Normotermik Kardiyak Arrest ve Kardiyopulmoner Resusitasyon: İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Perioperatif ve yoğun bakım ile ilgili akut böbrek hasarı için güçlü bir model sundu. Neredeyse, klinik AKI, histolojik ve fonksiyonel değişiklikleri çoğaltmak mümkündür kardiyak arrest ile indüklenen tüm vücut hipoperfüzyon kullanma.

Bu prosedürün genel amacı, müdahalelerin bu önemli ve yaygın hastalık durumu üzerindeki etkisini değerlendirmek için Norm Tematik global İskemi reperfüzyonunu modellemektir. İlk olarak, anestezi uygulanmış aletli bir fare, kardiyak arrest ve resüsitasyon veya ca CPR için hazırlanır. Sonraki kalp durması indüklenir.

Daha sonra fare, göğüs kompresyonları ve epinefrin kullanılarak kalp durmasından yeniden canlandırılır. Sonuç olarak, önemli organ hasarını değerlendirmek için kan üre, nitrojen, serum kreatinin, Alan Transferazlar, aspartattan minör transferazlara ve histoloji gibi fonksiyonel testler yapılabilir. Nötrofil jelatin ilişkili lipo callin gibi erken biyobelirteçlerin varlığı da ölçülebilir.

Son olarak, resüsitasyon sonucu burada değerlendirilir ve 24 saatlik trans kardiyo, perfüzyon ve renal hasat olarak gösterilir. Bu modelin, daha büyük kardiyak arrest ve kardiyopulmoner resüsitasyon hayvan modelleri gibi diğer yöntemlerimize göre en büyük avantajı, laboratuvar farelerinin düşük maliyetli, her yerde bulunması ve birçok transgenik suşta mevcut olmasıdır. Başlamak için, anestezi uygulanmış bir farenin gözlerini yağlayın ve hayvanı bir ısıtma yastığı üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin.

Daha sonra hayvanın ekstremitelerini bant kullanarak hareketsiz hale getirin, arka gözenekleri nötr bir konuma getirin, ancak göğüs kompresyonları sırasında tam göğüs duvarı gezisine izin vermek için dört gözeneği göğüs duvarına mümkün olduğunca yakın sabitleyin. Daha sonra yağlayın ve bir rektal sıcaklık probu yerleştirin. 22 gauge Teflon kateter ve açılı bir introdüser kullanarak trakeayı entübe edin.

Tüpün endotrakeal pozisyonu, pozitif veya negatif basınç kullanılarak doğrulanabilir. Pozitif basınç kullanılarak, tüpe küçük bir hacimde hava zorlanır. Tüp yemek borusu yerine trake yerleştirilmişse, göğüs negatif basınç kullanılarak simetrik olarak yükselir.

Endotrakeal tüpe bağlı olan şeffaf boruya az miktarda sıvı yerleştirilir. Farenin spontan solunum çabası, sıvıyı tüp içinde hareket ettirir. Endotrakeal kateteri kesici kısma bir tel halkası ile sabitleyin ve göğüs kompresyonları sırasında başın hareketsiz kalmasını sağlamak için kesici diş üzerinde hafif bir gerginlik sağlayın.

Fareyi kemirgen ventilatörü 140 mikrolitreye, dakikada 150 nefese ayarlanmış olarak mekanik olarak havalandırın. Steril teknik ve ameliyat mikroskobu kullanarak, juguler ven içine önceden yıkanmış bir PE 10 kateteri yerleştirin. PE 10 kateterini siyanoakrilat cerrahi yapıştırıcı ile cilt kapanışına sabitleyin.

Her eksenin yakınında bir tane ve karnın sol alt kadranında bir tane olmak üzere üç deri altı EKG elektrotu yerleştirin. Tüm kabloların çalışma yüzeyine sağlam olduğundan emin olun. Sinyal geçişlerini en aza indirin ve sinyal yolu içindeki izolatörleri en aza indirin.

Bağlandıktan sonra, monitördeki EKG sinyalini optimize edin. Farenin norm temalı olduğundan emin olun. 40 mikrolitre oda sıcaklığında, 0.5 molar potasyum klorürü intravenöz olarak uygulayın ve EKG'deki izoelektrik izlemeyi gözlemleyin.

Tutuklama zamanlayıcısını başlatın. Ardından, ventilatörün bağlantısını kesin ve anestezik buharı durdurun. Isıtma yastığını ve elektronik gürültü üreten ve EKG izlemeyi engelleyebilecek diğer ekipmanları kapatın.

Farenin üzerine yalıtkan bir örtü yerleştirin. Kardiyak arrest sırasında sıcaklığı her dakika kaydedin. Gerekirse, çekirdek sıcaklığını normal tematik aralığa getirmek için bir ısıtma lambası kullanın.

Yedi dakika 30 saniye kalp durmasından sonra ventilatörü yeniden bağlayın ve hızı dakikada 180 nefese yükseltin. Spontan dolaşımı geri döndürmek için göğüs kompresyonları yapmak bu modelin en zor kısmıdır. Fare oldukça küçüktür, bu nedenle konumlandırma ve basınç çok önemlidir.

