Name: Alzheimer Hastalığı Model Fareler Öğrenme ve Hafıza Açıkları Morris Su Labirent Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Öğrenin, farelerde hipokampal bağımlı öğrenme ve hafızayı değerlendirmek için Morris Su Labirenti yöntemini. Bu teknik, nörobiyoloji ve nörofarmakoloji araştırmalarında bilişsel bozuklukları incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Kanada Sağlık Araştırma Enstitüsü (CIHR) Townsend, Aile, ve Jack Brown ve Aile Alzheimer Araştırma Vakfı (WAS) tarafından desteklenmiştir. WS Kanada Araştırma Başkanı Alzheimer Hastalığı sahibi. PL NSERC Alexander Graham Bell Kanada Yüksek Lisans Bursu Doktora Sonrası Araştırma Ödülü ve Sağlık Araştırmaları Kıdemli Yüksek Lisans Bursu için Michael Smith Vakfı tarafından desteklenmiştir.

1. Hazırlık <ol><li> Ekipman hazırlık <ol><li> , 150cm çapında ve derinliği 50cm (Şekil 1) dairesel bir havuz alın. Eğer siyah fareler kullanarak, beyaz bir havuzu kullanılabilir; beyaz fareler kullanıyorsanız, siyah bir havuz kullanılmalıdır. </li><li> Test sırasında test edilen hayvan deneyi göremiyorum böyle oda düzenleyin. Bu perdeler ya da oda bölücüler ile yapılabilir. </li><li> Ve / veya bir yerde havuz su yüzeyinin üzerinde olacağını iç oda ile ilgili yüksek kontrast uzaysal işaretler yerleştirin. </li><li> Beyaz - beyaz bir havuzu, açık siyah bir havuzu için pleksiglas için havuzda bir 10cm çaplı bir platform yerleştirin. Havuz platform su yüzeyi üzerinde 1cm kadar su ile doldurun. Su, oda sıcaklığında (22 ° C) dengeye alalım. Su sıcaklığına bağlı olarak 1-3 gün sürebilir, ya da alternatif dengeleme hızlandırmak için sıcak su eklenebilir. </li></ol></li><li> Yazılım hazırlık <ol><li> Kamera piksel tabanlı bilgi, fiziksel mesafe bilgilerini oluşturmak, böylece bilgisayar yazılımı havuzu kalibre edin. 4 parçaya bölünür havuz bölün. Değişken bir bölge olarak her deneme ile değiştirebilirsiniz platform dilimi belirleyin. Her kadranda bir ve bir havuzun merkezi - 5 platformu subzones oluşturun. Kalibrasyon kaydedin ve kalan test gün boyunca kullanabilirsiniz. (Örneğin Şekil 2). </li><li> Maksimum 60 saniye kadar kısa bir deneme süresi ayarlayın. Fare, bu sefer daha önce platform bulursa, yazılım platformu bulundu yargılamayı durdurmak için program. </li><li> Otomatik izleme başlamak için program, deneyci çıkar test alanına belirtin. Yazılım paketi sağlayan herhangi bir "yansıma minimizasyonu" seçenekleri yararlanın. </li><li> Her kadranda harcanan yol uzunluğu, kaçış gecikme, ve zaman izleyin. </li></ol></li></ol> 2. 1. Gün: Görünür Platformu <ol><li> Bilgisayar programı <ol><li> Izleme yazılımı içine havuz kalibrasyon yükleyin. </li><li> Denemeniz için uygun bir yargılama arası aralığı ile, 5 çalışmalarda oluşturun. Platform konumu ve yönünü her deneme ile farklı başlangıç ​​Programı. Örneğin bir protokol için Tablo 1'e bakınız. </li></ol></li><li> Prosedürü Test <ol><li> Fareler, konut tesis davranış odasına aktarın. Fareler havuz veya uzaysal işaretlerin göremez bir alanda tutun. Onları test etmeden önce en az 30 dakika için yeni ortama uyum olsun. </li><li> Görünürlüğünü artırmak için platform üzerinde bir bayrak yerleştirin. </li><li> Teste başlamak için, kuyruk tabanı ile ev kafes fare kaldırın. Test alanına getirmek olarak fare desteği. Kuyruk baz fare Kaldırma, yavaşça havuzun kenarına bakan, suyun içine fare yerleştirin. Test alanına hızla bırakın. </li><li> Fare 60 sn önce platform bulursa sonra cut-off, fare, 5 saniye süreyle platform üzerinde kalmak için izin ev kafesine geri. Fare platformu bulamazsa, platform üzerinde fare yeri ve ev kafes dönmeden önce 20 saniye boyunca orada kalmak için izin. </li><li> Iz tüm fareler için tekrarlayın. Yazılım programlanmış gibi, farklı bir platformda yer ve başlangıç ​​yönü ile sonraki her deneme başlayın. </li><li> Test tamamlandığında, fareler, konut tesis dönün. Fare kurutulur ve normotermi hayvan tesis dönmeden önce güvence altına alınmıştır. </li><li> Ertesi gün için hazırlık, platform bayrağı kaldırmak ve yüzey altında 1cm batığın platform havuzuna su eklemeyiniz. </li></ol></li></ol> 3. Gün 2-5: Gizli Platform <ol><li> Bilgisayar programı <ol><li> Izleme yazılımı içine havuz kalibrasyon yükleyin. </li><li> Denemeniz için uygun bir yargılama arası aralığı ile, 5 çalışmalarda oluşturun. Programı platform tüm denemeler ve gün boyunca aynı pozisyonda kalmak için yer, ama başlangıç ​​yön var, her gün, her deneme ile farklı. </li></ol></li><li> Prosedürü Test <ol><li> Siyah fareler için toksik olmayan, beyaz, toz, sıcaklık boya, havuz ekleyin ve iyice karıştırın. Yeterli su yüzeyinden batık platform görünmez olduğunu, boya kullanın. Beyaz fareler için, temiz su ve net bir pleksiglas platformu ile siyah bir havuz kullanılmalıdır. </li><li> 2.2.3 ve 2.2.6 için gerekli adımları izleyin. </li></ol></li></ol> 4. 6. Gün: Probe Deneme <ol><li> Bilgisayar programı <ol><li> Izleme yazılımı içine havuz kalibrasyon yükleyin. </li><li> Hiçbir platform bölge ile 1 deneme, ve bir başlangıç ​​yönde oluşturun. Gün 2-5 kullanılan platform kadranda en uzak başlangıç ​​yönü tercih edilir. Iz uzunluğu 60 saniyeye ayarlayın. </li></ol></li><li> Prosedürü Test <ol><li> Havuz platformu çıkarın. </li><li> 2.2.3 ve 2.2.6 için gerekli adımları izleyin. </li></ol></li></ol> 5. Veri analizi <ol><li> Ve her fare, ortalama her gün için 5 çalışmalarda, her bir test konusu için tek bir yol uzunluğu ve kaçış gecikme vermek için. Uygun şekilde kombine hata hesaplayın. Sadece 6 gün için, her bir fare için platform kadranda harcanan yol uzunluğu, kaçış gecikme ve zaman toplamak. </li><li> Gün 1 gruplar arasında herhangi bir farklılık varsa, büyük olasılıkla, öğrenme ve hafıza daha ziyade vizyon ile ilgili bir sorun. Sadece hiçbir farkları 1 gün görülürse analizi ile devam edin. </li><li> Veri seti için uygun istatistikleri kullanılarak günlük 2-5 öğrenme eğrileri karşılaştırın. A dik eğrisinin hızlı görev kazanıldığını gösteren, sığ bir eğri görev edinimi açığı temsil eder. 2 gün 5 gün elde edilen veriler ANOWA kullanılarak analiz edilmektedir. </li><li> 6 gün için, veri seti için uygun istatistikleri kullanılarak, önceden öğrenilen platformu kadranda harcanan zamanın yüzde karşılaştırın. Platform kadranda harcanan zaman daha yüksek bir yüzdesi daha yüksek bir bellek tutma seviyesi olarak yorumlanır. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar Morris Su Labirent testi AD patogenezinde (7) ve valproik asit (VPA), transgenik AD modeli fareler AD tedavisi (6) 'nin ilaç potansiyeli hipoksi etkisi incelemek için kullanmışlardır. Şekil 3 VPA APP23 AD fare modeli (6) bellek açıkları etkisi bizim çalışmamızda raporlanan temsili bir sonucudur. 1. gün (görünür platformu çalışma), VPA tedavi ve kontrol grupları gecikme (Şekil 3A) ve her iki grup benzer motor ve görsel yetenekleri olduğunu gösteren yol uzunluğu (Şekil 3A) arasında hiçbir fark yoktur. Bu biz farelerin bayraklı platform ve çevresindeki çevre ipuçlarını görmek mümkün ve kabul edilebilir yüzebilirsiniz varsayalım. Gün 2-5 (gizli platform çalışmaların Gün 1 - 4) Örneğin, VPA tedavi edilen farelerde anlamlı olarak kontrollerden daha iyi bir performans gösterdiklerini öne kaçış gecikme (Şekil 3C) ve gruplar arasındaki yol uzunluğu (Şekil 3B) bir farklılık gösterir zamanla. Prob izi, farelerin daha önce gizli bir platform yerleştirildi üçüncü kadranda, içine yolculuk kaç kez, VPA tedavisi ile kontrol (Şekil 3E) göre anlamlı olarak daha fazla olduğunu son gün (Gün 6) gösteri. Bu veriler, VPA tedavisi APP23 farelerde görülen hafıza açıkları önemli ölçüde iyileştirdiğini göstermektedir. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Morris Su Labirent görünür platformu test günü için donatım kurulum havuzu oda bölücüler kullanılarak deneyci korumalıdır. Mekansal ipuçları duvarları üzerinde bulunan ve istenirse, belki su yüzeyi üzerinde, havuzun iç yerleştirilir. Havuz yüzeyinden 1cm bulunan platform, temiz su ile doldurulur. Bir bayrak görünürlüğünü geliştirmek için bir platform üzerine yerleştirilmiştir. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2. Havuz kalibrasyon gösteren herhangi bir-Labirent ™ Video İzleme Sistemi Ekran yakalama havuzu RTV24 Sayısallaştırıcı siyah ve beyaz analog izleme kamera tarafından yukarıdan bakıldığında. Bazı bölgeler yazılım içinde tanımlanmış ve toplam havuzu, 4 kadran ayrılmıştır. KB, KD, GB, GD, veya Merkez: beşinci, platformu bölgesi, beş olası yerleri ile denemeler arasında farklılık gösterebilir girilir. Bir kalibrasyon hattı (merkezi üzerinden işaretlendiyse hat) yazılım fiziksel mesafeleri piksel mesafeler dönüştürmek için izin eklenir. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3. Morris Su Labirent Temsilcisi sonuçlar insan İsveççe mutant APP geni taşıyan 7 ay APP23 transgenik fareler, günlük VPA (n = 30 fare) veya araç çözüm (n = 30 fare) enjeksiyonları bir ay sonra (A) sırasında test edildi . görünür platform testlerin ilk gününde, VPA tedavi ve kontrol APP23 fareler görünür platformu üzerine kaçmak için benzer bir gecikme sergiledi. P&gt; 0.05 öğrencinin t-testi ile (B) VPA ile tedavi edilen ve görünür bir platform testi görünür platformu üzerine kaçan kontrolü APP23 fareler daha önce de benzer yüzme mesafeler vardı . P&gt; 0.05 ile öğrenci t-testi. (C) gizli bir platform testleri VPA APP23 fareler 3 üncü ve 4. gün, P gizli bir platform üzerine ANOVA ile &lt;0.001 kaçmak için bir kısa bir gecikme gösterdi tedavi. (D) VPA ile tedavi edilen APP23 fareler ANOVA ile gizli bir platform üzerine 3. ve 4. gün, P &lt;0.01 kaçan önce yüzme boyunun kısa bir (E) 6. gününde prob çalışmada, VPA ile tedavi edilen APP23 fareler gitti gizli bir platform daha önce yerleştirilmiş olan üçüncü kadranda, kontrollere göre önemli ölçüde daha fazla kez. * P &lt;0.005 öğrencinin t-testi. (J Exp Med DOI yayınlanan Deneysel Tıp 205, 2781-2789, 2008, Rockefeller Üniversitesi Basın, The Journal of Uyarlama ve yeniden basıldı... 10.1084/jem.20081588) (6). <table border="1"><tbody><tr><td> </td><td colspan="2"> 1. Gün </td><td> 2. Gün </td><td> 3. Gün </td><td> 4. Gün </td><td> 5. Gün </td><td> 6. Gün </td></tr><tr><td></td><td> Platform konumu </td><td> Başlangıç ​​Yönü </td><td colspan="4"> Platform Yer: GB Yer başlayarak aşağıdaki gibi: </td><td> Hiçbir platformu. </td></tr><tr><td> Deneme 1 </td><td> GB </td><td> S </td><td> W </td><td> N </td><td> N </td><td> E </td><td> N </td></tr><tr><td> Deneme 2 </td><td> KB </td><td> N </td><td> S </td><td> W </td><td> E </td><td> S </td><td></td></tr><tr><td> Deneme 3 </td><td> KD </td><td> S </td><td> N </td><td> E </td><td> W </td><td> W </td><td></td></tr><tr><td> Deneme 4 </td><td> Merkez </td><td> E </td><td> E </td><td> W </td><td> S </td><td> E </td><td></td></tr><tr><td> Deneme 5 </td><td> GD </td><td> W </td><td> S </td><td> S </td><td> N </td><td> N </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 1. Örnek su labirenti protokolü * * Not başlayan yönünü değiştirir ise platform konumu ve 1 günde yönünü değiştirmek başlayan, her iki gün 2-5 platform konumu sabit kalır, oysa ne kadar. 6 gün, herhangi bir platform ve tek bir dava yoktur. Farelerin daha önce öğrenilen platformu kadranda girmeden önce bazı mesafe seyahat gerekir, böylece 6 gün başlangıç ​​yönü önceki platform konumu (SW) uzak.

