Name: Bir sentezi In vivo MR-saptanabilir Apoptoz Probe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-31T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: Öğrenin, MRI ile saptanabilir apoptoz probu sentezleme yöntemini. Annexin V ve demir oksit nanopartikülleri kullanarak apoptotik hücreleri erken tespit edin ve miyokard infarktüsü tanısında uygulayın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Sağlık, NHLBI National Institutes (RD, PY, PS). Amerikan Kalp Derneği (JL). Stanford Üniversitesi, VPUE Grant (JL).

Önceki çalışmada 1 den uyarlanmıştır. 1. SPIO için Annexin V Konjugasyon <ol><li> 2: 0.15 M sodyum periodat (NaIO 4) (ağırlık oranı 04:01 ağırlıkça) ile çözelti içinde karanlıkta 20, 1 saat boyunca SPIO partikülleri (Ocean Nanotech Inc, 5 mg / mL) ° C okside. </li><li> 20 ° C&#39;de 0.15 M sodyum borat (Na 2 B 4 O 7 10H 2 O): ANX protein (ağırlık 1:1 oranı, ağırlık) saflaştırılmış ile 12 saat boyunca okside SPIO inkübe </li><li> Çeker ocak altında sodyum borohidrid (NaBH4) ile 1 saat boyunca daha da azaltmak ve karışım daha sonra 0.15 M Tris-HCl sertleştirme. </li><li> 14.000 xg (75 mikron gözenek Microcon filtresi, Millipore, Billerica, MA) santrifüj ile ANX-SPIO gelen ücretsiz ANX ayırın. </li><li> Daha bir Magnetik Separatör cihazı (Ocean Nanotech, Inc) kullanarak ilişkisiz kirleri kaldırarak bileşik geliştirebilirsiniz. </li><li> Filtre retentat (ANX-SPIO) protein düzeyleri ölçmek-80 azından Bradford protein metodu ve deposu tarafından ° C&#39;de 2 azından% 1 serum albumin ve proteaz inhibitörü (Halt proteaz inhibitör, Termo Scientific, 1-50 mg / mg ANX) ile 0.1 M Tris-HCl içinde mg / ml. </li></ol> 2. Dinamik ışık saçılımı <ol><li> Ayrı 0.1 optik yoğunluğu PBS SPIO ve ANX-SPIO sulandırmak ve Zetasizer Nano DLS makinesi (Malvern Inc, Worcestershire, Birleşik Krallık) 3 dinamik ışık saçılımı analiz yaparlar. </li><li> Z-ortalama parçacık boyutu ve polidispersite indeksi (PDI) ile birlikte, bileşik için monomodal zirveleri (ideal) elde edilir. Tek başına demir oksit Nanopartikülün DLS-ölçülen boyutu bu boyutu karşılaştırın. ANX-SPIO DLS sonuçları homojen bir ANX-SPIO türler 3 yansıtan 0.13 1 bir PDI ile 78 nm konjuge parçacık hidrodinamik çapı gösterdi. </li></ol> 3. Hücre Kültürü, Kültür apoptoz İndüksiyonu ve Doku ve Hücre MRG <ol><li> Kültür yetişkin fare kemik iliği mezenkimal sDMEM içinde TEM hücreleri (MMSC)% 10 FBS ve tercihen pasaj az% 1 penisilin streptomisin (Invitrogen, Inc), 20-30 Nisan ile desteklenmiş. </li><li> DOX (Sigma,% 0.9 tuzlu su içinde 1 mM, ortam içinde 1 uM konsantrasyon) 12 ile 37 ° C &#39;de kat değişen için işleme tabi tutulmasıyla kültürü hücrelerde apoptoza yol. </li><li> ANX-SPIO (aşağıda 3.4 &#39;de açıklanan) ile MR veya TUNEL leke sonra mikroskop kullanılarak (APO-BrdUTM TUNEL Test Kiti, Moleküler Problar / Invitrogen, Eugene, OR) veya ANX-FITC leke sonra birini kullanarak kültürü apoptozisin miktarını ölçmek (Roche, İsviçre). </li><li> 37, 15 dak ° C. için, ANX-SPIO (olarak belirtilmedikçe 10 mg protein / mL, orta), ya da serbest SPIO (5 mg), eşdeğer bir kilo sahip hücrelerin etiketlemek SPIO Nanopartiküllerin difüzyon önlemek için% 1 agaroz 1 mL PBS ile 4 kat ve bindirme yıkayın. Yemekler MRG (aşağıda açıklanmıştır) gerçekleştirin. Alternatif olarak, hücreler yıkayıp DOX ve ANX-SPIO işaretlendikten sonra trypsinize, sonra hücreler izinEppendorf tüplere pelet