Stretch Bağlı Atriyal Fibrilasyon Koyun Modelinde Yüksek Çözünürlüklü Endokardial ve Epikardiyal Optik Haritalama

Bu protokol, gerilmeye bağlı atriyal fibrilasyonun altında yatan mekanizmaları anlamak için yüksek uzamsal ve zamansal çözünürlüklü optik haritalama kullanır. Bu, önce bir koyun kalbinin açıklanması ve aort yoluyla dolaşımdaki oksijenli tiro çözeltisi ile bir LAN endorf füzyon sistemine bağlanmasıyla gerçekleştirilir. Atriyal transseptal ponksiyon, intra atriyal basıncı kontrol etmek için kullanılan inferior vena kava dışındaki tüm ven deliklerini kapatmak için kullanılır.

Daha sonra sürekli atriyal gerilme altında, sol atriyal apendiksin üstünde bulunan bir elektrottan burst pacing kullanılarak kalıcı bir atriyal fibrilasyon uygulanır. Son adım, lazer aydınlatma, CCD kameralar ve bipolar elektrotlar kullanarak sol atriyal apendiks ve arka sol atriyumun epikardiyal ve endokardiyal yüzeylerini optik ve elektriksel olarak haritalamaktır. Sonuçlar, posterior sol atriyumdan sol atriyal apendiks'e ve sağ atriyuma kadar baskın frekans gradyanlarını göstermektedir.

Ek olarak, en yüksek frekans alanında dönme merkezlerine sahip ara sıra uzun ömürlü rotorlar tanımlanır. Bu tekniğin, insan elektrofizyolojik çalışmalarında geleneksel olarak kullanılan geleneksel bir elektriksel haritalama gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, sol atriyumun optik epikardiyal ve endokardiyal haritalamasının, atriyal fibrilasyonu sürdüren yüksek rotor frekansına sahip bölgeler de dahil olmak üzere çeşitli bölgelerdeki atriyal fibrilasyon dalgalarının izlenmesine izin veren geniş bir alanda yüksek zamansal ve uzamsal çözünürlük sağlamasıdır. Bu yöntem, kardiyak elektrofizyoloji ve karmaşık kardiyak aritmiler alanında, klinik uygulamada en sık görülen sürekli aritminin sürdürülmesinin altında yatan özel zamansal aktivasyon paternlerinin neler olduğu gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.

Bu tekniğin kullanılmasının sonuçları, mekanizmalarının daha iyi anlaşılmasına dayalı olarak atriyal fibrilasyonu önlemek veya sonlandırmak için terapötik olasılıklara doğru uzanır. Genel olarak, bu tekniğe yeni olan kişiler, tüm adımları makul bir süre içinde sorunsuz bir şekilde gerçekleştirmek için mücadele edeceklerdir. İzole edildikleri yaklaşık dört saat civarında yalnızca sınırlı bir süre olduğu fark edilmelidir.

Kalp, aritmilerin optik haritalaması için uygun koşullarda hatırlatır. Bu, elektriksel ve optik haritalama sistemini kurmak için teknik becerilerle birlikte atriyal streç modelini kurmak için belirli cerrahi beceriler gerektirir. Heparin uyguladıktan ve 35 ila 40 kilogramlık bir koyunu propofol ve Pentobarbital ile uyuşturduktan sonra, kalbini çıkarmak için bir torakotomi kullanın.

Diseke edilen kalbi, pH'ı 7.4 olan dolaşımdaki oksijenli tyro çözeltisi ile bir LAN perfüzyon sistemine bağlayın, sabit akış hızını dakikada 240 ila 270 mililitre arasında ayarlayın ve sıcaklığı 35.5 ila 37.5 santigrat derece arasında tutun. Perfüze edilmiş kalbin her iki kulakçığındaki intrakaviter basıncı eşitleyerek başlayın. Atriyal transseptal ponksiyon kullanarak, inferior vena kavoyu bir çıkış tüpü ile kanüle edin.

Ardından, açık uçlu çıkış kanülünün kulakçık üzerindeki yüksekliğini değiştirerek intra atriyal basıncı ayarlayın. Şimdi koroner sinüs, superior vena kava ve dört pulmoner ven dahil olmak üzere tüm damar deliklerini kapatın. Pulmoner venleri kapatırken, iki distal elektrottan gelen bipolar sinyalleri bir diferansiyel amplifikatör aracılığıyla kaydetmek için her birine kateterler yerleştirin.

Daha sonra, kardiyak miyositlerin kasılmasının neden olduğu doku hareketini azaltmak için, perfüzyona 10 mikromolar BLE statini ekleyin. Kanülün tabanındaki dijital bir sensör kullanarak basıncı izleyin. Deney boyunca 12 santimetre su sabit basıncını korumak için çıkış yüksekliğini sürekli olarak ayarlayın.

Son olarak, bipolar elektrotlar sol atriyal apendiksin çatısına ve sağ atriyal apendiksin üstüne yerleştirilir. Şimdi optik haritalama için hazırlanın. Yüksek çözünürlüklü yüksek hızlı bir CCD kamerayı sol atriyumsuz duvar yüzeyinin yaklaşık 14 santimetre karesine odaklayarak başlayın.