<ol><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+localization+does+not+require+the+presence+of+local+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Motivation%22%5BJournal%5D)">Spatial localization does not require the presence of local cues.</a> Learning and Motivation. 12, 239-260 (1981).</li>
<li>O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+hippocampal+place+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A review of the hippocampal place cells.</a> Prog Neurobiol. 13, 419-439 (1979).</li>
<li>Scoville, W. B., Milner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+recent+memory+after+bilateral+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 20, 11-21 (1957).</li>
<li>Eichenbaum, H., Stewart, C., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+representation+in+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal representation in place learning.</a> J Neurosci. 10, 3531-3542 (1990).</li>
<li>Block, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+ischemia+and+behavioural+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Global ischemia and behavioural deficits.</a> Progress in Neurobiology. 58, 279-295 (1999).</li>
<li>Qing, H., He, G., Ly, P. T., Fox, C. J., Staufenbiel, M., Cai, F., Zhang, Z., Wei, S., Sun, X., Chen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valproic+acid+inhibits+Abeta+production%2C+neuritic+plaque+formation%2C+and+behavioral+deficits+in+Alzheimer%27s+disease+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Valproic acid inhibits Abeta production, neuritic plaque formation, and behavioral deficits in Alzheimer's disease mouse models.</a> J Exp Med. 205, 2781-2789 (2008).</li>
<li>Sun, X., He, G., Qing, H., Zhou, W., Dobie, F., Cai, F., Staufenbiel, M., Huang, L. E., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+facilitates+Alzheimer%27s+disease+pathogenesis+by+up-regulating+BACE1+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxia facilitates Alzheimer's disease pathogenesis by up-regulating BACE1 gene expression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , 18727-18732 (2006).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of memory and learning.</a> Int J Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Lipp, H. P., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+and+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice and cognition.</a> Curr Opin Neurobiol. 8, 272-280 (1998).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural Plast. 6, 41-52 (1998).</li>
</ol>

Tüm deneyler, British Columbia Hayvan Bakım ve Kullanım komitesi ve CIHR kurallar Üniversitesi ile uygun olarak yapılmıştır.

Yaş, cinsiyet, tür ve şekil değiştirme farklılıkları MWM performansı (8) etkiler. Çalışmalar erkek kemirgenler dişilere oranla daha iyi performans yaşlı farelerde, MWM kötü performansa sahip olduğunu göstermektedir, ayrıca yüzen sıçan (9, 10) daha farelerde daha belirgindir. Bu nedenle, bu unsurların tüm testler arasında eşit olmalıdır. Kanıtlar da vurguladı hayvanlar MWM (11) daha düşük performans göstermektedir, bu nedenle çevresel faktörler, sıcaklık, ışık, ve gürültü gibi stres, neden olabilir, izlenmeli ve görevi boyunca sabit tutulur olmalıdır.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> AnyMaze video Takip Sistemi </td><td> Stoelting Şirket </td><td></td></tr><tr><td> Sıcaklık Boya </td><td> Reeves ve Poole Gruplar </td><td> Beyaz, toz </td></tr></tbody></table>

alzheimer hastalığı model fareler Öğrenme ve hafıza açıkları morris su labirent testi

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

Morris Su Labirent (MWM) ilk sinirbilimci Richard G. Morris hipokampal-bağımlı öğrenme, mekansal memoryand uzun vadeli uzaysal 1 satın alınması da dahil olmak üzere test etmek amacıyla 1981 yılında kurulmuştur. MWM genellikle altı gün denemeler, mekansal (gizli platform) arasındaki fark olan ana avantajı ve konumsal olmayan (görünür platformu) koşullarına 2-4 oluşan nispeten basit bir işlemdir. Buna ek olarak, MWM test ortamı koku izi girişim 5 azaltır. Bu görev, uzamsal öğrenme ve hafıza nörobiyoloji ve Neuropharmacology çalışma yaygın olarak kullanılan yol açmıştır. MWM kemirgen modelleri doğrulama Alzheimer Hastalığı 6, 7 gibi bilişsel bozukluklar için önemli bir rol oynar. Bu protokolde, Alzheimer hastalığının transgenik modeli farelerde yaygın olarak kullanılan test öğrenme ve bellek ve veri analizi için MWM tipik bir prosedür tartışıldı.

Morris Su Labirent hipokampal-bağımlı öğrenme ve hafıza test etmek için bir davranış iştir. Bu çalışmada, nörobiyoloji, Neuropharmacology ve bilişsel bozukluklar kemirgen modellerinde yaygın olarak kullanılır olmuştur.

Alzheimer Hastalığı Model Fareler Öğrenme ve Hafıza Açıkları Morris Su Labirent Testi

