RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/3108-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Beyin tümörlerinin radyoterapi yönetimi kaynaklanan bilişsel bozukluk yaşam kalitesini olumsuz etkileyen bir klinik inatçı bir durumu temsil eder. Eleştirel radyasyona bağlı bilişsel azaltır iyileştirmede için potansiyel müdahaleleri değerlendirmek için yeteneği sonuçta biliş sıkı kantitatif değerlendirmeler taahhüt yeteneğine bağlıdır.
Bu prosedürün genel amacı, kraniyal ışınlamanın neden olduğu davranışsal ve bilişsel değişiklikleri ölçmektir. İlk adım, yeni yer tanıma görevini kullanarak hipokampal tabanlı uzamsal tanıma belleğini test etmektir. Daha sonra, kaygı düzeyleri, hipokampus ve amigdalaya bağımlı bağlamsal adil koşullandırma görevi kullanılarak, yükseltilmiş artı labirent görevi, korkuya dayalı bellek oluşumu kullanılarak değerlendirilir ve daha sonra amigdalaya bağımlı sıraya alınmış korku koşullandırma görevi ölçülür.
Son adım, uzamsal öğrenmeyi, uzamsal hafızayı ve tersine öğrenme yeteneğini değerlendirmek için Maurice Water Maze görevini uygulamaktır. Sonuç olarak, bu protokol ruh hali, uzamsal ve uzamsal olmayan öğrenme ve hafızadaki değişikliklerin yanı sıra kraniyal ışınlamanın neden olduğu herhangi bir duyusal motor bozulmasını tespit eder. Bu yöntem, kraniyal ışınlamanın davranış ve biliş üzerindeki etkileri hakkında fikir verebilir.
Ayrıca, kemoterapi beyin veya kemoterapiye bağlı öğrenme ve hafıza bozuklukları gibi diğer tedavilerin istenmeyen bir yan etkisi olarak bilişin bozulduğu diğer durumlarda da kullanılabilir. Bu yönteme yeni olan kişiler, ekipmanı kurmanın ve optimize etmenin zaman alıcı doğası nedeniyle mücadele edeceklerdir. Deneysel prosedürler sıkı bir şekilde kontrol edilmezse bulguların yorumlanması zor olabilir ve verilerdeki varyasyon, kontrol ve deney grupları arasındaki farkları tespit etmeyi zorlaştırır.
Bu metodolojilerin görsel olarak gösterilmesi kritik öneme sahiptir, bu nedenle okuyucu, organizasyonda veya bilişsel testlerin yürütüldüğü deney odalarında yer alan incelikleri ve kullanılan özel prosedürleri takdir edebilir. Hayvanların tutarlı bir şekilde ele alınmasını sağlamak için, test ortamını hazırlayarak alıştırma aşamasına başlayın, iki özdeş plastik bloğu %70 etanol ile iyice temizleyin ve bunları arena içinde belirli konumlara yerleştirin. Hayvanı arenanın ortasına yerleştirin ve özgürce keşfetmesine izin verin.
Beş dakika boyunca, keşif davranışları puanlanır. Otomatik bir izleme sistemi kullanan keşif, bir hayvanın burnunun dört santimetrelik bir yarıçap içinde olması ve bloklara doğru yönlendirilmesi olarak tanımlanır. Süre dolduğunda, hayvanı beş dakika daha bir tutma kafesine alın.
Bu süre zarfında test alanını %70 etanol ile temizleyin. Blokların özdeş bir kopyasını, alışma aşamasında olduğu gibi aynı uzamsal konuma ve birini yeni bir uzamsal konuma ekleyin. Beş dakikalık gecikme aralığından sonra, hayvanı beş dakikalık bir test aşaması için test alanlarına yeniden sokun ve üç dakika boyunca serbestçe keşfetmelerine izin verin.
Tanıma aşamasındaki blokların mekansal düzenlemesi hatırlanırsa, sıçan yeni mekansal konumdaki bloğu keşfetmek için daha fazla zaman harcayacaktır. Ertesi gün, hayvanlar bir kez daha arenaya geri getirilir. 24 saatlik bir test aşaması için, yine, bir blok tanıdık bir konumda kalırken, diğeri bir romanda kalır.
Birincisi, hayvanı arenanın ortasına yerleştirin ve üç dakika boyunca keşif kaydedin. Yükseltilmiş artı labirent, kemirgenlerde kaygı düzeylerini ölçer. Testten önce labirentin iyice temizlendiğinden emin olun.
Başlamak için, hayvanı labirentin orta kısmına, açık kolu deneyciden uzağa bakacak şekilde yerleştirin, hayvanın beş dakika boyunca keşfetmesine izin verin. Giriş sayısı ve açık ve kapalı kollarda geçirilen süre, otomatik izleme yazılımı kullanılarak izlenir. Labirentten bir sıçan düşerse, hızlı bir şekilde açık bir kola geri yerleştirin ve olayı kaydedin.
Ayrıca, olası nedenlerle birlikte herhangi bir donma davranışını da not edin. Korku koşullandırması, hayvanların daha önce nötr bir uyarandan korkmayı öğrendikleri davranışsal bir paradigmadır. İlk gün zararlı bir uyaranla eşleştirerek, hayvanı iyice temizlenmiş bir odaya yerleştirin.
Üç aşamadan oluşan eğitim denemesine başlayın. Birincisi, eğitim aşaması sırasında herhangi bir şok veya ton uygulanmadığında beş dakikalık bir başlangıç aşamasıdır, beş dakikalık bir süre boyunca birden fazla ton şoku eşleşmesi sunulur. Son olarak, eğitim sonrası aşamada, hayvana beş dakika daha verilir.
