Name: İnsan Saç köklerinin arasından Sinir Crest Kök Hücre İzolasyonu ve Kültür (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-04-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Öğrenin, insan saç köklerinden sinir kresti kök hücre izolasyonu ve kültürü için akış sitometrisi ile hücre ayırma yöntemini. Bu protokol, rejeneratif tıp araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma NIH hibe R01AR054593 ve Xu R01AR054593-S1 tarafından desteklenmektedir.

1. Doku Kültürü Plakalarının Hazırlanması <ol><li> Coat Her iyi Poly-D-Lizin (PDL) kuyunun dibine karşılamak için yeterli. Plakalar kaputu kurumasını bekleyin. </li><li> Kuyu kuruduktan sonra, steril su ile durulayın ve aspire. Plakalar kaputu kurumasını bekleyin. </li><li> Ne zaman fibronektin ile kuru kat (6 ml içinde 1 mg 'lik bir konsantrasyonda 37 ° C de bir gece Biowhittaker su içinde çözülür ki). </li><li> ŞÇUK orta ekleyin [95 ml DMEM/F12, 1 ml Penn / Strep (P / S), 1 ml N2, 2 ml B27, 100 ul merkaptoetanol (2ME, 50 mM stok), bFGF (20 ng / ml orta), IGF -1 (20 ng / orta ml) ve EGF (20 ng / ml orta)] plakaları içinde kuru önce fibronektin, </li></ol> 2. İnsan Derisi şehirlerinde Saç Folikül Hücreleri Özü <ol><li> Tecrit NCSCs arasında işlemine başlamadan önce, bir (bkz. Tablo 1) ilgili medias ve reaktifler hazırlamak gerekiyor. </li><li> Facelift prosedürleri veya fe Taze yetişkin insan saçlı derital kafa derisi doku PBS penisilin-streptomisin içeren suyla yıkandı, toplanır. </li><li> Deri daha sonra 50 ml tüp içine aktarılır ve 4 ° C de bir gece dispase (10 mg / ml) DMEM içinde inkübe edilir 37, 2-4 saat boyunca inkübasyon ° C 'de etkilidir. Deri parçaları nüfuz enzim sağlamak için en az 1 cm en fazla genişlikte olmalıdır. </li><li> Steril bir Petri kabı içine deri aktarın; cilt yüzeyine yakın saç şaft tutup sıkıca ve düzgün çekerek cilt her saç çekin. Saç köklerinin anajen (Şekil 1A) veya telojen (Şekil 1B) ya morfolojisi göstermektedir. </li><li> Periyodik sallama ile oda sıcaklığında 15-20 dakika için% 0.05 tripsin-EDTA (Invitrogen) içinde izole folikül parçaları inkübe, reaksiyonu durdurmak için% 10 FBS ile 4 ml DMEM ilave edin. Epitel tripsinize ve değişik boyut ve şekil hücreleri içeren tek bir hücre süspansiyonu elde etmek için 40 um filtre ile filtre edilir. </li><li> Dönüş5 dakika boyunca 200 x g, 1 ml PBS% 2 serumu (FBS) ihtiva eden yeniden askıya, dikkatlice süpernatan atılır. </li><li> Alternatif olarak, alınmış saç köklerinin in situ olarak saç büyümesini küreler tripsin sindirim olmaksızın kültür içinde yerleştirilebilir. </li></ol> 3. Akış Sitometrik Hücre Ayırma kullanılması Saç Folikül NCSCs İzolasyonu <ol><li> Saç folikülü tek bir hücre süspansiyonu tripsin ile sindirim ile elde edilen ve CD271 (APC-konjuge) / HNK1 (FITC-konjuge) ya da CD271 / alpha4 karanlıkta buz üzerinde 40 dakika süreyle integrin (PE ile konjuge) karşı antikorlar ile işaretlenmiştir. </li><li> Oda sıcaklığında, 200 x g'de 5 dakika boyunca santrifüjden sonra süpernatan aspire. </li><li> PBS,% 2 serum (FBS) içeren içinde süspanse hücreleri, ve sıralama önce, PI ölü hücreleri kapı eklenir. </li><li> Flow sitometri (FACS) tarafından hücre sıralama yapın. CD271 toplayın +, HNK1 + çift pozitif hücreleri veya CD271 +, alpha4 