oluştururlar. </li></ol> 4. Vitro MRG&#39;de <ol><li> In vitro MRG analizi için standart diz alıcı bobini ile bir 1.5 veya 3 Tesla GE Signa EXCITE tarayıcı kullanın. </li><li> Tekrarlama Süresi (TR) 550 ms, Echo Saat (TE) 10 ms, flip açısı 15 °, matris 256 x 256, alan: kültür kaplarına veya tüpleri agar fantom içine ve gradient-eko spoiled gradient dizisi kullanarak görüntüyü yerleştirin of-view 3 cm x 3 cm, kesit kalınlığı 1,3 mm, ortalama sayısı (NEX) 2, aralık 0 5 mm. Görüntü eksenel sabit bir alanı bölgeleri-of-faiz kullanılarak T2 sinyal kaybı, (ROI) (örneğin, 0,8 mm 2) plaka üzerinde hücre katmanı. Agar hayalet gelen kontrol ROI sinyal kullanılarak arka plan için ayarlayın. Fantom çevreleyen havanın sinyal arka plan gürültü ölçün. </li><li> [SI örnek ROI-SI kontrolü ROI] / SI sinyal yoğunluğunu, [arka plan gürültü SI SD] ve: MR Kontrast-Gürültü Oranı (CNR hesaplayınSD) Standart sapma her kültür kaplarına hesaplandı. </li></ol> 5.. Temsilcisi Sonuçlar In vitro T2 * sinyal kaybı ölçüm sinyali geçersiz eser yaratacak homojen bir agar fantom ve hava kabarcıklarının eksikliği gerektirir. Bu eser SPIO hakiki T2 * sinyal kaybı ayırt etmek zordur, ve yorumlanabilir sonuçlar önemlidir. Bir hava eser örnek olarak orijinal demir oksit T2 sinyal kaybı için Şekil 1&#39;de görebilirsiniz. In vitro kültür kaplarına görüntüleme için kalınlığında yaklaşık 1 mm yeterli aksiyel MR dilimleri, yeterince görüntü tüm çanak yapılabilir, böylece her kültürün çanak agar jel uygun bir hacim uygulanır. Şekil 2 beklenen MRG sinyal göstermektedir agar bireysel kültür plakalardan. Int bölgeleri bazı sinyal plakasının kenar varyasyonu, böylece analizi tipik olarak mevcutturerest bu düzensiz alanlardan kaçınmak gerekir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3775/3775fig1.jpg" /> Şekil 1. ANX-SPIO doğan sıçanlardan kültüre kardiyomiyositlerde apoptoz algılar. Şekil 1A kontrol solüsyonu (sol tüp), ANX-SPIO (orta boru), DOX + ANX-SPIO (sağ tüp) ile tedavi edilen pelet yenidoğan kardiyomiyositlerin bir fotoğraf gösteriyor . DOX ve kahverengimsi renk + ANX-SPIO tedavi hücreleri, apoptotik hücrelerde ANX-SPIO bileşiğin artan saklama yansıtan unutmayın. In vitro MR görüntüleri Şekil 1B DOX + ANX-SPIO hücrelerin yoğun T2 sinyal kaybı göstermektedir. Ayrıca, bir hava kabarcığı 4. ve sinyal ANX-SPIO yoksun, ve CNR analizi etkileyebilir benzer 5. Eppendorf tüpleri (küçük siyah sinyal void) arasında görülür. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3775/3775fig2.jpg" /> Şekil 2. ANX-SPIObağlama kültürü apoptotik hücreler için spesifik değildir. Şekil 2A ANX-SPIO düşük ve yüksek konsantrasyonlarda (sağ, sol ve sırasıyla) ile ANX-FLUOS boyama veya ANX-SPIO boyama ya maruz kültür kaplarına üzerine apoptotik sıçan neonatal kardiyomiyositler, göstermektedir. Not Farklı T2 floresan ANX (ANX-FLUOS) ve ANX-SPIO yüksek seviyede ve düşük düzeyde tedavi edildi apoptotik hücre * sinyal kaybı (siyah sinyali). Artan T2 sağ * sinyal kaybı daha yüksek ASX-SPIO konsantrasyonları tarafından kapalı yarıştı edilmiş bir belirgin bir azalma oldu ANX-FLUOS sinyali ile ilişkilidir. Şekil 2B ANX-SPIO karşı ANX-FLUOS sinyal ve ayrışma rekabet bağlayıcı göstermektedir sabiti, i K. X-ekseni log ölçeğinde Annexin protein konsantrasyonunu ifade eder. Film 1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3775/3775movie1.mov" target="_blank">ek görmek için buraya tıklayın</a>film.

