Name: Metisiline Dirençli Deneysel Endokardit Modeli Staphylococcus aureus (MRSA) Sıçan (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 46 s
Description: Öğrenin sıçanlarda MRSA ile deneysel endokardit modeli kurma yöntemini. Kuyruk veninden enfeksiyon ve kateter yerleştirme teknikleriyle patogenez ve antimikrobiyal tedavi araştırmaları için güvenilir bir platform oluşturun.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Sağlık ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından desteklenen [hibe ASB R01AI-39.108] ve Amerikan Kalp Derneği [hibe SDG 0630219N ve YQX için YARDIM 09GRNT2180065].

1. Enfeksiyon için MRSA suşları hazırlanması <ol><li> Soya Agar (TSA) plaka Triptikaz bir koyun kanı (özel reaktifler ve ekipman Tablo bakınız) -80 bir stok tüp MRSA kültür loopful ° C inoküle ve 37 ° C&#39;de bir gece inkübe edin. </li><li> Hiçbir kir olmadığından emin olmak için kan agar (benzer koloni fenotipleri) üzerinde kültürün saflığı kontrol edin. </li><li> Koyun kanlı TSA plakadan bir koloni seçin ve 15 ml ek kapaklı tüp içinde 5 ml Triptikaz Soya Broth (TSB) içine koloni aşılamak. </li><li> 37 inkübe ° C&#39;de 200 rpm&#39;de sallayarak bir gecede. </li></ol> 2. Cerrahi Kateterler hazırlanması 10 cm uzunluğa ve steril bir forseps ile ucu basarak bir ucunu eritmek; polietilen boru (Becton Dickinson, sipariş no 427.401. PE10) kesin. Kateterin bir ucunu sızdırmazlık amacı kateterizasyon sırasında kanama kaçınmaktır. 3. Pre-surgery Hazırlık ve Anestezi <ol><li> Isofluorane-oksijen gaz karışımı (% 50:% 50) içeren bir odaya koyun Sprague-Dawley sıçan (Harlan, Indianapolis, Ind kadın, 250-300 gram) anestezik kadar (etkisi sürer örneğin kaslar gevşer ve pedal refleksleri vardır edilir ), ve gaz karışımı ile anesteziye cerrahisi sırasında bir durumda muhafaza hayvanlar. </li><li> Çeneden sadece Betadine ve% 70 etanol ile sternum altındaki boyun bölgesi temizleyin. </li></ol> 4. Cerrahi Prosedür <ol><li> Ameliyat boyunca steril tekniği kullanın. Dikey olarak sternum yukarıda boyun sadece cilt katmanı üzerinden bir insizyon (1-15 cm) olun. </li><li> Künt diseksiyon kullanarak, eğri dişli forseps 2 çift kullanılarak sağ karotis arter açığa fasya ayırın. </li><li> Yavaşça boyun kavite arter dışarı çekin ve ipek sütür yerine iki adet 10 cm uzunlukta arter altında ve maruz sefalik sonunda arter kapalı kravat, arte bir klip yerleştirinkanamayı önlemek için ry. </li><li> Bir kateter introducer (Becton Dickinson, sipariş no. 406.999) kullanarak arter üst küçük bir delik açın, arter delikten bir forseps ile bir kateter takmak, klibini kaldırmak ve kalp doğru kateter aşağı itmek kadar direniş karşılanmaktadır. </li><li> Arterin kaudal ucu çevresinde gevşek dikiş bağlayın ve kateter tarafından belirlenen yerde olduğunda ipek sütür ile yerde kateter sabitleyin: i) kateteri uzunluğu (4-5 cm); daha fazla ilerlemesini ii) direnç ve iii) kalp atışı ile kateter pulsasyon. Deney kalanı için bir yerde kateter bırakın. </li><li> Aşırı sütür ve kateter uçları kesilmiş ve kateter hiçbir kanama olmadığından emin olun. Boyun deri altında gevşek biter Tuck ve cilt klipler ile cilt kapatın. </li><li> Anestezi kurtarıldı kadar ılık bir yerde kafeste sıçan yerleştirin ve yiyecek ve su sağlıyor. Sırasında sık sık kontrol edin ve sıçansonra anestezi kurtarma. </li><li> Bu ameliyat bir &quot;Kategori E&quot; işlemdir. Ağrı üretilen prosedürleri hayvanlara sıkıntı eşlik MRSA enfeksiyonlarının