Name: Bir Fare Modelinde İntravenöz Öz Yönetim Yöntemleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 9 s
Description: Öğrenin farelerde intravenöz öz yönetim çalışmaları için kateterizasyon cerrahisi ve kateter açıklığını koruma tekniklerini. Bu yöntem bağımlılık mekanizmalarını anlamak için güvenilir veri toplamayı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Deney hayvanları üzerinde yapılan Hayvan Bakım ve McGill Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak yapıldı. Bu araştırma Sağlık Araştırması (CIHR) ve Kanada Enstitüsü&#39;nün KG verilen fonları tarafından desteklenmiştir. Çıkar çatışması ilan etti.

1. Hayvan Konut ve Alışma Prosedürleri <ol><li> Erkek ve dişi CD-1 fare su şişeleri ve gıda karşılamak için tel ızgara kapaklı beta çipine yatak ve nestlet yastıkları, içeren standart plastik kafeslerde eşcinsel littermates, kafes başına en fazla 5 hayvan ile yerleştirilmiştir. Standart fare yemi ve su deney boyunca ev kafeslerine mevcut ad libitum bulunmaktadır. </li><li> Fare bir ters ışık-karanlık zamanlama (22:00 10:00 &#39;ışıkları) tutulur. </li><li> Fare deneysel prosedür başlamadan önce bir hafta boyunca IVSA test odaları iklime alıştırmak için izin verilir. </li></ol> 2. Edimsel Eğitim <ol><li> Şekerli süt eğitim ve intravenöz ilaç öz-yönetim oturumu dahil tüm davranışçı tedaviler 2 ultra-hassas fare kolları, diper bardak, uyarıcı ışıklar ve mikrolitre şırınga pompaları (Med Association ile donatılmış 15,9 x 14 x 12,7 cm, ölçüm edimsel odaları kullanılarak yapılmaktadırates Inc, St Albans, VT, ABD). Chambers donatı planı programlamak ve veri toplamak için Med Associates Akıllı CR arayüzü ve Med-PC yazılımı kullanılarak bir bilgisayara bağlanabilirler. </li><li> Naïve fareler edimsel odalarına alışan ve diper fincan sunulan bir şekerli süt ödül (0,1 ml) kullanarak kolu basın için eğitilmiştir. Operant süt eğitim 5-7 gün boyunca 1 saatlik seans yapılır. Etkin kolu üzerinde sabit bir oranı (FR) programının tamamlanması dipper fincan ve bir uyarıcı ışık aydınlatma tanıtımı sonuçlandı. Şekerli süt çözeltisi sütler (3,25% yağ içeriği) eklenen sakaroz (10 mg / ml, ACS Reaktif, Sigma-Aldrich Inc St-Louis MO, USA) oluşuyordu. Şekerli bir çözelti süt ya da bir sıvı besin güçlendiricidir ile operant eğitim operant fareler 1,2 yanıt kolaylaştırmak için kullanılan yaygın bir tekniktir. </li></ol> 3. Cerrahi Sırasında Kullanılacak Ekipman hazırlanması RequIRED ekipmanları - 20, 23 ve 26 gauge iğne, taşlama, 1 cc şırınga, Tygon tüp, havya, heparin, antibiyotikler ve analjezik. <ol><li> 20 gauge iğne aşağı tıraş tarafından juguler vene kateter yerleştirilmesi yönlendirecek bir iğne hazırlayın. Iğne mili vene kateter tüp rehberlik iğne içinde bir kanal oluşturmak için bir değirmeni kullanarak aşağı traş edilir. İğne kanalı dikkatle tevdi edilmiş herhangi bir metal artıkları kontrol edilmelidir. Kanal için herhangi bir engel ince uçlu forseps kullanılarak kazınıp atılmalı. </li><li> Yıkama ve kateter kontrol edilmesi için kullanılmak üzere iki adet 1 cc şırınga uyarlamak. Tygon boru 12 cm parça alarak ve 1 cc şırınga yapıştırılmış 26 gauge iğne ile bir ucunda onları takın ve 23 gauge iğne üzerinde hortumun diğer uçları germe tarafından iki şırınga hazırlayın. Bir şırınga bir heparinize tikarsilin çözeltisi (tikarsilin 33 mg ile% 0.9 steril tuzlu su ve diğer doldurulmalıdırve steril salin 10 ml heparin başına 0.3 mg). </li><li> Kateter kanül kapaklar hazırlayın. Tygon tüp bir 23 gauge iğne gerilir ve konik 1 cm kesilir. Kalın bir mühür oluşturmak için boru parçasının açık olan ucundan eritin. Hortum tüm kanül kapak kanül ucuna sıkıca kapalı ucu geçme ile, kateter kanül üzerine uyacak şekilde yeterince uzun olacak şekilde eritilir olmalıdır. Kapağı çok uzun ise, o vidalı kateter kapsar bağlama işlemi sırasında eğildi ve sonradan delinmiş olacak bir risk olduğunu unutmayın. Böylece kateter kapaklar dikkatli bir hazırlık kanül ile iyi bir uyum sağlamak için, tavsiye edilmektedir. </li><li> Gerekli çözümleri hazırlayın. Tüm reaktifler Sigma-Aldrich Inc (St-Louis MO, ABD) satın alınır. <ol class="lalpha"><li> Kateter yıkama için Heparinize