<ol><li>Dash, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+MRI+probe+to+detect+treatment+of+cardiac+apoptosis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Med%22%5BJournal%5D)">A molecular MRI probe to detect treatment of cardiac apoptosis in vivo.</a> Magn. Reson. Med. , (2011).</li>
<li>Khym, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reaction+of+methylamine+with+periodate-oxidized+adenosine+5%27-phosphate%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">The reaction of methylamine with periodate-oxidized adenosine 5'-phosphate.</a> Biochemistry. 2, 344-350 (1963).</li>
<li>Liu, Y. Y., Yu, Y., Zhang, G. B., Tang, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation%2C+characterization%2C+and+controlled+release+of+novel+nanoparticles+based+on+MMA%2Fbeta-CD+copolymers%5BTitle%5D)+AND+%22Macromol.+Biosci%22%5BJournal%5D)">Preparation, characterization, and controlled release of novel nanoparticles based on MMA/beta-CD copolymers.</a> Macromol. Biosci. 7, 1250-1257 (2007).</li>
<li>Seo, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FeCo%2Fgraphitic-shell+nanocrystals+as+advanced+magnetic-resonance-imaging+and+near-infrared+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">FeCo/graphitic-shell nanocrystals as advanced magnetic-resonance-imaging and near-infrared agents.</a> Nat. Mater. 5, 971-976 (2006).</li>
<li>Hsiao, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+nanoparticle+labeling+of+mesenchymal+stem+cells+without+transfection+agent%3A+cellular+behavior+and+capability+of+detection+with+clinical+1.5+T+magnetic+resonance+at+the+single+cell+level%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Med%22%5BJournal%5D)">Magnetic nanoparticle labeling of mesenchymal stem cells without transfection agent: cellular behavior and capability of detection with clinical 1.5 T magnetic resonance at the single cell level.</a> Magn. Reson. Med. 58, 717-724 (2007).</li>
<li>Zhao, M., Beauregard, D. A., Loizou, L., Davletov, B., Brindle, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+detection+of+apoptosis+using+magnetic+resonance+imaging+and+a+targeted+contrast+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Non-invasive detection of apoptosis using magnetic resonance imaging and a targeted contrast agent.</a> Nat. Med. 7, 1241-1244 (2001).</li>
<li>van Tilborg, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internalization+of+annexin+A5-functionalized+iron+oxide+particles+by+apoptotic+Jurkat+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Media+Mol.+Imaging%22%5BJournal%5D)">Internalization of annexin A5-functionalized iron oxide particles by apoptotic Jurkat cells.</a> Contrast Media Mol. Imaging. 4, 24-32 (2009).</li>
<li>Sosnovik, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+of+cardiomyocyte+apoptosis+with+a+novel+magneto-optical+nanoparticle%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Med%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging of cardiomyocyte apoptosis with a novel magneto-optical nanoparticle.</a> Magn. Reson. Med. 54, 718-724 (2005).</li>
<li>Sosnovik, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+MRI+detects+low+levels+of+cardiomyocyte+apoptosis+in+a+transgenic+model+of+chronic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Cardiovasc.+Imaging%22%5BJournal%5D)">Molecular MRI detects low levels of cardiomyocyte apoptosis in a transgenic model of chronic heart failure.</a> Circ. Cardiovasc. Imaging. 2, 468-475 (2009).</li>
<li>Dumont, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiomyocyte+death+induced+by+myocardial+ischemia+and+reperfusion%3A+measurement+with+recombinant+human+annexin-V+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardiomyocyte death induced by myocardial ischemia and reperfusion: measurement with recombinant human annexin-V in a mouse model.</a> Circulation. 102, 1564-1568 (2000).</li>
<li>Blankenberg, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+detection+and+imaging+of+phosphatidylserine+expression+during+programmed+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">In vivo detection and imaging of phosphatidylserine expression during programmed cell death.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95, 6349-6354 (1998).</li>
<li>Schellenberger, E. A., Sosnovik, D., Weissleder, R., Josephson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto%2Foptical+annexin+V%2C+a+multimodal+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjug.+Chem%22%5BJournal%5D)">Magneto/optical annexin V, a multimodal protein.</a> Bioconjug. Chem. 15, 1062-1067 (2004).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Annexin V SPIO bağlama için tarif konjugasyon yöntemi Annexin yan zincirli amin gruplarının ve SPIO Nanopartikülün karboksil yarımlar yararlanır. Belirli bir oksitleme-indirgeme adımlarında, bu bileşiklerin kovalan bağlantı elde edilebilir, ve elde edilen fonksiyonlandırılmış nanoparçacık izole edilebilir. Bu yöntem, diğer proteinler ve ilgi nanopartiküller üzere genelleştirilmiş olabilir. En önemli aşamaları uygun sıcaklıklarda ve yumuşak karışımı ile gerçekleştirilen oksidasyon ve indirgem...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog # </td></tr><tr><td> Süperparamanyetik demir oksit </td><td> Ocean Nanotech, Inc </td><td> ICK-40-005 </td></tr><tr><td> Doksorubisin </td><td> Sigma </td><td> D1515-10mg </td></tr><tr><td> Ayırıcı SuperMag </td><td> Ocean Nanotech, Inc </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Zetasizer Nano DLS makinesi </td><td> Malvern, Inc </td><td> N / A </td></tr></tbody></table>