beri analjezikler tarafından hafiflememiş olduğunu. </li></ol> 5.. MRSA enfeksiyonu <ol><li> Enfeksiyon 1 ile 7 gün ameliyat sonrası arasında yapılan, ancak deneyler içinde tutarlı devam edilebilir. </li><li> Temiz sıçan% 70 etanol ile kuyruk ve istenilen hücre sayımı (10 4 - En S. aureus için 10 6 kob / hayvan) 0.5 ml MRSA enjekte. Kuyruk damarından intravenöz G 1/2 inç iğne 27 ile Dikkat : MRSA kültür biyogüvenlik düzeyi 2 (BSL2) ait personel ve çevre için potansiyel tehlike ılımlı vardır. </li><li> Hemostaz kafesine sıçan dönmeden önce oluşana kadar yerinde basınç tutun. </li></ol> 6. Kurban Sıçanlar ve Kültür Hedef Dokular <ol><li> Sodyum pentobarbital (200 mg ip enjeksiyonu ile sıçan Kurban/ Kg) 1-6 gün post-enfeksiyonu sonrası. </li><li> Sırtında sıçan yerleştirin ve% 70 etanol ile göğüs silin. </li><li> Sternum altındaki göğüs V şeklinde bir kesi yapın ve kalp maruz sternumun her iki tarafındaki kaburga kıkırdağı kesti. </li><li> Kadar yavaşça kalp çekin ve klip aorta yakın kalp dokusu ile ve kalp kurtarmak kadar incelemek. </li><li> 4x4 inç gazlı bez içinde bir steril Petri tabağına yerleştirin kalp, sol ventrikül iç duvarından bir kesim yapmak ve sol taraflı odası açın. </li><li> Kateter yerleştirme için görsel olarak kontrol edin. Inceleyin ve makas ve forseps ile valfinden vejetasyonlar kaldırın. </li><li> Tartılır ve homojenize vejetasyon ve kantitatif kültür için PBS ile seri dilüsyonlar olun. </li></ol> 7. Temsilcisi Sonuçlar Hemen artere kateter takılması ve kalp yönüne doğru 4-5 cm kateter aşağı iterek sonra, bir direnç experien olacakdüşürebilmiştir. Herhangi bir direnç hissedilen edilirse, kateter başarıyla kateterin yerleştirilmesi etkileyebilecek, kalp odasının sol tarafında içine yerleştirilir edilmemiş olabilir. Daha önce yayınlanmış 9 doğru bir kateter Şekil 1 &#39;de gösterilmiştir. MRSA örnekleri parçası enfeksiyonu numunenin enfeksiyonu ile saflık için tam canlı bakteri sayısı emin niceliksel kültürlenebilir gerekir. Buna ek olarak, vejetasyonlar kurtarıldı organizmalar inokulum kullanılanlar ile aynı olmalıdır. Tablo 1, bir S. nin ölümcüllüğünün bir örnek sunar Daha önce 9 yayımlandı sıçan endokardit modelinde aureus suşu. Tüm hayvanlar 10 5 ve 10 6 cfu inokulum ile meydan ve 3 ile 6 gün yüksek S. ile enfeksiyonların geliştirilen endocardits sonra sakrifiye kardiyak vejetasyon yanı sıra böbrek ve dalak aureus yoğunlukları ( <strong&gt; Tablo 1). Steril kapak kültürlerinde Ratlarda bulaşmamış kabul edilir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3863/3863fig1.jpg" /> Şekil 1. Kateter doğru bir yerde (kalp odasının sol tarafında) olduğunu, ve çok sayıda vejetasyon aort kapakları 9 civarında görülebilir. <table border="1"><tbody><tr><td> Ekim (Animas sayısı) </td><td colspan="3"> Doku 10 CFU / g ± SD bir oturum Ortalama: </td></tr><tr><td></td><td> Bitki örtüsü </td><td> Böbrek </td><td> Dalak </td></tr><tr><td> 10 6 CFU / hayvan (9) </td><td> 10.36 ± 0.85 </td><td> 7.30 ± 0.64 </td><td> 6.70 ± 0.57 </td></tr><tr><td> 10 5 CFU / hayvan (8) </td><td> 9.93 ± 0.53 </td><td> 7.14 ± 0.53 </td><td> 6.44 ± 0.63</td></tr><tr><td> 10 4 CFU / hayvan (7) </td><td> 3.46 ± 0.50 * </td><td> 1.81 ± 0.74 * </td><td> 1.58 ± 0.59 * </td></tr></tbody></table> Bir SD, standart sapma. P 10 5 veya 10 6 CFU-meydan hayvanlar ile ilgili &lt;0.001. Tablo 1. S. rat endokardit model 9 farklı inokulum ile kardiyak vejetasyonların aureus yoğunluğu.