integrin + çift pozitif hücreler (Şekil 2). </li><li> Sonra sıralamaing, CD271 +, HNK1 + çift pozitif hücreleri veya CD271 +, alpha4 integrin + çift pozitif hücreler ŞÇUK ortamda ultra-düşük eki plakalar kültüre </li></ol> 4. İlköğretim NCSCs Kültürü <ol><li> Kültür ilişkisiz foliküler hücreleri veya FACS ŞÇUK ortamda ultra-düşük eki plakaları hücreleri kriteri, her gün orta değiştirin. </li><li> Mikroskop altında her gün hücre kültüründe kontrol edin. NCSCs birkaç gün ve bağışçılar (Şekil 3A) yaşına bağlı olarak kültürde 2-5 hafta içinde iyi biçimli küreler sonra yüzen küçük agregatlar oluşturması için başlayacaktır. Outgrowth çıkıntı bölge ve birkaç hafta içinde in situ olarak iyi biçimlenmiş küreler (Şekil 3B) tüm saç köklerinin ŞÇUK ortamda kültüre de birkaç gün içinde görünecektir. </li></ol> 5. NCSCs genişletilmesi <ol><li> Bir kez PBS ile hücreleri yıkayın. </li><li> Önceden ısıtılmış ekle (37 ° C, kritik) 37 accutase ve inkübe ° C 5-10 içintek bir hücreye emin Nöral kök hücre küre disosiye yapmak için periyodik sallayarak dk (ek kültürlü ŞÇUK, 37 accutase ile inkübe hücreleri için emin kıl folikülü kök hücreleri müstakil olmak için 5 dakika ° C). </li><li> Kalan çözelti accutase kaldırmak için DMEM/F12 ortamı içinde oda sıcaklığında 200 x g'de 5 dakika boyunca iki kez yıkanır ve hücrelerin santrifüj. </li><li> ŞÇUK besiyeri ile hücreleri yeniden askıya. </li><li> Kayan kültürü için, ultra-düşük eki plakaları hücrelerin koydu. Eki kültürü için, ön işlem doku kültürü kabına hücreleri koydu. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar ŞÇUK kültür ortamı besleyici hücreleri için gerek kalmadan bir farklılaşmamış bir durumda hNCSCs korumak için yeterlidir. Keratinositlerin prolifere ve yavaş yavaş orta ölmüş olmaz. Bazı küçük yuvarlak hücreler çoğalmaya başlar ve 3 ila 5 gün sonra süspansiyon küçük agrega oluşturacaktır. Bu yüzen agregalar yavaş i arttıBiz saç küreler (Şekil 3A) olarak adlandırılan n boyutu, oluşturulan üç-boyutlu küre benzeri yapılar. Kaplanmış plakalar içinde kültüre ise, NCSCs yüzeye yapışır ve herhangi küreleri oluşturmayacaktır. Ekli NCSCs süspansiyon daha hızlı büyür. Küre-şekillendirme ya da bağlı kök hücreler NCSCs işaretleri ifade eder. Tüm saç köklerinin kültürleri olduğunda, küreler çıkıntı bölgesi (Şekil 3B) karşılık gelen bölge de oluşturulur. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3194/3194fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Anajen (A) ve telojen (B), saç folikülleri çekti. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3194/3194fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2,"> Şekil 2. NCSCs FACS analizi Örnek görüntüleri Sol panel:. Hücreleri, anti-CD271 ve anti-alphe 4 integrin antikorları ile kapı vardır. Sağ panel: hücrelerinin, anti-CD271 ve anti-HNK1 antikorlar kullanılarak kapı vardır. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3194/3194fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3,. Saç küreleri Morfoloji dalgalı saç küreleri, sol panel (A) Morfoloji:. Düşük güç, sağ panelde:. Yüksek güç (B) şişkinliği bölgede, sol paneldeki in situ olarak saç kürenin Morfoloji: telojen çıkıntı bir saç küre, Sağ panel: bir anagen kıl folikülünün şişkinliği bölgede bir saç küre.

<ol><li>Cotsarelis, G., Cheng, S. Z., Dong, G., Sun, T. T., Lavker, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Existence+of+slow-cycling+limbal+epithelial+basal+cells+that+can+be+preferentially+stimulated+to+proliferate%3A+implications+on+epithelial+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Existence of slow-cycling limbal epithelial basal cells that can be preferentially stimulated to proliferate: implications on epithelial stem cells.</a> Cell. 57, 201-209 (1989).</li>
<li>Cotsarelis, G., Sun, T. T., Lavker, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-retaining+cells+reside+in+the+bulge+area+of+pilosebaceous+unit%3A+implications+for+follicular+stem+cells%2C+hair+cycle%2C+and+skin+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Label-retaining cells reside in the bulge area of pilosebaceous unit: implications for follicular stem cells, hair cycle, and skin carcinogenesis.</a> Cell. 61, 1329-1337 (1990).</li>
<li>Tanimura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hair+follicle+stem+cells+provide+a+functional+niche+for+melanocyte+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Hair follicle stem cells provide a functional niche for melanocyte stem cells.</a> Cell Stem Cell. 8, 177-187 (2011).</li>
<li>Yu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+novel+population+of+multipotent+adult+stem+cells+from+human+hair+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Isolation of a novel population of multipotent adult stem cells from human hair follicles.</a> Am. J. Pathol. 168, 1879-1888 (2006).</li>
<li>Yu, H., Kumar, S. M., Kossenkov, A. V., Showe, L., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cells+with+neural+crest+characteristics+derived+from+the+bulge+region+of+cultured+human+hair+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Invest.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Stem cells with neural crest characteristics derived from the bulge region of cultured human hair follicles.</a> J. Invest. Dermatol. 130, 1227-1236 (2010).</li>
<li>Wong, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+crest-derived+cells+with+stem+cell+features+can+be+traced+back+to+multiple+lineages+in+the+adult+skin%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Neural crest-derived cells with stem cell features can be traced back to multiple lineages in the adult skin.</a> J. Cell Biol. 175, 1005-1015 (2006).</li>
<li>Sieber-Blum, M., Grim, M., Hu, Y. F., Szeder, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pluripotent+neural+crest+stem+cells+in+the+adult+hair+follicle%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle.</a> Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).</li>
<li>Amoh, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implanted+hair+follicle+stem+cells+form+Schwann+cells+that+support+repair+of+severed+peripheral+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Implanted hair follicle stem cells form Schwann cells that support repair of severed peripheral nerves.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 17734-17738 (2005).</li>
<li>Koliatsos, V. E., Xu, L., Yan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+stem+cell+grafts+as+therapies+for+motor+neuron+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin.+Biol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Human stem cell grafts as therapies for motor neuron disease.</a> Expert Opin. Biol. Ther. 8, 137-141 (2008).</li>
<li>McKenzie, I. A., Biernaskie, J., Toma, J. G., Midha, R., Miller, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin-derived+precursors+generate+myelinating+Schwann+cells+for+the+injured+and+dysmyelinated+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Skin-derived precursors generate myelinating Schwann cells for the injured and dysmyelinated nervous system.</a> J. Neurosci. 26, 6651-6660 (2006).</li>
<li>LeDouarin, N. M., Kalcheim, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLeDouarin%2C+NM+%22The+Neural+Crest%22">The Neural Crest</a>. , Cambridge University Press. Cambridge. (1999).</li>
<li>Tumbar, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+epithelial+stem+cell+niche+in+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Defining the epithelial stem cell niche in skin.</a> Science. 303, 359-363 (2004).</li>
<li>Roh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-potentiality+of+a+new+immortalized+epithelial+stem+cell+line+derived+from+human+hair+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev.+Biol.+Anim%22%5BJournal%5D)">Multi-potentiality of a new immortalized epithelial stem cell line derived from human hair follicles.</a> In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 44, 236-244 (2008).</li>
</ol>

Biz ifşa etmek başka bir şey var.

Anlatılan hücre izolasyonu ve kültürü yöntemleri tekrarlanabilir ve sağlamdır. Biz geniş bir yaş aralığında bireylerin onlarca NCSCs yarattı. Doğru doku hasat sonrası doku işlemek için iyi olmasına rağmen, biz kafa derisi dokularıyla güvenle hücre canlılığı üzerine minimal etkisi ile gecede ulaşım için buz üzerinde medya saklanabilir bulundu. Bu antibiyotik ile kafa derisi doku tedavisi ve potansiyel mikroorganizma kontaminasyonu önlemek için saç folikülü izolasyon sırasında aseptik teknik k...

