Name: Tümör Hücrelerinin vaskülojenik Faaliyet değerlendirin bir Matrigel Tabanlı Tüp Oluşumu Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-09-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min
Description: Öğrenin, tümör hücrelerinin vaskülojenik aktivitesini değerlendirmek için Matrigel tabanlı tüp oluşumu testini. Bu yöntem, kanser araştırmalarında anjiyojenik potansiyeli ölçmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma NCI R01 CA120659 (SC) tarafından desteklenmiştir.

1. Tümör Hücrelerinin vaskülojenik Faaliyet değerlendirin bir Matrigel Tabanlı Tüp Oluşumu Testi <ol><li> , Tümör hücreleri ve mikrovasküler endotel hücreleri Hazırlanması: U87 hücreleri, melanom hücrelerinin B16F1, meme kanseri MDA-MB-435 ve kolon hücrelerinin HCT116 gibi beyin tümör hücreleri (% 10 FBS ve penisilin / streptomisin ile desteklenmiş DMEM yetiştirilen tüm Invitrogen gelen .) Endotel hücre hattı insan mikrovasküler endotel hücreleri (HMVECs) 1 mcg / ml hidrokortizon ve 1 ng / ml epidermal büyüme faktörü,% 10 FBS ve penisilin / streptomisin ile desteklenmiş EBM2 orta (Lonza) kültüre edildi. Hücreler PBS üç kez yıkanır ve% 0.05 tripsin / EDTA (Invitrogen) ile müstakil edildi. 2,000 rpm ile 5 dakika süreyle santrifüj sonra, hücre pelletleri tekrar PBS ile yıkandı. Sonra, bir hemasitometre pelet hücreleri sayıldı. </li><li> Matrigel hazırlık: Bir kısım büyüme faktörü-azaltılmış Matrigel (BD Bioscience), oda sıcaklığında ısınmış. Tamamen çözülmüş önce, buz üzerine transfer edildi ve sıvı, en az 10 dakika boyunca buz üzerinde tutulmalıdır. Sonra Matrigel 50 ul Matrigel eşit olarak dağıtmak için izin veren bir yatay düzeyde 96-kuyucuğu kaplama, 37 ° C'de 30 dakika inkübe edildi </li><li> Tüp oluşumu: hücreler (1-2 x 10 4), endotel hücreleri tümör hücrelerinin ya da EBM-2 serum serbest DMEM ile yeniden askıya alınan ve Matrigel üst üzerinde yüklü idi . Bu testte tübül gelişimi üzerine bazı ajanların etkilerini ölçmek için kullanılmış ise, bu ajanlar (uyarıcıları veya inhibitörleri), serum serbest orta eklendi. Her koşullu grup 4-6 kuyu içeriyordu. </li><li> Görüntü ve veri analizi: 37 takiben kuluçka ° C gecede, her iyi, doğrudan mikroskop altında incelendi. Tübüller sabitleme için gerekli olsaydı,% 10 formalin tuzlu tabanlı çözüm ul 100 nazikçe eklendi ve on dakika sonra, analiz için hazır. 10x faz kontrast mikroskop altında, her alanda tübüller görüntülü ve ortalama 3-5 rastgele alanlardan her kuyuda Tübüllerin bir sayılmıştır. </li></ol> 2. Temsilcisi Sonuçlar: Bu tübüller, poligon ağı oluşturmak bağlanmak uzatılmış hücre gövdeleri üretilmişti HMVECs, pozitif kontrol olarak kullanıldı. B16F1, U87 ve MDA-MB-435 hücre HMVECs tarafından oluşturulan benzer vasküler tübüller geliştirilmiş, ancak HCT116 hücreleri (Şekil 1) vermedi. Doza bağımlı bir hücre tüp oluşumu U87 hücreleri test edildi. Şekil 2'de gösterildiği gibi, 10.000 hücreleri durdurulan tübüller kurdu. Hücrelerin iki katına sonra, sağlam bir damar ağı HMVECs olarak görülen karşılaştırılabilir. Buna karşılık, 5.000 'den az hücreleri vasküler bir fenotip oluşturmak için başarısız oldu. <img src="/files/ftp_upload/3040/3040fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 Tüp oluşumu HMVECs, U87, MDA-MB-435, ve B16F1 hücreleri tarafından uyarılan, ancak HCT116 hücreler, tüm hücrelerin (2 x 10 4) Matrigel üzerinde yüklü olan ve gece boyunca inkübe edildi . Tübüller faz kontrast kullanılarak görüntülenmiştir. HMVECs Pozitif kontrol olarak kullanılmıştır. 3-5 alanların bir temsilci gösterildi. Bar: 100 mikron. <img src="/files/ftp_upload/3040/3040fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 hücre sayısı bağımlı bir şekilde hücre kaynaklı U87 tübüller Farklı sayıda köşeleri belirtildiği gibi U87 hücrelerinin tüp oluşumu için kullanılmıştır. HMVECs pozitif kontrol için kullanılmıştır. Bar: 100 mm.

