2 Temmuz 2011
Fopius arisanus Tephritid meyve sinekleri bu önemli tropikal zararlıları biyolojik kontrol başarıyla kullanılan bir yumurta larva parazitoit. Biz burada F. yetiştirme için optimize edilmiş bir protokol tarif hazır malzemeler kullanılarak küçük bir ölçekte arisanus.
FOIA Aus, tropikal bölgelerde ve özellikle burada, Hawaii'de ciddi ekonomik zararlılar olan meyve sineklerine saldırdığı için Hawaii'de önemli bir biyolojik kontrol ajanıdır. FOIA Aus'un avantajı, zararlı böceğin yumurta evresine saldırması ve böylece böceği erken bir aşamada kontrol altına almasıdır. Aşağıdaki kliplerde, FOIA Aus'u laboratuvar ortamında nasıl yetiştirdiğimize dair yakın çekimler görebileceksiniz.
Bu programın sonunda, bu özel parazitoidin Fransız Polinezyası'nda başarılı bir salım programında nasıl kullanıldığına dair bazı tartışmalar göreceksiniz. Protokolümüze, konuk meyve sineği yumurtalarına ovoposizyon yapmaya hazır olan yetişkin parazitlerle başlayacağız. İlk adım, meyve sineği yumurtalarını parazite sunulmak üzere hazırlamaktır.
Ardından, meyve sineği larvalarının yumurtadan çıkmasına, gelişmesine ve pupa evresine geçmesine izin verilir. Meyve sinekleri pupa evresine ulaştığında, parazitleri zenginleştirmek için boyutlarına göre ayrıştırılırlar. Son olarak, parazitler dışarı çıkar ve olgunlaşana kadar muhafaza edilirler.
Ardından buluşurlar ve yeni bir meyve grubuna yumurta bırakmaya hazır hale gelirler. Sinek yumurtaları. Bu, döngüyü tamamlar.
Kenar uzunluğu yaklaşık 10 santimetre olan agar blokları hazırlayarak meyve sineği yumurtaları için A substratı hazırlayın. Agar, litre başına dokuz gram agar tozu konsantrasyonunda hazırlanır.
Düz bir yüzey kullanarak, kapları kenarlarına kadar sıvı auger ile doldurun ve en az 45 dakika boyunca katılaşmaya bırakın. Auger blokları katılaştıktan sonra, her bir auger bloğunun üst kısmını kaplayacak şekilde tek bir kat kağıt havlu yerleştirin. Yüzey nemi nedeniyle havlu, auger'a kolayca yapışacaktır.
İkinci kez yuvarlama işlemi gerçekleştirilir. Meyve sineği yumurtaları, auger bloklarının doku kaplı yüzeylerine uygulanır. Süspansiyon halindeki 0,5 milliliter meyve sineği yumurtası, blok başına yaklaşık 6.000 yumurta sağlar.
Doku yüzeyine meyve sineği yumurtalarını eşit şekilde yaymak için suya batırılmış 2,5 santimetre genişliğinde bir boya fırçası kullanılır. Meyve sineği yumurtaları, parazitlerin üzerine yerleşmesine izin vermek için parazit kafeslerinin alt teline yerleştirilir; telin alt kısmına hafifçe vurmak, meyve sineği yumurtalarının önünü kapatabilecek ölü parazitleri temizler. Sineği yumurtaları, parazitlerin gece boyunca üzerine yerleşmesini sağlar.
Meyve sineği yumurtalarının yüksek bir yüzdesinin parazitlenmesi için yaklaşık 21 saat yeterlidir. Daha uzun süreli maruziyet, süper parazitlenme riskini artırır. Parazit maruziyeti sonrası yumurtaların yetiştirilmesi için gerekli olan temel bileşenler meyve sineği larval diyeti, larval diyet kapları ve pupa kaplarıdır.
Parazitlenmiş yumurtalar içeren üç ila üç buçuk adet hazırlanmış burgu bloğu, 1,25 L meyve sineği larva besiyerinin üzerine yerleştirin. Yumurtaları içeren besiyeri kabını bir yükselticiye ve pupa kabını 1,5 cm derinliğindeki ince taneli vermikülit veya yıkanmış kum tabakasının üzerine yerleştirin.
