Name: Gelişim Araştırmaları Pencereleme Tavuk Yumurta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 1 s
Description: Keşfedin tavuk yumurtalarını nörobiyolojik deneyler için hazırlama ve pencereleme yöntemini. Bu teknik, embriyo canlılığını artırarak hücre kader haritalaması çalışmalarına olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

1. Inkübatör gelen yumurta çıkarın <ol><li> 37 o C&#39;da C bağıl nem% 60 üstünde. </li><li> Yumurta çıkarın; yumurta 90 ° döndürün, böylece büyük temel yatay yatıyor. </li></ol> 2. Sterilize etmek için Swab yumurta <ol><li> % 70 etanol ile non-steril gazlı bez bir yığın Doymuş. </li><li> 2-3 adet 5 yumurta kadar çubukla kullanın. Gazlı bez kirli atın. </li></ol> 3. Albümin kaldırılması sitesi hazırlanması <ol><li> Albümin çekilecek alanını korumak için temel sol 3M plastik bant 1 &quot;x 1&quot; parça kesin ve yerleştirin. </li></ol> 4. Albümin, kaldırılması <ol><li> Bandın ortasında küçük bir delik yapmak için bir makas noktasını kullanın. </li><li> 18-gauge iğne, 1-inç ile 10 cc şırınga kullanarak yavaş yavaş makas tarafından yapılan delikten iğne delin. </li><li> Iğne yumurta alt kısmına doğru 45 ° C açıyla aşağı çekmek. </li><li> Iğne merkezine doğru yatırın ve albümin 3 ila 4 ml çizin. </li></ol> 5. Pencereleme <ol><li> Plastik bant 3 &quot;x 3&quot; parça kesin ve yumurtanın üstüne uyacak şekilde germek. Çok sert çekmek için dikkatli olmak, yumurta yatay yüzey yuvarlak uçları etrafında kare köşeler uzatın. Hiçbir kıvrımları ile yumurta yüzeyine karşı sıkı bir şekilde bant çekin. </li><li> Bant yerleştirildi alanın alt ortasında bir delik bir çift keskin düz 4 &quot;diseksiyon makas kullanarak, bükün. Içini karşı ipuçları yetişmek için emin olmak yumurtanın içine yavaş yavaş alt bıçak, makas kılavuzu kabuk üssüne doğru bıçak Doğrudan ve yavaş yavaş kabuk kesmek başlamak. saat yönünün tersine bir biçimde devam edin, sadece üst merkeze ulaşmadan önce durdurulması, sadece küçük bir bit kadar makas çıkarın ve ters yönde gidiyor tekrar yumurta bağlı yumurta döllenmiş olduğundan emin olmak için kontrol edin. pencereyi kapatın kalır. </li></ol> 6. Kapanış yeniden açılması ve yumurta sızdırmazlık. <ol><li> Geniş plastik bant &quot;uzun, 1 / 2&quot; 2-3 hakkında kesin ve pencereyi kapatmaya kesildi deliğin içine sığacak kadar. Bant başka bir 1 x 1 &quot;parça alın ve yumurta drene olduğu delik mühür her türlü manipülasyonlar yapmak için yumurta yeniden forseps bir çift kullanın. Inkübatör yumurta dönmeye hazır olduğunuzda, bir parça kesti pencere mühür ve yumurta tüm yatay yüzey kapağı için yeterince büyük bir bant. </li></ol>

<ol><li>Cramer, K. S., Fraser, S. E., Rubel, E. W. Dev Biol. 224, 138-151 (2000).</li>
<li>Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. Dev Biol. 269, 26-35 (2004).</li>
<li>Cramer, K. S., Cerretti, D. P., Siddiqui, S. A. Dev Biol. 295, 76-89 (2006).</li>
<li>Huffman, K. J., Cramer, K. S. Dev Neurobiol. 67, 1655-1668 (2007).</li>
<li>Krull, C. E. Dev Dyn. 229, 433-439 (2004).</li>
<li>Gerlach-Bank, L. M., Cleveland, A. R., Barald, K. F. Dev Dyn. 229, 219-230 (2004).</li>
</ol>