<ol><li>Shao, R., Guo, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+microvascular+endothelial+cells+immortalized+with+human+telomerase+catalytic+protein%3A+a+model+for+the+study+of+in+vitro+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+%26+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Human microvascular endothelial cells immortalized with human telomerase catalytic protein: a model for the study of in vitro angiogenesis.</a> Biochemical & Biophysical Research Communications. 321, 788-794 (2004).</li>
<li>Ribeiro, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemostatic+properties+of+the+SV-40+transfected+human+microvascular+endothelial+cell+line+%28HMEC-1%29.+A+representative+in+vitro+model+for+microvascular+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Hemostatic properties of the SV-40 transfected human microvascular endothelial cell line (HMEC-1). A representative in vitro model for microvascular endothelium.</a> Thromb Res. 79, 153-1561 (1995).</li>
<li>Ades, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HMEC-1%3A+establishment+of+an+immortalized+human+microvascular+endothelial+cell+line%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">HMEC-1: establishment of an immortalized human microvascular endothelial cell line.</a> J Invest Dermatol. 99, 683-690 (1992).</li>
<li>Shao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acquired+expression+of+periostin+by+human+breast+cancers+promotes+tumor+angiogenesis+through+up-regulation+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+2+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+%26+Cellular+Biology%22%5BJournal%5D)">Acquired expression of periostin by human breast cancers promotes tumor angiogenesis through up-regulation of vascular endothelial growth factor receptor 2 expression.</a> Molecular & Cellular Biology. 24, 3992-4003 (2004).</li>
<li>Shao, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((YKL-40%2C+a+secreted+glycoprotein%2C+promotes+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">YKL-40, a secreted glycoprotein, promotes tumor angiogenesis.</a> Oncogene. 28, 4456-4468 (2009).</li>
<li>Basu, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+role+for+cyclooxygenase-2+in+regulating+vascular+channel+formation+by+human+breast+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A novel role for cyclooxygenase-2 in regulating vascular channel formation by human breast cancer cells.</a> Breast Cancer Research. 8, R69-R69 (2006).</li>
<li>Scavelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasculogenic+mimicry+by+bone+marrow+macrophages+in+patients+with+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Vasculogenic mimicry by bone marrow macrophages in patients with multiple myeloma.</a> Oncogene. 27, 663-674 (2008).</li>
<li>El Hallani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+alternative+mechanism+in+glioblastoma+vascularization%3A+tubular+vasculogenic+mimicry%5BTitle%5D)+AND+%22+Brain%22%5BJournal%5D)">A new alternative mechanism in glioblastoma vascularization: tubular vasculogenic mimicry.</a> Brain. 133, 973-982 (2010).</li>
<li>Maniotis, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+channel+formation+by+human+melanoma+cells+in+vivo+and+in+vitro%3A+vasculogenic+mimicry%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Vascular channel formation by human melanoma cells in vivo and in vitro: vasculogenic mimicry.</a> American Journal of Pathology. 155, 739-752 (1999).</li>
