Name: İnsan Kanı StemCell Teknolojileri RosetteSep Kit ile gelen NK Hücreleri zenginleştirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 52 s
Description: Öğrenin insan kanından negatif seleksiyonla NK hücreleri izolasyonu. RosetteSep kiti ile yüksek saflıkta ve canlılıkta doğal öldürücü hücreler elde edin. Bu yöntem immünoloji araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Her Rozet Eylül izolasyon kokteyl ile birlikte ayrıntılı bir protokol ve StemCell teknolojileri 1 online olarak mevcuttur.

<ol><li>Procedures and instruction manuals. , 
	
 <a target="_blank" href="http://www.stemcell.com/technical/technicalrsproc.aspx">http://www.stemcell.com/technical/technicalrsproc.aspx</a> Forthcoming.</li>
</ol>

Bu tekniği kullanarak izole hücreler diğer hücre ayırma kitleri kullanılarak farklı popülasyonlar daha ayrılabilir.

PBS% 2 FCS ve Histopaque çözümleri ile desteklenmiş prosedürü başlamadan önce oda sıcaklığına getirilmelidir.

İnsan kanı stemcell teknolojileri rosettesep kit ile gelen nk hücreleri zenginleştirilmesi

Enrichment of NK Cells from Human Blood with the RosetteSep Kit from StemCell Technologies

Doğal öldürücü (NK) hücreleri doğuştan gelen bağışıklık sistemine ait olup, kanser ve enfeksiyonlara karşı mücadelede önemli bir rol oynamak, büyük granüllü sitotoksik lenfositler, ancak, gebelik ve transplant reddini erken aşamalarında da sorumlu tutulmaktadır. Bu hücreler izole edilebilir olan periferik kan, mevcut. Hücreler, pozitif veya negatif seçim kullanılarak izole edilebilir. Olumlu seçimi için biz sadece tüm hücreleri ama ilgi hücreler mevcut yüzey belirteçleri hedefleyen antikor kokteylleri kullanan negatif seçimi için ise ilgi hücreleri mevcut bir yüzey işaretleyici yönelik antikorlar kullanır. Bu son teknik, böylece istenmeyen hücre aktivasyonu ya da farklılaşma riskini azaltarak, hücrelerin antikor serbest ilgi bırakarak avantajı sunuyor. Bu video protokol StemCell teknolojileri RosetteSep kiti kullanılarak, negatif seleksiyon tarafından nasıl insan kanı NK hücreleri ayrı göstermektedir. Bu prosedür, insan periferik kan (insan denekler korumak için bir kurumsal inceleme kurulu tarafından onaylanmış protokol altında) elde ve NK hücreleri yok belirteçlerinin bağlamak antikorların bir kokteyl ile karıştırma, ancak, periferik diğer tüm mononükleer hücreler içerir kan (örneğin, T lenfositleri, monositler ...). Kokteyl bulunan antikorlar, A üzerinde eritrosit glycophorin yönelik antikorlar konjuge. Bu nedenle, tüm istenmeyen hücre ve kırmızı kan hücrelerinin kompleksleri kalmış olacak. Kan ve antikor kokteyli karışımı, daha sonra seyreltilmiş Histopaque degrade üzerine yerleştirilmiştir ve santrifüj edilir. NK hücreleri (&gt;% 80 saf) Histopaque ve seyreltilmiş plazma arasındaki arayüz toplanabilir. Benzer kokteyller, insan T lenfositleri gibi diğer hücre popülasyonlarının, zenginleştirilmesi için kullanılabilir.

Doğal katil hücreler, lenfosit küçük bir nüfus. Burada StemCell Teknolojileri kit kullanarak, bu hücrelerin insan kanı negatif seleksiyon tarafından nasıl izole etmek göstermektedir. Elde edilen hücreler, bu nedenle bir takım prosedürler için kullanılacak hazır antikorlar tarafından uygulanabilir ve bakir, ve.

İnsan Kanı StemCell Teknolojileri RosetteSep Kit ile gelen NK Hücreleri zenginleştirilmesi

Doğal öldürücü (NK) hücreler, doğuştan gelen bağışıklık sistemine ait olan ve kansere karşı mücadelede önemli roller oynayan, büyük granüllü sitotoksik lenfositlerdir...

Merhaba, ben Christine Beaton. California Üniversitesi Irvine'deki Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nde, George Chen'in laboratuvarında araştırma asistanıyım. Bugün sizlere, Stem Cell Technologies kokteyl kitlerini kullanarak insan kanından doğal öldürücü hücrelerin negatif seleksiyonunun nasıl yapılacağını göstereceğim.Stem Cell Technologies firmasının bu kitini kullanmamızın nedeni, bize çok yüksek hücre saflığı sağlaması ve negatif seçimin, bir antikora bağlanmamış hücreler elde etmemize olanak tanımasıdır. Böylece bu hücrelerle ilgili beklenmedik bir durumla karşılaşmazsınız. TSEP kitinin çalışma prensibi, kandaki ilgilenmediğiniz tüm hücrelere bağlanacak antikorların bulunmasıdır.Bu durumda, T hücreleri, B hücreleri, monositler ve ardından alyuvarlardaki glikoforin A'ya bağlanacak antikorlar mevcuttur; burada yapılan işlem, bir akyuvara karşı olan bir antikoru, bir alyuvara karşı olan bir antikora bağlamaktır. Böylece, istenmeyen tek bir akyuvar ile birden fazla alyuvardan oluşan bir kompleks meydana gelecektir ve alyuvarlar akyuvarlardan daha yüksek yoğunluğa sahip olduğu için, kan ve antikorlarınızı içeren karışım kokteylini bir gradyana yerleştirip santrifüj ettiğinizde, alyuv

enrichment-nk-cells-from-human-blood-with-rosettesep-kit-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Burada genişletmek ve verimli bir şekilde arındırmak çok sayıda insan NK hücre ve kendi fonksiyonunu değerlendirmek için bir metodu tanımlar.