Bu yöntem deneysel manipülasyonlar uzun sağkalım süreleri sağlar. Örneğin, boya-etiketleme çalışmaları, E10 ya da daha sonra bir kader haritalama çalışması (1) hayatta kalma izin verdi. Buna ek olarak, gen ekspresyon seviyelerinin değiştirilmesi ve daha sonra gelişimsel aşamaları (2-6) devam etmek için gerekli geliştirme ovo elektroporasyon çalışmalarda kullanılmaktadır. Bu pencere tekniği embriyo manipülasyonları sonra hayatta kalma gerektiren herhangi bir işlem ile birlikte kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>Rotasyonlu inkübatör</td><td> </td><td>Profi</td><td></td><td>Bağıl nem %60'ın üzerine ayarlanmış şekilde 37&amp;deg; derecede tutun</td></tr><tr><td>%70 EtOH</td><td> </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td>gazlı bez</td><td> </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td>3M plastik bant</td><td> </td><td></td><td></td><td> </td></tr><tr><td>10cc şırınga</td><td> </td><td></td><td></td><td>yumurta başına 1 adet</td></tr><tr><td>18G iğneler</td><td> </td><td></td><td></td><td>1&amp;#189; inç iğne, şırınga başına 1 adet</td></tr><tr><td>Diseksiyon makası</td><td> </td><td></td><td></td><td>4&quot; keskin düz ağızlı</td></tr><tr><td>Döllenmiş Yumurtalar</td><td> </td><td></td><td></td><td> </td></tr></tbody></table>

gelişim araştırmaları pencereleme tavuk yumurta

Windowing Chicken Eggs for Developmental Studies

Gelişme çalışma büyük ölçüde deneysel bir model olarak civciv embriyo kullanımı yardımıyla olmuştur. Civciv bıldırcın kuruntulardan ve odak boya etiketleme dahil olmak üzere çeşitli yaklaşımlar kullanarak hücre kaderi harita deneyler için embriyo erişilebilirlik kolaylığı sağladı. Buna ek olarak, ovo elektroporasyon kullanarak plazmid DNA, protein kaplı boncuklar ve giriş yerleştirilmesi de dahil olmak üzere çeşitli moleküler tedirginlikler sağlar. Bu deneyler, merkezi ve periferik sinir sistemi gelişimi hakkında önemli veriler vermiştir. Bu çalışmaların çoğu için, kabuğu açık ve embriyonun büyüme rahatsızlık vermesini olmadan Sık kalkış için gereklidir. Embriyo, yumurta kabuğu yeniden açarak izleyen gelişim evreleri incelenebilir. Bu makalede, tavuk yumurtası açmak için birkaç mükemmel bir yöntem olmakla birlikte uzun sağkalım süreleri için optimize edilmiş bir yöntem göstermektedir. Bu yöntemde, yumurta yan dayanmaktadır ve küçük bir pencere kabuk kesilir. Deneysel işlemin ardından, kabuk, yumurta gelişimi süresince kapsayacak şekilde kullanılır. Kabuğu örten şeffaf plastik bant embriyo korur ve kuluçka dönemi kalan sırasında hidrasyon korumak yardımcı olur. Bu yöntem, iki gün inkübasyon başında kullanılır olmuştur ve olgun embriyonik çağlar boyunca hayatta kalma izin verdi.

Civciv bıldırcın kuruntulardan ve odak boya etiketleme dahil olmak üzere çeşitli yaklaşımlar kullanarak hücre kaderi harita deneyler için embriyo erişilebilirlik kolaylığı sağladı. Bu yazıda, uzun sağkalım süreleri için optimize edilmiş bir yumurta hazırlama yöntemi göstermektedir.