Ardından bölgeyi aydınlatmak için bir lazer ışık kaynağı konumlandırın. Şimdi, sol ventrikülün ön duvarından doğrudan bir görüş alanı elde etmek için mitral kapak boyunca 10 milimetre çapında çift kanallı sert bir boroskop tanıtın. Dört pulmoner veni ve atriyal septal pulmoner demeti görselleştirmek için boroskopu arka sol atriyumun endokardiyal yüzeyine odaklayın.

Şimdi, 0,2 inç çekirdek çapına sahip bir sıvı ışık kılavuzu kullanarak boreskopu bir mercek adaptörü aracılığıyla ikinci bir CCD kameraya deniz üzerinden monte edin. Boroskopun uyarma kanalına bir lazer yerleştirin. Her iki CCD kameradan gelen kaydı senkronize edin ve bunları, eşzamanlı bipolar kayıtları daha da tetikleyecek kare bir TTL darbesi sağlayacak şekilde yapılandırın.

Sistemi optik kayda hazırlamak için kalbe beş ila 10 mililitre dif four andep enjekte edin ve optik haritalama kayıtlarına başlamadan önce 10 dakika bekleyin. D four ANEP PS, 532 nanometre lazer uyarımı üzerine voltaja duyarlı floresan yayar. Bu nedenle, eklendikten sonra, sürekli atriyal gerilme altında atriyal fibrilasyonu indüklemek için hemen atriyal fibrilasyon kayıtlarına devam edin, elektrotu üste, atriyal fibrilasyon sırasında patlama hızı için LAA'yı yerleştirin.

Her iki kameradan aynı anda iki dakikalık aralıklarla beş saniyelik filmler kaydedin. Toplanan ham verilerle 50 dakikalık bir süre boyunca atriyal fibrilasyon kaydına devam edin, bipolar sinyallere üç hertz'de yüksek geçiren bir filtre ve 35 hertz'de düşük geçiren bir filtre uygulayın. Şimdi hem elektriksel hem de optik sinyalleri analiz etmek için, her ikisini de bir FFT algoritması kullanarak dönüştürün.

Son olarak, yüksek aktivasyon oranlarına sahip bölgeleri belirlemek ve frekans gradyanları üretmek için, oluşturulan faz filmlerini kullanarak her optik filmden baskın frekans haritaları oluşturun Hilbert dönüşümü ile üç aktivasyon modeli sınıfı tanımlanabilir. Bir rotor modeli, birden fazla dönüş için süren bir tekillik noktasına doğru birleşen fazların varlığı ile tanımlanır. Atılım modeli, görüş alanında görünen ve hedef benzeri bir desende dışa doğru yayılan bir dalga cephesi olarak tanımlanır.

Uzay-zamansal olarak organize edilmiş periyodik dalgalar, aynı konumdan benzer yönde ve dalgalar arası aralıkta ortaya çıkan en az dört ardışık periyodik dalga olarak tanımlanır. Bu temsili atriyal fibrilasyon epizodu sırasında, en yüksek baskın frekans posterior sol atriyumun sağ inferior pulmoner veninde lokalize idi. PLA'da yüksek frekans kaynaklarının varlığı, proksimal insan atriyal fibrilasyonunda ablatif prosedürler sırasında gözlenen soldan sağa baskın frekans gradyanları ile tutarlıdır.

Daha fazla niceleme, en yüksek baskın frekansların en yaygın aktivasyon modeli ile uzamsal korelasyonuna izin verir. Bazen, en yüksek frekans alanında lokalize edilmiş uzun ömürlü rotorları tanımlamak mümkündür. Bazı durumlarda, bir rotorun 3B eşdeğeri olan bir kaydırma dalgası tanımlanır, çünkü kaydırma dalgası kararlı dönme merkezi haritalama alanının yüzeyine dik kalır.

Bu rotor, PLA'nın endokardından LAA'ya doğru eşzamanlı fibriler iletim ile kaydedildi. Veriler, PLA ve LAA arasında sırasıyla dokuz ve 6.4 hertz'de bir frekans gradyanı ile ilişkilidir. Rotorlar genellikle PLA'da LAA'dan daha sıktır, bu da PLA'ya yeniden girişin aritminin korunmasında önemli bir rolü olduğunu düşündürür.

Cerrahi ve teknik yöntemlere hakim olduktan sonra. Bu deney iki, üç saat içinde tamamlanabilir. Başarılı bir deney için birkaç önemli nokta vardır.

İlk olarak, havanın sert koroner sisteme girmesini önlemek çok önemlidir. İkincisi, tüm damarları, yapaylıkları tanımlamak ve ardından düzgün bir şekilde kapatmak önemlidir. Üçüncüsü, en az miktarda hareket ve kuplör floresan kalıbı kullanmak ve uyarma ışığına maruz kalmayı mümkün olduğunca azaltmak önemlidir.

Burada gösterilen endokardiyal epikardiyal haritalama yaklaşımının geliştirilmesi, araştırmacıların dalga yayılımının dinamiklerini eskisinden daha ayrıntılı olarak ve karmaşık kardiyak aritmilerin son derece ilgili hayvan modellerinde keşfetmelerinin yolunu açmaktadır.