Genişleme, Saflaştırılması, ve İnsan Periferik Kan NK Hücrelerinin Fonksiyonel Değerlendirme

Bu video, hücre dışı akı analizörü kullanarak aktive edilmiş insan NK hücrelerinde enerji metabolizmasını analiz etme yöntemini göstermektedir. Elektron taşıma zinciri komplekslerinin farklı inhibitörleri, oksijen tüketim oranı veya OCR ile ölçülen ATP sentezini etkiler ve hücresel metabolizma ve biyoenerjetik hakkında bilgi sağlar.

Hücre dışı akı analizörü kullanılarak insan NK hücrelerinde enerji metabolizmasının gerçek zamanlı izlenmesi

Bu protokol, geliştirme, genişleme ve hESC ve iPSCs türetilen NK hücreleri, in vivo görüntüleme açıklar.

Geliştirme, Genişleme ve<em&gt; In vivo</em&gt; İnsan Embriyonik Kök Hücreleri (hESC) den İnsan NK Hücrelerinin İzleme ve ve Bağlı Pluripotent Kök Hücre (iPSCs)

Basit ve güvenilir bir yöntem, örneğin, farklı NK hücresi alt-gruplar içinde degranülasyonu, sitokin ve kemokin üretimi gibi NK hücresi fonksiyonlarının bir dizi analiz için tarif edilmektedir.

Akış NK Hücre Fonksiyonları İzleme Testi Sitometri tabanlı

Bu çalışmanın amacı hücrelerdeki birincil doğal öldürücü (NK) başarılı gen iletim için izin teknolojileri formüle etmek oldu. İnsan lentiviral iletim dextran aracılı veya fare birincil NK hücreleri sonuçlarında yüksek gen ifade verimliliği. Bu yöntemi, gen iletim NK hücre genetik manipülasyon büyük ölçüde artıracaktır.

Dextran fare ve insan birincil NK hücreleri Lentiviral iletim verimliliğini artırır

Kantitatif insan doğal katil hücrelerin sitotoksik etkinliğini belirlemek için Akış Sitometresi tabanlı yöntemi burada gösterilir.

Akış Sitometresi tabanlı sitotoksisite tahlil insan NK hücre etkinliği değerlendirilmesi için

Burada, mekanik çalışma içinde in vitro ve in vivoiçin bir besleyici-Alerjik farklılaşma sistemi kullanılarak gen susturmak fare NK hücreleri toplu üretim için bir protokol mevcut.

Roman besleyici-Alerjik sistemi fare doğal katil hücreler Vitro seri üretim için

İnsan doğal öldürücü hücrelerindeki terapötik antikorlar tarafından FcφRIIIa güdümlü olayları incelemek için bir protokol burada açıklanmıştır. Bu yapay stimülasyon platformu, degranülasyon, kemokin/sitokin üretimi gibi aşağı akış efektör fonksiyonlarının ve bağlamada yer alan antikorların FcφRIIIa ve Fc bölümlerinin aracılık ettiği sinyal yollarının sorgulenmesine izin verir.

Terapötik Antikorların Varlığında FcφRIIIa Katılımı tarafından Yönlendirilen İnsan Doğal Öldürücü Hücre Olaylarının Değerlendirilmesi

Mevcut protokol, hafif sitotoksisiteye sahip CD3-/CD45+CD56+ hücrelerinin, hem 3D hem de 2D kültür koşulları altında insan genişlemiş potansiyel kök hücrelerinden (hEPSC'ler) nasıl ayırt edileceğini göstermektedir. Bu, karmaşık mikro çevrenin tahrip edilmeden rutin fenotipik doğrulamaya izin verir.

İnsan Genişletilmiş Potansiyel Kök Hücrelerden Doğal Öldürücü Hücrelerin Üretilmesi

Burada, insan iPSC'den türetilmiş kimerik antijen reseptörü (CAR) eksprese eden doğal öldürücü hücreleri çeşitli malignitelere karşı daha iyi öldürme ile ayırt etmek ve genişletmek için bir yöntem sunuyoruz. Bu protokol, doğal öldürücü (NK) optimize edilmiş iPSC'den türetilmiş CAR-NK hücrelerinin farklılaşmasını ve genişlemesini ve çeşitli tümör hücre hatlarına karşı antitümör aktivitesinin ölçümünü gösterir.

İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Kimerik Antijen Reseptörü İfade Eden Doğal Öldürücü Hücrelerdeki Gelişmeler

Öğrenin insan kanından negatif seleksiyonla NK hücreleri izolasyonu. RosetteSep kiti ile yüksek saflıkta ve canlılıkta doğal öldürücü hücreler elde edin. Bu yöntem immünoloji araştırmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

İnsan Kanı StemCell Teknolojileri RosetteSep Kit ile gelen NK Hücreleri zenginleştirilmesi

Daha fazla video keşfet