Vitrifikasyon Tabanlı Kriyoprezervasyon: Biyolojik Örnekleri Uzun Süreli Depolama için Çok Düşük Sıcaklıklarda Korumak İçin Ultra Hızlı Bir Soğutma Tekniği

Ultra hızlı bir kriyoprezervasyon tekniği olan vitrifikasyon, canlı hücrelerin ve dokuların soğutulmasına ve çok uzun süreler boyunca son derece düşük sıcaklıklarda saklanmasına olanak tanır.

Yeni alınmış bir tümör dokusunu vitrifikasyona etmek için önce dokuyu bir kültür plakasına alın. Tümörden herhangi bir nekrotik bölgeyi, yağ içeren bölgeleri veya kan pıhtılarını çıkarın. Kan izlerini gidermek için dokuyu yıkayın.

Dokuyu uygun kalınlıkta dilimler halinde kesin. Şimdi, dilimleri DMSO veya dimetil sülfoksit ve sükroz içeren bir vitrifikasyon çözeltisi içeren bir tüpe aktarın. Bu bileşenler, hücreleri donma hasarına karşı korumak için kriyoprotektan görevi görür.

Düşük bir sıcaklıkta inkübe edin. Hücreye nüfuz eden bir kriyoprotektan olan DMSO, hücre zarı boyunca yayılır ve hücre içi buz kristali oluşumunu önlemek için hücrelerdeki suyun yerini alır. Aynı zamanda, nüfuz etmeyen bir kriyoprotektan olan sükroz, hücre dehidrasyonunu kolaylaştırarak ve hücre ölümü riskini azaltmak için hücre içi buz kristali oluşumunu azaltarak hücre dışı etki eder.

Dengelenmiş tümör dilimlerini bir doku tutucuya yerleştirin. Daha sonra, eksi 196 santigrat derecede dondurmak için bu düzeneği sıvı nit