Erken Evre Tavuk Embriyolar Büyüme Faktörü-Kaplı Boncuk yerleştirme

Raburn Laboratuvarı'na hoş geldiniz. Ben Matt Korn, California Irvine Üniversitesi Nörobiyoloji ve Davranış Bölümü'ndenim. Bugün bir yumurta alacağız, açacağız ve büyüme faktörüne batırılmış bir boncuk yerleştireceğiz.

Bir yumurtanın harika hazırlanması, embriyonik gelişimin bu erken aşamasında bir dizi farklı doku türünün kaderini değiştirmek için bir büyüme faktörü koymamıza izin verecektir. İkinci buçuk gün veya 17. aşama. Tamam, işte buradayız, buradaki kapsamdayız.

Yumurtalarım ve tüm aletlerim yanımda. Öyleyse gidin, devam edin ve buraya bir yumurta çekin ve kasetimizin nerede olduğunu görebilirsiniz. Pencere contası.

Güzel bir küçük çöreğim var. Sadece bir sanat mağazası alabileceğiniz sanatsal kilden yapılmıştır. Ve gerçekten kötü bir çift beş forseps alacağım.

Bunlar uzun zamandır ortalıkta dolaşıyor. Uç uçları oldukça sıkıcıdır, ancak bandı o pencerenin açılmasına yetecek kadar kaldırmak için harika çalışırlar. Bunları bir kenara koyabilirim.

Bunu katlayacağım ve yumurtayı sıkıştıracağım, bu pencereyi arkaya böyle koyacağım. Yani şimdi onu kapsam altına koyabilirim, her türlü manipülasyonu yapabilirim. Bu durumda, boncukları yapacağız ve ben devam edeceğim ve şu anda Hindistan mürekkebi olmadan Hindistan mürekkebimi alacağım.

Burada bir parça embriyo diski olduğunu görebilirsiniz, ve biraz yana doğru kaymış. Yani sadece yumurtayı çevirirsem, o zaman kanın bir kısmının burada nerede bir daire oluşturduğunu görebilirim. Ve devam edip iğnemi Hindistan mürekkebiyle alabilirim.

Ve ben sadece yan tarafa geçeceğim ve diskin altına gireceğim ve orada bir embriyo var. Embriyonun siyahla olan kontrastını görmek için çok fazla koymak istemiyorum. Ve sonra devam edeceğim ve bunu embriyonun liste kısmı öne bakacak şekilde döndüreceğim.

Ve burada gördüğünüz şey sefalon bölgesi. Nöral tüp buraya geri geliyor ve onu yaşlandırmamıza izin veren bazı somitlerimiz var. Ve eğer devam edersem ve yakınlaştırırsam, kalbin çok yavaş ama tutarlı bir şekilde attığını görebiliriz, ki bu harika.

Kalp oradaydı ama atmıyordu. Bunun hayati bir örnek olup olmadığı konusunda biraz endişelenmemiz gerekirdi. Üzerinde gerçek bir kalın zar olmadığı için, burada tungsten sondama geçebilirim.

Ben, ve ince bir zar var, ve embriyoya erişebilmek için burada kenara çekileceğim. Boncukları hem ön beyne hem de arka beyne yerleştiriyoruz. Ve bu, ön beyin için gideceğim.

Şimdi, ona ulaşmak için, bir zarı kesmem gerekiyor. Şimdi daha genç olduklarında, sadece bir tungsten probu kullanabilir ve nöral tüpten içeri girebilirim ve boncuğu koymak istediğim bölgeye erişimim olur. Ve şimdi tungsten sondama geçeceğim.

Ve sadece elimi sabitlemek için iki elimi kullanıyorum. Devam edeceğim ve embriyoyu hareket ettireceğim. Yani boncuğu buraya getirdiğimde, onu doğrudan nöral tüpe ve ön beyne kadar yerleştirebilirim.

Tamam, şimdi embriyoyu açtığıma göre, devam edip hazırlayabilir ve boncuğu yerleştirebilirim. Yapacağım şey sondamı biraz daha derine sokmak ve nöral tüpü açmak, ki orada yaptığımı görebilirsiniz. Devam edeceğim ve biraz daha yakınlaştıracağım.

Burada odağımı biraz değiştiriyorum. Gördüğünüz gibi orada küçük güzel bir açıklık var, ama kuyruk sefalonunun olduğu yerin üzerine gerçekten bir delik açmadım, ve bunun nedeni boncuğun gideceği yerin orada olması. Bu yüzden boncuğun dışarı çıkabileceği bir delik istemiyorum.

Biraz geri istiyorum, böylece boncuğu içeri koyabilir ve ileri itebilirim. Şimdi devam edeceğim ve bir boncuk alacağım. Çok farklı boyutlar olduğunu görebilirsiniz.

Bunlar heparin akrilik, PBS'deler. Devam edeceğim ve bir çift 55 forseps alacağım. Gördüğünüz gibi PBS'ye gireceğim ve sadece hoşuma giden bir tane bulacağım.

Ve bir kez PBS'den çıktıktan sonra, genellikle oradaki forsece yapışır, onu orada görebilir. Devam et ve boncukları ört. Yumurtamı geri getir.

Yumurtayı odaklamaya çalışacağım. Bu yüzden devam edeceğim ve 55 forsepsin üzerine boncuk getireceğim. Sevdiğim forsepte biraz daha yüksek, ama işte orada.

Ve ben sadece onu nöral tüpte o deliği açtığım yere yönlendireceğim. Onu nöral tüpe soktuğumda, gelişmekte olan beynin ön tarafına doğru manipüle etmek kolaylaşıyor. Bu yüzden devam edeceğim ve tungsten probumu alacağım, sadece iteceğim.

Boncuğu sefalona yerleştirirken dikkatli olmalısınız çünkü embriyo yaşlandıkça öne ve sonra yana doğru bükülmeye başlayacaktır. Ve çoğu zaman olan şey, ön beyne bir boncuk yerleştirdiğinizde Cephalon'a doğru gagaya doğru düşeceğini söylemektir çünkü gaga, beynin sırt bölgesinde olduğu embriyonun ventral kısmında oluşur. Ama bu oldukça iyi görünüyor.

Bundan oldukça memnunum. Devam edeceğim, 10 mikrolitre steril PBS içeren bir pipet alacağım ve buraya sadece birkaç damla koyacağım. Tamam, şimdi devam edip yumurtayı kapatabiliriz.

Ve yapacağım şey pencereyi buraya getirmek, yukarı ve tekrar, ve yumurta henüz mühürlenmedi. Yapmak istediğim şey, kurumaması için, devam edeceğim ve kullandığımız bu plastik banttan biraz alacağım ve sadece bir parça keseceğim. Boyutla ilgili, pencereden biraz daha büyük.

Ve onu biraz uzatacağım ve pencerenin tam üzerine yerleştireceğim ve güzel ve rahat olduğundan emin olacağım. Açtığımız deliklerden herhangi biri, albümini boşaltırken ya da pencereyi keserken mühürlendi. Yani şimdi yumurta mühürlendi, umin'in hiçbirini kaybedemiyor, kurumuyor.

Normal bir şekilde yaşlanabilmelidir. Boncuk yerleştirme için bu kadar. Civciv deneylerinizde iyi şanslar ve umarım istediğiniz sonuçları almışsınızdır.