8 Aralık 2012
Intravenöz kendinden-yönetim (IVSA) paradigma kemirgenlerde kötüye ilaçların takviye özelliklerini incelerken altın standart olarak kabul edilir. Bu yazıda güvenilir IVSA verilerini elde etmek için gerekli deney prosedürleri ve cerrahi teknikler özetliyor. Özellikle, titiz kateter implantasyonu ve bakım vurgulanır.
Merhaba, benim adım Elizabeth Kotick; McGill Üniversitesi Sağlık Merkezi'nin bağımlılık birimindeki Dr. Katherine Gill'in laboratuvarından geliyorum. Bugün size, intravenöz kendi kendine uygulama çalışmalarını yürütmek için gerekli olan kateterizasyon cerrahisinin nasıl gerçekleştirileceğini göstereceğim. Kateterin nasıl yerleştirileceğini gösterecek ve kateter açıklığının korunmasına yönelik bazı ipuçları paylaşacağım.
Nikotinle intravenöz kendi kendine uygulama seansları sırasında, hayvanlar plastik tüpler aracılığıyla Tai sistemine bağlanır ve nikotin infüzyonları bağlı infüzyon pompaları tarafından gerçekleştirilir. Operant kutuları Med Associates'den satın alınmıştır. Her kutu, iki adet ultra hassas fare kaldıracıyla donatılmıştır.
Kateterin vena içerisine yerleştirilmesi için cerrahi işlem öncesinde hazırlanması gereken birkaç öğe bulunmaktadır. Tüpün vena içerisine kaydırılması için 20 gauge bir iğnenin modifiye edilmesi gerekir. Kateter tüpünü vena içerisine yönlendirmek için kullanılacak bir kanal oluşturmak amacıyla, iğne şaftının üst kısmından yaklaşık iki santimetre tıraşlanmalıdır.
Ardından, kateteri yıkamak ve kontrol etmek için şırıngaları hazırlayın. 12 santimetrelik bir tüpün bir ucu şırınganın 26 gauge iğnesine takılıyken, diğer ucu 23 gauge bir iğne üzerine gerilmiştir. Tüpün kateter kanülüne daha kolay sabitlenmesini sağlamak için, biri heparinli T carcin çözeltisiyle, diğeri ise salinle doldurulmuş bu şırıngadan iki adede ihtiyacınız olacaktır.
Son olarak, kateter kanül kapağını hazırlayın. Kalıntıların içeri girmesini önlemek için kateter kanülün kapatılması gerekir. Bu kapaklar, plastik tüplerin 23 gauge iğneler üzerine gerdirilmesiyle yapılır.
Tüp, iğne ucundan bir santimetre uzaklıktan kesilir ve tüpü mühürlemek için açık uç eritilir; kapaklarda sızıntı olmadığından emin olmak için iğneden serum fizyolojik itilir. Fare kateterleri, Birleşik Krallık'taki Cam Cs'den temin edilmiştir. Kateter ampulünün ucundan 1,2 santimetre kalacak şekilde kateterdeki fazla tüp kısmını kesin.
Ardından, serum fizyolojik içeren şırıngayı kateterin dış metal kanülüne takın ve sızıntı olup olmadığını kontrol etmek için yıkayın. Fareler, oksijen ile karıştırılmış izofluran gazı kullanılarak anestezi altına alınır ve cerrahi işlem boyunca anestezide tutulur. Bir solunum tüpü kullanılarak hem oksijen hem de izofluran seviyeleri hayvanın vücut ağırlığına göre ayarlanır ve cerrahi sırasında gerektiğinde düzenlenir; hayvanın arka bacaklarını pensle sıkarak yeterince anestezi altında olduğundan emin olun ve cerrahi boyunca fareyi solunum sıkıntısı ve anestezi derinliği açısından izleyin.
Cerrahi işlem 20 ile 30 dakika arasında sürdüğünden, her iki göze göz kayganlaştırıcısı uygulayın. Fare, cerrahi işlemden önce tıraş edilir. Hayvanın sırtında kateter tabanı için bir alan hazırlayın.