<ol><li>Petti, C. A., Fowler, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcus+aureus+bacteremia+and+endocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiol.+Clin%22%5BJournal%5D)">Staphylococcus aureus bacteremia and endocarditis.</a> Cardiol. Clin. 21, 219-233 (2003).</li>
<li>Bashore, T. M., Cabell, C., Fowler, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+infective+endocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Probl.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Update on infective endocarditis.</a> Curr. Probl. Cardiol. 31, 274-352 (2006).</li>
<li>Fowler, V. G. Jr, Justice, A., Moore, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+hematogenous+complications+of+intravascular+catheter-associated+Staphylococcus+aureus+bacteremia%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Risk factors for hematogenous complications of intravascular catheter-associated Staphylococcus aureus bacteremia.</a> Clin. Infect. Dis. 17, 313-320 (1993).</li>
<li>Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent, S. M., Seifert, H., Wenzel, R. P., Edmond, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nosocomial+bloodstream+infections+in+US+hospitals%3A+analysis+of+24%2C179+cases+from+a+prospective+nationwide+surveillance+study%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Nosocomial bloodstream infections in US hospitals: analysis of 24,179 cases from a prospective nationwide surveillance study.</a> Clin. Infect. Dis. 39, 309-317 (2004).</li>
<li>Hoen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Special+issues+in+the+management+of+infective+endocarditis+caused+by+gram-positive+cocci%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Dis.+Clin.+North+Am%22%5BJournal%5D)">Special issues in the management of infective endocarditis caused by gram-positive cocci.</a> Infect Dis. Clin. North Am. 16, 437-452 (2002).</li>
<li>Moise, P. A., Hershberger, E., Amodio-Groton, M. I., Lamp, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+clinical+outcomes+when+utilizing+high-dose+%28%3E+or+%3D8+mg%2Fkg%29+daptomycin+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Safety and clinical outcomes when utilizing high-dose (> or =8 mg/kg) daptomycin therapy.</a> Ann. Pharmacother. 43, 1211-1219 (2009).</li>
<li>Sakoulas, G., Brown, J., Lamp, K. C., Friedrich, L. V., Lindfield, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+outcomes+of+patients+receiving+daptomycin+for+the+treatment+of+Staphylococcus+aureus+infections+and+assessment+of+clinical+factors+for+daptomycin+failure%3A+a+retrospective+cohort+study+utilizing+the+Cubicin+Outcomes+Registry+and+Experience%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Ther%22%5BJournal%5D)">Clinical outcomes of patients receiving daptomycin for the treatment of Staphylococcus aureus infections and assessment of clinical factors for daptomycin failure: a retrospective cohort study utilizing the Cubicin Outcomes Registry and Experience.</a> Clin. Ther. 31, 1936-1945 (2009).</li>
<li>Xiong, Y. Q., Willard, J., Kadurugamuwa, J. L., Yu, J., Francis, K. P., Bayer, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+in+vivo+bioluminescent+imaging+for+evaluating+the+efficacy+of+antibiotics+in+a+rat+Staphylococcus+aureus+endocarditis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob.+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Real-time in vivo bioluminescent imaging for evaluating the efficacy of antibiotics in a rat Staphylococcus aureus endocarditis model.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 49, 380-387 (2005).</li>
<li>Peerschke, E. I., Bayer, A. S., Ghebrehiwet, B., Xiong, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((gC1qR%2Fp33+blockade+reduces+Staphylococcus+aureus+colonization+of+target+tissues+in+an+animal+model+of+infective+endocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">gC1qR/p33 blockade reduces Staphylococcus aureus colonization of target tissues in an animal model of infective endocarditis.</a> Infect. Immun. 74, 4418-4423 (2006).</li>
<li>Ganesh, V. K., Rivera, J. J., Smeds, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+structural+model+of+the+Staphylococcus+aureus+ClfA-fibrinogen+interaction+opens+new+avenues+for+the+design+of+anti-staphylococcal+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">A structural model of the Staphylococcus aureus ClfA-fibrinogen interaction opens new avenues for the design of anti-staphylococcal therapeutics.</a> PLoS Pathog. 4, e1000226(2008).</li>
<li>Boles, B. R., Horswill, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staphylococcal+biofilm+disassembly%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Staphylococcal biofilm disassembly.</a> Trends Microbiol. , (2011).</li>
<li>Tseng, C. W., Sanchez-Martinez, M., Arruda, A., Liu, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+Infection+of+Methicillin+Resistant+Staphylococcus+Aureus+%28MRSA%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous Infection of Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA).</a> J. Vis. Exp. (48), e2528(2011).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Sıçan endokarditi bakteriyel enfeksiyonların 9-11 tedavisinde patogenezine ve antimikrobiyal ajanlar in vivo çalışmalar için önemli ve iyi karakterize hayvan modeli. Ayrıca, sıçan endokardit modelinde akut ve sub-akut enfeksiyonların bir kompozit temsil eder ve yakından insan meslektaşı ve insan doğal kapak endokarditi taklit eder. Ayrıca, bir de konut kateter eşliğinde, klasik bir biyofilm ilişkili enfeksiyon, klinik ortamlarda 12 ortak ve zor bir mesele temsil eder. En önemlisi, sıçan en...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Triptikaz Soya Agar Kan agar,% 5 koyun kanı (TSA) </td><td> Hardy Diagnostics </td><td> A10BX </td><td></td></tr><tr><td> Triptikaz Soya Broth (TSB) </td><td> Becton Dickinson </td><td> 211825 </td><td></td></tr><tr><td> Çalkalamalı inkübatör </td><td> Labnet </td><td> I5311-DS </td><td></td></tr><tr><td> Polietilen boru </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427401 </td><td></td></tr><tr><td> Kateter introducer </td><td> Becton Dickinson </td><td> 6999 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isofluorance </td><td> Batı Medikal Desty, Inc </td><td> 2147 </td><td> Güvenlik ve kullanım bilgileri izleyin </td></tr><tr><td> Cerrahi Aletler </td><td> Güzel Bilim Araçlar ve Biyomedikal Araştırma Instruments, Inc </td><td></td><td> Ihtiyaçlarınız için iki şirketlerden aletleri bul </td></tr></tbody></table>

