Name: Görüntüleme için Basit Bir Yöntem Arabidopsis Infiltratif Görüntüleme Orta Perfluorodecalin kullanarak bırakır. (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 19 s
Description: Öğrenin, Arabidopsis thaliana yapraklarında perfluorodekalin kullanarak canlı hücre görüntüleme derinliğini nasıl artıracağınızı. Bu yöntem, bitki biyolojisi ve hücre biyolojisi araştırmalarında net görüntüler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, onun tavsiye ve Exeter Üniversitesi bio-Tesis Exeter Üniversitesi&#39;nden Prof. Nicholas Smirnoff teşekkür etmek istiyorum. Finansman İngiltere Biyoteknoloji ve Biyolojik Bilimler Araştırma Konseyi (hibe referans BB/E002682/1) tarafından sağlanmıştır.

Aşağıda verilen protokol Arabidopsis thaliana yaprakları bir infiltratif montaj aracı olarak PFD kullanarak için basit bir yöntem açıklanır, ama biz, bu yöntem görüntüleme hava zengin dokular istenilen uygulamaların çeşitli kullanılıyor olabilir tahmin ediyoruz . 1. PFD montaj yaprak örnekleri <ol><li> Polidimetilsiloksan gaz-geçirgen bir conta (PDMS Carolina Gözlem Jel) ile bir mikroskop lamı hazırlayın. PDMS viskoelastik bir polimer ve deneysel gereksinimlerine uygun bir oda sağlamak için kalıp olabilir. </li><li> Hava ile PFD dengeye. Bu hava ile köpüren veya hava dolu bir şişede PFD küçük hacimli bir sallayarak elde edilebilir. </li><li> Durusu açık bir Petri kabı içine PFD ve bütün bir fide veya 5 dakika PFD eksize yaprak yüzer. Doku (Şekil 2 (a)), yarı saydam, vitrifiye doku anımsatan haline gelmelidir . Yapraklar PFD, bağımlı maruz kalmadan önce daha koyu veya daha açık bir şekilde görünebilir.aydınlatma koşulları ve doku yaşına göre kullanılır. </li><li> PDMS odasına hava dengelenmiş PFD ile doldurun ve dikkatle PDMS odasına kuluçka Petri kabı doku örnekleri aktarmak. Deneysel gereksinimlerine göre lamel ve görüntü ile slayt Seal. </li><li> Not: PFD de bir lamel üzerine inşa açık bir oda veya bir perfüzyon odasında iyi bir performans sergilediğini ve silikon gres ile uyumlu. Erirken PFD teflon bileşenleri ile uyumlu değildir. </li></ol> 2. Temsilcisi Sonuçlar: PFD-inkübe yaprak örneklerinin mikroskobik muayene, hava sahasındaki çoğunluğu Şekil 2 (b) PFD askıya rekombinant GFP ile sular altında hava sahasındaki gösterir sular altında olduğunu gösterir . Yaprak PFD ile inkübasyon üzerine sular altında olduğu açıktır, ama hava o zaman zaman ceplerinde kalır. Su, bu koşullar altında bir yaprak sel değildir. Numune LSCM inkübe ve monte ir, su ya da, PFD (Şekil 3) görüntüleme derinliğinde su ve hava üzerinde bir avantaj verdiğini PFD gösterir . Şekil 3'te verilen örnekte, hava, su ve PFD monte Arabidopsis cytosolically lokalize Venüs, YFP 11 35S promotör altında yapısal olarak ifade edilir bir varyantı ifade yaprakları gösterir . PFD ve su