Roman kullanarak Spinal Kord Yaralanması sonra Fare Hind Ekstremite Kemik Kaybı Boyuna değerlendirilmesi, In vivo, Metodolojisi

Ardışık düşük doz X-ray taramaları kullanarak omurilik yaralanması sonrası kemik kaybı, yetişkin farelerin femur ve süresince tibialar boyuna muayene yapıldı. Tibia kemik kaybı, kemik kaybı femur kadar 40 gün yaralanma tespit edilmedi ise çalışma boyunca tespit edildi.

Bu prosedür, omurilik yaralanmasını takiben farede zamana bağlı arka ekstremite kemik yoğunluğu kaybını tespit etmek ve ölçmek için kullanılan yeni bir yöntemi göstermektedir. Bu, ilk olarak steril ve alac onaylı koşullar altında anestezi uygulanmış bir farede spinal transeksiyon yaralanması gerçekleştirilerek gerçekleştirilir. Daha sonra bir iyileşme periyodundan sonra, hayvan yeniden uyuşturulur ve hem sağ hem de sol arka bacakların tibia ve fibialarının X-ışını görüntüleri elde edilir.

Bu, yaralanmadan sonraki 40 güne kadar haftalık olarak gerçekleştirilir. Daha sonra, x-ışını taramalarının bir görüntü analizi yapılır. Son adım, eksize edilen arka bacak kemiklerinde kemik yoğunluğunun ölüm sonrası değerlendirmesini yapmaktır.

Sonuç olarak, sonuçlar, omurilik yaralanmasının farenin arka bacaklarında nasıl hızlı ve ilerleyici bir kemik yoğunluğu kaybına neden olduğunu göstermektedir. Bu yeni yöntem, diğer görüntüleme modaliteleri tarafından kullanılanlardan daha düşük dozlarda x-ışınları kullanarak güçlü uzamsal ve zamansal çözünürlük sağlar. Osteoporoz, omurilik yaralanması ile yaşayanları etkileyen yaşamı tehdit eden bir durumdur.

Önerdiğimiz şey, bir araştırmacının osteoporoz ile ilişkili kemik kaybı olan uzun süreler boyunca uzunlamasına takip etmesine izin veren omurilik yaralanmasının hayvan çalışmalarında kullanılacak yeni bir yöntemdir. Bu iki nedenden dolayı önemlidir. Birincisi, bu, osteoporozun gelişimini şekillendiren mekanizmaları incelemek için bir fırsat sağlayacaktır.

İkincisi, omurilik yaralanması ile yaşayan hastalarda osteoporoz gelişimini önlemek veya belki de tersine çevirmek için tasarlanmış yeni müdahaleleri test etmenin bir yolunu sağlamasıdır. Bu yöntem omurilik yaralanmasına bağlı osteoporoz hakkında bilgi verebilse de, menopoz sonrası kadınlarda meydana gelen yaşa bağlı kemik kaybı gibi diğer sistemlere de uygulanabilir ve ayrıca izolasyondan kaynaklanan kemik yoğunluğundaki diğer travma kaynaklı azalmalar, kırık veya diğer hasarlar sonrasında iyileşme sürecinde önemli kemik kaybına neden olabilir. Tüm hayvan boylamsal düşük doz X-ışını görüntülemesinin uygulanması, bu sorunları en aza indirmek veya önlemek için tasarlanmış tedavilerin geliştirilmesine yeni yollar sağlayabilir.

Omurilik yaralanması ameliyatını zımpara prosedürlerine göre ve yerel kurumsal hayvan bakımı ve kullanım komitesi yönergelerine uygun olarak gerçekleştirin. Daha sonra 10. günden başlayarak, omurilik ameliyatı sonrası ve 40. güne kadar 10 günlük aralıklarla devam eder. Canlı anestezi uygulanmış transeksiyon omurilik yaralanmalı hayvanların ve yaralanmamış yaşlı eşleşme kontrollerinin sağ ve sol uyluk kemiklerini ve tibialarını ivus Lumina XR sistemini kullanarak tarayarak değerlendirin Taramadan önce, dahili kameranın eksi 90 santigrat derece çalışma sıcaklığına ulaşmasını sağlamak için Lumina XR cihazını başlatın.

