Name: Sıçan ve Farelerde Ovariektomi ve 17β-östradiol Değiştirme: Görsel Gösteri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Öğrenin sıçan ve farelerde ovariectomi ve silastik kapsüllerle 17β-östradiol replasmanı yöntemini. Bu teknik, serum östrojen seviyelerinin stabil kontrolü için nörobilim ve endokrinoloji araştırmalarında kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışma Linköping Üniversitesi ve Östergötland ve İlçe Belediyesi tarafından finanse edildi.

1. Dorsal Rota aracılığıyla Ovariektomi <ol><li> Bir oksijen / nitrik oksit,% 30 /% 70 karışımı içinde% 1.5 izofluran (indüksiyonu için% 4) kullanılarak, örneğin hayvansal uyuşturmak. Bir rektal termometre bağlı bir ısıtma plaka üzerinde pozisyonda hayvan yerleştirin. Bu hayvan ve plaka arasında izolasyon ince bir tabaka olması önemlidir ve bu termometre geri besleme sistemi 37 içinde vücut ısısını korur ± 0.5 ° C Göz koruması için jel sürün ve postoperatif ağrı için hayvanın boyun lateral üzerindeki deri altına serum fizyolojik ile sulandırılmış 5 mg Rimadyl / kg vücut ağırlığı yönetmek. </li><li> Iliak kanattan cephally bir 4 * 4 cm (3 fareler için * 3 cm) alan Tıraş. Iyice bir 4 * 4 cm açıklık cerrahi sac ile hayvan kapsayan önce Örneğin Jodopax için ile traş yıkayın. </li><li> 2-3 cm&#39;lik orta hat kesi olun ve açık açık yatan fasya karşı cildi incelemek. Orta hat lateral Bir cm, başka bir kesi yapmak uçtan bir ucafasya ugh. Açık açık karın boşluğuna ulaşana kadar yüzeysel olarak mümkün olduğunca bu fasya altında yanal incelemek. </li><li> Cımbız kullanarak, karın boşluğunda over çevreleyen yağ dokusu kapmak ve yavaşça dışarı çekin. Over belirlemek ve uterin boynuz ve bu yapının proksimalde damarları 0.5-1 cm ligate. Over ve bağlanan yağ dokusu kesin ve karın boşluğuna kalan doku geri koydum. Kontralateral fasya başka bir kesi yapmak ve işlemi tekrarlayın. </li><li> Tercihen bir monofilament sütür kullanılarak, yaraları kapatmak ve anesteziden uyanık hayvan izin verin. Cerrahisinden sonra, en azından 2 saat boyunca ısıtılmış bir kafes (25-27 ° C) içinde hayvan yerleştirin. Hayvanlar birinci gün postoperatif ayrı muhafaza edilmelidir. Bu kafes sık iyileşme döneminde temizlenir / değiştirilir çok önemlidir. Yirmi dört saat cerrahisinden sonra, bir başka ile seyreltilir 5 mg Rimadyl / kg vücut ağırlığı ile deri altından enjekte hayvanlarıtuzlu. </li></ol> 2. Silastik Kapsül ile 17β-östradiol Subkutan İdaresi <ol><li> Iyice susam yağı 17β-östradiol istenilen miktarda karıştırın. Sıçanlar ve fareler fizyolojik konsantrasyonları için, sırasıyla 180 mcg / mL ve mcg / mL 18-36 öneririz. Plasebo kapsüller saf susam yağı ile doldurulur. </li><li> 3 cm (fareler için 2 cm) silastik boru uzunlukları ve 5 mm (fareler için 3 mm) takmak için