Gelişim Araştırmaları Pencereleme Tavuk Yumurta

Gelişim çalışmaları, deneysel bir model olarak piliç embriyosunun kullanımıyla büyük ölçüde desteklenmiştir. Embriyoya erişimin kolaylığı...

Kramer Laboratuvarına hoş geldiniz. Ben Matt Korn, California Üniversitesi Irvine Nörobiyoloji ve Davranış bölümündenim. Bugün size boncuk yerleştirme, boya enjeksiyonu veya ovo içi inceleme dahil olmak üzere çeşitli manipülasyonlar için tavuk yumurtalarının nasıl hazırlandığını göstereceğim.Öyleyse daha fazla vakit kaybetmeden başlayalım. Tamam, şimdi yumurtayı temizleyeceğiz. Bunun nedeni, inkübatöre girebilecek birçok farklı maddenin bulunabilmesidir.Bunu bantla mühürleyeceğiz. Yumurtanın yerleştirileceği pencere bölgesine küçük parçaların girip, embriyoyu çıkarmak istediğimiz ana kadar ölme olasılığını artırmasını istemiyoruz. İnkübatörde gördüğünüz üzere, yumurtalar geniş kısımları yukarı bakacak şekilde duruyor.Şimdi yapacağımız işlem, yumurtayı alıp yan tarafına çevirmek olacak. Bu iki amaca hizmet edecek: Birincisi, penceresi tam burada olacak ve ikincisi, herhangi bir manipülasyon yapabilmemiz için embriyonun üste çıkması gerekecek.Şimdi, inkübatördeki raftan birkaç tanesini karton bir yumurta tutucuya yerleştireceğim. Bu parça aslında yumurtalar teslim edildiğinde kutunun içinde gelen parçadır. Bugün, bunu sadece yumurtaları tutmak için kullanacağız.Şimdi düzenleme size k

windowing-chicken-eggs-for-developmental-studies

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bıldırcın-chick kimerik embriyo kuş nöral krest hücrelerinin göç ve nihai kaderi analiz etmek için bir yaklaşım tarif edilmiştir. Bu yöntem, aksi ayarlanmamış bir civciv embriyo içinde ayırt etmek zor göç ve farklılaşma sırasında nöral krest hücrelerinden izlemek için basit ve kolay bir tekniktir.

Çapraz türler Nakli Sinir Crest Göç ve Farklılaşma Analiz

Bu videoda, döllenmiş bir tavuk yumurtasının yumurta kabuğunu, dallanan kan damarlarından oluşan bir ağ taşıyan koryoallantoik zarını veya CAM'sini ortaya çıkarmak için açma tekniğini açıklıyoruz. Açıkta kalan CAM, in ovo tümör modellemesi için kullanılabilir.

Yumurta Pencereleme: Korioallantoik Membran Vaskülatürünü Ortaya Çıkarmak için Döllenmiş Tavuk Yumurtası Kabuğunu Açma Yöntemi

Gelişim sırasında tavuk embriyosunu görüntülemek ve ona erişmek zor olabilir. Basit, uygun maliyetli ve bir sınıfta veya araştırma ortamında kolayca kullanılabilecek bir ex ovo yöntemi geliştirdik. Bu yöntem, embriyonik gelişimin geç aşamalarına kadar embriyoya erişim sağlar (HH 40).

Optimize Ex-ovo Kalkınma Gelişmiş Aşamaları Chick Embriyolar ekimi

Bu protokol, kontrastlı ultrason görüntüleme ve mikrokabarcık aracılı ilaç dağıtımını incelemek için 5 ila 8 günlük tavuk embriyolarının ve bunların koryoallantoik membranının (CAM) in vivo bir model olarak nasıl elde edileceği ve kullanılacağına dair üç yöntemi açıklamaktadır.

