozda Penta Barbital enjekte ettikten sonra, interdigital ağrı refleksini test edin.
Kalbe ve aorta en iyi erişim median sternotomi ile sağlanır. Manubriumdan sternumun ksifoid sürecine uzanan derin bir uzunlamasına cilt kesisi yapın. Ksifoid işleminin hemen altındaki diyaframda küçük bir kesi yaparak göğüs boşluğuna erişim sağlayın.
Kemik makaslarını göğüs boşluğuna yerleştirin ve ikiye bölün Bu işlemi gerçekleştirirken sternuma özen gösterilmelidir çünkü kalp, sternumun iç kısmına bir yerde yapışık olabilir. Sternum bölündükten sonra, kendini tutan sternal ekartöre yerleştirin ve hala sağlamsa göğüs boşluğunu açın, kalbin tepesindeki perikardda küçük bir kesi yapın ve ardından perikardiyal torbayı dijital olarak açın. Sol ventrikülü, sağ oracle'ı ve aortu tanımlayın.
Superior kaval ven ile birlikte, kalbin tepesine yakın küçük bir yüzeysel kesi yapın ve miyokardiyumu künt uçlu bir aletle delerek sol ventriküle erişin. Perfüzyon kanülünü sol ventrikülün içine yerleştirin ve kanül ucu kranını aort içine hareket ettirin. Aortta ikinci ve üçüncü parmak arasında kanül hissedildiğinde, kanülü yerine sıkıştırın.
Kendinden tutan kavisli forseps ile sağ oracle'a bir kesi yapın ve sabitleyiciyi perfüzyon kanülünden enjekte etmeye başlayın. Aorttaki bol sekizli akış hissedilebilir ve Perfuse sekizli mini domuz damarlarına akışı devam ederken, kesilen sağ oracle'dan kan dökülecektir. Para formaldehit ile sistemik bolluğun, sinirlerin ve kasların aldehit çapraz bağlanması nedeniyle uzuvların hiperekstansiyonunu ve yüzeysel kas sisteminin seğirmesini nasıl indüklediğine dikkat edin.
Basınçlı hava ile çalışan bir perfüzyon sistemi kullanırken, havanın vasküler sisteme girmesini önlemek için kanülü çıkardığınızdan veya teneke kutu boşalmadan önce şeffaf silikon tüpü sıkıştırdığınızdan emin olun. Bu videoda, yerçekimi yerine basınçlı hava ile çalışan bir perfüzyon sistemi kullanıyoruz. Basınçlı hava kullanan sistemlerin avantajı, uygulanan hidrostatik basıncın işlem sırasında sabit olması ve sonuçta en iyi organ bolluğunu sağlamasıdır.
Bu makale, intübasyon ve kateterizasyon gibi temel prosedürlere odaklanarak, biyomedikal araştırmalarda Göttingen minipiglerinin artan kullanımını ele almaktadır. Çalışmanın amacı, bilimsel araştırmalarda bu tekniklerin anlaşılmasını ve uygulanmasını geliştirmektir.
Göttingen minipiglerdeki cerrahi teknikler, translasyonel araştırmalar için temel teşkil eden fizyolojik izlemeyi ve doku korumasını mümkün kılarak preklinik modellemeyi destekler. Bu prosedürler, prosedürel değişkenliği azaltarak ve hayvan refahını iyileştirerek nörobilim, metabolizma ve kardiyovasküler fonksiyon çalışmalarındaki veri kalitesini artırır. Entübasyon, kateterizasyon ve perfüzyon yöntemlerinde uzmanlaşmak, preklinik güvenilirliği güçlendirir ve erken keşif süreçlerindeki karar aşamalarını destekler.
Bu teknikler, erken fizyoloji taramasından preklinik doğrulamaya kadar olan keşif iş akışlarına entegre edilerek, hedef doğrulaması ve öncü bileşik optimizasyonu aşamalarında iteratif tasarımları destekler.