Name: Rat splenositlerin T Hücre Büyüme Faktörü hazırlanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T22:24:33.000+00:00
Duration: 18 min 27 s
Description: Öğrenin, sıçan splenositlerinden T hücre büyüme faktörü hazırlama yöntemini. Concanavalin A ile uyarılmış mononükleer hücrelerden sitokin üretimi ve TCGF elde edilmesi sürecini keşfedin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li> Lewis sıçan dalak (160-200g arasında fareler en iyi) ele alalım. Bir hücre süzgeç kullanarak PBS + antibiyotikler (PBS-PS) içeren bir petri buz Dilacerate. 50 ml&#39;lik bir tüp içinde koyun. PBS-PS ile doldurun. </li><li> 4 10 dakika Spin ° C pelet hücreleri. </li><li> Hücreler iki kez yıkayın. </li><li> Pelet NH 4 Cl 0.15 M (dalak başına 5 ml) tekrar Eritrositler lyse buz üzerinde 3 dakika süreyle bir pipetlemeyin yavaşça ve sürekli karıştırın. Orta tüp doldurun. </li><li> 4 10 dakika Spin ° C pelet hücreleri. </li><li> Hücreler iki kez yıkayın. </li><li> Hücreleri saymak. Bir sıçan dalak 200-250 milyon hücre verir. </li><li> Tam orta ml başına 2 milyon tohum hücreleri: 75 cm 2 şişeyi başına 50 ml. </li><li> Inkübatörde 48 saat boyunca büyümesini sağlar. </li><li> Pelet hücreleri Spin 15 dakika 4 ° C. </li><li> Süpernatantı toplamak; hücrelerin atın. </li><li> 15 mg / ml metil mannoside süpernatantı ekleyin. Iyice karıştırınız. </li><li> Filtre (0.2 mm) </li><li> -20 ° C&#39;de kısım ve mağaza Gerekirse 10 gün, 4 ° C&#39;de muhafaza edilebilir. </li></ol>

<ol><li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -M., Gola, M., Sabatier, J. -M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blocking+of+voltage-gated+K%2B+channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. 166, 936-944 (2001).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K%2B+channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%2C+a+model+for+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. 98, 13942-13947 (2001).</li>
<li>Mor, F., Cohen, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+of+Lewis+rat+encephalitogenic+T+cell+lines%3A+T-cell-growth-factor+is+superior+to+recombinant+IL-2%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">Propagation of Lewis rat encephalitogenic T cell lines: T-cell-growth-factor is superior to recombinant IL-2.</a> J. Neuroimmunol. 123, 76-82 (2002).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Düzenli olarak naif sıçanlarda serum ve thymi in vitro Lewis sıçan T hücre hatları teşvik etmek için hasat bu gerginlik euthanize beri Lewis sıçan splenositlerin TCGF hazırlar. Bu TCGF diğer sıçan suşları T hücre hatlarının büyüme ve hayatta kalma teşvik etmek için kullanılabilir. TCGF sıçan diğer suşları hazırlanabilir.

1 şişe PSG; 5 ml RPMI vitaminler; 5 ml sodyum piruvat; 5 ml non-esansiyel amino asitler, 50 UM% 10 FCS: tam bir kültür ortamı, RPMI 1640 ve steril filtre 500 ml şişe için aşağıdaki eklemek hazırlamak için beta-mercaptoethanol; 2 ug / ml Concanavalin A.

rat splenositlerin t hücre büyüme faktörü hazırlanması

Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes

Hücre genişleme 1,2 evreleri ayrılmış antijen-bağlı aktivasyon kültür antijen spesifik T hücre hatları veya klonlar Bakım mermi gerektirir. IL-2, genişleme aşamasında kültür ortamı eklenmesi hücre ölümü önlemek için gerekli ve kısa vadeli T hücre hatları korumak için yeterli ama Th1 kutuplaşma 3 artış görülmüştür . Sitokinlerin bir karışımını içeren T hücre büyüme faktörü (TCGF) IL-2 Yedek interlökin 2 3 in vitro uzun vadeli T hücre hatlarının korunmasında daha etkili. Ayrıca, laboratuvarda büyük miktarlarda TCGF kolayca hazırlanır ve rekombinant interlökin 2 çok daha ucuz olabilir. Burada, sıçan splenocyte kültür süpernatantlar TCGF nasıl hazırlanacağını gösteriyor. Bu işlem için, biz, timus ve kan toplama için ötenazi naif Lewis sıçan dalak hasat. Biz kültür ortamında dalak, dalak tek hücre süspansiyonları hazırlamak, kırmızı kan hücrelerinin ozmotik şok lyze ve tohum. Concanavalin A, non-selektif olarak sitokinlerin üretimini indükleyen, tüm sıçan T lenfositleri aktive olduğunu mitojenle hücreleri uyarılır. Kültür supernantant andexcess Concanavalin 48 saat sonra toplanan bir TCGF eklendi olacak T hücre hatları aktive önlemek için alfa metil mannoside bağlıdır. TCGF sonra, steril filtrelenmiş aliquoted ve -20 ° C&#39;de saklanır.