Kontrastlı Ultrason Görüntüleme ve Mikrokabarcık Aracılı İlaç Dağıtım Çalışmaları için Tavuk Ex Ovo Embriyolarının ve Korioallantoik Membran Damarlarının In Vivo Model Olarak Hazırlanması

Bu, kanser metastazının baskılayıcılarını veya sürücülerini taramak için etkili bir yöntemdir. Bir ifade kütüphanesi ile transdüklenen hücreler, metastatik koloniler oluşturmak için tavuk chorioallantoic membran vaskülatürüne enjekte edilir. İnvazivliği azalmış veya artmış koloniler, fenotiplerini doğrulamak için ekscised, genişletilmiş, reenjected ve son olarak, yüksek verim sıralaması kullanılarak analiz edilir.

Hızlı ve Nicel Intravital Chick Chorioallantoic Membran Modeli Kullanılarak Metastatik Regülatörlerin Keşfi

Tavuk embriyoları, klasik bir gelişim modeli olarak, laboratuvarımızda çeşitli çevresel kirleticilere maruz kalmanın ardından gelişimsel kardiyotoksioksiklikleri değerlendirmek için kullanılır. Bu yazıda maruz kalma yöntemleri ve kurulan morfolojik/fonksiyonel değerlendirme yöntemleri açıklanmıştır.

Gelişimsel Kardiyotoksikliklerin Değerlendirilmesinde Tavuk Embriyosunun Güçlü Bir Araç Olarak Kullanılması

Doğal ve sentetik bileşiklerin , bu durumda, nikotinamid ribozidin kas gelişimini ve büyümesini etkileme yeteneğini test etmek için kuluçkalanmamış ticari piliç yumurtalarını kullanan ovo besleme araştırma denemelerinde yürütmek için sağlam bir metodoloji geliştirilmiştir.

Burada: Ovo Ticari Broiler Yumurtalarının Beslenmesi: Kas Gelişimini ve Büyümesini Etkilemek İçin Doğru ve Tekrarlanabilir Bir Yöntem

Islatılmış boncuk testi, hücre farklılaşmasının ve morfogenezinin düzenlenmesini incelemek için herhangi bir gelişimsel zaman noktasında test reaktifinin hedeflenmiş olarak verilmesini içerir. Üç farklı tipte ıslatılmış boncuk hazırlamak ve bunları bir tavuk embriyosunun ara rakamlarına implante etmek için herhangi bir deneysel hayvan modeline uygulanabilir ayrıntılı bir protokol sunulmaktadır.

Islatılmış Boncuk Tahlili Kullanılarak Tavuk Embriyogenezi Sırasında Hücre Farklılaşması, Morfogenez ve Desenleme Analizi

Standart işitsel beyin sapı yanıtı (ABR) tekniklerini kullandık ve bunları işitsel işlev için erken bir kuş modeli olan yavru tavuklara uyguladık. Protokol, hayvan hazırlama ve ABR edinme tekniklerini, diğer kuş veya kemirgen modellerine çevrilebilecek adımlarla ayrıntılı olarak özetlemektedir.

Tavuk Yavrularında İşitsel Beyin Sapı Yanıtının Değerlendirilmesi

Civciv, çeşitli çalışmalar için uygun maliyetli, erişilebilir ve yaygın olarak bulunan bir model organizmadır. Burada, kuş iç kulağı gelişimi ve yenilenmesinin altında yatan moleküler mekanizmaları anlamak için bir dizi protokol detaylandırılmıştır.

Ovo ve Ex Ovo'da Kuş İç Kulak Gelişimini İnceleme Yöntemleri

Keşfedin tavuk yumurtalarını nörobiyolojik deneyler için hazırlama ve pencereleme yöntemini. Bu teknik, embriyo canlılığını artırarak hücre kader haritalaması çalışmalarına olanak tanır.

Gelişim Araştırmaları Pencereleme Tavuk Yumurta

Daha fazla video keşfet