Nöromüsküler Elektriksel Stimülasyon tarafından Kas Eğitimi A Mürin Modeli

Ön kompartman kasları nöromüsküler elektriksel stimülasyon bir fare modeli (NMES), güvenli ve ucuz bir klinik yöntem, anlatılmıştır. Bu modelde, farelerde ve spesifik hedef kas kontraksiyonlarının ortaya çıkarmak amacıyla, kolayca bulunabilen bir klinik cihazı değiştirerek bir avantaja sahiptir.

Bu prosedürün genel amacı, nöromüsküler elektriksel stimülasyon kullanarak bir murn kas eğitimi modelini göstermektir. Bu, ilk olarak insanlarda kullanılmak üzere tasarlanmış klinik olarak mevcut bir yüzey elektrodunun farelerde kullanılabilecek bir yüzey elektroduna uyarlanması, daha sonra anestezi yapılması ve hayvanın stimülasyon için konumlandırılmasıyla gerçekleştirilir. Daha sonra yüzey elektrodunu doğrudan fibula başının hemen distalindeki derin fibula sinirinin üzerine yerleştirin.

Son adım, ön kıvrılma kaslarının stimülasyon protokolünü gerçekleştirmektir. Sonuç olarak, histolojik analiz iskelet kası vaskülaritesinde bir artış gösterir ve yerinde kasılma testi, artmış bir tepe şeytani gücü gösterir. Merhaba, benim adım Fabrizio.

Pittsburgh Üniversitesi Fiziksel Tıp ve Rehabilitasyon Bölümü'nde yardımcı doçent ve Hücresel Rehabilitasyon Laboratuvarı direktörüyüm. Bugün sizin için nöromüsküler elektriksel stimülasyon kullanarak kas eğitiminin aynalayıcı bir modelini göstereceğiz. Gösterinin bu ilk bölümünde, klinik olarak mevcut bir yüzey elektrodunu, farelerde iskelet kasını uyarmak için kullanabileceğiniz bir elektrota nasıl değiştireceğinizi göstereceğiz.

İkinci bölümde, bu nöromüsküler elektriksel stimülasyon protokolünü deneylerinizde nasıl uygulayacağınızı ve modaliteleri yakından taklit eden hayvan modellerinin geliştirilmesini göstereceğiz. Kliniği kullanmak önemlidir çünkü kas aktivasyonunun mekanik transdüktif yanıtları nasıl tetiklediği gibi iskelet kası fizyolojisi ile ilgili soruları yanıtlamamıza yardımcı olabilir ve bu konuda moleküler, hücresel ve doku seviyelerinde bakabiliriz. Merhaba, benim adım Ricardo Ferrari.

Pittsburgh Üniversitesi Fizik Tedavi Bölümü'nde doktora HD öğrencisiyim. Kasın yakınında elektrostimülasyon, kas kuvvetini artırmak ve kas iyileşmesini iyileştirmek için bir klinikte kullanılan yaygın bir prosedürdür. Bununla birlikte, kullanılması gereken en uygun parametreler konusunda birçok soru devam etmektedir.

Bu hayvan modeli, klinik bir ortamda kullanım için spesifik bir elektriksel stimülasyon protokollerinin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Elektrodu hazırlamak için, altı milimetre uzunluğundaki iki altın pimi 90 derecelik bir açıyla bükerek başlayın. Ardından, dış yalıtımı çıkararak iki bakır telin yaklaşık yedi santimetresini açığa çıkarın.

Ardından, konektörlerden gelen kabloları yaklaşık 3,5 milimetre aralıklarla yerleştirilmiş iki altın pime lehimleyin. Bu yerden sonra, yalıtım ve stabilizasyon için bakır teller ile altın pimler arasındaki bağlantı üzerine daralan makaronu ısıtın, altın pimlerin birbirine paralel olduğundan emin olun ve uçları hizalanacak şekilde devre kartından geçirin. Daha sonra, pimleri birden fazla şeffaf epoksi uygulamasına gömün, epoksinin uçtaki uygulamalar arasında tamamen kurumasına izin verin, altın pimlerin uçlarını ortaya çıkarmak için epoksiyi zımparalayın.