ahşap aplikatör sopalarla uzunlukları kesin. Forseps kullanarak, tüm uzunluğu doldurmak için 17β-estradiol/sesame yağ solüsyonu enjekte önce silastik kapsül içine bir ahşap fiş sıkın. Yavaşça ahşap bir fiş (fişler kapsül kalıcı kalması beklenen) ile açık sonunda silastik kapsül kap. Implantasyondan önce, bir gece boyunca geri kalan 17β-östradiol çözelti içinde kapsül inkübe. </li><li> Kapsülün implantasyon sıçanlarda ovariektomi kullanılan anestezi gerçekleştirilebilir. Mi içince, ancak ovariektomi sonra 14 günlük bir iyileşme süresi kuvvetle narin deri yoluyla çıkıntılı kapsül riskini en aza indirmek için tavsiye edilir. </li><li> 1.1 gibi, ya ovariektomi insizyon kapatıldıktan sonra cerrahi hazırlıklardan sonra, tıraş ve hayvanın boyun dorsalinde 2 * 2 cm yıkayın. 1 cm&#39;lik bir kesi yapmak ve pervasızca kapsül için geniş bir alan olan, caudolaterally bir deri altı cebe incelemek. Silastik kapsül (bu zaman noktaya kadar 17β-östradiol çözüm inkübe edildiği) silin ve yavaşça sonradan bir dikişle kapatılır kesi yoluyla yükleyin. Bu emin olmak için çok önemli olduğu, özellikle yara yakın alanda mümkün olduğunca az kapsül suşları cilt. Implantasyon kapsül üretimi bakıldığında, kirlenmenin önlendiği önemlidir. </li></ol> 3. Nut-krem Nutella ile 17β-östradiol peroral İdaresi <ol><li> Iyice erimesi 17β-sonra susam yağı östradiol ve Nutella ile susam yağı karıştırın. Her günlük kısmı 17β-östradiol 28 mikrogram, 5 uL susam yağı ve bir kilogram vücut ağırlığı ve sıçanlar için 17β-estradiol 1.12 mg, 0,312 uL susam yağı ve her 30-g fare için 60 mg Nutella başına 1 gr Nutella içerir öneririz. Placebo ceviz krem ​​17β-östradiol olmadan hariç aynı hazırlanır. </li><li> Deney öncesinde beş gün için hormon içermeyen ceviz krem ​​yemeği için hayvanlar eğitin. Eğitimin ilk üç gün, fareler optimal evlerinde kafeslerde, (yaklaşık 0.5 gr Nutella 2-5 hayvanlar için) grupları konusunda eğitilmelidir. Eğitimin dördüncü ve beşinci günlerde, hayvanların deneysel duruma benzemeye günlük kısmını almadan önce ayrı kafeslere konur. </li><li> Deneme sırasında, hayvanların Nutella kısmı küçük seramik karoların üzerinde servis edilir sonra, her beslenmeden durum için ayrı kafeslere konur. Eğitim yukarıda, o gibi yapıldıysaur deneyim sıçan ve farelerin fazla% 95 fındık-krem kabul, ve bir kez tam habitüe, hayvanların çoğu saniye içinde tüketmek olmasıdır. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Mevcut yöntemlerin yeniden hedefliyoruz serum fizyolojik 17β-östradiol konsantrasyonu, yaklaşık olarak 5-140 pg / sıçan ve fareler 4,6 için 5-35 pg / mL için ml. Subkutan silastik kapsülleri yukarıdaki talimatlara göre, 300 gram dişi Sprague-Dawley sıçanlara zaman, yavaş yavaş pg / mL günde yaklaşık 40 adet 2 ila 10 pg / mL günde 35 17β-östradiol serum konsantrasyonları azalmakta üretirler. Ancak, hemen uygulamadan sonra, 1000 pg / ml civarında bir serum pik konsantrasyonu 4,5 (Şekil 1A) 8 saat içinde fizyolojik aralığına düşen beklenebilir. 