Wharton Kanalı üzerinden Fare Submandibular Tükürük Bezi kanülasyonu
14 Mayıs 2011
Wharton kanalı üzerinden fare submandibular tükürük bezi kanülasyonu için bir protokol açıklanmıştır. Bu deneme için, tripan mavi çözümü, bu tekniği etkin bir şekilde hedeflenen bezine infüzyonları dağıtımını nasıl göstermek için, bu yeni yaklaşımın güvenilirliğini ve tükürük bezlerinin rejenerasyonu için potansiyel bir klinik ilaç / hücre tedavisi olarak önermek için bir boyacı olarak kullanılır.
Tüm deneyler McGill Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmıştır ve Kanada Hayvan Bakımı Konseyi'nin yönergelerine uygun olarak hareket ediyoruz. Bu deneyin amacı, Wharton kanalının kanülasyonu yoluyla mandibular tükürük bezinin faresine progenitör veya kök hücreler vermektir. Bu video için, hücre infüzyonunu görselleştirmek için bir boya olarak trippen mavisi çözeltisi kullanılmıştır.
Tükürük bezlerinin hipofonksiyonu, Sjögren sendromunun en sık görülen yan etkilerinden biridir ve baş ve boyun bölgelerinde kanser tedavisi için terapötik ışınlamadır. Tükürük bezinin arızalanması genellikle ağız mukozasının enfeksiyonu ve diş çürümesi gibi diş hastalıklarına yol açabilir. Hasarlı tükürük bezlerinin tedavisi için rejeneratif tıbbın yenilikçi bir yaklaşımı şudur.
Kök hücreler, bozulmuş bezin işlevlerini canlandırmada güçlü bir yöntem olarak tükürük bezinin ördekleri yoluyla kanülasyon yoluyla doğrudan beze bırakılabilir, muhtemelen göç eden yabancı kök hücreler, tükürük bezinin bir parçası olarak işlev görmek üzere glandüler hücrelere farklılaşacaktır. Burada, Wharton kanalı yoluyla fare alt mandibular tükürük bezi üzerinde kanülasyon prosedürünün gerçekleştirilmesinde yer alan adımları gösteriyoruz. Bu deney için, trip ve mavi çözelti, ultra konforlu 29 gazlı bez iğnesi ve şırınga ile Wharton kanalının açılmasından beze enjekte edilir.
Daha sonra, infüzyonların beze başarılı bir şekilde geçtiğini göstermek için fare disseke edilir. Tamamen. Birinci adım, mililitre başına 0.5 miligram vücut ağırlığının gramı başına bir mikrolitre, atropin sülfat monohidrat, tükürük salgılarının infüzyonların hareketini bozmasını önlemek için her fareye deri altına enjekte edilir. İkinci adım, fareyi sakinleştirmek için her fare intraperitonealıne mililitre başına 100 miligram, ketamin ve mililitre başına 20 miligram vücut ağırlığının kilogramı başına bir mikrolitre ksilazin çözeltisi enjekte edilir.
Üçüncü adım. Sedasyon işleminden sonra mouse bir platform üzerine yerleştirilir. Ventral pozisyonda, maksiller kesici diş metal bir tel üzerine kilitlenir ve mandibular kesici diş, ağzı açık tutmak için elastik bir ipe asılır.
Dördüncü adım, ultra konforlu 29 Gau iğne ve şırınga kullanılarak filtrelenmiş %0.4 Trian mavisi solüsyonu, dilin hemen altında bulunan Wharton kanalından submandibular tükürük bezine infüze edilir. İğne şimdi Wharton kanalının açılmasına işaret ediyor ve şimdi infüzyonları iletmek için kanala girdi. Beşinci adım.
Kanülasyon işleminden hemen sonra, tükürük bezi, infüzyonların gerçekte ne kadarının bezde kaldığını belirlemek için cerrahi olarak açığa çıkarılır. İnfüzyonlar enjekte edildikten sonra, fare, kanül sonrası tükürük bezini cerrahi olarak ortaya çıkarmak için diseke edildi. Bu görüntüde görebileceğiniz gibi, Wharton kanalının koyu renklenmesi, tükürük bezi hipofonksiyonu durumunda trippin mavisi solüsyonunun başarılı bir şekilde infüze edildiğine dair güçlü kanıtlar vermektedir.
Lokal uygulama, yani bu kanülasyon prosedürü ile ilaç ve hücre enjeksiyonu, parotis, submandibular ve sublingual tükürük bezlerinin fonksiyonlarının canlandırılmasında daha doğrudan ve etkili bir yol olarak algılanabilir. Temsili sonuçlarda açıkça görüldüğü gibi, bu durumda Trian mavisi çözeltisi olan infüzyonlar, Wharton kanalı yoluyla fare submandibular tükürük bezine başarılı bir şekilde bırakıldı. Bu nedenle, bu kanülasyon tekniği, fare tükürük bezinin rejeneratif tıbbı için güvenilir bir model olarak kullanılabilir.