Anestezi uygulanmış bir hayvanı Lumina xr içindeki platforma yerleştirin. Ardından, hem femur hem de tibial bölgelere odaklanmaya izin vermek için yüksek büyütmeli bir lens yerleştirin. Konunun görüş alanına düzgün şekilde yerleştirilip yerleştirilmediğini kontrol edin.

Gerekirse, kapıyı açın ve hayvanı yeniden konumlandırın. Hayvanın uygun şekilde konumlandırılması burada gösterilmiştir. Düzgün bir şekilde yerleştirildikten sonra, x-ışını işlevi yürütülebilir.

Enerji açılır listesinden hayvana uygun bir seçim yapın. Ardından kontrol panelini açın. X-ışınını kontrol ederek işaretleme yaparak x-ray özelliğini etkinleştirin ve x-ışını görüntüsünü elde edin.

Burada görüldüğü gibi tüm uyluk kemiği ve kaval kemiği görünür olmalıdır. Canlı görüntü yazılımı varsayılan olarak dönüştürülmüş röntgen görüntülerini gösterdiğinden, düzeltmeler filtreleme araçları menüsüne girerek ve x-ışını absorpsiyonu'nun yanındaki onay işaretini kaldırarak ham röntgen görüntülerinin görüntülendiğinden emin olun. Ham görüntü verileri otomatik olarak sabit sürücüye kaydedilir.

Temsili TIFF dosyaları da kaydedilir. Görüntülemeden sonra, fare daha sonra ev kafesine geri döndürülür ve araştırmacı gözlemi altında iyileşmesine izin verilir. İşlem daha sonra bir sonraki fare ile tekrarlanır.

İlk olarak, beliren diyalog kutusundaki canlı görüntü simgesine çift tıklayarak yazılımı açın. İlgilendiğiniz klasörü seçin ve Tamam'ı tıklayın. Gözat düğmesine tıklayarak bir x-ray görüntüsü yükleyin.

Canlı görüntü tarayıcısı, seçilen verileri kullanıcı kimliğiyle birlikte görüntüler. Etiket bilgileri ve kamera yapılandırma bilgileri Verileri açmak için, veri satırına çift tıklayın. Görüntü ve araç paleti görüntülenir.

Açık veriler tarayıcıda mavi renkle vurgulanır. Ardından, ROI araçlarına tıklayın. ROI araçları'ndaki araç paletinde, tür açılır listesini açın ve ölçüm ROI'sini seçin.

Bu denemede kullanılan üç ROI'yi yüklemek için kare simgesini tıklayın ve kareleri yükleyin. Bir cetvel kullanarak uyluk kemiğinin uzunluğunu ölçün, iki karenin uzunluğunu toplam uyluk kemiği uzunluğunun sekizde biri olacak şekilde ayarlayın. Karelerin genişliğini toplam uyluk kemiği uzunluğunun 24'te biri olacak şekilde ayarlayın.

Şimdi cetvel ile proksimal uyluk kemiği ucuna olan mesafenin sekizde birini ölçün ve bir dikdörtgeni o konumda ortalanacak şekilde yerleştirin. İkinci dikdörtgeni distal femur ucuna taşıyın ve dizin trabeküler bölgesi içinde ortalanacak şekilde yerleştirin. Sonra tibianın uzunluğunu ölçün.

Kutunun uzunluğunu toplam kaval kemiği uzunluğunun sekizde birine ayarlayın. Genişliği toplam kaval kemiği uzunluğunun 30'da birine ayarlayın. Son olarak, kutuyu burada görüldüğü gibi proksimal tibia ucundan olan tibia mesafesinin toplam uzunluğunun sekizde biri olacak şekilde yerleştirin.

Ardından, ölçüm simgesine tıklayın, x-ışını görüntüsünde ROI Yoğunluk ölçümleri görünür ve ROI ölçümleri tablosu görünür. Bu tabloyu nokta CSV dosyası olarak istediğiniz konuma aktarın. Bu, tablonun Excel kullanılarak açılmasına izin verecektir.