tikarsilin çözüm - 0.33 g tikarsilin (disodyum tuzu) ve steril serum fizyolojik 10 ml heparin 0.003 gr çözülür. Çözeltisi 0.03 mL thr temizlendiGünlük ough kateter. Antibiyotik çözüm geliştirme kan pıhtıları ve enfeksiyonları önlemek için uygulanır. </li><li> Deri altı enjeksiyon için Amikicin (antibiyotik) - A tek bir subkutan enjeksiyon, 10 mg / post-operatif enfeksiyonları önlemek için kg &#39;lik bir dozda ameliyatı takiben verilir. </li><li> Deri altı enjeksiyon için ketoprofen (analjezik) - A tek bir subkutan enjeksiyon 5 mg / herhangi ameliyat sonrası ağrı yönetimi kg &#39;lik bir dozda ameliyatı takiben verilir. </li></ol></li></ol> 4. Kateter İmplantasyon Cerrahi Gerekli ekipman ve reaktifler: İzofluran, steril salin, alkol (% 70), 1 ve 3 cc şırınga steril salin, 1-cc adapte şırıngalar, Yukarıdaki bölümde 3, fare kateterler (CamCaths, Cambridgeshire, UK hazırlanan antibiyotik ve analjezik çözümleri ile dolu ), kateter kapakları (HRS Bilimsel, Montreal, Quebec kristal kapaklar), göz yağlayıcı, (bu damar yükseltmesine 4 cm plastik çubukplastik bir Q-ucu), polysporin, steril pamuklu çubuklar ve gazlı bez, kavisli ve düz forseps, arter kelepçeler, ince makas inşa edilebilir. <img src="/files/ftp_upload/3739/3739step1.jpg" alt="Adım 1" fo:content-width="3in" fo:src="/files/ftp_upload/3739/3739step1highres.jpg"/><ol><li> Standart aseptik teknikler cerrahi tezgah, cerrahi aletler ve kateterlerin kullanılması ameliyat öncesinde sterilize edilir. Uygun sterilizasyon teknikleri CamCaths satın cerrahi aletler ve kateterler için otoklav buhar içerir. Cam boncuk sterilizasyon ayrıca cerrahi aletlerin uçları kullanılabilir. Etilen oksit sterilizasyon riski erime olduğunu daha hassas kateterler veya malzemeler üzerinde istihdam edilebilir. Kemirgen cerrahi aseptik teknikler daha ayrıntılı bir açıklaması ilişikteki referanslar 1,2 bulunabilir. Tezgah kurma, cihazlar ve bakım anestezi için burun konisi fotoğrafı gösterilmiştir. </li><li> Fare izofluran gaz anestezisi, ve bir atma sistemi altında bir solunum tüpü kullanılarak anestezi altında yapılmaktadır. Göz yağlayıcı (Tears Naturale PM) işlem sırasında kurumasını önlemek için her iki göze uygulanır. Uygun cerrahi sınır hayvanın sırtına ve boynuna traş edilir. Herhangi kesiler yapılır önce, cerrahi alanları steril örtüler kullanarak sınırlıdır. </li><li> Kalbin sağ atriyum içine yerleştirilmesi için kateter hazırlamak için, fazlalık kateter tüp, kateter bir ampul itibaren 1,2 cm kesilir. Bu yetişkin CD-1 farelerde, yaş yaklaşık 8 hafta, 20-25 gram vücut ağırlığı için kurulan uygun uzunluğudur. Kateter tüp uzunluğu fare suşu, büyüklüğü ve yaşına göre, (deneme ve yanılma ile) hafifçe ayarlanması gerekebilir. Yerleştirilmeden önce, steril tuzlu su içeren şırınga (bölüm 3.2) kateter kanül takılır ve kateter temizlendi ve kaçakları kontrol. TutmakBu şırınganın cerrahi prosedür boyunca kateter bağlı. Bu kateter yıkayın ve adım 4.7 kan geri çekmek için kullanılacaktır. </li><li> 2 cm uzunluğunda midscapular kesi arka ortasında başlayan ve kateter tabanına karşılamak amacıyla ensenin hemen altında biten yapılmış,% 70 alkol ile sterilizasyon olduğunu ardından. Bağ dokusu, deri altı kateter tabanı için yer açmak için forseps ile ayrı zorunlu olmalıdır. </li><li> Alanı% 70 alkol ile temizlenmesi sonra 2 cm çapraz kesi, hayvanların çene yukarı doğru gidiyor, sağ klavikulanın yapılır - ikinci bir sığ 1, sırtında hayvan yerleştirme. Juguler ven boyun deri altında yüzeysel bulunacaktır. Kateter hazırlıklarında, kateter tabanından boru arka kesiden çekilir ve sadece sağ omuz üzerinden deri altına tüp geçirerek yakın şahdamarından getirdi. Kateter tüpünün sonudursonra bir arter kelepçe takılı ve onu yerde tutmak için hayvanın yan yerleştirildi. </li><li> Sağ juguler ven hafifçe hayvanın boynuna kesiden yüzeysel bağ ve yağ dokusu uzaklaşıyor tarafından bulunur. Ven çevresinde bağ dokusu kavisli bir forseps kullanarak ayrı kırık ve ven daha sonra steril bir plastik çubuk kullanarak yükselir. Gevşek açık sütür venin her iki ucu etrafında yapılır ve kateter tüp tepe püskülü aracılığıyla dişli ve sağ omuz üzerinden çözülür dinlenmek için