metisiline dirençli deneysel endokardit modeli<em&gt; staphylococcus aureus</em&gt; (mrsa) sıçan

Experimental Endocarditis Model of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in Rat

Endokardit dahil Endovasküler enfeksiyonları, yaşamı tehdit eden enfeksiyon sendromdur 1-3. Staphylococcus aureus kabul edilemeyecek kadar yüksek morbidite ve hatta uygun antimikrobiyal ajan tedavileri 4-6 ile mortalite ile bu sendromun en yaygın dünya çapında nedenidir. Nedeniyle Metisiline dirençli S. için enfeksiyonlarda artış aureus (MRSA), vankomisin klinik tedavi başarısızlıkları ve linezolid ve daptomisin direnci artan sorunların yüksek oranda bu enfeksiyonu olan tüm hastalar daha karmaşık bir yönetim var ve yüksek sağlık masrafları 7, 8 yol açtı. Ayrıca, antibiyotik tedavisi sonuçları ile en son çalışmalarda klinik ortamlarda kurulmuştu ve bu nedenle de hasta-hasta arasında değişen ana faktörler tarafından etkilenir olabileceği vurgulanmalıdır. Bu nedenle, ana faktör hayvan-to-hayvana benzer olan endovasküler enfeksiyon ilgili bir hayvan modeli daha fazladırmikrobiyal patogenez yanı sıra, yeni antimikrobiyal ajanların etkinliğini araştırmak için çok önemlidir. Rat Endokardit yakın insan doğal kapak endokarditi yaklaşan köklü bir deneysel hayvan modelidir. Bu model özellikle stafilokok virulans faktörlerinin rolü ve stafilokok endokardit için antibiyotik tedavisi rejimlerinin etkinliğini incelemek için kullanılmıştır. Bu yazıda, bakteriyel patogenezi ve antibiyotik tedavisine yanıt araştırmak için kullanılan olabilir MRSA nedeniyle deneysel endokardit modeli açıklamak.

Metisiline dirençli nedeniyle deneysel rat endokardit modeli<em&gt; S. aureus</em&gt;.

Metisiline Dirençli Deneysel Endokardit Modeli<em&gt; Staphylococcus aureus</em&gt; (MRSA) Sıçan

Endokardit dahil olmak üzere endovasküler enfeksiyonlar, yaşamı tehdit eden enfeksiyöz sendromlardır1-3. Staphylococcus aureus, dünya genelinde en yaygın nedendir...