Pupasyon kabının kenarlarını maskeleme bandı ile bantlayın. Larvaların dışarı çıkıp aşağıdaki vermikülitin içine düşebilmeleri için diyet kabının üst kısmı ile pupasyon kabı kapağı arasında yeterli boşluk olduğundan emin olun. Pupasyon kaplarını bir hafta boyunca 27 °C sıcaklıkta ve %80 bağıl nemdeki bir odaya taşıyın.
Bir hafta sonraki ilk dört gün boyunca kapların üzerini ağır bir bezle örtün. Pupasyon kaplarını açın ve larva besiyerini çıkarın. foia Airis yetiştirmek için konak meyve sineği olarak Bre Dorsals kullanıyoruz.
Asfa ve sitis cinslerindeki diğer türler de potansiyel konakçılardır. Vermikülit içerisinde pupa olmamış larvalar varsa, bir gece boyunca pupa olmalarına izin verin ve ardından eleyin. Vermikülitteki pupaları toplamak için önce iri gözenekli bir elek ve geniş bir kap kullanın.
Ardından, vermikülit içinde kalan tüm topakları temizlemek için bir el eleği kullanın. Opia'lar, parazitleşmemiş meyve sineklerinden kısmen ayrıştırılabilir. Önceki araştırmalara dayanarak, yalnızca çapı 1,65 ve 2,26 milimetre arasında olan aria'ları topluyoruz; daha küçük olanlar çoğunlukla yetersiz boyutlu parazitoidler içerir.
Daha büyük arealar çoğunlukla sinekler içerir. Pupaları boyutlarına göre ayırmak için çeşitli yöntemler kullanılabilir. Toplanan parazitlenmiş arealar için özel boyutlu bir ayırıcı kullanan mekanik bir yöntemi açıklayacağız.
Dişilerin yüzdesi boyutla birlikte artar; puy'ları mekanik boyut ayırıcının üst kısmındaki huniye yerleştirin. Bir titreşimli besleyici, bunları 30 derecelik açıyla, hafifçe birbirinden ayrılan bir çift yuvarlanma çubuğunun üst kısmına taşır. Aria, huniler aracılığıyla 10 ayrı kaba boşaltılan bir dizi yuvaya tek tek düşer.
Pupaları, çoğu sinek parazitlenmiş pupalardan çıkana kadar yedi gün daha, 1,65 millimeters ile 2,26 millimeters boyut aralığında bir çıkış kafesine yerleştirin. Ardından, boş pupa kabuklarını hâlâ canlı parazitoitler içerenlerden ayırmak için bir fan kullanın. Opia Aus kolonisini sürdürmek için, her bir kenarı yaklaşık 25 centimeters uzunluğunda, çıkarılabilir cam ön panelli bir parazit tutma kafesi kullanın.
Kafesin üstünde ve iki yanında bir kare milimetrelik bir elek bulunmaktadır. Kafesin arkası, erişim için dokuz santimetrelik bir deliği olan bir kauçuk levha ile kaplıdır. Kafesin tabanında, iç kısmı bir ila iki kare milimetrelik bir elekle kaplı bir kesik yer alır.
Meyveli iki adet ağız bloğu ile parazit konumlandırması için sinek yumurtalarının yerleştirilmesine olanak tanıyacak kadar büyüktür. Tutma kafeslerinin cam ön yüzünün alt çeyreği boyunca, parazitlerin kafesin ön kısmında kümelenmesini en aza indirmek için renkli bir bölüme sahip olması gerekir. Seçilen agardan yaklaşık 11 gramı, yaklaşık dokuz santimetre çapındaki plastik kaplara yerleştirin.
Bu işlem, kafes başına yaklaşık 600 ila 700 parazit üretmelidir. Boyut seçimi yaklaşık %60 dişi ile sonuçlanmalıdır. Kaplara elekli kapaklar takın. Kapaklar, çıkış sonrası meyve sineklerinin kaplardan ayrılmasına izin veren ancak geriye kalan meyve sineklerini içeride tutacak iki milimetrekarelik bir elek ile kaplanmalıdır.