bir sentezi<em&gt; in vivo</em&gt; mr-saptanabilir apoptoz probe

Synthesis of an In vivo MRI-detectable Apoptosis Probe

Hücresel apoptoz birçok hastalığın önemli bir özelliktir ve hastalığın klinik belirtileri ortaya çıkmadan bu programlanmış hücre ölümü genellikle oluşur. Onun erken, tersinir aşamalarında apoptoz algılamak için bir araç önleyici veya tedavi edici önlemler kalıcı hasarlardan kalbi korumak için alınabilecek sırasında bir klinik öncesi &#39;pencere&#39; göze olacaktır. Biz burada MR-saptanabilir kontrast ajan olarak hizmet süperparamanyetik demir oksit (SPIO) nanopartiküller için heyecanla apoptoz erken, tersinir aşamalarında hücrelerine bağlanarak insan Annexin V (ANX), birleşmek için basit ve sağlam bir yöntem sunmaktadır. Konjugasyon yöntemi SPIO ve polisakkarit kabuk karboksil grupları okside SPIO nanopartiküller, bir oksidasyon ile başlar. ANX proteini saflaştırılmış ve sonra bir indirgeyici tampon içinde SPIO ile ANX arasında kovalent etkileşimi kolaylaştırmak için bir sodyum borat çözeltisi ortamda eklenir. Sodyum borohydrid ile son bir azalma adıme redüksiyon tamamlamak üzere gerçekleştirilir ve daha sonra reaksiyon söndürüldü. Konjuge olmayan ANX mikrosantrifüj filtrasyon ile karışım kaldırılır. ANX-SPIO ürünün saflığı boyutu ve dinamik ışık saçılması (DLS) ile teyit edilmektedir. Bu yöntem ek olarak, veya modifikasyonu gerektirmez, çapraz bağlı olarak demir oksit partikül konjugasyon yöntemler veya biyotin etiketli nanopartiküller karşıt polisakkarid SPIO kabuk. Sonuç olarak, bu yöntem, ilgi diğer proteinler konjugasyon uzayabilir basit, güçlü bir yaklaşımı temsil eder.