<li>Hendrix, M. J., Seftor, E. A., Hess, A. R., Seftor, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasculogenic+mimicry+and+tumour-cell+plasticity%3A+lessons+from+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Vasculogenic mimicry and tumour-cell plasticity: lessons from melanoma.</a> Nature Reviews Cancer. 3, 411-421 (2003).</li>
<li>Folberg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+cell+plasticity+in+uveal+melanoma%3A+microenvironment+directed+dampening+of+the+invasive+and+metastatic+genotype+and+phenotype+accompanies+the+generation+of+vasculogenic+mimicry+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Tumor cell plasticity in uveal melanoma: microenvironment directed dampening of the invasive and metastatic genotype and phenotype accompanies the generation of vasculogenic mimicry patterns.</a> American Journal of Pathology. 169, 1376-1389 (2006).</li>
<li>Liu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostate-specific+membrane+antigen+directed+selective+thrombotic+infarction+of+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Prostate-specific membrane antigen directed selective thrombotic infarction of tumors.</a> Cancer Research. 62, 5470-5475 (2002).</li>
<li>Sood, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+significance+of+tumor+cell-lined+vasculature+in+ovarian+carcinoma%3A+implications+for+anti-vasculogenic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">The clinical significance of tumor cell-lined vasculature in ovarian carcinoma: implications for anti-vasculogenic therapy.</a> Cancer Biology & Therapy. 1, 661-664 (2002).</li>
<li>Shirakawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamics+in+vasculogenic+mimicry+and+angiogenesis+of+inflammatory+breast+cancer+xenograft%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Hemodynamics in vasculogenic mimicry and angiogenesis of inflammatory breast cancer xenograft.</a> Cancer Research. 62, 560-566 (2002).</li>
<li>Ruf, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+role+of+tissue+factor+pathway+inhibitors+1+and+2+in+melanoma+vasculogenic+mimicry%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Differential role of tissue factor pathway inhibitors 1 and 2 in melanoma vasculogenic mimicry.</a> Cancer Research. 63, 5381-5389 (2003).</li>
<li>Seftor, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cooperative+interactions+of+laminin+5+gamma2+chain%2C+matrix+metalloproteinase-2%2C+and+membrane+type-1-matrix%2Fmetalloproteinase+are+required+for+mimicry+of+embryonic+vasculogenesis+by+aggressive+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Cooperative interactions of laminin 5 gamma2 chain, matrix metalloproteinase-2, and membrane type-1-matrix/metalloproteinase are required for mimicry of embryonic vasculogenesis by aggressive melanoma.</a> Cancer Research. 61, 6322-6327 (2001).</li>
<li>Shirakawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasculogenic+mimicry+and+pseudo-comedo+formation+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Vasculogenic mimicry and pseudo-comedo formation in breast cancer.</a> International Journal of Cancer. 99, 821-828 (2002).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Bu testte başarılı olmak için, Matrigel kalitesini ilk test edilmelidir. Bioscience BD HMVECs kullanarak tahlil öncesi çalıştırmak için küçük bir örnek alınabilir. Farklı parti ürünleri, bazı çok sayıda tüp oluşumu için en uygun durumda vermezseniz hangi benzemeyen nitelikler gösterebilir. Matrigel bir kısım 96-kuyucuğu yüklendiğinde kabarcıkları tübül oluşumu bozabilir çünkü İkincisi, herhangi bir kabarcıkları kaçınılmalıdır olmalıdır. Minik kabarcıklar iyi tespit edilirse, Matrigel hemen deney sırasında buz üzerinde t...