Parazitleri 24 °C sıcaklıkta, yaklaşık %45 bağıl nemde, 12:12 fotoperiyodunda ve iyi havalandırma ile muhafaza edin; kafeslerin üst kısmına haftada en az üç kez santrifüjle ayrıştırılmış bal şeritleri sürün. Alternatif olarak, mevcut bal kuruduğunda, ayrıştırılmış balı bir parmak ucuyla dar şeritler halinde uygulayın. Şeritler çok yoğun olursa balın kafesin içine damlayacağını unutmayın. Şeritler çok ince olursa bal hızla kuruyacak ve sık uygulama gerektirecektir. Parazitlere nem sağlamak amacıyla kafeslerin üstüne 10 cm kare ve 4 cm derinliğindeki agar bloklarını yerleştirin.
Bu bloklar haftada iki kez değiştirilmelidir. 2001 yılında, Oriental meyve sineğinin o dönemde tüm tropikal meyvelerde inanılmaz düzeyde istilaya yol açması nedeniyle, durumu iyileştirmeye yardımcı olmak amacıyla Fransız Polinezyası'na biyolojik kontroller getirip getiremeyeceğimizi görmek için küçük bir başlangıç hibe desteği aldık. Buradaki Hawaii laboratuvarından 10 sevkiyat gerçekleştirdik.
Bu sevkiyatların her biri genellikle yaklaşık yüz bin *Fopius arisanus*'a tekabül ediyordu; aslında sayı bundan oldukça fazlaydı, ancak biz oryantal meyve sineği pupalarını içindeki parazitoidle birlikte gönderiyor, ardından onları çıkartıyorduk. Tahiti'de küçük bir laboratuvar kurduk ve bunları burada teslim alıp *Fopius arisanus*'ların çıkışını sağlıyorduk. Böylece, yaklaşık bir yıllık bir süre zarfında, bir milyona yakın *Fopius arisanus* saldık.
Genel olarak bu, Hawaii dışındaki en başarılı uygulamadır. FOIA Aus başlangıçta Hawaii'de piyasaya sürüldüğünde, tüm Pasifik boyunca meyve sineklerinin biyolojik kontrolünün en iyi örneği olmuştur. Son 10 yılda, dünya genelinde Bactrocera dorsalis kompleksinin muazzam bir yayılımı gerçekleşmiştir.
Böylece Bactrocera Carbo Güney Amerika'ya, Surinam'a yayıldı ve şu an Kuzey Brezilya'da bulunuyor. Ardından, Afrika genelinde yayılan ve her türlü yıkıma neden olan Bactrocera Inance adlı başka bir tür ortaya çıktı. Ayrıca, Bactrocera papaya'nın da yayılımı gerçekleşti.
Dolayısıyla bu başarı, şimdi bu FOIA Aus'ların Güney Amerika, Afrika ve Asya'nın diğer bölgelerinde yaygınlaştırılması için fırsatlar sunuyor.
Fopius arisanus, tropikal bölgelerde önemli tarımsal zararlılar olan Tephritid meyve sineklerinin yumurta-larva evrelerini hedef alan bir parazitoid yaban arısıdır. Bu makale, erişilebilir malzemeler kullanarak F. arisanus'un küçük ölçekte yetiştirilmesi için optimize edilmiş bir protokol sunmaktadır.
Fopius arisanus gibi parazitoid yaban arılarının güvenilir laboratuvar kolonilerinin kurulması, ekonomik olarak zarar veren Tephritid meyve sineklerine karşı biyolojik mücadele programlarının geliştirilmesi açısından kritik öneme sahiptir. Optimize edilmiş yetiştirme protokolleri, zararlı yönetimi stratejilerinin mekanistik risk azaltımı için biyolojik ajanların tutarlı üretimini sağlayarak, hedef doğrulamadaki öngörü güvenilirliğini artırır. Bu durum, tarımsal biyoteknoloji süreçlerinde keşif aşamasından preklinik değerlendirmeye kadar olan translasyonel sürekliliği destekler.
Yetiştirme yöntemi, erken aşama keşif sürecinde hipotez testlerini destekleyerek, standartlaştırılmış parazitoid üretimi yoluyla analiz geliştirmeyi mümkün kılarak ve konakçı yelpazesi doğrulaması aracılığıyla translasyonel araştırmalara bilgi sağlayarak keşif sürekliliğine entegre olmaktadır.