Morris Su Labirenti (MWM), hippocampal-bağımlı öğrenmeyi test etmek amacıyla ilk kez 1981 yılında nörobilişimci Richard G. Morris tarafından geliştirilmiştir; bu öğrenme süreci şunları içerir...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, hipokampusa bağımlı öğrenme ve belleği test etmektir. Birinci günde fare, görevin kaçılabilir bir bitiş noktası olduğunu öğrenmesi için berrak suyla dolu bir havuzda rastgele yerleştirilmiş, yükseltilmiş bayraklı bir platformu bulması için eğitilir. İkinci adım olarak fare, sonraki günlerde, platformun suyun altında ve tek bir konumda sabitlendiği opak suyla dolu bir havuza farklı pozisyonlardan bırakılarak eğitilir.Bu durum, farenin çevredeki ipuçlarını kullanarak platformun konumunu öğrenmesini sağlar. Ardından, son günde platform kaldırılır ve görev kazanımını değerlendirmek amacıyla farenin yüzme paterni bir dakika boyunca takip edilir. Böylece, öğrenme ve bellek sonuçları elde edilir.Üç farklı test koşulunda görülen kaçış latansları ve yol uzunluğuna dayanarak, mekansal öğrenme ve bellekte bozulmalar olduğunu gösterir. Bu tekniğin mevcut yöntemlere göre temel avantajı, özel gizli platform ve özel olmayan görünür platform koşullarını birbirinden ayırmanın nispeten kolay olmasıdır. Genel olarak, bu yöntemde yeni olan kişiler, yöntemin deneysel uygulamalara karşı hassas olması nedeniyle zorluk yaşayabilirler.Prosedürler sırasında farelerin strese girmediğinden emin olmalısınız, aksi takdirde bu durum sonuçları etkileyebilir. Bu prosedürün gösterimi, laboratuvarımdan lisansüstü öğrenciler Ms. Kelly Bromley ve Miss Sweden tarafından gerçekleştirilecektir. Öncelikle dairesel bir havuz temin edin. Deney fareleri siyahsa beyaz bir havuz, fareler beyazsa siyah bir havuz kullanın. Şimdi.Odayı, test edilen hayvanların test sırasında deneyciyi görmeyeceği şekilde bölmelerle düzenleyin. Oda hakkında ve havuzun iç kısmında, su yüzeyinin üzerinde kalacak bir konumda yüksek kontrastlı uzamsal ipuçları yerleştirin. Havuzu suyla doldurun ve oda sıcaklığında dengeleyin.Ardından, havuzun içine, su yüzeyinin bir santimetre üzerinde, beyaz havuz için beyaz veya siyah havuz için şeffaf pleksiglas olan 10 santimetre çapında bir platform yerleştirin. Kameranın piksel tabanlı bilgilerden fiziksel mesafe bilgileri oluşturabilmesi için havuzu bilgisayar yazılımında kalibre edin.Havuzu dört kadrana bölün. Platform bölgesini, her denemede değişebilen değişken bir bölge olarak belirleyin. Ardından, her kadranda bir tane ve havuzun merkezinde bir tane olmak üzere toplam beş platform alt bölgesi oluşturun.Kalibrasyonu kaydedin ve kalan test günleri boyunca kullanın. Ardından, maksimum deneme süresini 60 saniye olarak ayarlayın. Fare platformu bu süreden önce bulursa, platform bulunduğunda denemeyi durduracak şekilde yazılımı programlayın.Ayrıca, deneyci test alanından çıktığında izlemeye otomatik olarak başlama programını belirtin. Yazılım paketinin sağladığı tüm yansıma azaltma seçeneklerini kullanın. Son olarak; yolu, uzunluğu, kaçışı, latans süresini ve her bir kadranda geçirilen süreyi takip edin.Test gününde fareleri, barınma tesisinden davranış odasına, havuzu veya uzamsal ipuçlarını göremedikleri bir alana transfer edin. Yeni ortama alışmaları için onlara en az 30 dakika süre tanıyın. Testten önce, havuz kalibrasyonunu takip yazılımına yükleyin.Her denemede platform konumu ve başlangıç yönünün farklı olacağı, uygun bir denemeler arası aralık programına sahip beş deneme oluşturun. Görünürlüğü artırmak için platformun üzerine bir bayrak yerleştirin. Teste