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 11995 </td></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 16000-044 </td></tr><tr><td> Büyüme faktörü-azaltılmış Matrigel </td><td> Bioscience BD </td><td> 47743-720 </td></tr><tr><td> EBM2 kiti </td><td> Lonza </td><td> CC-3156 </td></tr><tr><td> Nikon ECLIPSE TS100 mikroskop </td><td> Nikon </td><td></td></tr></tbody></table>

tümör hücrelerinin vaskülojenik faaliyet değerlendirin bir matrigel tabanlı tüp oluşumu testi

A Matrigel-Based Tube Formation Assay to Assess the Vasculogenic Activity of Tumor Cells

Geçtiğimiz birkaç on yıl içinde, bir tüp oluşum denemesi büyüme kullanarak faktör-azaltılmış Matrigel genellikle vasküler endotelyal hücrelerin in vitro 1-5 anjiyogenik faaliyet göstermek için istihdam edilmiştir . Ancak, son zamanlarda giderek artan kanıtlar, bu testte, vasküler endotelyal hücreler için davranış test etmek için sınırlı olmadığını göstermiştir. Bunun yerine, aynı zamanda tümör hücrelerinin damar fenotip 6-8 geliştirmek için bir dizi yeteneğini test etmek için kullanılır olmuştur . Bu yeteneği, xenotransplanted hayvanlar, vaskülojenik taklit (VM) 9 olarak bilinen bir süreç olarak tanımlanan vaskülojenik davranışı ile uyumlu idi . Tümör hücre-aracılı VM, endotelyal hücre anjiyogenez 6, 10-13, bağımsız, tümör gelişiminde hayati bir rol oynar gösteren çok sayıda kanıt vardır. Örneğin, tümör hücrelerinin melanoma ve glioblastoma hasta 8, 10, 11 kan, doku örnekleri perfüze, vasküler kanal oluşumu katılmak bulundu . Burada, tümör hücrelerinin vaskülojenik aktivite değerlendirilmesi yararlı bir araç olarak bu borulu şebeke tahlil nitelendirdi. Biz böyle melanom B16F1 hücreleri, glioblastoma U87 hücreleri ve meme kanseri MDA-MB-435 hücre gibi bazı tümör hücre hatları vasküler tübüller formu mümkün olduğunu, ancak bazı kolon kanseri HCT116 hücreleri gibi değil. Ayrıca, bu vasküler fenotip Matrigel kaplanmış hücre sayıları bağlıdır. Bu nedenle, bu testte vasküler potansiyel vasküler hücreler, tümör hücreleri gibi diğer hücrelere de dahil olmak üzere çeşitli hücre tipleri ekrana güçlü bir yardımcı olarak hizmet verebilir.

Bir tüp oluşum denemesi tümör hücrelerinin damar etkinliğini değerlendirmek için kullanılır.

Tümör Hücrelerinin vaskülojenik Faaliyet değerlendirin bir Matrigel Tabanlı Tüp Oluşumu Testi