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>11965-092</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>Invitrogen</td><td>11330-32</td><td></td></tr><tr><td>Isıyla inaktive edilmiş FBS</td><td>Hyclone</td><td>SH30071.03</td><td></td></tr><tr><td>B27 takviyesi</td><td>Invitrogen</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>N2 takviyesi</td><td>Invitrogen</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>bFGF</td><td>Invitrogen</td><td>PHG0026</td><td></td></tr><tr><td>EGF</td><td>R&amp;amp;D sistemi</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>IGF-I</td><td>R&amp;amp;D sistemi</td><td>291-G1-050</td><td></td></tr><tr><td>%0,05 Trypsin/EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>25300-054</td><td></td></tr><tr><td>Dispase</td><td>Invitrogen</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin</td><td>Invitrogen</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;p class=&quot;Sizden herhangi bir kaynak metin gelmedi. Lütfen çevrilmesini istediğiniz İngilizce metni gönderin; JoVE standartlarına ve akademik Türkçe diline uygun şekilde çevirisini gerçekleştirebilirim.&quot;&gt;&lt;güçlü&gt;Tablo 1.&lt;/strong&gt;&lt;/p&gt;</td></tr></tbody></table>

İnsan saç köklerinin arasından sinir crest kök hücre İzolasyonu ve kültür

Isolation and Culture of Neural Crest Stem Cells from Human Hair Follicles

Saç köklerinin yaşam boyu büyümeye geçmesi ve saç döngüsü kök hücre çoğalması ve sükunet içeren iyi-kontrollü bir süreç olduğunu. Saç şişkinliği yetişkin kök hücreleri 1 için iyi karakterize niş. Dış kök kılıfı bu segment epitel kök hücreler 2, melanosit kök hücre 3 ve 4-7 kök hücreleri gibi nöral krest dahil kök hücreler, farklı türde bir dizi içerir. Saç köklerinin insan kök hücreleri farklı türleri için erişilebilir ve zengin bir kaynak oluşturmaktadır. Biz ve diğerleri 4,5 insan fetal ve yetişkin saç köklerinin gelen nöral krest kök hücreler (NCSCs) izole ettim. Bunlar insan kök hücreleri etiket tutucu hücreleri ve in vitro asimetrik hücre bölünmesi yoluyla kendini yenileme yeteneğine sahiptir. Onlar immatür nöral krest hücre belirteçleri değil farklılaşma işaretleri ifade eder. Bizim ekspresyon profili çalışma, fare derisi immatür nöral CRE ile benzer bir gen ekspresyon paterni paylaşmaktadır gösterdiST hücreleri. Onlar vitro klonal tek hücre kültürü sonrası, miyojenik melanositik ve nöronal hücre soylarının ortaya çıkmasına neden olabilir klonal multipotency sergilerler. Farklılaştırılmış hücreler sadece soy-spesifik belirteçler elde değil, aynı zamanda ex vivo koşullarda uygun işlevleri göstermek değildir. Buna ek olarak, bu NCSCs mezenkimal soy doğru farklılaşma potansiyeli gösteriyor. Farklılaştırılmış nöronal hücrelerin fare beyin inat ve nöronal farklılaşma işaretleri koruyabilirsiniz. Bu saç NCSCs sinir büyütme yardımcı olabilir türetilmiş folikülü ve onlar transecting omurilik yaralanması 8 takiben bu kök hücreler nakledildi farelerde motor fonksiyon geliştirmek olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, periferik sinirlerin kök hücre greftleri 9 ve ezilmiş siyatik sinirleri bitişik cilt türetilmiş prekürsör hücrelerin implantasyonu ile tamir edilmiştir remiyelinizasyon 10 sonuçlandı. Bu nedenle, saç folikülü / cilt elde NCSCs zaten r için umut verici sonuçlar göstermiştirpreklinik modellerde egenerative tedavisi. Indüklenmiş pluripotent kök (iPS) hücreleri yeniden programlayarak Somatik Hücre rejeneratif tıp için muazzam potansiyel göstermiştir. Bununla birlikte, özellikle iPS hücreleri, onkogen / virüs entegrasyon ve pluripotent kök hücrelerin potansiyel tümör gelişimini ve uzun dönemli etkisi ile hala birçok sorunları yeterince ele alınmamıştır vardır. IPS hücreleri rejeneratif ilaç için kullanılmadan önce üstesinden gelinmesi gereken çok engel hala vardır. Yetişkin kök hücreleri güvenli olduğu bilinen ve bu gibi kemik iliği nakli gibi pek çok yıl için klinik olarak kullanılmaktadır ise. Birçok hasta zaten tedavi yararlanmıştır. Otolog yetişkin kök hücreler hâlâ nakli için tercih edilen hücrelerdir. Bu nedenle, insan deri / saç köklerinin kolayca erişilebilir ve genişletilebilir erişkin kök hücrelerin rejeneratif tıp için değerli bir kaynaktır.

