KRİYOPREZERVE Numune Kurtarma için Do-It-Yourself Aygıt yanlışlıkla Kriyojenik Depolama Tankları içine Dropped
11 Mayıs 2012
Burada sıvı nitrojen dolu Dewar tanklardan numune alımı için düşük maliyetli, dayanıklı cryotolerant cihaz sunuyoruz. Inşaat ve cihaz modüler tasarım kolaylığı kriyojenik tanklarından numune alma işlemi güvenli ve kolay hale getirir.
Bu prosedürün amacı, yapımı kolay bir cihaz kullanarak sıvı nitrojen ile doldurulmuş ikili tanklardan kriyo kutuları ve kriyo şişelerindeki numunelerin alınmasını kolaylaştırmaktır. Bu, manevra için yer açmak için önce doerden bir veya iki dondurucu rafının çıkarılması ve cihazın doer'a dikey olarak yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım, cihazla birlikte yapıcının altını nazikçe kazımaktır.
Ardından, cihazı yapıcının duvarları boyunca dik olarak çekin Dondurucu kutusunu tanktan çıkarmak için son adım, yapıcının altından alınan kutuyu almak ve çıkarılan dondurucu raflarını değiştirmektir. Bu tekniğin boşaltma, çubuk dolusu sıvı nitrojen gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, numune bütünlüğünü koruyan ve tek bir operatör tarafından gerçekleştirilebilen kolay, güvenli ve hızlı bir alternatif sunmasıdır. Kriyo toleranslı cihazın montajına başlamak için, LHA güçlü bir bağ yapmak için üç taraflı güçlü bir bağın bir tarafını düzeltmek için pense kullanın.
Burada görüldüğü gibi, güçlü bağın boyutları, yapanın boynunun çapına bağlı olarak seçilebilir. Cihazın beş buçuk x beş buçuk inçlik kriyo kutularını almasına izin vermek için bu kadar güçlü iki bağ yapılmalıdır. Bunları, kriyo kepçesinin tabanını oluşturmak için bir taç cıvatası, somun rondela ve vida kullanarak güçlü bir bağ TST kayışı ile sabitleyin.
Cihaz şimdi burada görüldüğü gibi görünmelidir. Şimdi oluklu bir plaka kullanarak, güçlü kravat tişörtü üzerindeki yuvaları, oluklu plakanın bir ucundaki yuvalarla hizalayın. Ardından ikisini Hillman somun ve cıvatalarıyla birbirine sabitleyin.
Oluklu plaka ve güçlü bağlarda önceden delinmiş delikler yoksa, bağlantı için delikler açın. İstenirse, oluklu plakanın diğer ucu bükülerek ve köpük ile sarılarak bir tutamak oluşturulabilir. Cihazı daha iyi kavramak için, suyla kaplamadan önce köpüğü çıkardığınızdan emin olun.
Kriyo toleranslı DIY alma cihazı, kriyo şişelerinin alınması için de uyarlanabilir. Bu, düz tabanın, şişeleri sıvıdan çıkarmak için değiştirilmiş paslanmaz çelik bir süzgeç ile değiştirilmesini içerir. Montaja başlamak için, önce taç somunlarını ve cıvatalarını sökün ve güçlü lastik tişört strapp'ını oluklu plakaya takın.
Ardından, paslanmaz çelik süzgeci oluklu plakaya takmadan önce, tabanı bir kepçeye benzeyecek bir açıyla yönlendirmek için süzgecin boynunu pense yardımıyla hafifçe bükün. Kullanılan süzgeç bir dudakla birlikte geliyorsa, dudağı aşağı doğru bükmek için pense kullanın. Bu, cihazla manevra yapmayı kolaylaştıracaktır.
Süzgecin sapındaki deliği, oluklu plakadaki deliklerle birlikte hizalayın ve süzgeci Hillman somun ve cıvatalarını kullanarak sabitleyin. Süzgeç önceden delinmiş deliklerle gelmiyorsa delikler açın. Bir uygulayıcıdan kriyo kutularını almaya başlamak için önce kriyojenik eldivenler giydiğinizden emin olun.
Ardından, cihazla manevra yapmak için yer açmak için bir veya iki dondurucu rafını doerden çıkarın. Daha sonra, yapanın altını nazikçe kazımak ve kutuyu toplamak, yapıcı tankın dibine düşmek için güçlü bağlama ttra tabanına sahip dik kriyo toleranslı DIY geri alma cihazını kullanın. Ardından, dondurucu kutusunu tanktan çıkarmak için cihazı doerin duvarları boyunca dik olarak çekin
.Kutunun tekrar doer'a kaymasını önlemek için cihazın dikey olarak tutulması ve düz bir şekilde yukarı çekilmesi gerektiğini unutmayın. Kriyo şişelerini almak için, kriyo kutusu alımına benzer şekilde doerin altını nazikçe kazımak için bir süzgeçle donatılmış kriyo kepçesini kullanın, cihazı dik olarak çekin ve süzgeçte toplanan şişeleri alın. Gen ekspresyonu çalışmalarındaki en büyük zorluk, RNA'nın kalitesinin hem donmuş doku örnekleri hem de ekstrakte edilen RNA için saklama koşullarına bağlı olmasıdır.