dikiş ipliğinin üzerinde döngü gerçekleştirilir. </li><li> Önce ekleme için, ıslak sürtünmeyi azaltmak için steril serum fizyolojik ile 20 gauge ekleme iğne ve ven hem de. İğne damarına paralel olarak düzenlenen ve yükseltilmiş ven (Not: iğne ucu yaklaşık 0,5 cm ven girmesi gerekir) altına yakın yavaşça eklenir. Forseps kullanarak, ven içine iğne mili aşağı kateter tüp kaydırın. Direnç bu boru i işaret ederbağ dokusu içinde değil ven içinde s. Hiçbir sızıntı olmadığından emin olmak için damar yoluyla tuzlu 0.03 cc itin. Kaçaklar ven deldi veya kateter tüp yerleştirme ayarlanması gerektiğini olabileceğini işaret eder. Not: Hortumun ven içinde olup olmadığını kontrol etmek için, ekteki salin şırınga kullanarak bazı kan çekmeyi deneyecek. Kan hemen çizilebilir yapamıyorsanız, ven veya kalp duvarının kateterin ucu tıkanıklığını gidermeye olabilir veya ven deldi olmamıştır; tüp ayarlayın ve tekrar deneyin. Kan hala çizilmiş olamaz eğer İğne reinsertion gerekli olabilir. </li><li> Yerinde kateter sabitlemek için, ekleme noktası için kateter ampul itmek ve iğne çıkarılır. Alt düğüm ve daha sonra ampul Yukarıdaki ikinci düğüm sağ ipe önce bar karşı kateter sifonu çekerim. Kan çizilebilir görmek ve gerekirse biraz eğer knot gevşetmek için tekrar sınayın. Deri ve dikiş altında kateter tüp sıkıştırınhayvanın boynuna ventral kesi. Steril pamuk uçlu bir aplikatör veya tercihen kapalı kesi bazı analjezik içeren diğer antibiyotikli merhem kullanarak Hızlı Heal Polysporin uygulayın. </li><li> Onun karın hayvan ile hazırlanan kesi içinde arka deri altında kateter tabanı yerleştirin. Aşırı boru minimal ilmekledi ve iyi çiğneme ve piercing hayvanın şansını en aza indirmek için kateter tabanı altında gizli olduğundan emin olun. Kateter baz her iki kesik dikiş, ve steril bir pamuk uçlu bir aplikatör kullanılarak Polysporin Heal hızlı uygulanır. </li><li> Yapıştırılmış boru (bölüm 3.2) ile şırınga kullanarak heparinize tikarsilin çözüm 0,03 cc ile kateter yıkayın. Beyaz kateter kapağı üzerindeki plastik kanül kapağı ve vida ile kanül kapak takın. Kanül şapkalı önce ameliyat taze bazı farelerde kan kateter dışarı sızabilir. Bu re-floş hayvan ve rapidl önemlidirKan akmaya şansı bulamadan y kanülün kapağını değiştirin. Hayvanlar kateter açıklığını korumak için günlük olarak yıkanması gerekir. </li><li> % 70 etanol ile hayvanlara arka bacakları arasından enjeksiyon alan aşağı silme sonra, deri altından bir tarafında 5 mg / kg &#39;lık bir dozda enjekte analjezik ketoprofen, ve diğer yan üzerinde 10 mg / kg&#39; lik bir dozda antibiyotik amikicin. </li><li> Anestezi kesilir sonra, hayvanlar 5 ila 7 gün boyunca yiyecek ve su kolay erişim ile temiz bir kafes içinde kurtarmak için izin verilir. Fare post-operatif hipotermi önlemek için bir gecede bir ısıtmalı kabin konulmalıdır. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3739/3739step2.jpg" alt="Adım 2" fo:content-width="4.75in" fo:src="/files/ftp_upload/3739/3739step2highres.jpg"/> 5. Davranışsal test - Öz-Yönetim İntravenöz <ol><li> Davranış testi kateterler öncesinde% 0.9 steril serum fizyolojik ile temizlendi. Fare ardından yerleştirmek edilird operant odalarında ve infüzyon hattı ve infüzyon pompası bağlanır. Aktif Kolu pres uyarıcı ışık aydınlatması ile birleştiğinde bir 3.2 sn 18 ul ilaç infüzyonu ile sonuçlanabilir. Her kolu basın uyarıcı ışığı açık kalır dönem sırasında üzerinden 8 sn süre ile takip edilir. </li><li> Edimsel oturumun ardından, farelerin kateterler evlerine kafes iade edilmeden önce heparinli tikarsilin çözeltisi ile temizlendi. </li><li> Fareler her dozda 3 ardışık 2-hr oturumları için kendini yönetmek için izin verilir. Aşağıdaki bölümde gösterildiği gibi Dozlar her fare için rastgele sırayla sunuldu. </li><li> Kateter açıklığı tuzlu ve antibiyotik solüsyon hem kateter ile yıkanabilir sağlayarak günlük değerlendirilir. Ekli referans 5 içinde tarif edildiği gibi Buna ek olarak, midazolam / ketamin deney yapılır. Kısaca, bu tür 0,02-0,03 ml ketamin (15 mg / ml) bir infüzyon 5 saniye içinde hareketsizlik gibi anestezi belirtileriveya midazolam (0.75 mg / ml) midazolam patent kateter 5 kanıtıdır. </li></ol>