karşılaştırırken görüntüleme derinliği yaklaşık 2 kat artış görebilirsiniz. PFD kullanarak görülen kesin iyileşme sayısal diyafram ile lens ve kullanılan doku tipi değişir, ancak dikkat edilmelidir. PFD tedavi fide sitoplazmik akışı ve kök saç uzama, sağlıklı bitkiler, her gösterge gördük. Buna ek olarak Fv / Fm, 12, bitkilerin fotosentez işleyen bir ölçüsüdür görüntülemede kullanılan zaman çizelgesi üzerinde tolere edilebilir sınırlar içinde kalmasını 2 göstermiştir. 3394fig1.jpg "/&gt; Şekil 1. Bitki yaprak karmaşıklığı ve optik etkileri A. anatomik özellikleri gösteren Şematik gösterim thaliana yaprak optik set-up ile ilgili. Kullanılan kısaltmalar obj. = Objektif lens, imm. = Daldırma sıvısı, cov. = Lamel, mnt. = Mountant, kesme. = Manikür, reklam. ep. = Adaxial epidermis, st. = Stoma gözenek, sp. = Süngerimsi mezofil = hava sahasını, dostum. = Palisad mezofil, fi = vasküler paket, reklam. ep. = Adaxial epidermis. Hücre duvarları siyah çizgilerle gösterilir. <img alt="Şekil 2." src="/files/ftp_upload/3394/3394fig2.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 2."> Şekil 2. PFD kolayca Arabidopsis yaprakları nüfuz (A) hava, su inkübe veya 5 dakika için PFD ve Leica MZ16F mikroskop (Leica Microsystems (UK) Ltd, Milton Keynes, Birleşik Krallık) ile Leica DCF3000FX dijital kamerayı kullanarak görüntülü bırakır. Vallahi logosu asetat film baskılı ve fro aydınlatmalım aşağıda bir ışık kutusu. Pozlama süresi 89 ms ve tüm görüntüleri toplanan ve aynı şekilde işlendi. Ölçek çubuklar 2 mm temsil eder. (B) PFD in vivo olarak rekombinant yeşil floresan proteininin (GFP) saflaştırılmış hava sahasındaki sınırlandırır taşıma. GFP yanlış renkli yeşil ve kırmızı klorofil mezofil hücreleri sınırlandırıyor oto-floresan, göstermek için kullanılır. (Şekil 2 (b) izni ve tüm teknik detayları Littlejohn ark ile çoğaltılamaz 2010 2). Ölçek bar, 25 m. temsil <img alt="Şekil 3." src="/files/ftp_upload/3394/3394fig3.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 3."> Şekil 3. PFD yaprakları konfokal görüntüleme artırır LSCM sağlam A. thaliana cytoplasmically lokalize Venüs floresans (yeşil) ve klorofil otofloresans (kırmızı) gösteren görüntüler, hava, su ya da PFD görüntülü bırakır. Dalgaboyu 514 nm ve floresans emisyon Venüs için 604 nm ile 518 nm kaydedildi ve 657 nmKloroplast için 679 nm. Her panel, 5 mikron aralıklarla alınan 11 konfokal görüntüleri Z-yığından alınan tek bir konfokal bölümünde. Bu ek filmleri üretmek için kullanılan 1 mikron aralıklarla elde edilen 59 görüntü tam bir Z-yığını çıkarıldı. Derinlik ölçümleri epidermal yüzeye göre verilmiştir. Aynı şekilde işlendi Temsilcisi görüntüler, gösterilmiştir. Deneysel mikroskop ayarları gibi ayrıntılar, Littlejohn ve ark. 2010 2 bulunanlara aynıdır . Scalebars 20 mikron temsil eder.