Apoptoz Erken teşhis hastalıklarının çeşitli risk altındaki hücre popülasyonu tespit edebilir. Burada bir MR-saptanabilir demir oksit nanoparçacık (SPIO) bir erken apoptozis algılama protein (Annexin V) bağlamak için bir yöntem gösterilmektedir. Bu yöntem MR-saptanabilir moleküler görüntüleme probları üretmek için ilgi diğer proteinlere uzatılabilir.

Bir sentezi<em&gt; In vivo</em&gt; MR-saptanabilir Apoptoz Probe

Hücresel apoptoz birçok hastalığın belirgin bir özelliğidir ve bu programlı hücre ölümü genellikle hastalığın klinik belirtileri ... gerçekleşmeden önce meydana gelir.

Aşağıdaki deneyin genel amacı, in vivo MRI ile tespit edilebilen bir apoptoz probu sentezlemektir. Bu işlem, MRI ile tespit edilebilen demir oksit nanopartiküllerinin veya SPIO'ların oksitlenmesi ve ardından bir neksin proteinine konjuge edilmesiyle gerçekleştirilir. Daha sonra, yetişkin fare kemik iliği mezenkimal hücrelerinde apoptoz indüklenir ve bu hücreler, apoptotik hücrelere bağlanan A-N-X-S-P-I-O probu ile inkübe edilir.Son olarak, probun etkinliğini değerlendirmek amacıyla hücre kültürü kaplarının görüntülenmesi için MRI kullanılır. MRI görüntüleme sonucunda, A-N-X-S-P-I-O'nun apoptotik hücrelere hedeflenmiş bağlanmasından kaynaklanan bir sinyal elde edilir. Bu tekniğin etkileri, erken teşhisin erken önleyici tedaviye olanak sağlaması nedeniyle miyokard enfarktüsünün tedavisi ve teşhisine kadar uzanmaktadır. SPIO'ya xin five konjugasyonu yapmak için, SPIO partiküllerini 0.15 molar sodyum periyodat çözeltisinde, karanlıkta, 20 °C'de bir saat boyunca oksitleyerek başlayın.Karışımı çeker ocak altında daha fazla indirgemek için, oksitlenmiş SPIO'yu saflaştırılmış A NX proteini ile 0,15 molar sodyum borohidrür içerisinde 20 °C'de 12 saat inkübe edin. Bir mililitre sodyum borohi

synthesis-of-an-in-vivo-mri-detectable-apoptosis-probe

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video, manganez klorür ile insan embriyonik kök hücreleri (hESC) (MnCl etiket nasıl...

İnsan Embriyonik Kök Hücreleri Manyetik Rezonans Görüntüleme için in vitro Etiketleme

Tüm Dağı<em&gt; In situ</emE11.5 fare embriyolarına E8.5 ve&gt; Hibridizasyon

Kaspaz 3 aracılı apopitoz ölümsüzleştirdi N19 oligodendrosit hücre kültürleri Canlı hücre görüntüleme...

İzleme bölünmüş Kaspaz-3 Aktivite ve Potasyum kaynaklı Membran depolarizasyon Canlı hücre Görüntüleme ve Cleaveable EPA-boya Substratlar ölümsüzleştirdi oligodendroglial Hücre Apoptoz

Biz fare embriyolarının programlanmış hücre ölümü bölgeleri (PCD) ve LysoTracker adlı oldukça çözünür boya kullanarak embriyonik kök (ES) hücre kültürleri ayırt görselleştirmek için basit bir protokol mevcut.