25 g dişi C57BL / 6 fare uygulanmıştır 36 ug 17β-estradiol/mL, yukarıda tarif fareler için silastik kapsüller, serum kons işlemekyavaş yavaş yaklaşık 90 pg / mL günde 2 ila 25 pg / mL günde 35 düşmesi entrations. Bu (Şekil 1B) 6 incelenmemiştir rağmen, sıçanlarda bulundu gibi Bu muhtemelen benzer bir pik önce gelmelidir. Dozlarda peroral Nutella yöntemi 300 g dişi Sprague-Dawley farelerinin uygulandığı zaman, yukarıda anlatılan 10-70 pg / ml (Şekil 2A) 4 arasında günlük dalgalanmalarla 17β-estradiol fizyolojik seviyeleri vermektedir. Yukarıda belirtilen dozlar kullanılarak fareler için, günde yaklaşık 20 seviyeleri ve 120 pg / ml (Şekil 2B) 6 arasında değişen. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/4013/4013fig1.jpg" /> <st<html> . sıçanlarda 17β-östradiol seviyelerini gösteren rong&gt; Şekil 1 Stilize grafikleri; 4,5 ve fareler (Bir sonraki zaman noktalarında n zaman puan = 10 en çok 24 saat, n = 15) (B n = 10) kapsül implantasyon sonrası 6. Silastik kapsülleri 1000 serum konsantrasyonları kısa bir başlangıç ​​zirveye kadar üretmek pg / ml, ama 100 pg / ml altındaki seviyelere saat içinde azalır. Giderek azalmakta olsa da önümüzdeki 4-5 hafta için, kapsül, serum konsantrasyonları istikrarlı verim. Gölgeli alanlar sırasıyla sağlam dişi sıçanlar ve fareler fizyolojik 17β-östradiol serum karşılık gelir. Görsel grafikler gösterilememiştir rağmen, inter-bireysel değişkenliği (çok düşük ortalama 27 sıçanlarda% 183 ve 28 silastik kapsül yöntemi ile farelerde% 115 değişkenlik katsayıları render 17β-östradiol konsantrasyonu vardır konsantrasyonları genellikle) varyasyon katsayıları yüksek oluşturur. iles/ftp_upload/4013/4013fig2.jpg &quot;/&gt; Şekil 2 sıçanlarda 17β-östradiol konsantrasyonu sunan Stilize grafikler (A; n = 15). 4 ve fareler (B n = 10) Nutella günlük hormonu verilmesinin bir sonucu olarak 6. Peroral Nutella yöntem subkutan veya intravenöz yöntemlerle üretilen kadar yüksek değil ancak açık farkla, günlük pik vermektedir. Bu insan hormon replasman tedavisi farmakokinetiği taklit eden ve oral tedavi sadece yukarıdaki örnekte ilk 96 saat sunmak bile, gerekli olduğu sürece için devam edebilirsiniz. Gölgeli alanlar sırasıyla sağlam dişi sıçanlar ve fareler fizyolojik 17β-östradiol serum karşılık gelir. Rağmen görsel grafikler gösterildiği değil, inter-bireysel değişkenliği (çok düşük ortalama konsantrasyonları Nutella yöntemi ile farelerde sıçanlarda 40-% 132 den ve 13 219% ile varyasyon katsayıları render 17β-östradiol konsantrasyonu vardır genellikle yüksek üretmekvaryasyon katsayıları).