Bu prosedürün genel amacı, sıçanlarda deneysel bir enfektif endokardit modeli oluşturmaktır. Bu işlem, öncelikle aureus kültürlenerek ve enfeksiyon için cerrahi kateterler hazırlanarak gerçekleştirilir. Ardından, cerrahi alan hazırlanır ve hayvan anestezi altına alınır.Hayvan anestezi altına alındıktan sonra, sağ karotis arteri üzerinden kalbe doğru bir kateter yerleştirilir. Son adım, kuyruk veni enjeksiyonu ile hayvanların aureus ile enfekte edilmesidir. Son olarak, hedef dokular diseke edilir ve kantitatif kültür için hazırlanır.Bu tekniğin hızlı endokardit modeli gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, kırmızı endokardit modelinin in vivo görüntüleme sistemi Ivus ile birlikte kullanılabilmesidir. Bu yöntem, antimikrobiyal ajanların virülensi ve etkinliği gibi oral patogenez alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Genel olarak, bu tekniği ilk kez kullanacak kişiler, cerrahi prosedürün zorlayıcı olması nedeniyle güçlük çekebilirler.İlk olarak, dondurulmuş stoktan bir öze dolusu M SSA kültürünü koyun kanlı agar plakasına ekleyin. Kontaminasyon olmadığını kontrol ettikten sonra, kültürü 37 °C'de gece boyunca inkübe edin. Plaktan tek bir koloni seçin ve bunu 15 mL'lik snap kapaklı bir tüpteki 5 mL triptik soya soya broth'u eklemek için kullanın.İnokülumu, sallamalı bir inkübatörde 37 °C'de gece boyunca inkübe edin. Kateterleri hazırlamak için hızı 200 RPM'e ayarlayın. Polietilen tüpleri 10 cm uzunluğunda kesin ve kateterleri cex dezenfektan çözeltisinde 30 dakika boyunca sterilize edin.Ardından, sağ karotis arterinden geçip sol ventriküle ulaşacak ve kalp atışları sırasında endokardiyuma zarar verecek bir kateter oluşturmak için, steril bir tüpün bir ucunu ısıtılmış steril pens ile bastırarak eritin. Daha sonra, anestezik etki gösterene kadar sıçanı, bir bire bir izofluran-oksijen karışımı içeren bir hazneye yerleştirerek anestezi uygulayın. Kasların gevşediğini ve pedal reflekslerin kaybolduğunu kontrol ederek anestezinin gerçekleştiğini doğrulayın.Gaz karışımına bağlı bir burun konisi kullanarak cerrahi işlem boyunca anestezi durumunu sürdürün. Cerrahi alanı, operasyon boyunca steril teknik kullanarak Betadine ve %70 etanol ile temizleyin. Sıçanı dorsal pozisyona getirin ve künt diseksiyon uygulayarak sternumun üzerindeki boyun deri tabakası boyunca dikey bir insizyon yapın.Sağ karotis arterini açığa çıkarmak için fasyayı ayırın. Sağ karotis arter, köprücük kemiklerinin üzerinde, orta hattın hemen sağında yer alır. Arteri boyun boşluğundan dikkatlice yukarı çekin ve açığa çıkan sefalik ucundan bağlamak için arterin altına iki adet 10 santimetre uzunluğunda ipek sütür yerleştirin.Ardından, kanamayı önlemek için artere bir klips takın. Pens kullanarak, kateter yerleştirici ile arterin üst kısmında küçük bir delik açın. Kateterin mühürlenmemiş ucunu arterdeki delikten içeri yerleştirin.Klipsi çıkarın ve kateteri kalbe doğru itin. Uygun şekilde yerleştirildiğinde, dirençle karşılaşana kadar kateter arter içine dört ila beş santimetre uzanmalı ve sıçanın kalp atışıyla birlikte nabız vermelidir. Kateter yerleştirildikten sonra, arterin distal ucuna gevşek bir sütür bağlayın ve kateteri sabitleyin.