Ardından, kabloların elektriksel olarak kısa devre yapmadığını kontrol etmek için bir volt metre kullanın. Ardından, dişi iki kablo konektörünün metal pimlerini yalıtmak için plastik boru kullanın. Ardından, NMES cihazından gelen elektrot uçlarını dişi iki kablo konektörüne takın.

Tüm prosedürler Pittsburgh Üniversitesi Iacuc tarafından gözden geçirildi ve onaylandı ve PHS Assured ve alac'ta gerçekleştirildi. Uluslararası akredite programlar ve tesisler, flor izinin solunması yoluyla hayvanı uyuşturur. Hayvan, NMES seansı boyunca anestezi altında kalmalıdır.

Anestezi, ayak parmağı sıkışması ekstansör refleks testi kullanılarak doğrulanmalıdır. Ardından hayvanı yanal yaslanmış pozisyona getirin. Daha sonra arka bacak tıraşı olun, alkolle silin, elektrodu% 3 çamaşır suyu ile silin.

Daha sonra su ile, 150 mikrosaniyelik darbe süresi ve 50 PP s frekans dahil olmak üzere stimülasyon parametrelerini ayarlayın. Ardından, stimülasyon süresini 0,5 saniyelik bir rampa yukarı ve 0,5 saniyelik bir rampa aşağı ile beş saniyeye ayarlayın. Bu, kasın yavaş yavaş stimülasyona alışmasına izin verecek ve hayvan için daha rahat olacaktır.

Bundan sonra, kasılmalar arasındaki kapanma süresini 10 saniyeye ayarlayın. Bu, istenen etkiye bağlı olarak ayarlanabilir, ancak kapalı kalma sürelerinin azalması, kas yorgunluğunun daha hızlı başlamasına neden olacaktır. Daha sonra, elektrodu% 3 ağartıcı ve ardından su ile sterilize edin ve tibial anterior ve ekstansör digitorum en uzun kas dahil olmak üzere ön bölme kaslarının uyarılması için elektrota iletken jel uygulayın, yüzey elektrodunu doğrudan hayvanın lateral femoral kondilin hemen distalinde bulunan ortak perineal sinirin üzerine yerleştirin.

Elektrotun yerleşimi, stimülasyon tam ayak bileği dorsifleksiyonunu ve parmakların tam ekstansiyonunu ortaya çıkardığında doğrulanır. Öte yandan, basamak ekstansiyonu olmayan pençe dorsifleksiyonu, sadece tibiallerin ön kasının uyarıldığını düşündürür. Daha sonra, NMES yoğunluğunu dokuz miliamperde başlatın, dinlenme süresi boyunca setler arasında beş dakikalık bir dinlenme ile toplam 20 kasılma için iki set kasılmayı tamamlayın, kontralateral ekstremitenin uyarılması gerçekleştirilir.

Şimdi hayvanı kurtarma odasına yerleştirin. Üç ila beş aylık MDX kızak farelerinde dört haftalık NMES'ten sonra, hematin ve eoin iskelet kası boyama, uyarılmamış kontrol muadillerine kıyasla merkezi olarak çekirdekli liflerin sayısında bir artış göstermez. Bu, NMES uygulamasının dejenerasyon rejenerasyon kaskadını başlatmadığını göstermektedir.

Endotel hücre belirteci olarak CD 31 immünohistokimyası, stimülasyon almayan kontrol farelerine göre, dört haftalık NMES'in tedavi edilen kasın önemli anjiyogenezi ile sonuçlandığını ortaya koymaktadır. Bu şekil, tedavi edilmemiş kasları kontrol etmeye göre NMES ile tedavi edilen kasların artan tepe titanik gücünü göstermektedir. Bu tekniğe hakim olduktan sonra, protokolün tamamlanması hayvan başına yaklaşık 15 dakika sürmelidir.

Bu protokolün en zor kısmı, istenen kas tepkisini ortaya çıkarmak için elektrotunuz için doğru yerleşimi bulmaktır. İzlediğiniz için teşekkürler. Herhangi bir sorunuz olursa lütfen laboratuvarımızla iletişime geçmekten çekinmeyin.