<ol><li>Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dose-related+neuroprotective+versus+neurodamaging+effects+of+estrogens+in+rat+cerebral+ischemia%3A+a+systematic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Dose-related neuroprotective versus neurodamaging effects of estrogens in rat cerebral ischemia: a systematic analysis.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1359-1372 (2009).</li>
<li>Strom, J. O., Theodorsson, E., Holm, L., Theodorsson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+for+administering+17beta-estradiol+to+ovariectomized+rats+result+in+opposite+effects+on+ischemic+brain+damage%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Different methods for administering 17beta-estradiol to ovariectomized rats result in opposite effects on ischemic brain damage.</a> BMC Neurosci. 11, 1471-2202 (2010).</li>
<li>Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hormesis+and+Female+Sex+Hormones%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Hormesis and Female Sex Hormones.</a> Pharmaceuticals. 4, 15(2011).</li>
<li>Isaksson, I. M., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+17beta-estradiol+administration+to+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+journal+of+clinical+and+laboratory+investigation%22%5BJournal%5D)">Methods for 17beta-estradiol administration to rats.</a> Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. , (2011).</li>
<li>Strom, J. O., Theodorsson, E., Theodorsson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Order+of+magnitude+differences+between+methods+for+maintaining+physiological+17beta-oestradiol+concentrations+in+ovariectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Scand.+J.+Clin.+Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Order of magnitude differences between methods for maintaining physiological 17beta-oestradiol concentrations in ovariectomized rats.</a> Scand. J. Clin. Lab Invest. 68, 814-822 (2008).</li>
<li>Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+long-term+17beta-estradiol+administration+to+mice%5BTitle%5D)+AND+%22General+and+comparative+endocrinology%22%5BJournal%5D)">Methods for long-term 17beta-estradiol administration to mice.</a> General and comparative endocrinology. , (2011).</li>
<li>Kalliokoski, O., Jacobsen, K. R., Hau, J., Abelson, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+concentrations+of+buprenorphine+after+oral+and+parenteral+administration+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+J%22%5BJournal%5D)">Serum concentrations of buprenorphine after oral and parenteral administration in male mice.</a> Vet. J. 187, 251-254 (2011).</li>
<li>Simpkins, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogens+may+reduce+mortality+and+ischemic+damage+caused+by+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+female+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Estrogens may reduce mortality and ischemic damage caused by middle cerebral artery occlusion in the female rat.</a> J. Neurosurg. 87, 724-730 (1997).</li>
<li>Wise, P. M., Dubal, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estradiol+protects+against+ischemic+brain+injury+in+middle-aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Estradiol protects against ischemic brain injury in middle-aged rats.</a> Biol. Reprod. 63, 982-985 (2000).</li>
<li>Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen-induced+recovery+of+autonomic+function+after+middle+cerebral+artery+occlusion+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 281, 1531-1539 (2001).</li>
<li>Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrimental+effects+of+17beta-oestradiol+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 25, 414-420 (2005).</li>
<li>Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+17beta-estradiol+upon+stroke+damage+in+stroke+prone+and+normotensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Differential effects of 17beta-estradiol upon stroke damage in stroke prone and normotensive rats.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 298-304 (2004).</li>
<li>Yong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((17beta-estradiol+potentiates+ischemia-reperfusion+injury+in+diabetic+ovariectomized+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">17beta-estradiol potentiates ischemia-reperfusion injury in diabetic ovariectomized female rats.</a> Brain Res. 1054, 192-199 (2005).</li>
<li>Theodorsson, A., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estradiol+increases+brain+lesions+in+the+cortex+and+lateral+striatum+after+transient+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats%3A+no+effect+of+ischemia+on+galanin+in+the+stroke+area+but+decreased+levels+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Estradiol increases brain lesions in the cortex and lateral striatum after transient occlusion of the middle cerebral artery in rats: no effect of ischemia on galanin in the stroke area but decreased levels in the hippocampus.</a> Peptides. 26, 2257-2264 (2005).</li>
<li>Levin-Allerhand, J. A., Sokol, K., Smith, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safe+and+effective+method+for+chronic+17beta-estradiol+administration+to+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp.+Top+Lab+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Safe and effective method for chronic 17beta-estradiol administration to mice.</a> Contemp. Top Lab Anim. Sci. 42, 33-35 (2003).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Daha önceki çalışmalarda var Yukarıda sunulan yönetim modları 17β-östradiol fizyolojik serum üretimi açısından ticari yavaş salımlı tablet ve enjeksiyon üstün olduğunu kanıtladı. Yavaş salınımlı pelet çok yüksek ve uzun süreli serum konsantrasyonu zirveleri üretirken, enjeksiyon aşırı, günlük hormon dalgalanmalara neden ve hayvanların 4-6 tekrarlanan stresli ele alınmayı gerektirir. Yeterli yönetim modları seçmenin önemi düşük doz 17β-östradiol yönetim rejimleri (örneğin mevcut makalede sunulan teknikleri gib...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Rimadyl, 50 mg / ml </td><td> Pfizer </td><td> 462986 </td><td> Ovariektomi postoperatif analjezi. </td></tr><tr><td> Lubrithal göz jeli </td><td> Leo Laboratuvarları </td><td></td><td> Ameliyat sırasında göz koruması. </td></tr><tr><td> Jodopax veteriner </td><td> Pharmaxim </td><td></td><td> Cerrahi dezenfeksiyon. </td></tr><tr><td> Vicryl 4-0 sütür </td><td> Johnson &amp; Johnson </td><td></td><td> Sütür ve over ligasyonu Yaralanması. </td></tr><tr><td> 17β-estradiol,&gt;% 98 </td><td> Sigma </td><td> E8875-1G </td><td> Silastik kapsül ve Nutella için susam yağı içinde. </td></tr><tr><td> Susam yağı </td><td> Sigma </td><td> S3547-1L </td><td> 17β-östradiol dağıtılması. </td></tr><tr><td> Silastik tüp, ID / OD: 1.575/3.175 mm </td><td> Dow Corning </td><td> 508-008 </td><td> Silastik kapsül üretimi. </td></tr><tr><td> Ahşap aplikatör çubuk </td><td> Selefatrade </td><td> 12-0783 </td><td> Silastik kapsül Kapatma. </td></tr><tr><td> Nutella </td><td> Ferrero </td><td></td><td> Peroral 17β-östradiol için Orta. </td></tr></tbody></table>