<ol><li>Rocha, B. A., Ator, R., Emmett-Oglesby, M. W., Hen, R. Intravenous Cocaine Self-Administration in Mice Lacking 5-HT1B Receptors. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 57 (3), 407-412 (1997).</li>
<li>Zapata, A., Chefer, V. I., Ator, R., Shippenberg, T. S., Rocha, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+sensitization+and+enhanced+dopamine+response+in+the+nucleus+accumbens+after+intravenous+cocaine+self-administration+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Behavioural sensitization and enhanced dopamine response in the nucleus accumbens after intravenous cocaine self-administration in mice.</a> European Journal of Neuroscience. 17 (3), 590-596 (2003).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586(2011).</li>
<li>Hoogstraten-Miller, S. L., Brown, P. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHoogstraten-Miller%2C+SL+%22Techniques+in+Aseptic+Rodent+Surgery+Current+Protocols+in+Immunology%22">Techniques in Aseptic Rodent Surgery Current Protocols in Immunology</a>. , John Wiley & Sons, Inc. 1.12-1.14 (2001).</li>
<li>Thomsen, M., Caine, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+Intravenous+Drug+Self-Administration+in+Rats+and+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience.+%22%5BJournal%5D)">Chronic Intravenous Drug Self-Administration in Rats and Mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. . 9, 20.1-20.40 (2005).</li>
<li>Gill, K. J., Boyle, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirmation+of+quantitative+trait+loci+for+cocaine+induced+activation+in+the+AcB%2FBcA+series+of+recombinant+congenic+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogenetics%22%5BJournal%5D)">Confirmation of quantitative trait loci for cocaine induced activation in the AcB/BcA series of recombinant congenic strains.</a> Pharmacogenetics. 13, 329-338 (2003).</li>
<li>Gill, K. J., Boyle, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+influences+on+drug-induced+psychomotor+activation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Genetic influences on drug-induced psychomotor activation in mice.</a> Genes, Brain & Behavior. 7, 859-868 (2008).</li>
<li>Boyle, A. E., Gill, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+AXB%2FBXA+recombinant+inbred+lines+of+mice+to+the+locomotor+activating+effects+of+cocaine%3A+A+QTL+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogenetics%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of AXB/BXA recombinant inbred lines of mice to the locomotor activating effects of cocaine: A QTL analysis.</a> Pharmacogenetics. 11 (3), 255-264 (2001).</li>
<li>Boyle, A. E., Gill, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+verification+of+previously+identified+QTLs+for+cocaine-induced+activation+using+a+panel+of+B6.A+chromosome+substitution+strains+%28CSS%29+and+A%2FJxC57Bl%2F6J+F2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">A verification of previously identified QTLs for cocaine-induced activation using a panel of B6.A chromosome substitution strains (CSS) and A/JxC57Bl/6J F2 mice.</a> Psychopharmacology. 207 (2), 325-3234 (2009).</li>
<li>Thomsen, M., Caine, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychomotor+stimulant+effects+of+cocaine+in+rats+and+15+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Psychomotor stimulant effects of cocaine in rats and 15 mouse strains.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 19 (5), 321-341 (2011).</li>
<li>Thomsen, M., Caine, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+drug+self-administration+in+mice%3A+practical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior+genetics%22%5BJournal%5D)">Intravenous drug self-administration in mice: practical considerations.</a> Behavior genetics. 37 (1), 101-118 (2007).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Uyuşturucu hayvan modelleri uyuşturucuyla ilgili davranışların genetik temelini anlamada yararlıdır. Örneğin, farklı genetik profilleri ile farelerin kokain 6-8 duyarlılıkları farklılıklar kalıtsaldır ve identify potansiyel gen adaylar fenotipik değişkenlik 9 gözlenen arabuluculuk yardımı göster. Bu yazıda anlatılan intravenöz kateterizasyon girişimlerinde farelerin yanı sıra farklı genetik geçmişleri 10 farelerde çeşitli suşları ilaç IVSA incelemek için hatırı sayılır bir başarı ile kullanılmaktadır. Bu videoda gösterilen işlemler sırasında odaklanmak önemli faktörler vurgulamak ve güvenilir intravenöz kendinden-yönetim veri elde etmek amacıyla kateterizasyon cerrahi sonrası. İlk olarak, sağ atriyum içinde kateter tüp yerleştirme blot pıhtı ikinci kateter yetersizliği önlemek için son derece önemlidir. Ameliyat sırasında emin olmak için önemli olduğu katetersonunda engelsiz ve kalp veya damar dokusu da tıkanmasıyla değildir. İkinci olarak, her gün sonda yıkama tıkanıklıkları önlemek için operant seans önce hem de sonra gereklidir. Son olarak, kateter kanül enkaz girişini önlemek için, hayvanlar kafeslerine zaman kanül kapaklar ve kristal hem kapaklar sürekli örtülmelidir. Kateter kanül Minör tıkanması, özellikle hayvanlar IVSA için test edilmemiştir günlerde, heparinize antibiyotik solüsyon gerekli olan ancak günlük yıkama, ince bir 26 gauge iğne kullanılarak yerinden olabilir. Hayvan sağkalım cerrahi, aseptik tekniklerin iyi bir bilgi gerçekleştirmek için, analjezi ve anestezi gereklidir. Bu videoyu uygun bir cerrahi eğitimi yerine geçmez iken, bu paradigma için gerekli teknikleri edinmek isteyen araştırmacılar için bir kılavuz olarak kullanılabilir.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Tikarsilin disodyum tuzudur </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T5639-1G </td><td> 1 gram şişe </td></tr><tr><td> Tears Naturale PM (Göz yağlayıcı) </td><td> Alcon </td><td> N / A </td><td> 3,5 gram tüpü Bu göz yağlayıcı çoğu eczanelerde bulunabilir. Herhangi bir oftalmik göz yağlayıcı madde kullanılabilir. </td></tr><tr><td> Kokain </td><td> Medisca Pharmaceutique </td><td> 0723-06 </td><td> 1 gram şişe </td></tr><tr><td> Ketamin </td><td> Medisca Pharmaceutique </td><td> 1754-1704 </td><td> 25 gram şişe </td></tr><tr><td> Midazolam </td><td> Medisca Pharmaceutique </td><td> 2519-06 </td><td> 1 gram şişe </td></tr><tr><td> Heparin sodyum tuzu </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> H4784-250MG </td><td> 250 gram şişe </td></tr><tr><td> Ketoprofen </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> K1751-1G </td><td> 1 gram şişe </td></tr><tr><td> Amikicin Sülfat tuzu </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A2324-5G </td><td> 5 gram şişe </td></tr><tr><td> Sakaroz ACS Reaktif </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S5016-500G </td><td> 500 gram şişe </td></tr><tr><td> Yumuşak örgü Standart fare kateterler </td><td> CamCaths </td><td> MIVSA/20/26/BC-1S </td><td> Boru özellikler: 26SWG; 0,451; 0,254 </td></tr><tr><td> Kristal kap aplikatörü </td><td> HRS Bilimsel </td><td> 313CAC </td><td> Bu beyaz kateter kap olduğunu. </td></tr><tr><td> Tygon Mikro Boru Çap </td><td> Thomas Bilimsel </td><td> 9561S41 </td><td> Boru özellikler (çap inç x od x duvar kalınlığı): .01 x .03 x .01 </td></tr>
 </tbody>
</table>