Hayvanın sırtındaki deriyi nazikçe yukarı kaldırın ve kürek kemikleri arasında yaklaşık iki santimetre uzunluğunda küçük bir boylamsal insizyon yapın. Sırtın orta kısmından başlayıp boynun hemen altına kadar uzatın. Kateter tabanı için yer açmak amacıyla bağ dokusunu ayırın ve insizyon bölgesine salin uygulayın.
İnsizyonun her iki yanındaki deriyi nazikçe bir araya getirin ve hayvanı ters çevirin. Sağ tegular ven, boyun derisinin yüzeysel kısmında bulunur ve sığ bir insizyon yapılarak açığa çıkarılabilir. Sağ klavikula civarından başlayıp hayvanın çenesine doğru yukarı uzanan, yaklaşık bir ila iki santimetre uzunluğunda diyagonal bir kesi yapın.
Kateterin tabanından gelen tüpün, vene yerleştirilmeye uygun hale gelmesi için boyundaki ventral insizyondan geçirilmesi gerekir. Pensle omuz derisinin altından ilerleyin ve bağ dokusunu kesin. Sırt insizyonuna ulaşmak için, tüpü hayvanın boynundaki ventral açıklığa doğru deri boyunca çekin.
Tübün ucunu arter klempleriyle tutun ve hayvanın sağ tarafında klempli halde bırakın. İnsizyona salin uygulayın, sağ jugular veni izole edin. Görüşünüzü engelleyebilecek tüm bağ ve yağ dokularını çok nazikçe uzaklaştırın ve veni bulun.
Damarın üst kısmını nazikçe kaldırın ve damarın çevresindeki ve altındaki adipoz ve bağ dokuyu ayırmak için eğri pens kullanın. Eğri pensi damarın altına yerleştirin ve boşta kalan elinizle pensi açın. Damarın altına steril bir plastik bar yerleştirin.
Ven yükseltildikten sonra, veni net ve engelsiz bir şekilde görebilmek için yeterli miktarda yağ dokusunu uzaklaştırın. Açığa çıkan venin nemli kalması için periyodik olarak üzerine salin damlatın. Kateter tüpü juguler bölgeye yerleştirildiğinde sabitleyebilmek için venin etrafında sütür düğümleri hazırlayın.
Her iki uçta venin altına süturlar yerleştirin ve her bir uçta tek bir çok gevşek açık düğüm atın. Kateter tüpünü üst düğümden geçirin ve sütur ipinin üzerinden dolaştırarak sağ omuzun üzerinden geriye doğru yönlendirin. Kateter tüpünü juguler vene yerleştirmek için tüpü ağırlaştırmak amacıyla kateterden salin itin.
Modifiye edilmiş 20 gauge iğne, veni delmek için kullanılır; yerleştirme sırasında sürtünmeyi azaltmak için hem veni hem de yerleştirme iğnesini salin ile ıslatın, plastik çubuğu nazikçe geri çekin ve iğneyi venin alt kısmına daha yakın bir noktadan yerleştirin. İğnenin yarım santimetresi içeri girecek kadar yerleştirmeniz yeterlidir. Kateter tüpünü iğne üzerinden kaydırarak venin içine ilerletin.
Herhangi bir dirençle karşılaşılmamalıdır. Direnç oluşması, bağ dokusunda olduğunuzu gösterir. Damar içinde olduğunuzdan emin olmak için, kan çekip çekemediğinizi görmek amacıyla kateter şırıngasını geri çekmeyi deneyin.
Tüpler yerleştirildikten sonra, iğneyi çıkarın ve kateter balonunu yerleştirme noktasına doğru itin. Alt düğümü bağlayın ve ikinci düğümü balonun hemen üzerine bağlamadan önce kateter tüpünün çubuğa tam olarak yaslandığından emin olun. Bu işlem, kateteri yerinde sabitleyecektir.
Barı çıkarın ve her iki uca ikinci bir düğüm atın. Sütürlemeden önce kateter tüpünü ve sütür iplerini derinin altına itin. Sütür iğnesini deriden geçirmek için arter klembini kullanın ve insizyonu kapatın.