Analiz edilecek tüm kayıtlı görüntüler için bu adımı tekrarlayın. Son olarak, tüm verileri tek bir Excel sayfasında birleştirin. İstatistiksel anlamlılık, istenirse Microsoft Excel veya Sigma Plot 11.0 yazılımı gibi yazılımlar kullanılarak bir öğrencinin T-testi ile belirlenir, sonuçlar, bu yöntem için standart protokoller kullanılarak çift enerjili x-ışını absorpsiyon geometrisi kullanılarak kemik yoğunluğunun ölüm sonrası analizinden elde edilen sonuçlarla karşılaştırılabilir.

Omurilik yaralanmasından sonra bir fare, tibia ve uyluk kemiğinin nispi kemik yoğunluğu kaybı, saf farelerle karşılaştırıldığında, yukarıdaki yöntem kullanılarak tespit edilebilir. Bu şekil, proksimal tibiadaki omurilik yaralanması sonrası, yaralanmadan 10, 20, 30 ve 40 gün sonra kemik yoğunluğu kaybını göstermektedir. Yaşa uygun naiflerle karşılaştırıldığında, sadece 10 gün sonra tibia kemik yoğunluğunda %12'lik önemli bir azalma olur ve 40 günde %15'e varan kemik yoğunluğu kaybı olur.

Burada proksimal femurda omurilik yaralanması sonrası, yaralanmadan 10, 20, 30 ve 40 gün sonra kemik yoğunluğu kaybı görüyoruz. Yaş eşleşmesi naifleriyle karşılaştırıldığında, yaralanmadan 40 gün sonra proksimal femurda kemik yoğunluğu kaybında %7'lik bir azalma gözlendi. Bu grafik, yaralanmadan 10, 20, 30 ve 40 gün sonra distal femurda omurilik yaralanması sonrası kemik yoğunluğu kaybını göstermektedir.

Yaşlı uyumlu naif kontrollerle karşılaştırıldığında, distal femurdaki kemik yoğunluğu kaybı, yaralanmadan 10 gün sonra gözlenebildi ve deneyin geri kalanı boyunca devam etti. Çift enerjili x-ışını abor geometri verilerinin bu temsili görüntüsü, kemik mineral içeriğini ve kemik mineral yoğunluğu çıktısını gösterir. Eksize edilen femur spinal kord yaralanmasından 40 gün sonra analiz edildi.

Bu protokolde gösterilen yöntemin etkinliğini şu anda mevcut olan diğer yöntemlerle karşılaştırmak için, bu şekil, omurilik yaralanmasının uyluk kemiğindeki gram cinsinden kemik mineral içeriğinin çift enerjili x-ışını abor geometri analizini göstermektedir. Ameliyattan 40 gün sonra fareler ve yaş eşleşmesi naifleri. Omurilik yaralanması olan farelerde naif ile karşılaştırıldığında% 12'lik önemli bir kemik mineral içeriği kaybı gözlenmiştir.

Burada, miligram cinsinden kemik mineral yoğunluğunun çift enerjili, ekstra abor geometri analizini, yaralanmada omuriliğin uyluk kemiğinde santimetre kareyi, yaralanmadan 40 gün sonra fareleri ve H eşleşmesi naif fareleri görüyoruz. Kemik mineral yoğunluğu kaybı önemli ölçüde değişmedi, ancak bir kez ustalaştıktan sonra kemik mineral içeriğine benzer bir eğilim izledi. Bu, 20 ila 30 dakika içinde gerçekleştirilebilir, ancak unutmayın, arka bacakları doğru şekilde konumlandırmak önemlidir.

Bu videoyu izledikten sonra, Caliper Instruments Lumina XR cihazını kullanarak omurilik yaralanmasını takiben kemik yoğunluğunun canlı bir hayvan uzunlamasına değerlendirmesinin nasıl yapılacağı hakkında bir fikriniz olmalıdır.