bir fare modelinde İntravenöz Öz yönetim yöntemleri

Methods for Intravenous Self Administration in a Mouse Model

Hayvan modelleri intravenöz kendinden-yönetim (IVSA) paradigma dahil ilaçların takviye etkileri incelemek için geliştirilmiştir. Kokain gibi kötüye ilaçların takviye özelliklerini incelemek için bir IVSA paradigma kullanmanın avantajları ilacın yerine öz-yönetilen deneyci-yönetilen, takviye programı değiştirilebilir olduğu gerçeği, ve miktarlarının hassas bir şekilde ölçebilecek ilaç olarak tüketilen zamanlama ve IV enjeksiyon kalıbı elde edilebilir. Ayrıca, idarenin intravenöz ilk geçiş metabolizması veya tat ile ilgili potansiyel karıştırıcıların önler, kan ve beyin ilaç düzeyleri hızlı artışlar üretir. Bu video özetlendiği gibi, intravenöz öz-yönetim yıkama ve bakım cerrahi ve titiz günlük kateter sırasında dikkatli kateter yerleştirilmesini takiben önceden yiyecek kısıtlaması veya önceden ilaç eğitim olmadan elde edilebilir. Bu belirtilen deneysel prosedürlerkağıt bir hayvan barınağı tanımı ve alıştırma yöntemleri, şekerli süt çözümlerini kullanarak edimsel eğitim ve kateter implantasyonu içerir.

<img src="/files/ftp_upload/3739/3739fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. İntravenöz ilaç öz-yönetim için yanıt paterni kullanılan ilaç, doz aralığı ve fare zorlanma göre değişir. Sunulan rakam video açıklanan yordamı kullanarak başarılı kateterizasyon operasyonlar sonrasında kokain öz-yönetim verileri gösterir. Şekil kokain infüzyon takviye bir FR1 zamanlamaya göre rastgele sırayla sunulan 4 kokain doz aralığında (mg / kg vücut ağırlığı) kazandı ve ortalama (± SEM) kokain tüketimi (± SEM) anlamına gösterir. Abscissa: infüzyon başına kendi kontrolünde ilaç dozu. Sol Ordinat: infüzyonlarının toplam sayısı 2-hr edimsel oturumu sırasında kazandı. Sağ Ordinat: 2-hr test oturumu sırasında mg / kg toplam kokain alımı. Tüm 13 kateterler çalışma süresi (4 hafta) patent kalmıştır. Doz konusunda yapılan tek yönlü ANOVA ortaya koyduğu mikrofonE [F (1,12) = 42.8, p &lt;0.05]. doza bağımlı bir şekilde kokain idare edildi Doz-yanıt eğrisi [F (3,36) = 29.6, p &lt;0.05] daha yüksek dozlarda basarak kolu bir düşüşe rağmen fazla kokain tüketiminin bir artış vardır. Her veri noktası CD-1 fare (kombine n = 13 / doz, erkek ve kadın) toplanan her kokain dozu (± SEM) az 3 test seans ortalama temsil eder. Doz yanıt eğrisi boyunca yanıt aktif (ilaç takviyeli) vs inaktif kolu Karşılaştırmalar bu fareler iki kolu arasında ayrımcılık vardı sağlamak için iki yönlü ANOVA kullanılarak yapılmıştır. CD1 fareler için analiz aktif kolu için bir tercih [F (1,12) = 10.255, p &lt;0.05] tam doz-tepki eğrisi (veriler burada gösterilmemiştir) üzerinde mevcuttu.