sıçan ve farelerde ovariektomi ve 17β-östradiol değiştirme: görsel gösteri

Ovariectomy and 17&beta;-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Östrojenler etkileri istisnai olarak geniş bir yelpazeye sahip kadın cinsel hormonların bir aile vardır. Sıçan ve farelerde östrojen araştırmalarında kullanılan ettiklerinde genellikle 17β-östradiol Eksojen yerine, hızla bisiklete hormon üretimini baskılamak için ovarektomi edilir. Hormonu fizyolojik serum elde etmek için uygulanmalıdır nasıl olduğu konusunda görüş birliği eksikliği Ancak, vardır. 17β-östradiol seviyesi / uygulama yöntemi derinden deneysel sonuçlar 1-3 etkilediğinden Bu çok önemlidir. Biz subkutan silastik kapsül ve başına sözlü somun-krem Nutella ticari yavaş salımlı granül (Amerika Yenilikçi Araştırma şirketi tarafından üretilen) üstün olduğu bulma, 17β-östradiol yönetimin farklı modları karakterize bir dizi çalışma var ve 17β-estradiol 4-6 fizyolojik serum konsantrasyonları üretimi açısından günlük enjeksiyonlar. Adv arasındaDaha önce buprenorfin idaresi 7 için kullanılır olmuştur fındık dondurma yöntemi, bir antages östrojen yönetimi için kullanılan zaman oral hormon replasman tedavisi benzer ve non-invaziv olmasıdır. Subkutan silastik kapsüller uygundur ve çok kararlı serum konsantrasyonları üretirler. Bu video, makale ovariektomi adım adım gösteri ve silastik kapsül ve yönetim prosedürlerinin önemli yönlerini bir tartışma izler sıçan ve farelerde yapılan oral Nutella tarafından 17β-östradiol hormon replasman içerir.

Silastik kapsüller ve peroral Nutella vasıtası ile overlerin alınması ve 17β-estradiol müteakip değiştirilmesi sıçan ve farelerin gösterilmiştir.

Sıçan ve Farelerde Ovariektomi ve 17β-östradiol Değiştirme: Görsel Gösteri

Östrojenler, son derece geniş bir etki yelpazesine sahip, dişi seks hormonlarından oluşan bir ailedir. Östrojen araştırmalarında sıçanlar ve fareler kullanıldığında, bunlar...