Embriyolar yılında Programlı Hücre Ölümü Algılama LysoTracker kullanımı ve Embriyonik Kök Hücreler Farklılaşan

Bazı genetik bozulmalar veya toksinlere maruz kalma, belirli hücre tiplerinin ölümüne yol açan normal gelişimsel süreçleri bozabilir. Zebra balığı embriyolarında tam montajlı immünofloresan ile aktive edilmiş Kaspaz 3'ün analizi, spesifik olarak apoptoz geçiren hücrelerin evre ve dokuya özgü lokalizasyonunu ortaya koymaktadır.

Aktif Kaspaz 3 Algılama Tüm montaj immünofloresans tarafından Zebra balığı Embriyolar Apaptozun Analizi

Bu protokol, paraformaldehit preekli beyin için ideal olan hızlı ve basitleştirilmiş bir in situ hibridizasyon yöntemini tanımlar, böylece taze donmuş dokular kullanılırken uzun süreli karmaşık adımlara olan ihtiyacı azaltır.  Yöntem, sıçanlarda serotonin 5-HT2A reseptör geni htr2a'nın tanımlanması kullanılarak doğrulanmıştır.

Çabuk<em&gt; In Situ</emSerotonin Sendromu ile Ratlarda Paraformaldehyde-öneki Beyin oligonükleotid Problar kullanarak&gt; Melezleme

Fizyolojik açıdan önemli tümör microenvironment meme kanserinin fare modellerinde parametrelerinde değerlendirilmesi için düşük-alan (L-band, 1.2 GHz) elektron paramagnetic rezonans çözünür nitroxyl ve trityl sonda kullanarak gösterilmiştir.

Vivo EPR pH, pO2, Redox durumu ve fosfat konsantrasyonları ve glutatyon tümör Microenvironment olarak değerlendirilmesi

Efferocytosis, apoptotik hücreler, fagositik kaldırılması homeostazı korumak için gerekli ve reseptörleri ve tanıma, engulfment ve apoptotik hücreler içselleştirilmesi için izin sinyal yollar tarafından yönetilir. Burada, biz efferocytosis miktar ve efferocytic sinyal yolları etkinlik için bir floresans mikroskobu Protokolü mevcut.

Efferocytosis tek hücreli floresans mikroskobu tarafından miktar

DetectSyn, tedaviler veya hastalık durumları arasında göreceli sinaps (sinaptik öncesi ve sonrası) sayısındaki değişiklikleri ölçen tarafsız, hızlı bir floresan testidir. Bu teknik, hem kültürlü nöronlarda hem de sabit dokuda kullanılabilen bir yakınlık ligasyonu tekniği kullanır.

DetectSyn: Sinaps Yoğunluğundaki Değişiklikleri Tespit Etmek için Hızlı, Tarafsız Bir Floresan Yöntemi

Bu çalışma, [68Ga] D-dodekapeptid antagonistinin pozitron emisyon tomografik görüntülemesine dayanarak, programlanmış ölüm ligandı 1'in tüm vücuttaki dağılımını değerlendirmek için invaziv olmayan ve gerçek zamanlı bir yöntem geliştirmiştir. Bu tekniğin konvansiyonel immünohistokimyaya göre avantajları vardır ve immün kontrol noktası blokaj tedavisinden fayda görecek uygun hastaları belirleme etkinliğini artırır.

Programlanmış Ölüm Ligandı 1 Ekspresyonunun Görüntülenmesi için 68Galyum Etiketli D-Peptid PET İzleyicinin Geliştirilmesi

Bu çalışma, pankreas adacıklarında sitokin kaynaklı apoptozu ve β hücreye özgü ölümü değerlendirmek için konfokal mikroskopi ile birlikte hücre ölümü ve apoptozun çok boyamalı floresan bazlı belirteçlerini kullanmaktadır. Hücre dışı uyaranlara yanıt olarak hücre ölümü ve apoptozdaki mekansal ve zamansal değişiklikleri ortaya çıkarır.

İzole Pankreas Adacık Tedavisi ve Apoptoz Ölçümü

Öğrenin, MRI ile saptanabilir apoptoz probu sentezleme yöntemini. Annexin V ve demir oksit nanopartikülleri kullanarak apoptotik hücreleri erken tespit edin ve miyokard infarktüsü tanısında uygulayın.

Bir sentezi

Daha fazla video keşfet