Son birkaç on yıldır, anjiyojenik kapasiteyi göstermek için genellikle büyüme faktörü azaltılmış Matrigel kullanılarak tüp oluşumu deneyi uygulanmaktadır...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, in vivo vasküler aktiviteyi ölçmenin bir yolu olarak, çeşitli tümör hücresi tiplerinin in vitro tüp oluşumunu ölçmektir. Bu, tüp oluşumunu tetiklemek amacıyla matrigel üzerine tümör hücreleri ekleyerek gerçekleştirilir. İkinci bir adım olarak.Matrigel üzerindeki hücreler, tüp oluşumunun gerçekleşmesini sağlamak için 37 °C'de gece boyunca inkübe edilir. Ardından, her hücre tipi tarafından oluşturulan tüpler görüntülenir. Her hücre tipi tarafından oluşturulan ortalama tüp sayısını nicelleştirmek için, xenograft tümör modellerine dayanarak bu hücrelerin in vivo damarlanma oluşturma potansiyel kapasitelerini gösteren sonuçlar elde edilir.Bu yöntem, in vitro ortamda vasküler aktivitenin nasıl ölçüleceği gibi kanser araştırmaları alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Tümör hücrelerini hazırlamak için UAD seven melanoma, B 16 F1 MDA, MB 4 35 veya kolon HCT one 16 hücrelerini kültüre ederek başlayın. İnsan mikrovasküler endotel hücrelerini veya H ECS'leri; %10 FBS ve penisilin ile desteklenmiş, 1 µg/mL hidrokortizon ve 1 ng/mL epidermal büyüme faktörü içeren EBM two besiyerinde; diğer hücreleri ise %10 FPS ve penisilin ile desteklenmiş DMEM'de kültüre edin.Hücreleri PBS ile yıkayın, ardından %0,05 tripsin EDTA ile ayırın ve hücreleri 2000 RRP M'de beş dakika boyunca pelitleyin. Daha sonra hücreleri tekrar PBS ile yıkayın. Matrigel'i ısıtmak için hücreleri bir hemositometre kullanarak sayın.Büyüme faktörü azaltılmış matri gelin bir mililitresini oda sıcaklığına getirin. Ardından hemen 10 dakika boyunca buz üzerinde bekletin. 96 kuyucuklu bir plakanın kuyucuklarına 50 microliters pipetleyin.Plakayı 37 °C'de 30 dakika inkübe edin, 1 ila 2 × 10⁵ tümör veya endotel hücresini sırasıyla DMEM veya eBM2 içerisinde resüspande edin ve bunları matrigel üzerine yükleyin. Reaktiflerin tübül gelişimi üzerindeki etkilerini inceliyorsanız, reaktifi serumsuz medyuma ekleyin ve 37 °C'de gece boyunca inkübe edin. Görüntü analizi için, 10 µL %10'luk formalin ve salin bazlı çözelti ekleyip 10 dakika bekletin.Ardından, 10 x objektif altında faz kontrast mikroskobu kullanarak görüntüleme yapın. Her bir kuyucuktan rastgele seçilen üç ila beş alandaki tübül sayısını sayın. Daha sonra burada bir ortalama alın.Bu tübüller, bir poligon ağ oluşturmak üzere birbirine bağlanan belirgin uzamış hücre gövdelerinden geliştiği için HMC'ler pozitif kontrol olarak kullanılmıştır. B 16 F1 U 87 ve MDA MB 4 35 hücreleri, Hec'ler tarafından oluşturulanlara benzer vasküler tübüller geliştirmiştir. Ancak HCT one 16 hücreleri bunu yapmamıştır.U 87 hücrelerinde hücre dozuna bağlı tüp oluşumu test edildi. Bu şekilde gösterildiği üzere, hücre sayısı iki katına çıkarıldığında 10.000 hücre kesintili tüpçükler oluşturmuştur. H ecs'lerde görülene benzer şekilde sağlam bir vasküler ağ gözlemlenmiştir.Buna karşılık, 5.000 hücreden daha az ile başlandığında vasküler fenotip oluşumu sağlanamamıştır. Bu videoyu izledikten sonra, kanser hücrelerinin in vitro tüp oluşumunu ölçmek için bir matrigel tüp deneyi düzeneğinin nasıl başarıyla kurulacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

a-matrigel-based-tube-formation-assay-to-assess-vasculogenic-activity

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Tüp formasyonu deneyi in vitro olarak anjiyojenezi ölçmek için bir hızlı, ölçülebilir bir yöntemdir. Endotel hücreler, koşullu ortam ile bir araya yerleşen ve bazal zar özü ekilir. Tüp oluşumu saat içinde meydana gelir ve yeni oluşan tübülleri kolayca ölçülebilir.

Endotel Hücre için Tüp Deneyi birleşimi<em&gt; İn Vitro</em&gt; Anjiyogenezin Çalışması

Ultrason ve endomikroskopi olmak üzere iki tamamlayıcı görüntüleme yöntemi kullanarak kanser hücreleri tarafından salgılanan bir faktör havuzunun anjiyojenik potansiyelini göstermek için bir matrigel tıkaç testi tarif ediyoruz. Hücre dışı bir matriks (ECM) taklidi jeli olan matrigel, konağı (fare) şartlandırılmış ortama (CM) salgılanan anjiyojenik faktörlerle tanıştırmak için kullanılır.

Hızlı büyüyen Tümör üreten hücreleri tarafından salgılanan faktörler tarafından işe alınmış İzleme İşlevsellik ve vaskülatürüne morfolojisi

Bu el yazması, kontrollü bir ortamda endotel hücre tüpü oluşumunu kullanarak belirli bir bileşiğin veya durumun anjiyogenez üzerindeki etkilerini ölçmek için bir tüp oluşturma testini açıklar.

Stratejik Endotel Hücre Tüp Oluşumu Testi: Azaltılmış Ekstrasellüler Matrix Ekstrasellüler Matrix ve Büyüme Faktörü Karşılaştırılması

Bu kağıt vitro hemangioblastomas (HBs) ve HBs rolü klasik tümör angiogenez bulunmaktadır olup olmadığını değerlendirmek için kapsamlı bir yordam sunar. Sonuçları HB-neovaskülarizasyon karmaşıklığı vurgulamak ve bu sık görülen angiogenez HB neovaskülarizasyon sadece tamamlayıcı bir mekanizma olduğunu göstermektedir.