Bu makale, insan saç köklerinin gelen nöral krest kök hücrelerin izolasyonu ve kültür için sağlam bir protokol sunar.

İnsan Saç köklerinin arasından Sinir Crest Kök Hücre İzolasyonu ve Kültür

Kıl folikülleri yaşam boyu büyümeye devam eder ve kıl döngüsü, kök hücre proliferasyonu ile durgunluğunu (kuiesens) içeren iyi kontrol edilen bir süreçtir. Kıl bulgi (bulge), ...

Bu prosedürün genel amacı, insan saç derisi dokularından primer nöral krista kök hücrelerini veya N CSC'leri izole etmek ve kültürlemektedir. Bu işlem, öncelikle insan saç derisinin bir santimetre genişliğinde şeritler halinde kesilmesi ve disbay içeren besiyerinde inkübe edilmesiyle gerçekleştirilir. Ardından deri taze besiyerine yerleştirilir ve kıl folikülleri tıkanır.Prosedürün ikinci adımı, kıl foliküllerinin tripsin ile işlenmesi ve tek hücre süspansiyonlarının elde edilmesidir. Prosedürün son adımı, akış sitometrisi kullanılarak CD 2 71 HNK one çift pozitif ncsc'lerin seçilmesi ve kültür plaklarına ekilmesidir. Son olarak, nörosfer oluşumunu ve büyümesini incelemek için faz kontrast mikroskopisi kullanılır; bu yöntemlerin gösterimi kritiktir çünkü mikroskop altında deri ve kıl parçacıklarının diseksiyonu çok zor olduğundan, çıkarma ve izole etme aşamalarını öğrenmek güçtür.Kök hücre kültürü hazırlığı için, altı kuyucuklu bir plakanın her kuyucuğunun tabanını poli-D-lisin ile kaplayın ve plakaların çeker ocakta kurumasını bekleyin. Kuyucuklar kuruduğunda, steril su ile durulayıp aspire edin ve ardından kuyucukların tekrar kurumasını bekleyin. Plakaları 0,17 mg/mL konsantrasyo

isolation-culture-neural-crest-stem-cells-from-human-hair

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Burada fare epidermal nöral krest kök hücreleri (EPI-NCSC) izole etmek için yöntem gösteriyor. Tekniği içerir mikro diseksiyon, bıyık kıl follikülleri, şişlik izole ve doku kültürü içine placeing. 4 gün - 3 gün içinde EPI-NCSC alt tabaka üzerine çıkıntı eksplantlar göç etmeye başlar.

Fare Epidermal Sinir Crest Kök Hücre (EPI-NCSC) Kültürler

In vitro nöral krest kök hücreler (NCSC) yetiştirmek için özel bir orta (NCSCM) gereklidir. NCSCM önemli bir parçası civciv embriyo ekstraktı (CEE). Biz burada, izolasyon, maserasyon, santrifüj ve filtrasyon işlemleri gibi ayrıntıları da dahil olmak üzere saf ve kaliteli CEE maksimize miktarda üretmek için doğru teknikleri anlatıyoruz.

Civciv Embriyo Özü murin Sinir Crest Kök Hücre Yetiştiriciliği Üretimi

Insan derisi canlı yetişkin epitelyal kök hücreleri izole bir hızlı, sağlam bir şekilde açıklanmıştır. Bu yöntem cilt kollajen matriks enzimatik sindirim, saç folikülleri ve hücre kültürü için, tek bir hücre süspansiyonları ya da doku parçalarının izolasyonu koparma kullanır.