<ol><li>Inoue, S. Foundations of Confocal Scanned Imaging in Light Microscopy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aInoue%2C+S+%22Handbook+of+Biological+Confocal+Microscopy%2C+3rd%22">Handbook of Biological Confocal Microscopy, 3rd</a>. Pawley, J. P. , Springer Science & Business Media, LLC. New York. 1-16 (2006).</li>
<li>Littlejohn, G. R., Gouveia, J. D., Edner, C. S. mirnoff, N,, Love, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfluorodecalin+substantially+improves+confocal+depth+resolution+in+air-filled+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22New.+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Perfluorodecalin substantially improves confocal depth resolution in air-filled tissues.</a> New. Phytologist. 186, 1018-1025 (2010).</li>
<li>Sargent, J. W., Seffl, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Properties+of+perfluorinated+liquids.+Fed%5BTitle%5D)+AND+%22Fed.+Proc%22%5BJournal%5D)">Properties of perfluorinated liquids. Fed.</a> Fed. Proc. 29, 1699-1703 (1970).</li>
<li>Schönherr, J., Bukovac, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penetration+of+stomata+by+liquids%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Penetration of stomata by liquids.</a> Plant Physiol. 49, 813-819 (1972).</li>
<li>Davies, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+ventilation%5BTitle%5D)+AND+%22Paediatr.+Child.+Health%22%5BJournal%5D)">Liquid ventilation.</a> Paediatr. Child. Health. 35, 434-437 (1999).</li>
<li>Shaffer, T. H., Wolfson, M. R., Greenspan, J. S., Hoffman, R. E., Davis, S. L., Clark, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+ventilation+in+premature+lambs%3A+uptake%2C+biodistribution+and+elimination+of+perfluorodecalin+liquid%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod.+Fertil.+Dev%22%5BJournal%5D)">Liquid ventilation in premature lambs: uptake, biodistribution and elimination of perfluorodecalin liquid.</a> Reprod. Fertil. Dev. 8, 409-416 (1996).</li>
<li>Crafoord, S., Larsson, J., Hansson, L. J., Carlsson, J. O., Stenkula, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+perfluorocarbon+liquids+in+vitreoretinal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Ophthalmol.+Scand%22%5BJournal%5D)">The use of perfluorocarbon liquids in vitreoretinal surgery.</a> Acta. Ophthalmol. Scand. 73, 442-445 (1995).</li>
<li>Lowe, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+blood%3A+synthetic+substitutes+from+fluorinated+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Engineering blood: synthetic substitutes from fluorinated compounds.</a> Tissue Eng. 9, 389-399 (2003).</li>
<li>Wardrop, J., Edwards, C. M., Lowe, K. C., Davey, M. R., Power, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+responses+of+plant+protoplasts+to+culture+with+oxygenated+perfluorocarbon%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Exp.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cellular responses of plant protoplasts to culture with oxygenated perfluorocarbon.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 428, 501-505 (1997).</li>
<li>Sukumaran, N. P., Quamme, H., Weiser, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+fluorocarbons+to+study+freezing+in+plant+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Use of fluorocarbons to study freezing in plant tissues.</a> Plant Physiol. 50, 632-634 (1972).</li>
<li>Nagai, T., Ibata, K., Park, E. S., Kubota, M., Mikoshiba, K., Miyawaki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+variant+of+yellow+fluorescent+protein+with+fast+and+efficient+maturation+for+cell-biological+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A variant of yellow fluorescent protein with fast and efficient maturation for cell-biological applications.</a> Nat. Biotechnol. 20, 87-90 (2002).</li>
<li>Baker, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chlorophyll+fluorescence%3A+a+probe+of+photosynthesis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Plant.+Biol%22%5BJournal%5D)">Chlorophyll fluorescence: a probe of photosynthesis in vivo.</a> Annu. Rev. Plant. Biol. 59, 89-113 (2008).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Bu hava ile doldurulmuş veya optik karmaşık dokuların mikroskopi artırmak için basit ve kullanımı kolay bir tekniktir. Biz tekniği, bazı güçlü avantajlara sahiptir ve biz bu hava zengin dokulara ait biyolojik soruları aydınlatmak için kullanılan olacağını umuyoruz göstermiştir. Örneğin, bitki mezofil ya da akciğerlerde patojen saldırı çalışmaları için doğal bir seçim olacaktır. Ayrıca tekniğin sınırlılıkları farkında. Biz daha iyi refraktif indeksi eşleşen üzerinde çalışıyoruz, uzun zaman ölçeğinde deneyler sırasında mikroskopi diğer modları ve perflorokarbon mountant ikmal kullanın. Ayrıca PFC en önemli avantajlarından biri, yani biyolojik olarak tesirsiz bir flipside olsa da, tanımak. PFC, ayrıca hormonlar, ilaçlar, ve diğer küçük moleküller veya iyonlar gibi ilgi bileşikleri kolayca sunmak için kullanılabilir olduğunu göstermektedir biyolojik moleküllerin kolayca çözülür.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktifi Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Perfluorodecalin </td><td> F2 Kimyasallar </td><td> N / A </td><td> Sipariş vermek için telefon. </td></tr><tr><td> Carolina Gözlem Jel </td><td> Biyolojik Bıçaklar </td><td> 13-2700 </td><td></td></tr></tbody></table>