Dikiş sayısı, insizyonun boyutuna göre değişiklik gösterecektir. Hayvan karnüstedeyken kateter tabanını hayvanın sırtına yerleştirin. İnsizyona salin uygulayın ve kateter tabanını derinin altına kaydırın.
Delinme olasılığını en aza indirmek için tüpün minimum düzeyde kıvrıldığından ve tabanın altında olduğundan emin olun. Kateter tabanının etrafındaki cildi dikin. Dikiş sayısı, insizyonun boyutuna bağlı olacaktır.
Genellikle üç ila dört dikiş yeterlidir. Kateterden hala kan çekilebildiğinden emin olun. Son olarak, enfeksiyonu ve kan pıhtısı oluşumunu önlemek için kateteri heparinli tein çözeltisi ile yıkayın.
Kateter kanülüne bağlı olan boruyu gevşetin. Ardından, salin tüpünü çıkarın ve hızlıca heparinli T Carin solüsyonu içeren şırınganın borusuyla değiştirin. Kateteri 0,03 ila 0,05 ccs solüsyon ile yıkayın.
Kanüle bağlı olan boruyu tekrar gevşetin. Kateter kapağını pensle tutun ve tek bir hareketle boruyu kanülden çıkarıp yerine kateter kapağını takın. Kanın yukarı çıkmasını önlemek için bu işlem hızlıca gerçekleştirilmelidir.
Kanül ucunu delmediğinden emin olarak beyaz kateter kapağını sıkıca vidalayın. Fareye deri altına analjezik ve antibiyotik enjekte edin. Bir taraftan kilogram başına beş miligram dozunda analjezik ketoprofen ve diğer taraftan kilogram başına 10 miligram dozunda antibiyotik amikasin enjekte edin.
Anestezi kesildikten sonra, farelerin yiyecek ve suya kolayca erişebilecekleri temiz bir kafeste iyileşmelerini sağlayın. Bu videoda sunulan teknikler izlenerek güvenilir intravenöz kendi kendine uygulama verileri elde edilebilir. Ancak, kateter açıklığının korunması önemlidir.
Bu durum, kateterin sağ atriyuma dikkatlice yerleştirilmesi, operasyon seanslarından önce ve sonra kateterin her gün yıkanması ve kalıntı girişini önlemek için kateter kanülünün sürekli kapalı olduğundan emin olunmasıyla sağlanır.
Bu makale, kemirgenlerde ilaç pekiştirmesini incelemek için standart bir yöntem olan intravenöz kendi kendine uygulama (IVSA)le paradigmasını detaylandırmaktadır. Özellikle kateter implantasyonu ve bakımına odaklanarak, güvenilir IVSA verileri elde etmek için gerekli olan cerrahi teknikleri ve prosedürleri vurgulamaktadır.
Fare modellerinde intravenöz kendi kendine uygulama (IVSA), bileşiklerin pekiştirici özelliklerini değerlendirmek için kritik bir preklinik platform sağlayarak, bağımlılık ve nöropsikiyatrik ilaç keşfinde hedef doğrulamasına olanak tanır. Hayvanların test maddelerini kendi kendilerine uygulamalarına izin veren bu yöntem, deneyci yanlılığını azaltır ve ilaç alım modellerine ilişkin kantitatif veriler sunarak, erken aşama hedef değerlendirmesinde mekanistik risk azaltma ve öngörülebilir güven düzeyini destekler. Bu yaklaşım, hedef etkileşiminden davranışsal çıktıya kadar translasyonel sürekliliği kolaylaştırarak, MSS terapötikleri için portföy önceliklendirmesindeki devam/dur kararlarına bilgi sağlar.
IVSA; hedef doğrulamadan öncü bileşik tanımlamaya ve preklinik değerlendirmeye kadar olan keşif sürecine entegre olarak, in vitro ve in vivo farmakokinetik profillemeyi tamamlayan, pekiştirme sorumluluğu için fonksiyonel bir analiz yöntemi olarak hizmet eder.