Sözde Hemangioblastoma tahlil çimlenme küresel kullanarak neovaskülarizasyon Vitro performansını değerlendirmek için kapsamlı bir yordam

Burada, biz su ekstresinin etkilerini değerlendirmek Ruta graveolens gemi ağ oluşumu üzerinde bir tüp oluşumu tahlil kullanarak bir jelli Bodrum matris.

HUVEC tüp-formasyon assay doğal ürünlerin anjiyogenezi üzerinde etkisini değerlendirmek için

İndüklenen pluripotent kök hücrelerinden (IPSC-EPs) elde edilen endotel progenatörler, kardiyovasküler hastalık tedavilerinin devrimleştirilmesi ve daha sadık kardiyovasküler hastalık modellerinin oluşturulmasını sağlamak için potansiyele sahiptir. Burada, üç boyutlu (3D) kollajen mikroortamlarda IPSC-EPs kapsülleme ve bu hücrelerin vasculogenik potansiyelinin nicel Analizi açıklanmıştır.

Bir In vitro 3D model ve hesaplamalı boru hattı PSC-türetilen endotel progenitors Vazculogenik potansiyelini ölçmek için

Bu tahlil, filizlenen anjiyogenezi in vitro olarak kontrol eden biyolojik süreçleri analiz etmek için 3D-kollajen jel içinde kültürlenmiş embriyoid cisimlere farklılaştırılmış fare embriyonik kök hücrelerini kullanır. Bu teknik, ilaçları test etmek, hastalıkları modellemek ve embriyonik olarak ölümcül olan delesyonlar bağlamında spesifik genleri incelemek için uygulanabilir.

In Vitro Vasküler Hastalık Modellemesi ve İlaç Testi için Fare Embriyonik Kök Hücreleri Kullanılarak Anjiyogenezin Üç Boyutlu Filizlenme Testi

Burada sunulan yöntem, reaktiflerin anjiyogenez veya vasküler geçirgenlik üzerindeki etkisini in vivo boyamadan değerlendirebilir. Yöntem, neo-damarları veya vasküler sızıntıyı görselleştirmek için kuyruk damarı yoluyla dekstran-FITC enjeksiyonunu kullanır.

Anjiyogenez Çalışmaları için Modifiye In Vivo Matrix Jel Plug Testi

Mevcut protokol, trofoblast hücreleri gibi hücrelerin, hücre dışı bazal membran matrisinin bir tabakası üzerinde kılcal benzeri yapılar halinde organize olduğu klasik in vitro anjiyogenez-tüp oluşum testinde oluşan tüp benzeri yapıların geri kazanılmasına izin verir. Geri kazanılan yapılar, çeşitli biyokimyasal analizler için RNA ve protein izolasyonu için kullanılır.

Farklılaşma İşaretleyici İfade Analizi için Anjiyogenez-Tüp Oluşum Testinden Trofoblast Hücre Geri Kazanımı

Bu çalışma, iki boyutlu (2D) çizik yara migrasyon testini ve üç boyutlu (3D) küresel filizlenme testini, RNA ekstraksiyonu ve immünositokimya dahil olmak üzere ilgili aşağı akış analiz yöntemleriyle birlikte, in vitro anjiyogenezi incelemek için uygun testler olarak sunmaktadır.

Çizik Yara Migrasyon Testi ve Sferoid Filizlenme Testinden Yararlanarak Anjiyogenezin Fonksiyonel ve Moleküler Düzeyde İncelenmesi

Öğrenin, tümör hücrelerinin vaskülojenik aktivitesini değerlendirmek için Matrigel tabanlı tüp oluşumu testini. Bu yöntem, kanser araştırmalarında anjiyojenik potansiyeli ölçmeye yardımcı olur.

Tümör Hücrelerinin vaskülojenik Faaliyet değerlendirin bir Matrigel Tabanlı Tüp Oluşumu Testi

Daha fazla video keşfet