Bu şekil, numune işlemenin toplam RNA'nın bütünlüğü üzerindeki etkisini göstermektedir, aynı doku kaynağından alınan toplam RNA, deneyden önce farklı numune işlemeye tabi tutulmuştur, bozulmamış toplam, RNA hazırlama hızı net 28 s ve 18 s ribozomal, 28 s ribozomal RNA bandına sahip RNA bantları, 18 s ribozomal RNA bandının yaklaşık iki katı yoğunluktadır. Bu, RNA'nın sağlam olduğunun bir göstergesidir. Üçüncü ve dördüncü şeritler, yapandan kısa süreli geri almalarla tekrarlanan kısmi dondurma nedeniyle önemli ölçüde bozulmaya sahip numuneleri gösterir, böylece düşen şişelerin kutular üzerinde alınması gerekliliği nedeniyle periyodik boşaltma ile uzun süreli depolamayı modeller.
Bununla birlikte, DIY cihazı kullanılarak yapıcı servisinde saklanan ve bu nedenle kısmi donma olmayan numuneler, ikinci şeritte bozulmamış RNA içerir. Bu videoyu izledikten sonra, sıvı nitrojen dolgulu dvar'dan numuneleri boşaltmaya gerek kalmadan nasıl alacağınızı iyi anlamış olmalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, sıvı azot dolu Dewar tanklarından örneklerin güvenli ve kolay bir şekilde alınması için tasarlanmış, düşük maliyetli, dayanıklı ve kriyojenik dayanıklı bir cihazı sunmaktadır. Modüler tasarım, inşaat sürecini basitleştirir ve örnek kullanımı sırasında kullanıcı güvenliğini artırır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Biyoteknoloji
- Kriyoprezervasyon
Arka Plan
- Kriyojenik tanklardan örnek alımı zor ve tehlikeli olabilir.
- Mevcut yöntemler örnek bütünlüğünü tehlikeye atabilir.
- Daha güvenli, daha verimli alım tekniklerine ihtiyaç vardır.
- Önerilen cihaz bu sorunları çözmeyi amaçlamaktadır.
Çalışmanın Amacı
- Sıvı azot tanklarından örneklerin alımını basitleştiren bir cihaz geliştirmek.
- Örnek alım sürecinde örnek bütünlüğünü sağlamak.
- Artırılmış verimlilik için tek operatör kullanımına izin vermek.
Kullanılan Yöntemler
- Manevra kabiliyeti için Dewar tankından dondurucu raflarının çıkarılması.
- Cihazın tanka dikey olarak yerleştirilmesi.
- Örneklerin toplanması için tankın dibi boyunca hafif bir kazıma.
- Örneklerin alınması için cihazın tank duvarları boyunca dik çekilmesi.
Ana Sonuçlar
- Cihaz, geleneksel yöntemlere hızlı ve güvenli bir alternatif sunar.
- Örnek bütünlüğü, örnek alım süreci boyunca korunur.
- Tek operatör işlevselliği kullanılabilirliği artırır.
- Cihazın yapımı basit ve uygun maliyetlidir.
Sonuçlar
- Kriyojenik dayanıklı cihaz, kriyojenik tanklardan örnek alımı önemli ölçüde geliştirir.
- Kriyoprezerve örneklerle çalışan araştırmacılar için pratik bir çözüm sunar.
- Gelecekteki uygulamalar çeşitli laboratuvar ortamlarına genişleyebilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Reliable recovery of cryopreserved biological samples is critical for maintaining sample integrity and ensuring continuity in biopharma R&D workflows. Accidental loss of vials or boxes into cryogenic storage tanks can compromise high-value assets and disrupt discovery or translational programs. A safe, rapid, and standardized retrieval solution directly supports operational resilience and portfolio risk management.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Preserves integrity of primary samples essential for target validation studies.
- Reduces risk of sample degradation that could confound mechanistic or pathway analyses.
- Supports reproducible access to archived biospecimens for hypothesis-driven research.
Screening & Assay Development
- Enables consistent retrieval of reference materials for assay calibration and validation.
- Minimizes freeze-thaw cycles that can impact assay reproducibility and quantitative outputs.
- Facilitates reliable preparation of biological systems for downstream screening workflows.
Translational & Preclinical Research
- Maintains sample quality for biomarker studies and preclinical model development.
- Ensures continuity of biospecimen resources across discovery and translational phases.
- Reduces operational risk in long-term biobanking and sample management.
Pipeline & Workflow Integration
This device integrates into the biopharma pipeline at the biobanking, sample management, and pre-analytical stages, supporting workflows from early discovery through preclinical research.
- Discovery Biology: Enables reliable hypothesis testing by safeguarding sample integrity during retrieval.
- Screening: Supports assay readiness by preventing sample degradation from repeated decanting or exposure.
- Analytics: Preserves quantitative measurement fidelity by minimizing RNA or protein degradation.
- Translational Research: Aligns with biomarker continuity and preclinical sample quality requirements.
- Enterprise Reuse: Provides a reusable, adaptable tool for ongoing sample management across programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Enhances predictive confidence by maintaining sample quality for downstream analyses.
- Operational Value: Standardizes retrieval, reduces safety risks, and enables single-operator workflows.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision reliability by ensuring sample integrity is uncompromised.
- Portfolio Impact: Reduces risk of lost or degraded samples, supporting risk-adjusted advancement decisions.
Implementation Considerations
- Requires basic technical skills for device assembly and adaptation to tank dimensions.
- Needs access to standard laboratory tools and materials for construction.
- Operators must use appropriate cryogenic PPE and follow safety protocols.
- Device can be adapted for different sample formats (boxes or vials) as needed.
- Visibility and maneuverability within Dewar tanks may still present practical limitations.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
0:05
Title
1:02
Assembly of Cryotolerant Device for Retrieval of Cryoboxes
2:15
Assembly of Cryotolerant Device for Retrieval of Cryovials
3:12
Retrieving Cryoboxes and Cryovials from Dewar
4:12
Results: RNA Sample Quality from Retrieved Samples
5:27
Conclusion