Intravenöz kendinden-yönetim (IVSA) paradigma kemirgenlerde kötüye ilaçların takviye özelliklerini incelerken altın standart olarak kabul edilir. Bu yazıda güvenilir IVSA verilerini elde etmek için gerekli deney prosedürleri ve cerrahi teknikler özetliyor. Özellikle, titiz kateter implantasyonu ve bakım vurgulanır.

Bir Fare Modelinde İntravenöz Öz Yönetim Yöntemleri

İntravenöz kendi kendine uygulama (IVSA) paradigması da dahil olmak üzere, ilaçların pekiştirici etkilerini incelemek için hayvan modelleri geliştirilmiştir. Avantajları...

Merhaba, benim adım Elizabeth Kotick; McGill Üniversitesi Sağlık Merkezi'nin bağımlılık birimindeki Dr. Katherine Gill'in laboratuvarından geliyorum. Bugün size, intravenöz kendi kendine uygulama çalışmalarını yürütmek için gerekli olan kateterizasyon cerrahisinin nasıl gerçekleştirileceğini göstereceğim. Kateterin nasıl yerleştirileceğini gösterecek ve kateter açıklığının korunmasına yönelik bazı ipuçları paylaşacağım.Nikotinle intravenöz kendi kendine uygulama seansları sırasında, hayvanlar plastik tüpler aracılığıyla Tai sistemine bağlanır ve nikotin infüzyonları bağlı infüzyon pompaları tarafından gerçekleştirilir. Operant kutuları Med Associates'den satın alınmıştır. Her kutu, iki adet ultra hassas fare kaldıracıyla donatılmıştır.Kateterin vena içerisine yerleştirilmesi için cerrahi işlem öncesinde hazırlanması gereken birkaç öğe bulunmaktadır. Tüpün vena içerisine kaydırılması için 20 gauge bir iğnenin modifiye edilmesi gerekir. Kateter tüpünü vena içerisine yönlendirmek için kullanılacak bir kanal oluşturmak amacıyla, iğne şaftının üst kısmından yaklaşık iki santimetre tıraşlanmalıdır.Ardından, kateteri yıkamak ve kontrol etmek için şırıngaları hazırlayın. 12 santimetrelik bir tüpün bir ucu şırınganın 26 gauge iğnesine takılıyken, diğer ucu 23 gauge bir iğne üzerine gerilmiştir. Tüpün kateter kanülüne daha kolay sabitlenmesini sağlamak için, biri heparinli T carcin çözeltisiyle, diğeri ise salinle doldurulmuş bu şırıngadan iki adede ihtiyacınız olacaktır.Son olarak, kateter kanül kapağını hazırlayın. Kalıntıların içeri girmesini önlemek için kateter kanülün kapatılması gerekir. Bu kapaklar, plastik tüplerin 23 gauge iğneler üzerine gerdirilmesiyle yapılır.Tüp, iğne ucundan bir santimetre uzaklıktan kesilir ve tüpü mühürlemek için açık uç eritilir; kapaklarda sızıntı olmadığından emin olmak için iğneden serum fizyolojik itilir. Fare kateterleri, Birleşik Krallık'taki Cam Cs'den temin edilmiştir. Kateter ampulünün ucundan 1,2 santimetre kalacak şekilde kateterdeki fazla tüp kısmını kesin.Ardından, serum fizyolojik içeren şırıngayı kateterin dış metal kanülüne takın ve sızıntı olup olmadığını kontrol etmek için yıkayın. Fareler, oksijen ile karıştırılmış izofluran gazı kullanılarak anestezi altına alınır ve cerrahi işlem boyunca anestezide tutulur. Bir solunum tüpü kullanılarak hem oksijen hem de izofluran seviyeleri hayvanın vücut ağırlığına göre ayarlanır ve cerrahi sırasında gerektiğinde düzenlenir; hayvanın arka bacaklarını pensle sıkarak yeterince anestezi altında olduğundan emin olun ve cerrahi boyunca fareyi solunum sıkıntısı ve anestezi derinliği açısından izleyin.Cerrahi işlem 20 ile 30 dakika arasında sürdüğünden, her iki göze göz kayganlaştırıcısı uygulayın. Fare, cerrahi işlemden önce tıraş edilir. Hayvanın sırtında kateter tabanı için bir alan hazırlayın.Hayvanın sırtındaki deriyi nazikçe yukarı kaldırın ve kürek kemikleri arasında yaklaşık iki santimetre uzunluğunda küçük bir boylamsal insizyon yapın. Sırtın orta kısmından başlayıp boynun hemen altına kadar uzatın. Kateter tabanı için yer açmak amacıyla bağ dokusunu ayırın ve insizyon bölgesine salin uygulayın.İnsizyonun her iki yanındaki deriyi nazikçe bir araya getirin ve hayvanı ters çevirin. Sağ tegular ven, boyun derisinin yüzeysel kısmında bulunur ve sığ bir insizyon yapılarak açığa çıkarılabilir. Sağ klavikula civarından başlayıp hayvanın çenesine doğru yukarı uzanan, yaklaşık bir ila iki santimetre uzunluğunda diyagonal bir kesi yapın.Kateterin tabanından gelen tüpün, vene yerleştirilmeye uygun hale gelmesi için boyundaki ventral insizyondan geçirilmesi gerekir. Pensle omuz derisinin altından ilerleyin ve bağ dokusunu kesin. Sırt insizyonuna ulaşmak için, tüpü hayvanın boynundaki ventral açıklığa doğru deri boyunca çekin.Tübün ucunu arter klempleriyle tutun ve hayvanın sağ tarafında klempli halde bırakın. İnsizyona salin uygulayın, sağ jugular veni