başlamak için, fareyi kuyruk tabanından tutarak ev kafesinden kaldırın ve test alanına nakil sırasında fareyi destekleyin.Ardından fareyi, havuzun kenarına bakacak şekilde nazikçe suyun içine yerleştirin. Test alanından hızlıca ayrılın. Fare, 62. saniye sınırından önce platformu bulursa, farenin platform üzerinde beş saniye kalmasına izin verin ve ardından fareyi ana kafesine geri götürün.Fare platformu bulamazsa, fareyi platformun üzerine yerleştirin ve ana kafesine geri götürmeden önce orada 20 saniye kalmasını sağlayın. Deneydeki tüm fareler için işlemi tekrarlayın. Sonraki her denemeye, program yazılımına uygun olarak farklı bir platform konumu ve başlangıç yönü ile başlayın.Testler tamamlandığında, fareleri ertesi güne hazırlamak amacıyla barınaklarına geri götürün. Platformdaki bayrağı çıkarın ve platformu yüzeyin bir santimetre altına batıracak şekilde havuza ek su ekleyin. Havuz kalibrasyonunu takip yazılımına yükleyin ve uygun bir denemeler arası aralıkla beş deneme oluşturun.Ardından, platform konumunu tüm denemeler ve günler boyunca aynı pozisyonda kalacak şekilde programlayın, ancak başlangıç yönünün her gün her denemede farklı olmasını sağlayın. Siyah fareler için, havuza toksik olmayan beyaz toz tempera boyası ekleyin ve iyice karıştırın. Batık platformun su yüzeyinden görünmeyeceği kadar boya kullanın.Daha önce final prob denemesi için açıklandığı şekilde, fareleri suda tek tek test etmeye geçin. Havuz kalibrasyonunu takip yazılımına yükleyin. Platform bölgesi olmayan bir deneme ve bir başlangıç yönü oluşturun.Tercihen, ikinci ile beşinci günler arasında kullanılan platform kadranından en uzak olan başlangıç yönü seçilmelidir. Ayrıca iz süresi 60 saniye olarak ayarlanmalıdır. Şimdi platformu havuzdan çıkarın ve her gün için daha önce açıklandığı şekilde fareleri suda tek tek test edin ve her denek için tek bir yol uzunluğu ve kaçış gecikmesi elde etmek amacıyla her fare için beş denemenin ortalamasını alın.Ayrıca, Morris su labirenti kullanılarak verileri ekteki makalede ayrıntılı olarak açıklandığı şekilde analiz edin ve yorumlayın. İnsan İsveç mutant A PP genini taşıyan yedi aylık A PP 23 transgenik fareler, görünür platform testlerinin ilk gününde, bir ay boyunca günlük valproik asit veya taşıyıcı çözelti enjeksiyonlarından sonra test edilmiştir. VPA ile tedavi edilen ve kontrol grubu A PP 23 fareleri, görünür platforma çıkışta benzer bir gecikme süresi sergilemiştir.VPA ile tedavi edilen ve kontrol grubu olan A PP 23 fareleri, görünür platforma çıkmadan önce benzer yüzme mesafeleri sergilemiştir. Üçüncü ve dördüncü günlerdeki gizli platform testlerinde gerçekleştirilen görünür platform testinde, VPA ile tedavi edilen A PP 23 fareleri, gizli platforma çıkmak için daha kısa bir gecikme süresi göstermiştir. Üçüncü ve dördüncü günde, VPA ile tedavi edilen A PP 23 fareleri, gizli platforma çıkmadan önce daha kısa bir yüzme mesafesi kat etmiştir.Altıncı gündeki prob denemesinde, kontrol farelerine kıyasla VPA ile işlem görmüş PP 23 fareleri, gizli platformun daha önce yerleştirildiği üçüncü kadrana anlamlı derecede daha fazla kez girmiştir. Bu prosedür uygulanırken gürültü, sıcaklık ve ışık gibi strese neden olabilecek çevresel faktörlerin izlenmesini hatırlamak önemlidir. Bu prosedürün ardından, öğrenme eksikliklerinin hipokampusa özgü olup olmadığını veya amigdalayı da kapsayabilen daha geniş bir nörobilişsel problemin parçası olup olmadığı gibi ek soruları yanıtlamak için işaretli ve bağlamsal korku koşullanması gibi diğer yöntemler uygulanabilir.