Bu prosedürün genel amacı, dişi sıçanlarda ve farelerde aksi takdirde dalgalanan serum östrojen konsantrasyonları üzerinde sıkı bir kontrol sağlamaktır. Bu, öncelikle overlerin dorsal kökten çıkarılmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, elastik kapsüller ve bir Nutella karışımı hazırlanır.Son olarak, deri altına bir kapsül yerleştirilir veya Nutella karışımı oral yolla uygulanır. Nihayetinde, kapsül yöntemi için stabil, Nutella yöntemi için ise dalgalanan serum 17 beta estradiol konsantrasyonlarını gösteren radyoimmünolojik analiz kullanılarak sonuçlar elde edilebilir. Bu tekniklerin yavaş salınımlı peletler gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, uzun süreler boyunca fizyolojik estradiol konsantrasyonları ürettiklerinin kanıtlanmış olmasıdır.Bu yöntem, uygulama biçimleri, kökler ve dozlar arasındaki etki farklılıkları gibi östrojen alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Hayvan anestezi altına alındıktan sonra, rektal termometreye bağlı bir ısıtma plakasının üzerine prone pozisyonda yerleştirin. IGEL'i ve postoperatif rahatlama sağlamak amacıyla hayvanın boynunun lateral kısmına subkütan olarak uygulayın.İliak krist şaverin ön kısmındaki dört çarpı dört santimetrelik alana, salin içinde kilogram başına beş miligram IL uygulayın. Ardından, hayvanı dört çarpı dört santimetrelik açıklığı olan bir cerrahi örtü ile kapatmadan önce bölgeyi bir antiseptik ile dezenfekte edin. İki ila üç santimetrelik bir orta hat insizyonu yapın ve cildi, orta hattın bir santimetre lateralinden alttaki fasyadan künt diseksiyonla ayırın.Fasya üzerinden başka bir insizyon yapın. Ardından, karın boşluğuna ulaşana kadar bu fasyanın altında, mümkün olduğunca yüzeysel olarak lateral yönde künt diseksiyon gerçekleştirin. Cımbız kullanarak, karın boşluğunda yumurtalığı çevreleyen adipoz dokuyu tutun ve nazikçe dışarı çekin.Overi belirleyin ve uterus kornularını ve damarlarını bu yapının 0,5 ile bir santimetre proksimalinden bağlayın. Overi ve bağlanan adipoz dokuyu çıkarın ve geri kalan dokuyu abdominal kaviteye geri yerleştirin.Kontralateral fasya üzerinde başka bir insizyon yapın ve diğer yumurtalığı çıkarın. Yaraları kapatın ve 17 beta estradiol hemen uygulanmayacaksa, hayvanın anesteziden ayılmasını bekleyin.Hayvanı cerrahi işlemden sonra en az iki saat boyunca ısıtmalı bir kafeste tutun. Sıçanı ameliyat sonrası ilk birkaç gün boyunca ayrı bir kafeste barındırın. Cerrahi işlemden 24 saat sonra deri altına.17 beta estradiol'i şolastik kapsüller aracılığıyla uygulamak için hayvanlara kilogram başına beş miligram daha IL enjekte edin. İstenilen miktarı susam yağında iyice karıştırın. Pens kullanarak, tıkama işlemi için üç santimetre uzunluğunda şolastik tüpler ve beş milimetre uzunluğunda ahşap aplikatör çubukları kesin.17 beta estradiol susam yağı çözeltisini enjekte