Bir şok veya tonlama olmadığında, her bir hayvanın donmak için harcadığı sürenin yüzdesi, başlangıç aşamasının son 60 saniyesinden ve eğitim sonrası aşamanın son 60 saniyesinden ölçülür. 24 saat sonra, hayvanı beş dakikalık bir bağlamsal test için odaya geri koyun ve testten bir saat sonra donmak için harcanan sürenin yüzdesini kaydedin. Tanıdık bağlamda, ızgara zeminini çıkarın, odanın dışına paneller ekleyin ve kokulu ev temizleyicisi ile temizleyin.
İşaretli korku koşullanmasını test etmek için, hayvanı yeni bağlama yerleştirin ve daha önce zararlı uyaranla eşleştirilmiş tonun varlığında ve yokluğunda donma davranışını kaydedin. Morris Su Labirenti, büyük bir opak su havuzunda batık bir kaçış platformunu bulmak için distal ipuçlarının kullanılmasını gerektiren bir uzamsal öğrenme testidir, görev sekiz gün boyunca uygulanır ve kuyruk testi ve edinim olmak üzere dört aşamadan oluşur. Aşama 24 saatlik prob testi ve tersine öğrenme testi.
Kuyruğa alınmış teste başlamak için, kaçış konumunun hayvan tarafından görülebilmesi için platformun ortasına belirgin bir siyah beyaz bayrak yerleştirin. Her CUD test denemesi için, hayvanı havuzun çevresinde önceden belirlenmiş farklı bir başlangıç konumuna yerleştirin, platformu farklı bir çeyreğe taşıyın. Dört denemenin her biri için, hayvanın kaçış platformunu bulması için 30 saniye bekleyin.
Maksimum süreye ulaşılırsa, hayvanları oraya elle yönlendirin. Hayvanı ısıtılmış bir kafese koymadan önce 20 saniye platformda kalmasına izin verin. Ertesi gün, art arda beş gün boyunca günde dört denemeden oluşan satın alma aşamasına başlayın.
Bu aşamada, gizli platform aynı yerde kalır ve hayvanlar ona gitmeyi öğrenir. Distal oda ipuçlarını kullanarak, hayvanı önceden belirlenmiş farklı bir başlangıç noktasında havuza yerleştirin. Her deneme sürümü için, platformu bulmak için ortalama gecikme süresini ve yol uzunluğunu uzamsal öğrenme ölçüleri olarak kaydedin.
Hayvan maksimum 60 saniyelik yüzme süresi içinde kaçamadıysa, platforma manuel olarak yönlendirilin ve 20 saniye orada kalmasına izin verin. Son eğitim denemesinden 24 saat sonra, hayvanın platformu içermek için kullanılan kadran tercihini belirlemek için platformun çıkarıldığı 62. bir sonda denemesi yapın. Bu araştırma denemesinin ardından, platformu aynı çeyreğe geri getirin ve Tersine Öğrenme testi için üç ek edinim denemesi uygulayın.
Sekizinci günde, platformu yeni bir konuma taşıyın. Hayvanı havuza tanıtın ve platformu önceki konumunda aramak için harcanan süreyi burada yeni konumuna kıyasla ölçün. Yeni Yer Tanıma Görevinde Kontrol ve Işınlanmış Hayvanlardan elde edilen sonuçlar, alışma aşamasında iki konumun eşit olarak araştırıldığını göstermiştir.
Bununla birlikte, kontrol hayvanları, ışınlanmış hayvanlar yapmazken, beş dakika ve 24 saatlik gecikme aralıklarını takiben yeni uzamsal konum için net bir tercih gösterdi. Yükseltilmiş artı labirentte, kontrol ve ışınlanmış hayvanlar, açık kolları keşfetmek için şans eseri beklenenden daha az zaman harcadılar. Odaya ilk maruz kalma sırasındaki donma yüzdesi, ertesi gün eğitim sonrası döneme kıyasla çok düşüktü.
Donma davranışı, tanıdık bağlam içinde hala artmıştır, ancak yeni bir bağlama yerleştirildiğinde ışınlanmış hayvanlarda çok daha az olmasına rağmen, donma davranışı temel seviyelere geri döndü, ancak Morris Su Labirenti'ndeki tonun sunumuyla tekrar yükseltildi. Görev Kontrol Hayvanları, ışınlanmış hayvanlara kıyasla ardışık denemelerde Kaçış platformunu daha hızlı bir şekilde buldu. Işınlanmış hayvanlar ayrıca bir sonda denemesinde platforma daha fazla zaman ve daha uzun bir yol aldı, 24 saat sonra Tersine Öğrenme Testi sırasında, platformun konumu değiştirildiğinde, normal hayvanlar yavaş yavaş eski kadranı aramayı bırakır ve yeni platform konumunu öğrenirken, ışınlanmış hayvanlar bunu yapmaz.
Bu görevleri yerine getirirken, veriler analiz edilmeden önce ele alınması gereken ortaya çıkan herhangi bir anormal olay veya davranışın yanı sıra ortaya çıkan izleme sorunlarıyla ilgili ayrıntılı notlar almak önemlidir. Deney hayvanlarıyla çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürleri gerçekleştirirken her zaman kişisel koruyucu ekipman kullanımı gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın. Hayvanların güvenli ve etik kullanımı için kurumsal onay almak ve kurumsal ve federal yönergeleri takip etmek de çok önemlidir.
Related Videos
11:24
Related Videos
14.9K Views
11:45
Related Videos
12.4K Views
09:11
Related Videos
22.4K Views
07:27
Related Videos
9K Views
06:23
Related Videos
33.1K Views
07:55
Related Videos
11.8K Views
09:58
Related Videos
7.8K Views
07:30
Related Videos
3.2K Views
07:57
Related Videos
3K Views
08:02
Related Videos
16.7K Views