Ve gelecekteki bir olasılık olarak, bu prosedür klinik gen transferi uygulaması için uygun bir yöntem olabilir. Bu görsel makalenin, tükürük bezinin rejeneratif tıbbı konusunda daha ileri çalışmalara ilgi duyan öğrenciler ve araştırmacılar için etkili bir araç olarak kullanılması büyük bir zevk olacaktır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, Wharton'un kanalı vasıtasıyla fare submandibular tükürük bezini kanüle etmek için bir protokolü açıklamaktadır. Trypan mavisi solüsyonunun bir boya olarak kullanılması, bu tekniğin hedeflenen beze infüzyon sağlamada etkinliğini göstermekte ve tükürük bezi yenilenmesinde klinik uygulamaların potansiyelini vurgulamaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Yenilemesel tıp
- Tükürük bezi fonksiyonu
- Hücre tedavisi
Arka Plan
- Tükürük bezlerinin hipofonksiyonu, Sjogren sendromu gibi durumlarda yaygın bir sorundur.
- Baş ve boyun kanserleri için terapötik ışınlama, tükürük bezi fonksiyon bozukluğuna yol açabilir.
- Hizmet dışı kalmış tükürük bezleri diş hastalıklarına neden olabilir.
- Hasar görmüş tükürük bezlerinin tedavisi için yenilikçi yaklaşımlar gereklidir.
Çalışmanın Amacı
- Fare submandibular tükürük bezine progenitör veya kök hücre sağlamak.
- Trypan mavisi solüsyonunu kullanarak hücre infüzyonunu görselleştirmek.
- Tükürük bezi yenilenmesi için potansiyel tedavileri keşfetmek.
Kullanılan Yöntemler
- Fareler üzerinde Wharton'un kanalının kanülasyonu.
- Süreci görselleştirmek için trypan mavisi solüsyonunun infüzyonu.
- McGill Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi'nden onay alma.
- Kanada Hayvan Bakım Konseyi yönergelerine uyma.
Ana Bulgular
- Kanülasyon tekniği, tükürük bezine infüzyonları etkili bir şekilde sağlar.
- Trypan mavisi solüsyonu, infüzyon sürecini başarılı bir şekilde görselleştirir.
- Bu yöntem, gelecekteki klinik uygulamalar için umut vericidir.
- Tükürük bezi fonksiyon bozukluğunda yenileyici tedaviler için potansiyel.
Sonuçlar
- Açıklanan protokol, tükürük bezi infüzyonu için güvenilir bir yöntemdir.
- Bez yenilenmesi için hücre tedavisi araştırmalarına yeni yollar açar.
- Klinik uygulamaları keşfetmek için daha fazla çalışma gerekmektedir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Direct cannulation of the mouse submandibular salivary gland via Wharton's duct enables precise delivery of cells or agents, supporting regenerative medicine research for glandular hypofunction. This technique provides a robust preclinical model for evaluating targeted therapies and gene transfer strategies in salivary gland disorders. Its reproducibility and visualization capabilities enhance predictive confidence at the early discovery and translational interface.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of therapeutic hypotheses for glandular regeneration using direct cell or agent delivery.
- Supports biological de-risking by allowing functional assessment of candidate interventions in a controlled system.
- Facilitates predictive confidence in target engagement and mechanistic studies for salivary gland repair.
Screening & Assay Development
- Provides a validated in vivo system for evaluating delivery efficiency and retention of infused agents.
- Standardizes infusion protocols, supporting reproducibility and quantitative assessment of glandular uptake.
- Enables screening of candidate cell therapies or gene vectors for functional restoration potential.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant models of salivary gland hypofunction, supporting translational biomarker development.
- Ensures continuity from discovery through preclinical validation of regenerative strategies.
- De-risks advancement decisions by providing direct evidence of delivery and localization in target tissue.
Pipeline & Workflow Integration
This cannulation method integrates into the early discovery-to-preclinical continuum for regenerative and gene therapy research targeting salivary gland dysfunction.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing for cell-based and gene transfer interventions in a physiologically relevant model.
- Screening: Delivers reproducible, quantitative readouts of agent localization and retention in the gland.
- Analytics: Enables visual and quantitative confirmation of successful infusion, supporting comparative studies.
- Translational Research: Bridges preclinical validation with disease-relevant endpoints for salivary gland restoration.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable platform for evaluating diverse regenerative and gene therapy modalities.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in regenerative therapy development.
- Operational Value: Standardizes delivery and assessment protocols for reproducible in vivo studies.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions and prioritizes candidates with demonstrated delivery and retention.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted advancement of regenerative and gene therapy programs targeting glandular dysfunction.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical cannulation and animal handling.
- Needs access to specialized syringes, needles, and visualization dyes for infusion confirmation.
- Demands cross-team standardization of infusion protocols and assessment criteria.
- Adaptation may be needed for different gland types or animal models.
- Practical limitations include technical variability and the need for post-infusion tissue validation.
