JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 7:32 dk. • July 8th, 2025
Hastalıkla ilişkili bir protein biyobelirtecini tespit etmek için bir immünoassay plakası alın.
Plaka, boyuta dayalı protein ayrımı için gerekli olan önceden doldurulmuş ayırma ve istifleme matrislerini içerir.
Proteinleri ve immünoassay reaktiflerini farklı plaka kuyucuklarına yükleyin.
Çalıştırmayı bir CEI analizörü içinde başlatın. Analizördeki kılcal kartuş, her bir kılcal damar içinde bir jel oluşturmak için matrisleri aspire eder.
Kılcal damar daha sonra proteinleri aspire eder. Elektroforez sırasında, proteinler moleküler ağırlıklarına göre göç eder ve ayrılır.
Analizör, kılcal damardaki proteinleri hareketsiz hale getiren UV ışığı verir.
Yıkama tamponu, matrisleri ve bağlanmamış proteinleri uzaklaştırır. Engelleme arabelleği daha sonra içeri akar ve spesifik olmayan etkileşim sitelerini engeller.
Analizör, biyobelirteçlere bağlanan birincil antikorları, ardından birincil antikorlarla etkileşime giren peroksidaz konjuge ikincil antikorları ekler.
Yıkayın ve ardından kemilüminesans substratını ekleyin. Peroksidaz, substratı oksitleyerek lüminesans yayar.
Lüminesans yoğunluğunu ölçün ve biyobelirteç tespiti için protein standardıyla karşılaştırın.
ALS hastalarından ve sağlıklı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin