Mürin Yüzeysel lenf nodu Cerrahisi

Bu prosedürün genel amacı, anestezi uygulanmış bir fareden lenf düğümlerini cerrahi olarak çıkarmaktır. Bu, önce lenf düğümlerinin lokalize edilmesiyle gerçekleştirilir. Lenf düğümleri toplanır ve ardından kesi kapatılır.

Son olarak, deneysel analiz için tek hücreli bir süspansiyon elde edilebilir. Sonuç olarak, canlı lenfosit popülasyonları akış sitometrisi ile değerlendirilebilir. Bu tekniğin görsel gösterimi, lenf nodu lokalizasyonu ve çıkarılmasının ustalaşmak için görüntülenmesi gerektiğinden kritik öneme sahiptir.

Fareyi uyuşturduktan sonra, göz merhemi sürün, buprenorfin enjekte edin ve ayak parmağınızı çimdikleyerek sedasyonu onaylayın, ardından fareyi yan çevirin. İlk olarak, brakiyal lenf düğümünü lokalize edin ve ardından diseke edilecek bölgeyi tıraş edin. Gevşek tüyleri fırçaladıktan sonra, bölgeye bir dezenfektan uygulayın ve ardından dört Legg'in arkasında yaklaşık beş milimetrelik küçük bir kesi yapın.

Çevredeki yağın görülebileceğinden daha grimsi veya daha koyu görünebilen brakiyal lenf nodu görünene kadar kesiyi germek için iki çift forseps kullanın. Daha sonra lenf düğümünü kaplayan fasyayı bir çift forseps ile sıkıştırın. İkinci forseps çiftini lenf düğümünün mümkün olduğunca altına yerleştirin ve çevreleyen dokuyu kırmadan zarı hafifçe çekin.

Ardından fasyayı kırmak ve lenf düğümünü çıkarmak için ilk forseps çiftini kullanın. Lenf nodu başarılı bir şekilde toplandıysa, lenf nodunun daha önce bulunduğu yerde bir kan lekesi görünecektir. Eksize edilen lenf nodunu batar ise izotonik bir solüsyona yerleştirin, bu, hasat edilen dokunun yağ değil bir lenf nodu olduğunu doğrulayacaktır.

Ardından, yarada kıl olmadığını doğrulayın ve cildin iki iç kısmını birbirine yapıştırarak ve insizyonun boyutuna bağlı olarak bir ila iki klipsle zımbalayarak kesiği kapatın. Şimdi bir kasık lenf nodunu lokalize edin ve diseke edilecek bölgeyi tıraş edin. Gevşek tüyleri fırçaladıktan sonra, bölgeye bir dezenfektan uygulayın ve ardından karın yakınında arka pençenin yaklaşık beş milimetre üzerinde küçük bir kesi yapın.

İnsizyonu brakiyal lenf nodu için gösterildiği gibi iki çift forseps ile açtıktan sonra, çevredeki yağ dokusu içinde yer alan kasık lenf nodunu tanımlayın. Ardından, az önce gösterildiği gibi iki çift forseps ile lenf düğümünü çıkarın. Yine, lenf nodunun daha önce bulunduğu yerde görünen kan lekesini not ederek lenf nodunun başarılı bir şekilde toplandığını onaylayın ve ardından kasık lenf nodunu ayrı bir izotonik çözelti kabına bırakın.

Tüm lenf düğümleri toplandıktan sonra, fareyi bir kafese koyun ve farenin kolayca beslenebilmesi için ıslak yiyecek ekleyin. Ameliyattan yaklaşık altı ila sekiz saat sonra, ağrı yaşamadığından emin olmak için fareyi kontrol edin. Duruşun, yürüyüşün, konjen ile etkileşiminin ve kürkün görünümünün normal sağlıklı bir fareninkine benzer olduğunu dikkatlice gözlemleyin.

Son olarak, lenf düğümünü bir Petri kabındaki buzlu slaytlara bastırarak ayırın ve ardından tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için bir tüpe aktarın. İlgilenilen hücre yüzeyi antijenleri için hücreleri boyadıktan sonra, hücreleri akış sitometrisi ile analiz edin. Burada, anestezi uygulanmış veya kurban edilmiş hayvanlardan toplanan lenf nodları için örnek ileri ve yan, dağılım grafikleri gösterilmektedir.

İki saçılma grafiğinin canlı lenfosit kapılarındaki hücrelerin profilleri ve yüzdeleri aynıdır. Lenf nodu cerrahisinin hücreleri toplamak için uygun bir teknik olduğunu göstermek: Bir kez ustalaştıktan sonra, lenf nodu ameliyatı, uygun şekilde yapılırsa fare başına beş ila 10 dakika içinde yapılabilir.