görüntüleme için basit bir yöntem arabidopsis infiltratif görüntüleme orta perfluorodecalin kullanarak bırakır.

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

Biyolojik örnekler derinliklerine yüksek çözünürlüklü görüntüler elde sorun yaygın olarak 1 kabul edilir . Süngerimsi mezofil hücreleri ve hava sahasındaki arasında ve biyolojik doku ve optik sistemin geri kalanı arasındaki hücresel bileşenleri arasındaki kırılma indisi çoklu geçişler, daha fazla zorluklar ortaya çıkan bitki yaprakları veya omurgalı akciğerler gibi hava dolu doku. Ayrıca, refraktif indeks uyumsuzlukları fluorofor uyarma ve floresan mikroskobu sinyal emisyon zayıflama neden olur. Biz perflorokarbon uygulama perfluorodecalin (PFD), optik, lazer güç zarar artar başvurmadan, derinlik konfokal mikroskobu (LSCM) örnek görüntüleme lazer tarama artırır ve fizyolojik etkilerini minimum 2 infiltratif bir görüntüleme aracı olarak burada açıklayın . Biz onun bir sonucu olarak optik karmaşık Arabidopsis thaliana yaprak dokusu ile PFD kullanımı için protokol tarifyapısı (Şekil 1). PFD 3 bu kullanım için uygun hale öznitelikleri bir numarası vardır. PFD kırılma indisi (1.313), su (1.333) ile karşılaştırılabilir ve sitoplazmada (yaklaşık 1.4) hava (1.000) daha yakındır. Buna ek olarak, PFD floresan olmayan, hazır ve toksik değildir. Sel sağlar stoma penetrasyon 4 - PFD düşük yüzey gerilimi (19 dynes cm-1), su (72 dynes cm-1) daha düşük ve aynı zamanda sınırı (30 dyne cm -1 25) altında potansiyel olarak yıkıcı bir vakum veya surfaktan uygulama olmadan süngerimsi mezofil hava sahasındaki. Son olarak ve en önemlisi, PFD, CO 2 ve O 2, böylece gaz değişimi örnek üzerinde fizyolojik etkileri en aza indirerek, sular altında doku muhafaza sağlar çözme için büyük bir kapasiteye sahiptir . Bu özellikler, kısmi sıvı solunum ve akciğer enflasyona içeren çeşitli uygulamalarda kullanılmaktadırTION 5,6 cerrahi, 7, 8 yapay kan, büyüme oksijenasyon medya 9, ve bitkiler buz 10 kristal oluşumu çalışmaları. Şu anda, canlı konfokal görüntüleme için su ya da sulu tampon doku monte etmek yaygındır. PFD montaj aracı olarak kullanımı, mevcut uygulamada bir iyileşmeyi temsil etmektedir ve görüntüleme için canlı bütün yaprak örnekleri basit bir hazırlık sağlar düşünün.

Biz perfluorodecalin infiltratif montaj aracı olarak kullanımı açıklanmaktadır. Bu görüntüleme derinliğini artırmak için basit bir yöntem.<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Yaprak dokusu minimal fizyolojik etkiye sahip.

Görüntüleme için Basit Bir Yöntem Arabidopsis Infiltratif Görüntüleme Orta Perfluorodecalin kullanarak bırakır.

Biyolojik örneklerin derinliklerinden yüksek çözünürlüklü görüntüler elde etme sorunu yaygın olarak kabul edilmektedir1. ...'nın süngerimsi mezofili gibi hava dolu dokularda...