izole edin. Görüşünüzü engelleyebilecek tüm bağ ve yağ dokularını çok nazikçe uzaklaştırın ve veni bulun.Damarın üst kısmını nazikçe kaldırın ve damarın çevresindeki ve altındaki adipoz ve bağ dokuyu ayırmak için eğri pens kullanın. Eğri pensi damarın altına yerleştirin ve boşta kalan elinizle pensi açın. Damarın altına steril bir plastik bar yerleştirin.Ven yükseltildikten sonra, veni net ve engelsiz bir şekilde görebilmek için yeterli miktarda yağ dokusunu uzaklaştırın. Açığa çıkan venin nemli kalması için periyodik olarak üzerine salin damlatın. Kateter tüpü juguler bölgeye yerleştirildiğinde sabitleyebilmek için venin etrafında sütür düğümleri hazırlayın.Her iki uçta venin altına süturlar yerleştirin ve her bir uçta tek bir çok gevşek açık düğüm atın. Kateter tüpünü üst düğümden geçirin ve sütur ipinin üzerinden dolaştırarak sağ omuzun üzerinden geriye doğru yönlendirin. Kateter tüpünü juguler vene yerleştirmek için tüpü ağırlaştırmak amacıyla kateterden salin itin.Modifiye edilmiş 20 gauge iğne, veni delmek için kullanılır; yerleştirme sırasında sürtünmeyi azaltmak için hem veni hem de yerleştirme iğnesini salin ile ıslatın, plastik çubuğu nazikçe geri çekin ve iğneyi venin alt kısmına daha yakın bir noktadan yerleştirin. İğnenin yarım santimetresi içeri girecek kadar yerleştirmeniz yeterlidir. Kateter tüpünü iğne üzerinden kaydırarak venin içine ilerletin.Herhangi bir dirençle karşılaşılmamalıdır. Direnç oluşması, bağ dokusunda olduğunuzu gösterir. Damar içinde olduğunuzdan emin olmak için, kan çekip çekemediğinizi görmek amacıyla kateter şırıngasını geri çekmeyi deneyin.Tüpler yerleştirildikten sonra, iğneyi çıkarın ve kateter balonunu yerleştirme noktasına doğru itin. Alt düğümü bağlayın ve ikinci düğümü balonun hemen üzerine bağlamadan önce kateter tüpünün çubuğa tam olarak yaslandığından emin olun. Bu işlem, kateteri yerinde sabitleyecektir.Barı çıkarın ve her iki uca ikinci bir düğüm atın. Sütürlemeden önce kateter tüpünü ve sütür iplerini derinin altına itin. Sütür iğnesini deriden geçirmek için arter klembini kullanın ve insizyonu kapatın.Dikiş sayısı, insizyonun boyutuna göre değişiklik gösterecektir. Hayvan karnüstedeyken kateter tabanını hayvanın sırtına yerleştirin. İnsizyona salin uygulayın ve kateter tabanını derinin altına kaydırın.Delinme olasılığını en aza indirmek için tüpün minimum düzeyde kıvrıldığından ve tabanın altında olduğundan emin olun. Kateter tabanının etrafındaki cildi dikin. Dikiş sayısı, insizyonun boyutuna bağlı olacaktır.Genellikle üç ila dört dikiş yeterlidir. Kateterden hala kan çekilebildiğinden emin olun. Son olarak, enfeksiyonu ve kan pıhtısı oluşumunu önlemek için kateteri heparinli tein çözeltisi ile yıkayın.Kateter kanülüne bağlı olan boruyu gevşetin. Ardından, salin tüpünü çıkarın ve hızlıca heparinli T Carin solüsyonu içeren şırınganın borusuyla değiştirin. Kateteri 0,03 ila 0,05 ccs solüsyon ile yıkayın.Kanüle bağlı olan boruyu tekrar gevşetin. Kateter kapağını pensle tutun ve tek bir hareketle boruyu kanülden çıkarıp yerine kateter kapağını takın. Kanın yukarı çıkmasını önlemek için bu işlem hızlıca gerçekleştirilmelidir.Kanül ucunu delmediğinden emin olarak beyaz kateter kapağını sıkıca vidalayın. Fareye deri altına analjezik ve antibiyotik enjekte edin. Bir taraftan kilogram başına beş miligram dozunda analjezik ketoprofen ve diğer taraftan kilogram başına 10 miligram dozunda antibiyotik amikasin enjekte edin.Anestezi kesildikten sonra, farelerin yiyecek ve suya kolayca erişebilecekleri temiz bir kafeste iyileşmelerini sağlayın. Bu videoda sunulan teknikler izlenerek güvenilir intravenöz kendi kendine uygulama verileri elde edilebilir. Ancak, kateter açıklığının korunması önemlidir.Bu durum, kateterin sağ atriyuma dikkatlice yerleştirilmesi, operasyon seanslarından önce ve sonra kateterin her gün yıkanması ve kalıntı girişini önlemek için kateter kanülünün sürekli kapalı olduğundan emin olunmasıyla sağlanır.

methods-for-intravenous-self-administration-in-a-mouse-model

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Kapsamlı preklinik test merkezi sinir sistemine etkili ilaçların genellikle belirli uygulama yolları ile bağlantılı olarak değerlendirilmesi ve ilaç biodistribution karşılaştıran içerir. Burada, yaygın olarak kullanılan üç sistemik teslimat yöntemleri (intravenöz, intraperitoneal ve sözlü) yanı sıra yerel teslimatı için bir yöntem (konveksiyon gelişmiş teslimat) farelerde gösterilmiştir.