Biz, antijen-spesifik sıçan T lenfosit hatları in vitro genişlemesi için kullanılan T hücre büyüme faktörü hazırlık açıklar.

Rat splenositlerin T Hücre Büyüme Faktörü hazırlanması

Antijen spesifik T hücresi hatlarının veya klonlarının kültürde sürdürülmesi, hücre genişleme fazları ile ayrılmış antijen indüklü aktivasyon döngüleri gerektirir 1,2. ...

Merhaba, ben Christine Beaton. California Üniversitesi Irvine kampüsündeki Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nde, George Chen'in laboratuvarında araştırma asistanıyım. Önümüzdeki iki gün boyunca size, T hücresi büyüme faktörü anlamına gelen TCGF'nin nasıl hazırlanacağını göstereceğim.Günlük hücre kültürlerimizde, kültür ortamındaki sitokinlerin bileşimi hakkında kesin bir bilgiye ihtiyaç duymadığımız durumlarda, T hücrelerinin genişlemesine yardımcı olacak gerekli sitokinleri içeren, dalak hücre kültüründen elde edilen bir süpernatant olan T-hücre büyüme faktörünü (TCGF) kullanırız. TCGF'yi hazırlama yöntemimiz şöyledir: Sağlıklı Lewis sıçanları sakrifiye edildiğinde dalaklarını alır, tek hücre süspansiyonu hazırlar, eritroliz yoluyla eritrositlerden kurtulur ve ardından mononükleer hücreleri, T hücrelerini büyümeleri için gerekli tüm sitokinleri üretmeye teşvik edecek olan konkanavalin A ile stimüle ederiz. TCGF üretmek için hücreleri aktive etmemiz gerekir.İşlem şu şekilde gerçekleşir: Hücre kültürümüze, kısaltılmış adıyla Con A olarak bilinen lectin concanavalin A ekleyeceğiz. Con A'yı hücre kültürümüze eklediğimizde, glikozillenmiş T-hücre reseptör kompleksine bağlanacaktır ve aynı anda birkaç komplekse bağlanarak "capping" (başlık oluşumu) dediğimiz durumu gerçekleştirecektir. Böylece hücre yüzeyindeki tüm reseptörleri agregasyonla bir küme haline getirecek ve bu da T lenfositlerinde bir aktivasyon sinyali oluşumunu tetikleyecektir.Hücreler aktive olduktan sonra, blastlaşacaklar. Yani büyüyecekler ve ardından sitokinler salgılamaya başlayacaklar. Başlangıçta TCGF'nin temel olarak interlökin 2 olduğunu düşünüyorduk, ancak artık durumun pek öyle olmadığını biliyoruz.Ayrıca interferon gamma, TNF alfa ve muhtemelen hücreleri kültürde 48 saat sonra hayatta tutmak için gereken çok küçük miktarlarda sitokinler de içerir. Hücreler, ihtiyacımız olan tüm sitokinleri üretmiş durumdadır. Bu nedenle hücreleri uzaklaştıracağız; hücreleri uzaklaştırıp sadece süpernatant kaldığında, süpernatantta hala bir miktar serbest konal bulunacaktır. T-hücre hatlarının büyümesini sağlamak için T-hücre büyüme faktörünü kullanmak istediğimizden, bu durum bir sorun teşkil edecektir.Ve eğer konvalvalarini orada serbest bırakırsak, hücreleri aktive etmemizi istemediğimiz zamanlarda aktive edecektir. Bu sorunu aşmak için, serbest konvalvalarinlerin tamamına bağlanacak aşırı miktarda bir şeker ekleyeceğiz. Böylece tamamen inaktive olacaklar ve kültüre TCGF eklediğimizde hücrelerdeki diğer glikozillenmiş reseptörlere bağlanmayacaklardır.Öyleyse başlayalım. Bu deneyin ilk adımı, ötanazi sonrası hemen sıçanlardan dalakları çıkarmaktır. Ben de steril aletler kullanarak bunu hemen gerçekleştireceğim.Dalakları çıkardıktan sonra, onları antibiyotiklerle takviye edilmiş PBS içine koyacağım; antibiyotik olarak penisilin ve streptomisin kullanıyorum. Öyleyse başlayalım. Kültürümde herhangi bir kontaminasyon oluşmamasını sağlamak için sıçanı %70 etanol ile püskürterek temizliyorum.Ardından aletlerimi kullanarak buradaki deride küçük bir kesi yapacağım. Sonra kas