Bu prosedürün genel amacı, yaprak içindeki canlı hücrelerin daha net görüntülerini elde etmek için bitki yapraklarındaki hava boşluklarının neden olduğu biyolojik görüntü bozulmalarını en aza indirmektir. Yaprak sulu bir montaj ortamına yerleştirildiğinde ve bir florofor lazerle uyarıldığında, dokuda turuncu ile gösterilen birçok boş hava alanı ve kırılma indisi değişiklikleri, sonuç görüntüsünde dokunun derinliklerinden gelen sinyalin gücünü sınırlar. Yaprak bunun yerine perflorodekalin (PFD) içine yerleştirilirse, floroforun lazerle uyarılması daha az sönümlenir ve yayılan sinyallerin daha iyi iletilmesini sağlar.Sonuç olarak, PFD montaj ortamı ile birlikte taramalı lazer konfokal mikroskobun kullanımı, bitki yaprağı içindeki canlı hücrelerin, sulu bir montaj ortamı kullanıldığında mümkün olanın iki katından fazla derinlikte net görüntülerini sağlar. Bu tekniğin, yaprakların fikse edilmesi veya montajlanması ve sulu ortamlar gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, mezofil içindeki kırılmayı azaltması ve yaprağın daha derinlerinde yer alan, görüntülenmesi sorunlu olan canlı hücrelerin daha doğru şekilde görüntülenmesine olanak tanımasıdır. Bu yöntem; mezofil, hücre biyolojisi ve in vivo sinyal iletimi ile patojenlerin yaprakları kolonize etmesi ve patojen-konak etkileşimleri gibi bitki bilimindeki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir ve temel bitki biyolojisine dair içgörü sağlayabilir.Bu yöntem ayrıca, iç kulak spiralleri veya omurgalı akciğeri gibi hava boşluğu bakımından zengin olan diğer yüksek kırılma indisli dokulara da uygulanabilir. Bu prosedürü laboratuvarımdan Dr. George Littlejohn uygulamalı olarak gösterecektir. PFD'deki örnekler, polidimetilsiloksan veya P-D-M-S'den yapılmış gaz geçirgen bir contaya sahip bir mikroskop lamı hazırlanarak başlar; P-D-M-S, deneysel gereksinimlere göre özelleştirilmiş bir hazne sağlamak için kalıplanabilen viskoelastik bir polimerdir.Hava dolu bir şişede az miktarda PFD'yi çalkalayarak PFD'yi hava ile dengeleyin. Bu işlem, PFD içinden hava kabarcıkları geçirerek de gerçekleştirilebilir; ardından PFD'yi açık bir Petri kabına boşaltın ve bütün bir fideyi veya kesilmiş bir yaprağı beş dakika boyunca sıvının üzerinde yüzdürün. Doku, vitrifiye dokuyu anımsatacak şekilde yarı saydam hale gelmelidir.Işıklandırma koşullarına ve kullanılan dokunun yaşına bağlı olarak, yapraklar PFD'ye maruz kalmadan öncesine göre daha koyu veya daha açık görünebilir. Son olarak, PDMS haznesini aero equate edilmiş PFD ile doldurun ve doku örneklerini inkübasyon Petri kabından PDMS haznesine dikkatlice aktarın. Lamı bir kapatma lamı ile mühürleyin ve görüntüleyin.Deneysel gereksinimlere göre, aylık yapraklar beş dakika boyunca rekombinant yeşil floresan protein veya GFP süspansiyonunda inkübe edilmiştir. PFD mikroskobik incelemesinde, PFD ile inkübe edilen yaprak örneklerinin çoğundaki hava boşluklarının PFD içinde süspande olmuş rekombinant GFP ile dolduğu görülmektedir. GFP yeşil renktedir; kırmızı renk ise klorofili, otofloresansı ve mezofil hücrelerini temsil etmektedir.PFD ile inkübasyon sonrası yaprağın tamamen sıvıyla dolduğu, ancak yer yer hava boşluklarının kalabildiği görülmektedir. Bu koşullar altında su, yaprağı tamamen doldurmaz. Burada, sitozole yerleşen bir YFP varyantı olan Venus eksprese eden opsys yaprakları; hava, su veya PFD içinde inkübe edilerek monte edilmiş ve lazer taramalı konfokal mikroskopiye tabi tutulmuştur. Örneklerin konfokal mikroskobu, görüntüleme derinliğinde yaklaşık iki katlık bir artışla PFD'nin hava ve suya göre avantajlı olduğunu göstermektedir.PFD ve su karşılaştırıldığında, bu teknik bir kez kavrandıktan sonra uygun şekilde uygulandığı takdirde beş ila 10 dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedürü gerçekleştirirken, perifloro-dekalinin oje ve teflonu çözdüğünü ancak silikon gresi ile uyumlu olduğunu hatırlamak önemlidir. Bu videoyu izledikten sonra, bitki yaprak hücrelerinde görüntülemeyi iyileştirmek için bir montaj ortamı olarak perifloro-dekalinin nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Perfluoro decalin toksik olmasa da, bu prosedürü gerçekleştirirken standart güvenlik uygulamalarının benimsenmesini öneririz.

a-simple-method-for-imaging-arabidopsis-leaves-using-perfluorodecalin

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz canlı bakteri stoma yanıt erişmek için basit ve tekrarlanabilir bir protokol geliştirmiştir. Bu yöntem daha önce bildirdiği epidermal peeling kullanımı ile karşılaştırıldığında yaprak yaralama ve manipülasyona en aza indirir.

Tüm Yaprak Görüntüleme kullanarak Bakteriyel Hücreler Live Stoma Tepki Değerlendirilmesi

Bu makale RootChip içinde Arabidopsis fide ekimi için bir protokol, mikroskobik kök izleme ve hücre içi metabolit düzeylerinin FRET tabanlı ölçümü ile büyüme koşullarını otomatik kontrol birleştiren bir mikroakışkan görüntüleme platform sağlar.

RootChip kullanarak Kök Çevre Rapid manipülasyonu ile Arabidopsis Kök Büyüme Time-lapse Floresans Görüntüleme

Biz stoma farklılaşma belgeleyen, gelişme birkaç gün içinde epidermis konfokal görüntüleme için bitki kotiledon hareketsiz odası slaytlar ve medya kullanarak bir protokol açıklar. Fluorofor etiketli proteinlerin hücre bölünmesi ve hücre tipi farklılaşması esnasında olası rollerini anlamayı arttırıyor, ifade ve hücre içi lokalizasyonu dinamik izlenebilir.