İpek sütür kullanarak fazla sütür ve kateter uçlarını kesin ve ardından uçları boyun derisinin altına yerleştirin. Deriyi deri klipsleri ile kapatın. Sıçanı temiz bir kafese yerleştirin ve anesteziden tamamen uyanana kadar sıcak bir yerde tutun.Sıçana yiyecek ve su sağlayın ve hem iyileşme süreci boyunca hem de sonrasında sıçanı sık sık kontrol edin. Enfeksiyon işlemi cerrahiden bir ila yedi gün sonra gerçekleştirilebilir, ancak süre deneyler boyunca tutarlı tutulmalıdır. Sıçanın kuyruğunu %70 etanol ile temizleyin ve istenen hücreye 0,5 mililitre MRSA kültürü enjekte edin.Kuyruk venine enjekte edin. 27 gauge yarım inçlik bir iğne kullanarak, sıçanı kafesine geri götürmeden önce kanama durana kadar enjeksiyon bölgesine baskı uygulayın. Sıçan sakrifiye edildikten sonra, göğüs bölgesini %70 etanol ile silin ve ardından sternumun altındaki göğüs bölgesine V şeklinde bir insizyon yapın.Sternumun her iki yanındaki kaburga kıkırdaklarını kesin. Kalbi açığa çıkarmak için kalbi nazikçe yukarı çekin, aortaya yakın dokuyu klipsleyerek kesin ve kalbi serbest bırakmak için yukarı doğru diseke edin. Kalbi, 4x4 inçlik gazlı bez serilmiş steril bir petri kabına yerleştirin, ardından sol ventrikül iç duvarı boyunca bir kesi yaparak sol tarafındaki kamarayı açın.Kateterin doğru yerleştirildiğini onaylayın ve ardından kateteri çıkarın. Kapakçık üzerindeki vegetasyonları makas ve pens yardımıyla inceleyip temizleyin. Ayrıca böbrekleri ve dalağı çıkarın; dokuları ve vegetasyonları tartıp homojenize ettikten sonra, kantitatif kültür için PBS içerisinde seri dilüsyonlar hazırlayın.Burada, en soldaki okun gösterdiği gibi doğru konumlandırılmış bir kateter görülmektedir. Kateter, aort kapağını geçerek kalp boşluğunun sol tarafına uzanmaktadır ve orta ile sağdaki okların gösterdiği üzere aort kapaklarının etrafında çok sayıda vejetasyon görülmektedir. Bu tablo, sıçan endokardit modelinde bir ssus suşunun virülansına dair bir örnek sunmaktadır.10⁵ ve 10⁶ CFU'luk inokülumla enfekte edilen tüm hayvanlarda, kalp vejetasyonlarının yanı sıra böbrek ve dalakta yüksek ssus yoğunlukları ile seyreden endokardit gelişmiştir. Bu cerrahi prosedür, uygun şekilde uygulandığında 10 dakika içinde tamamlanabilir.Bu prosedür uygulanırken, cerrahi sırasında ve sonrasında hayvanın değerlendirilebilir bir durumda tutulmasının önemli olduğunu unutmamak gerekir. Antimikrobiyal ajanların etkinliğinin gerçek zamanlı izlenmesi ve gelişim sonrası in vivo gen ekspresyonu gibi ek soruları yanıtlamak için ivus gibi yöntemler uygulanabilir. Bu teknik, stem orus ve fiction alanındaki araştırmacıların endovasküler enfeksiyondaki patojenik virülans faktörlerini keşfetmeleri için bir yol olabilir.Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda deneysel endokardit modelinin nasıl oluşturulacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. MRA ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken laboratuvar önlüğü ve eldiven giymek gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.