etmeden önce, şolastik kapsülün içine bir adet ahşap tıpa yerleştirin. Kapsülün tamamını doldurmak için, açık ucu başka bir ahşap tıpa ile nazikçe kapatın. İmplantasyondan önce kapsülleri, kalan 17 beta estradiol çözeltisi içinde gece boyunca inkübe edin.Ektomi insizyonlarını kapattıktan sonra, sıçanın boynunun dorsal yönünde ikiye iki santimetrelik kare bir alanı tıraş edin ve dezenfekte edin. Bir santimetrelik bir insizyon yapın ve lateral olarak künt dissection gerçekleştirin. Kapsül için yeterli alan oluşturacak şekilde subkütan bir cep disseke edin.Scolastik kapsülü silin ve insizyon üzerinden nazikçe yerleştirin. Ardından insizyonu bir sütür ile kapatın. Kapsülün, özellikle yara çevresindeki cildi mümkün olduğunca az gerdiğinden emin olun.Östrojen uygulama ortamı olarak fındık kreması Nutella'yı kullanmak için, 17 beta estradiol'i susam yağında tamamen çözün ve ardından susam yağını fındık kremasıyla karıştırın. Deneyden beş gün önce, 17 beta estradiol içermeyen bir plasebo fındık kreması hazırlayın. Sıçanları, birinci günden üçüncü güne kadar hormon içermeyen fındık kremasını yemeleri için eğitin.Hayvanları dördüncü ve beşinci günlerde gruplar halinde eğitin. Deneyler boyunca onlara ayrı kafeslerde fındık kreması yedirin. Hayvanlara fındık kremalı fizyolojik serum verildiğinde onları ayrı kafeslere yerleştirin.Mevcut yöntemlerin yeniden üretmeyi amaçladığı 17 beta estradiol konsantrasyonları, sıçanlar için yaklaşık 5 ila 140 picograms per milliliter ve fareler için 5 ila 35 picograms per milliliter'dir. Burada gösterildiği gibi. 300 gram ağırlığındaki dişi Sprague Dawley sıçanlarına uygulandığında.Deri altına yerleştirilen elastik kapsüller, serum 17 beta estradiol konsantrasyonlarını ikinci günde yaklaşık 40 picograms per milliliter seviyesinden 35. güne kadar 10 picograms per milliliter seviyesine kadar yavaşça düşürür. Bununla birlikte, kapsüller 25 gram ağırlığındaki dişi C 57 black six farelere uygulandığında, uygulama sonrası hemen yaklaşık 1000 picograms per milliliter düzeyinde bir serum konsantrasyonu zirvesi beklenir ve bu değer sekiz saat içinde fizyolojik aralığa düşer.300 g ağırlığındaki Sprague Dawley sıçanlarına nut krem yoluyla uygulandığında, serum konsantrasyonu ikinci günde yaklaşık 90 picograms per milliliter düzeyinden 35. günde 25 picograms per milliliter düzeyine yavaşça düşmüştür. Farelerde 17 beta estradiol fizyolojik seviyeleri günlük olarak 10 ile 70 picograms per milliliter arasında dalgalanma göstermiştir.17 beta estradiol seviyeleri mililitre başına 20 ve 120 pikogram arasında dalgalanma göstermiştir. Teknikte uzmanlaşıldığında, eksizyon ve kapsül implantasyonu işlemi uygun şekilde gerçekleştirilirse 10 dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedür uygulanırken, hijyen kurallarına kesinlikle uyulması gerektiğini unutmamak önemlidir.