Uzun süreli, yüksek çözünürlüklü Konfokal Time Lapse Görüntüleme<em&gt; Arabidopsis Kotiledon</emÇimlenme sırasında&gt; Epidermis

Ca 2 + sinyalizasyon tesislerinde çeşitli biyolojik süreçleri düzenler. Burada mekansal ve zamansal Ca kaynaklı abiyotik stres izlemek için yaklaşımlar sunmak Arabidopsis hücre ve genetik olarak kodlanmış Ca 2 + göstergeleri Aequorin veya Case12 kullanarak dokularda 2+ sinyaller.

Ölçme Mekansal ve zamansal Ca 2+ Sinyalleri

Canlı konfokal görüntüleme gelişimini incelemek için güçlü bir araç biyologlara sağlar. Burada, Arabidopsis çiçek gelişmekte canlı konfokal görüntüleme için ayrıntılı bir protokol mevcut.

Arabidopsis Çiçek Gelişmekte Konfokal Görüntüleme Canlı

Burada, yüksek numerik diyafram açıklığı hedefleri ve daldırma ortamı olarak perflorodekalin kullanılarak 3 güne kadar kök ve hipokotil gelişiminin yüksek çözünürlüklü konfokal zaman atlamalı görüntülemesi için basit bir teknik sunulmuştur.

Kök ve Hipokotil Gelişimin Uzun Süreli Konfokal Görüntülemesi için Basit Bir Oda

Bu makalede, ana kök ve kök tüyleri tek bir optik uçağı için confines bir iki katlı mikrosıvısal platformda Arabidopsis thaliana fidan kültür gösterilmiştir. Bu platform iyi kök morfolojisi de yüksek çözünürlüklü görüntüleme gelince gerçek zamanlı optik görüntüleme için başka araçlar tarafından kullanılabilir.

Kök saç Morfoloji Arabidopsis fidan bir iki katlı mikrosıvısal platformda görüntüleme

Burada, malzemelerin ve Seryum oksit nano tanecikleri (nanoceria) (reaktif oksijen türlerine) için için bir protokol atılmasını vivo içindebitki dokularda düşsel confocal mikroskobu ve in vivo tarafından nanoceria mevcut nanoceria ROS tarafından confocal mikroskobu atma izleme.

Anyonik Seryum oksit nano tanecikleri tarafından bitki reaktif oksijen türleri içinde Vivo katalitik kayıt atma

Floresan canlı görüntüleme Arabidopsis thaliana yaprakların uzun bir zaman aralığı içinde gerçekleştirmek için basit ve çok yönlü bir yöntemi bildirin. Biz bir transgenik Arabidopsis bitki bitki bağışıklık yanıtı kronolojik zamanmekansal anlayış kazanıyor için bir örnek olarak bir bağışıklık ile ilgili düzenleyici denetimi altındaki bir floresan muhabir gen ifade kullanın.

Arabidopsis montaj için çok yönlü bir yöntem Intravital zaman hata görüntüleme için yaprakları

Bu protokol amacı nasıl Arabidopsisalt kısımlarında farklı sitelere CFDA yüklemek için göstermek için. Daha sonra çekim içinde CF ortaya çıkan dağıtım deseni sunuyoruz.

Arabidopsis 'In alt lavabo dokularında yüklü CFDA Tracer Shootward hareketi

Bir plazma membran reseptörü kinazının membran kaçakçılığı olaylarını incelemek için burada yaygın olarak kullanılan birkaç yöntem tanıtılmaktadır. Bu yazıda bitki materyali hazırlama, farmakolojik tedavi ve konfokal görüntüleme kurulumu dahil olmak üzere ayrıntılı protokoller açıklanmaktadır.

Stoma Soy Hücrelerinde Membran Kaçakçılığı Olaylarını İncelemek için Görüntü Tabanlı Yöntemler

Öğrenin, Arabidopsis thaliana yapraklarında perfluorodekalin kullanarak canlı hücre görüntüleme derinliğini nasıl artıracağınızı. Bu yöntem, bitki biyolojisi ve hücre biyolojisi araştırmalarında net görüntüler sağlar.

Görüntüleme için Basit Bir Yöntem Arabidopsis Infiltratif Görüntüleme Orta Perfluorodecalin kullanarak bırakır.

Daha fazla video keşfet