experimental-endocarditis-model-methicillin-resistant-staphylococcus

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Akut miyokard infarktüsü (AMI) sıçan modelinde kalp patofizyolojik ve fizyolojik fonksiyonu MI sonucu incelemek için yararlıdır.

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

Murin deri ve yumuşak doku enfeksiyonu modeli metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve ev sahibi immünolojik yanıtlar virülans fonksiyonu değerlendirmek için kullanılmaktadır. Burada, biz, deri ve yumuşak doku enfeksiyonu için bir deri altı enfeksiyon modeli sundu.

Subkutan Enfeksiyon Metisiline Dirençli Stafilokok Aureus (MRSA)

Streptococcus pneumoniae, kalpte ayrık pürülan olmayan mikroskobik lezyonlar oluşturur. Kardiyak mikrolezyon oluşumunun bir murin modeli için protokol ana hatlarıyla belirtilmiştir. Mikroskopi kullanılarak mikrolezyon görselleştirmesi, erken ve geç mikrolezyonlar arasında ayrım ve nekahat dönemindeki hayvanların kalplerinde kardiyak yeniden şekillenmeyi tespit etme yöntemleri hakkında talimat verilmektedir.

Görselleştirme<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Kalp Microlesions ve sonraki Kardiyak Tadilat içinde

Bir yaklaşım Kutanöz yaralama için doğuştan gelen bağışıklık yanıtının gerçek zamanlı algılama ve Staphylococcus aureus enfeksiyon farelerin için tanımlanır. Karşılaştırma LysM-EGFP tarafından (floresan nötrofil sahip) fareler LysM EGFP ile immünyetmezligi fare zorlanma olacak, biz anlayışımız enfeksiyon ve enfeksiyon mücadele için yaklaşımlar gelişimi önceden.