Çok fazla basınç, akciğer ve karaciğer yaralanmasına neden olur ve sağkalımı azaltır. Çok az basınç, spontan dolaşımın geri dönme olasılığını azaltacaktır. Göğüs, ANA sırasının üçte birinden yarısına kadar sıkıştırılmalıdır.

Kompresyonlar arasında posterior mesafeye ve tam geri tepmeye izin verilmelidir. Bu modelde sağkalımın sağlanamaması neredeyse her zaman suboptimal CPR'den kaynaklanır Sekiz dakikada. Göğüs kompresyonlarını dakikada 300 vuruşta başlatın.

Göğüs kompresyonu işaret parmağı ile yapılmalıdır. Ksifoid işleminin beş milimetre üzerinde ve orta hattın biraz solunda infüze edilir. 0.5 mililitre epinefrin mililitre başına 15 mikrograma seyreltilir.

CPR'nin ilk 30 saniyesinde, spontan dolaşım veya ROSC'nin geri dönüşü için EKG'yi dikkatlice izleyin, ilk iki dakika içinde sık erken ventriküler kasılmalar ve EKG ekseninde değişiklikler gözlenir. ROSC ve hemen hemen her zaman sabit sinüs taşikardisi ile çözülür. İki dakikada, toplam resüsitasyon süresini ve epinefrin dozunu kaydedin.

Sıcaklığı 10 dakika boyunca her dakika kaydedin. R-O-S-C-E-K-G uçları çıkarılabilir Spontan solunum başladığında, genellikle ROSC'den 12 ila 50 dakika sonra, juguler kateteri çıkarın ve hemostaz elde etmek için doğrudan basınç kullanın, spontan solunum hızı dakikada 60'tan fazla olduğunda trakeayı ekstübe edin. Son olarak, fareyi işlemden sonraki ilk iki saat boyunca 37 santigrat dereceye ayarlanmış sıcaklık kontrollü bir yüzeye veya gerekirse daha uzun süre kurtarma kafesine yerleştirin Anesteziden tam iyileşme için, kafes C-A-C-P-R fareyi uyuşturduktan 24 saat sonra standart ameliyat sonrası barınma koşullarına taşınabilir ve önce salin ve ardından formalin ile trans kardiyo perfüzyon gerçekleştirin Fiksasyonu takiben, Böbrek fiksasyonunun yeterliliğini kontrol etmek için bir laparotomi yapılır.

Yeterince perfüze edilmiş ve sabitlenmiş böbrekler iyi beyazlatılmıştır. Kardiyak arrest anında perfüzyon kaybına neden olur. Burada ortalama arteriyel basınç veya harita olarak temsil edilen basınç.

Bu perfüzyon basıncı kaybı, gölgeli alanda kardiyak arrest süresi boyunca bölgesel renal kortikal kan akışının veya RR CBF'nin neredeyse tamamen kesilmesine neden olur. Burada görüldüğü gibi, göğüs kompresyonları ve epinefrin ile resüsitasyon haritasını normale döndürür ve resüsitasyon sonrası dönemde RR CBF giderek yükselir. Bu şekilde, işlemden 24 saat sonra kan üre azotu veya BUN serum kreatinin ve tübüler hücre ölümünün derecesinin, sahte bir prosedürle tedavi edilen hayvanlarla karşılaştırıldığında, ca CPR uygulanan hayvanlarda nasıl önemli ölçüde yüksek olduğu görülebilir, burada pan organizmal iskemik bir hakarete neden olur, karaciğer fonksiyon enzimlerinin büyük ölçüde yükselmesi ile kanıt, Alan Transferazlar veya bir LT ve minoro transferaz veya bir ST'ye aspartat, sahte muamele edilen hayvanlarla karşılaştırıldığında, CPR fareleri.

Burada, nötrofil jelatinimsi ilişkili lipo callin veya end gal'e karşı bir poliklonal antikor kullanılarak gerçekleştirilen bir western blot. Renal iskemik hasarın hassas bir göstergesi gösterilmiştir. İdrar örnekleri, A, B, C ve D olarak temsil edilen dört hayvanda C-A-C-P-R'den hemen önce ve 24 saat sonra elde edildi.

Bu şekil, ca CPR yamalı işleminden 24 saat sonra böbrek dokusunun kısa eksenli hiler bölümünün hematik, toin ve eoin boyasını göstermektedir, ancak tübüler tıkaçlı medüller ve kortiko medüller tübüllerde açık hasar, aynı hayvanda aynı bölgenin floro yeşim B lekesi görülebilir. Bu şekilde C-A-C-P-R sonrası 24 saat görülebilmektedir, floro yeşim B, nekrotik hücreleri parlak yeşile boyar ve yamalı kortiko medüller tübülin nekrozu gösterir. Bu bulgular, akut böbrek hasarı veya KI geliştiren insanlardan alınan böbrek biyopsisi bulgularına büyük ölçüde benzer ve bir KI'nin diğer hayvan modelleri tarafından üretilenlerden farklı olarak, bu prosedürü denerken, EKG sinyal gürültüsünü en aza indirmek ve optimum basınçla göğüs kompresyonları sağlamak için dinlenmeden önce fareyi dikkatlice konumlandırmayı unutmamak önemlidir.