İnsan Cilt Yetişkin Epitel Kök Hücre İzolasyonu ve Kültür

Atılır insan fetal kortikal doku sinir kök hücrelerin izolasyonu ve kültürü üzerinde basit ve güvenilir bir yöntem açıklanmıştır. Bilinen insan nörolojik bozukluklar türetilen Kültürler farmakolojik etkinliğini değerlendirmek için bir platform sağlamak gibi, hücresel ve moleküler patolojik süreçleri karakterizasyonu için kullanılabilir.

Atılan İnsan Fetal Kortikal Doku Sinir Kök Hücre Üretimi

Nöral tüpten embriyonik nöral krest izolasyonu kullanımını...

Embriyonik Mürin Nöral Tüp çıkan sinirsel Crest Hücre İzolasyonu ve Kültür

Bu video, insan dermis dokularından Schwann hücrelerini izole etmek ve kültürlemek için bir protokol göstermektedir. İnsan dermisi, fibroblastlar ve Schwann hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre tipleri içerir. İzolasyondan sonra, hücreler çoğalan fibroblastları ortadan kaldırmak için bir antimitotik ajan ile muamele edilir ve bu da saf bir Schwann hücresi kültürü ile sonuçlanır.

İnsan Dermisinden Primer Schwann Hücrelerinin İzolasyonu ve Kültürü

Bu video, civciv embriyolarının orta beyin bölgesinden kraniyal nöral kıvrımları izole etmek için bir tekniği göstermektedir. Nöral kıvrımların ayrıntılı bir diseksiyon sürecini, bunların yerleştirilmesini ve fibronektin kaplı lameller üzerine bağlanmasını ve ardından nöral kıvrımlardan nöral krest hücre göçünün gözlemlenmesini sunar.

Nöral krest hücre kültürü için bir civciv embriyosundan kraniyal nöral kıvrımların izole edilmesi

Birincil insan fibroblast ikinci naif multipotent ten türetilmiş öncü (SKP) hücreleri izole etmek için bir yöntem sunulmaktadır. Biz fibroblast kültürleri elde edilen bu SKPS insan deri biyopsisi doğrudan elde benzeyen kök hücre özelliklerini paylaşmak olduğunu göstermektedir. Bu hücreler, örneğin Oct4 ve Nanog olarak multipotent işaretleri ek olarak nöral tepe işaretleyici, Nestin, ifade eder.

İlköğretim İnsan fibroblast Kültürler gelen naif Erişkin Kök Hücre İzolasyon

Insan pluripotent kök hücreleri (hPSC) türetilmiş nöral krest (NC) hücreler, insan gelişimi ve hastalık modelleme ve hücre replasman tedavileri için büyük bir potansiyele sahiptir. Burada, şu anda yaygın olarak kullanılan bir besleyici ücretsiz...

İnsan Pluripotent dan Sinir Crest Progenitör Hücreler besleyici ücretsiz Derivasyon Kök Hücre

Bu protokol, öncelikle hücre göçü çalışmaları için fare modellerinden kranial nöral krest hücrelerinin diseksiyon ve kültürünü açıklar. Kullanılan canlı görüntüleme tekniklerini ve hız ve hücre şekli değişikliklerinin analizini anlatıyoruz.

Nöral Krest Hücre Delaminasyonu ve Göçü Çalışması İçin Fareden Birincil Kranial Nöral Krest Hücrelerinin Diseksiyonu, Kültürü ve Analizi

Fare embriyonik kök hücrelerinden kraniyal nöral krest hücreleri üretmek için tekrarlanabilir boyutta nöroküreler üreten üç boyutlu (3D) bir in vitro farklılaşma protokolü sunuyoruz. Bu metodolojinin önceki protokollere kıyasla değişkenliği azalttığını ve kraniyal nöral krest hücre gelişimini incelemek için çoğullanmış test için nasıl kullanılabileceğini gösteriyoruz.

Kraniyal Nöral Krest Hücreleri Çoğullanmış Test için Üç Boyutlu İn Vitro Farklılaşma Protokolü

Öğrenin, insan saç köklerinden sinir kresti kök hücre izolasyonu ve kültürü için akış sitometrisi ile hücre ayırma yöntemini. Bu protokol, rejeneratif tıp araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

İnsan Saç köklerinin arasından Sinir Crest Kök Hücre İzolasyonu ve Kültür

Daha fazla video keşfet