Manyetofeksiyon Bazlı Transfeksiyon İn Vitro: Manyetik Nanopartiküller Kullanarak Plazmitleri Birincil Fare Nöronal Hücrelerine Vermek İçin Manyetik Alan Destekli Bir Teknik

Ortamda floresan protein kodlayan plazmit DNA veya pDNA süspansiyonu ile başlayın. pDNA süspansiyonuna biyouyumlu, katyonik polimer kaplı manyetik nanopartiküller ekleyin ve inkübe edin.

Pozitif yüklü katyonik polimerler, negatif yüklü pDNA ile elektrostatik olarak etkileşime girer ve konjuge olur, bu da pDNA yoğunlaşmasına ve genel olarak pozitif yüklü 'manyetik poliplekslerin' oluşumuna neden olur.

Şimdi, polipleks karışımı, yapışık birincil fare nöronal hücre kültürü içeren çok kuyucuklu bir plakaya aktarın. Çok kuyulu plakayı manyetik bir plakanın üzerine monte edin ve inkübe edin.

Manyetik plaka tarafından üretilen manyetik alan, poliplekslerin nöronal hücre yüzeyi üzerinde tortulaşmasına ve birikmesine neden olur. Hücre yüzeyi ile bu yakın temas, pozitif yüklü poliplekslerin negatif yüklü hücre zarı ile ilişkili proteoglikanlara spesifik olmayan bağlanmasını kolaylaştırır.

Daha sonra, polipleksler endositoz yoluyla içselleştirilir - hücre zarının yerel bölgelerinin istila edildiği ve endozom adı verilen zara bağlı veziküller oluşturmak için sıkıştığı bir süreç.

Sitoplazmanın içinde, poliplex'in katyonik polimerleri endozomda proton birikimine neden olur. Yük nötrlüğünü koruma