Bir fare modeli için değerlendirmek doğuştan gelen bağışıklık yanıtı Staphylococcus aureus enfeksiyon

Protokol, paslanmaz çelik bir k-tel implantının biyolüminesan Staphylococcus aureus Xen36 ile enfekte olduğu yeni bir in vivo spinal implant enfeksiyonu fare modelini açıklar. Bakteri yükü biyolüminesan görüntüleme ile uzunlamasına izlenir ve ötenazi sonrası koloni oluşturan birim sayıları ile doğrulanır.

Spinal İmplant Enfeksiyonunun İn Vivo Fare Modeli

Biz basınç aşırı orta remodeling ve sinyal transdüksiyon yolları remodeling sürecinin başlatılması nda yer alan erken sistolik disfonksiyon indüklenen bir sıçan modeli nin oluşturulması nı açıklar. Bu hayvan modeli kalp yetmezliği için erken terapötik anti-remodeling stratejileri uygulamak için moleküler hedeflerin belirlenmesinde yardımcı olacaktır.

Aşırı Sistolik Kalp Yetmezliği nin Aksine Aşırı Basınç Ait Orta Remodeling ve Sistolik Disfonksiyon Bir Rat Modeli

Burada, sıçanlarda tekrarlanabilir bir yoğun bakım ünitesi odaklı endotoksin modeli sunuyoruz.

Sıçanlarda Tekrarlanabilir Yoğun Bakım Ünitesi Odaklı Bir Endotoksin Modeli

Sıçan kalbinin miyokard iskemi-reperfüzyon modeli, kendi kendine yapılan bir retraktör, polivinil klorür tüpü ve benzersiz bir düğümleme yöntemi kullanılarak geliştirilmiştir. Elektrokardiyogram, trifeniltetrazolyum klorür ve histolojik boyama ve yüzde sağkalım analizi sonuçları, geliştirilmiş model grubunun mevcut model grubundan daha yüksek başarı ve sağkalım oranlarına sahip olduğunu göstermiştir.

Miyokard İskemisi ve Reperfüzyon Hasarının Geliştirilmiş Kemirgen Modeli

Bu çalışma, kritik aort darlığı veya hipoplastik sol kalp sendromu gibi konjenital kardiyak defektlerde görüldüğü gibi, endotelyal-mezenkimal geçişe bağlı fibrozun bir hayvan modelini sunar, bu da ayrıntılı histolojik doku değerlendirmesine, düzenleyici sinyal yollarının tanımlanmasına ve tedavi seçeneklerinin test edilmesine olanak tanır.

Endotelyal-mezenkimal geçiş çalışması için yenidoğan heterotopik sıçan kalp nakli modeli

Staphylococcus aureus (S. aureus) tüm vücuda yayılma yeteneğine sahiptir, bu da kalıcı ve tekrarlayan enfeksiyonlara neden olur. Bu süreçleri daha iyi anlamak için, bu çalışma S. aureus için bir hücre içi enfeksiyon modeli oluşturmaktadır. Bu model, hücre içi enfeksiyonların arkasındaki mekanizmaları araştırmak için çok önemli bir temel sağlayacaktır.

Staphylococcus aureus için Hücre İçi Enfeksiyon Modellerinin Geliştirilmesi ve Değerlendirilmesi

Mevcut protokol, implant ile ilişkili enfeksiyonları araştırmak için subkutan dorsal implantasyon kullanan, patofizyolojik mekanizmaların kapsamlı bir şekilde araştırılmasını sağlayan ve hedefe yönelik terapötik stratejilerle tanı kriterlerinin geliştirilmesini destekleyen bir fare modelini tanımlamaktadır.

Farelerde İmplantla İlişkili Enfeksiyonların Hayvan Modeli

Öğrenin sıçanlarda MRSA ile deneysel endokardit modeli kurma yöntemini. Kuyruk veninden enfeksiyon ve kateter yerleştirme teknikleriyle patogenez ve antimikrobiyal tedavi araştırmaları için güvenilir bir platform oluşturun.

Metisiline Dirençli Deneysel Endokardit Modeli

Daha fazla video keşfet