Kemirgen Modeller Merkezi Sinir Sistemi Hastalıkları Tedavisinde Sistemik ve Yerel İlaç Taşıyıcı

Araştırma kemirgenler ile güvenli ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri bir temel yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli işlemek ve etkili fare ve sıçanlara bileşikler yönetmek için gerekli temel ilkeleri sunacak.

Manuel Tutucu ve Fare ve Sıçanlarda Ortak Bileşik İdaresi Rotalar

Merkezi sinir sistemi içine yenidoğan farelerin beyin (intraserebroventriküler) ve (intravenöz) 2) sistemik tedavi ajanları tanıtmak içine 1): Bu makale, enjeksiyon iki çok farklı yöntemler göstermektedir.

Fare intraserebroventriküler sayesinde Terapötik Ajanlar teslimi (ICV) ve intravenöz (IV) Enjeksiyon

Bu videoda, ilaçlar ve izleyici boyalar gibi deneysel ajanların intravenöz olarak in vivo olarak verilebildiği bir fare modelinin juguler venine bir kateter implante etmek için bir yöntemi açıklıyoruz. Böyle bir düzenleme, diğer sistemlere bağlandığında, hemodinami ve kan örneklemesini izlemek için de kullanılabilir.

Deneysel Ajanların Kateter Bazlı İntravenöz Enjeksiyonu: Fare Modelinde Deneysel Ajanların Juguler Ven Yoluyla İntravenöz Olarak Verilmesi İçin Bir Teknik

Kaynak: Kanazawa, T., et al. Burundan beyine ilaç dağıtımını değerlendirmek için inhalasyon anestezisi altında intranazal uygulama için yeni yöntemler. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, burundan beyine ilaç dağıtımını sağlamak için anestezi uygulanmış bir farede radyoaktif işaretli ilaçların intranazal uygulamasını göstermektedir. İlaçların nazal epitelden nasıl geçtiğini ve beyne ulaşmak için nöronal yollardan nasıl geçtiğini ve ayrıca siliyer hareketin ilaç tutulmasını ve klerensini nasıl...

Farelerde burundan beyine ilaç iletimi için pipet ve ters kanülasyon yoluyla intranazal ilaç uygulaması

Pediatrik hastalığın hayvan modelleri erken başlangıçlı ve agresif hastalığın ilerlemesini yaşayabilirsiniz. Klinik genç fare modelleri ile ilgili tedavi teslimat teknik olarak zor olabilir. Bu protokol, yaşamın ilk iki doğum sonrası gün içinde yeni doğmuş fareler için invazif olmayan bir damar içi enjeksiyon yöntemi tarif etmektedir.

Yenidoğan Farelerde intravenöz enjeksiyonlar

Bu protokol, farelerde çoklu intravenöz bolus dozu uygulaması ve invaziv hemodinamik izleme yürütmek için adım adım bir prosedür sağlar. Araştırmacılar bu protokolü pulmoner arter hipertansiyonu için gelecekteki terapötik bileşik taraması için kullanabilirler.

Hipoksi ile İndüklenen Fare Pulmoner Arter Hipertansiyon Modelinde Çoklu İntravenöz Bolus Dozu ve İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Bu protokol, açık cerrahi riskini önlemek ve kör perkütan enjeksiyonların doğruluğunu artırmak için farelerde intratimik enjeksiyon için oluşturulan girişimsel bir radyoloji prosedürünü tanımlamaktadır.

Farelerde İntratimik Enjeksiyon için Minimal İnvaziv, Doğru ve Etkili Bir Teknik

Burada, farelerde serbest el yaklaşımı kullanarak (yani stereotaksik bir cihaz olmadan) intraserebroventriküler enjeksiyonlar yapmak için basit ve hızlı bir yaklaşım açıklanmaktadır.

Farelerde Serbest El İntraserebroventriküler Enjeksiyonlar

İlaç öz-yönetim ve ultrasonik seslenmelere (USV) hayvanlar üzerinde yapılan araştırmalar davranış değerlendirmeler olarak kullanılan, ancak nadiren kombinasyonu. Bu makalenin amacı, duygusal tepkilerin ilaç deneyimi değerlendirmek için ilaç öz-yönetim işlemleri sırasında kayıt USVs avantajlarını anlatmak için.

Sıçanlar İlaç Öz-yönetim sırasında Ultrasonik seslenmelere Değerlendirilmesi

Öğrenin farelerde intravenöz öz yönetim çalışmaları için kateterizasyon cerrahisi ve kateter açıklığını koruma tekniklerini. Bu yöntem bağımlılık mekanizmalarını anlamak için güvenilir veri toplamayı sağlar.

Bir Fare Modelinde İntravenöz Öz Yönetim Yöntemleri

Daha fazla video keşfet