ovariectomy-17-estradiol-replacement-rats-mice-visual

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

İki paradigmalar egzersiz egzersiz kapasitesi ve egzersiz kardiyak adaptasyon menopozun etkisini incelemek için yeni geliştirilen kimyasal kaynaklı menopoz fare modeli üzerinde test edildi.

Farelerde Egzersiz Kapasitesi ve Kardiyak Uyum Kimyasal kaynaklı Yumurtalık Yetmezliği Etkisi Eğitim için Bir Yöntem

Burada, canlı görüntüleme, farelerde aşılı fluorescently etiketli insan endometrium parçacıkları için bir iletişim kuralı mevcut. Yöntemi seçim ilaçların etkileri izleme aracılığıyla endometriotic lezyon boyutu ve gerçek zamanlı olarak flüoresan muhabir tarafından yayılan Floresans miktar...

Lezyon boyutu endometriozis, kapaklı fare modeli noninvaziv izlenmesi

Klinik olarak, menopozal kadınlarda östrojen eksikliği lipid bozulması ve ateroskleroz insidansını ağırlaştırabilir. ApoE-/- farelerde çift dorsal-lateral kesi ile bilateral ovariektomi ile in vivo östrojen eksikliği modeli oluşturduk. Fare modeli menopoz sonrası kardiyovasküler disfonksiyon eksojen östrojen tedavileri tarama için geçerlidir.

Menopoz Sonrası Kardiyovasküler Disfonksiyon Exogenous Östrojen Tedaviler Tarama için Bir In Vivo Östrojen Eksikliği Fare Modeli

Bu makalede, erkek farelerde cinsel davranış testleri nasıl yapılacağını açıklamaktadır.

Erkek Farelerin Cinsel Davranışlarının Değerlendirilmesi

Bu protokol, düşük maliyetli bir mikroenjeksiyon sisteminin inşasını, derin beyin yapılarına stereotaksik implantasyonunu ve uyanık ve sınırsız sıçanlarda tetrodotoksin zamanlanmış mikroenjeksiyon prosedürünü açıklar. Amaç, hipotalamik yapıların nöral aktivitelerini engelleyerek yumurtlamanın düzenlenmesine katılımını ortaya çıkarmaktır.

Tetrodotoksin Mikroenjeksiyonları ile Ters İnaktivasyon Yoluyla Yumurtlamanın Düzenlenmesinde Sıçan Beyninin Ayrık Alanlarının Rolünün Çözülmesi

Bu el yazması, hayatta kalma kemirgen orkiektomilerini ve yumurtalıklarını hızlı bir şekilde gerçekleştirmenin tutarlı bir yolunu açıklamaktadır.

Seks Hormonu Üretimini Azaltmak için Murin Orşiektomi ve Ovariektomi

Gebelik oluşumu, kompleks embriyo ve uterus çapraz ilişkisini içeren dinamik bir süreçtir. Maternal uterin ortamın bu süreçlere kesin katkıları aktif bir araştırma alanı olmaya devam etmektedir. Burada, bu araştırma sorularını ele almak için in vivo hayvan modellerinin tasarlanmasına yardımcı olacak ayrıntılı protokoller sağlanmaktadır.

Yumurtalık Ameliyatlı Fare Modelinde Gebelik Oluşumuna Uterus Katkılarını İnceleme Yöntemleri

Burada, Bazi Bushen kapsülünün (BZBS) östrojen benzeri etkisi sayesinde yumurtalıklı kemirgen modelindeki RANKL / OPG sinyal yolunu düzenleyebileceğini gösteren bir protokol sunulmaktadır.

Bazi Bushen Kapsülünün Yumurtalıklı Sıçanlarda Östrojen Benzeri Etkisi

Çeşitli ekstragonadal doku ve organlarda folikül stimüle edici hormon (FSH) birçok hastalığın patogenezi ile ilişkilidir. Yumurtalıklı ve FSH ile tedavi edilmiş fare modeli (OVF), FSH'nin ekstragonadal etkilerini araştırmak için kullanılabilir.

Folikül Uyarıcı Hormonun Bağımsız Etkilerinin Bir Fare Modelinde İn Vivo Olarak Araştırılması

Bu protokol, mini pompalar kullanılarak kontrollü letrozol salınımı yoluyla farelerde polikistik over sendromu (PCOS) modellerini indüklemek için bir teknik sunar. Yeterli anestezi altında, mini pompa deri altına implante edildi ve mini pompa salınımından belirli bir süre sonra farelerde PCOS başarılı bir şekilde indüklendi.

Farelerde Polikistik Over Sendromunu İndüklemek İçin Modifiye Edilmiş Bir Teknik

Öğrenin sıçan ve farelerde ovariectomi ve silastik kapsüllerle 17β-östradiol replasmanı yöntemini. Bu teknik, serum östrojen seviyelerinin stabil kontrolü için nörobilim ve endokrinoloji araştırmalarında kullanılır.

Sıçan ve Farelerde Ovariektomi ve 17β-östradiol Değiştirme: Görsel Gösteri

Daha fazla video keşfet