morris-water-maze-test-for-learning-memory-deficits-alzheimer-s

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Morris su labirenti davranışsal bir görev hipokampus katılımı belgelemek için kullanılan bir iyi kabul edilen bir araçtır.

Morris Su Labirent Deney

Lashley III labirent caydırıcı uyaran ya da görsel ipuçları dayanmaz bir rota-öğrenme görevi. Bu nedenle, özellikle yaşlanma fareler ya da başka stres dikkate, öğrenme ve hafıza değerlendirmek için son derece cazip bir seçenek.

Farelerde Lashley III Labirent Düşük stres Rota Öğrenme

Farelerde Su Maze Testleri Sığ Su (kürek çekmeye) Türevleri

Beyin tümörlerinin radyoterapi yönetimi kaynaklanan bilişsel bozukluk yaşam kalitesini olumsuz etkileyen bir klinik inatçı bir durumu temsil eder. Eleştirel radyasyona bağlı bilişsel azaltır iyileştirmede için potansiyel müdahaleleri değerlendirmek için yeteneği sonuçta biliş sıkı kantitatif değerlendirmeler taahhüt yeteneğine bağlıdır.

Kranial Radyoterapi Yarattığı Bilişsel Azaltır nicel

Bu videoda, kemirgenlerde çalışma belleğini incelemek için kullanılan bir navigasyon görevi olan platform yer değiştirme ile Morris su labirenti testini açıklıyoruz.

Platform Yer Değiştirmeli Su Labirenti: Çalışma Belleğini Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Bu el yazması, Alzheimer hastalığının yaygın olarak kullanılan bir fare modeliyle kullanılmak üzere tasarlanmış bir Morris su labirenti (MWM) protokolünü açıklamaktadır. MWM, transgenik fare modellerinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Fare modelinin arka plan gerilimine duyarlı bir prosedürün uygulanması, grup farklılıklarını tespit etmek için çok önemlidir.

Morris Water Maze Testi: Fare Gerilme ve Test Ortamı için Optimizasyon

yeni modelde ortak morbid Alzheimer hastalığı (AH) ve inme durumunu araştırmak, üç davranış görevleri motor kontrolü ve bilişsel davranışları hem değerlendirmelerini tarif edilmiştir. Bu görevler ışın yürüme görevi, silindir görev ve Morris su labirenti içerir.

İnme ile Alzheimer Hastalığının bir Transgenik Fare Modelinde Motor ve Hipokampal Bağımlı Mekansal Öğrenme ve Referans Hafıza Değerlendirme

Burada, yüzmeye ihtiyaç duymayan bilişe ait fare-spesifik bir test için bir protokol sunuyoruz. Bu test kontrollü kortikal darbe kaynaklı travmatik beyin hasarı farelerini sahte kontrollerden başarılı bir şekilde ayırt etmek için kullanılabilir.

Radyal bir Su Basamalı Labirent Kullanarak Travmatik Beyin Hasarı Fare Modelinde Mekansal Bellek Bozukluğunu Değerlendirme

Burada, Alzheimer hastalığı model farelerin öğrenme ve hafıza yeteneğini değerlendirmek ve bunları tedavi etmek için manuel akupunktur etkisini değerlendirmek için Morris su labirent testleri yapmak için bir protokol açıklanmıştır.

Morris Su Labirenti Kullanarak Alzheimer Hastalığı Fare Modelinde Öğrenme ve Hafıza Yeteneğinin Analizi

Biz, eş zamanlı sinir kayıt ve stimülasyon yeteneği ile bir ışık headstage, ön-amplifikatör sistemi tasarım ve inşa etmek için düşük maliyetli bir yöntem sunmaktadır. Bu cihaz, yüzme hayvanlarda kullanılmak üzere su geçirmez olabilir.

Eşzamanlı Sinir Uyarım ve Su Maze Kayıt için Tasarım ve İnşaat Maliyet Etkin headstage

Öğrenin, farelerde hipokampal bağımlı öğrenme ve hafızayı değerlendirmek için Morris Su Labirenti yöntemini. Bu teknik, nörobiyoloji ve nörofarmakoloji araştırmalarında bilişsel bozuklukları incelemek için kullanılır.

Alzheimer Hastalığı Model Fareler Öğrenme ve Hafıza Açıkları Morris Su Labirent Testi

Daha fazla video keşfet