tabakasını kaldırıyorum ve dalak tam burada beliriyor. Böylece diğer cımbızı alıp dalağı zarar vermeden nazikçe dışarı çıkarıyorum.Bağ dokusunu bu şekilde temizliyorum. Böylece şu an elimde bir dalak var. Karın boşluğu içindeki başka herhangi bir şeye zarar vermemeye çok dikkat ediyorum; çünkü bağırsaklara gelecek herhangi bir zarar, dalağımın anında kontamine olmasına yol açacaktır.Ardından, dalağımı PBS ve antibiyotikler içeren bir tüpe transfer edeceğim. Bu tüpü buz üzerinde tutuyorum. Böylece üç sıçandan dalak hasadını tamamlamış oldum.Şimdi, bu dalaklardan tek hücre süspansiyonu hazırlamaya hazırız. Dalakları aldığım için, 70 mikronluk hücre süzgeçleri kullanarak tek hücre süspansiyonu hazırlamak amacıyla onları bir doku kültürü kabinine getirdim. Dalaklardan tek hücre süspansiyonu elde etmek için birkaç şeye ihtiyacım olacak.Steril aletlere, bir adet pens ve bir adet makasa ihtiyacım var. Ayrıca Petri kabının içinde steril 1 mL'lik bir şırınganın pistonu bulunuyor. Dalakları, antibiyotikli PBS içerisine yerleştireceğim.Ve başka bir Petri kabına, 10 mL PBS ve antibiyotik karışımı içerisine 70 mikron hücre süzgeci yerleştirdim. İlk adım, dalakların temiz olduğundan emin olmaktır; çünkü burada görebileceğiniz üzere, hala küçük konnektif doku parçaları mevcut ve bunları temizleyeceğim, çünkü hücre süzgecini çok hızlı bir şekilde tıkayacaklardır. Bunun için, istemediğim kısımları basitçe kesip Petri kabının kapağına atıyorum.Şu an dalaklar büyük oranda temizlendi, bu yüzden dalakları tek tek alıp hücre süzgecine koyacağım ve küçük parçalara ayıracağım. Ardından üç dalağı da birbirine karıştıracağım. Bir sonraki adım, tek hücreli süspansiyon hazırlamaktır. Her şeyin steril kalmasını istediğim için hücre süzgecine kesinlikle dokunmuyorum ve dalak parçalarını hücre süzgecinin içinden geçirmek için steril 1 mL'lik bir şırınganın pistonunu kullanıyorum.Hücre ayırıcı cihazın dış kısmında gördüğünüz üzere, tek hücre süspansiyonu hazırlanıyor. İlk döngüde hâlâ bazı küçük dalak parçaları mevcut, ancak ben yine de tek hücre süspansiyonunu almaya başlayacağım. Bunu zaten buz üzerinde muhafaza ettiğim 50 ml'lik bir tüpe aktardım.Hücre süzgecimi 10 mL daha PBS ve antibiyotik ile yeniden dolduracağım. Bu yüzden, yaklaşık olarak 10 mL daha antibiyotikli PBS alıyorum; sadece yıkama yaptığımız için tam olarak 10 mL olması gerekmiyor. Bunu hücre süzgecine ekliyorum ve ardından aynı prosedürü uyguluyorum.Şırınga pistonuna geri dönüyorum ve ocid üzerinden biraz daha bastırıyorum. Tabii ki, hücre süzgecinde kalacak olan konjonktif doku ve çıkaramadığım küçük yağ parçaları olduğu için her şeyi tamamen geçiremezsiniz. Ancak, dalağınızın büyük bir kısmını hücre süzgecine aktarmış olmanız gerekir.Ardından, daha önce yaptıklarımı aynen tekrarlıyorum. Tek hücre süspansiyonumu toplayacağım ve aynı dişe ekleyeceğim. Şu ana kadar hücre eleyicide ekrandan neredeyse hiçbir şey kalmadı ve çıkan PBS çok daha berrak. Sadece bir kez daha yıkayacağım ve şu ana kadar hücrelerin çoğunu çıkarmış olmamız gerekir.Şu anda PLE sitlerinden oluşan tek hücreli süspansiyonum elimde ve bunları sadece peletlemek için santrifüj edeceğim. Sekiz ila 10 dakika boyunca döndürmek yeterli olacaktır. PLE sitlerimizi santrifüj ettik ve güzel bir pelet elde ettik.Şimdi yapacağım işlem, süpernatantı uzaklaştırmak ve ardından kırmızı kan hücrelerini liz etmek olacak. Miyositleri süspanse etmek için amonyum klorür kullanacağım. Bu, 0.15 molar amonyum klorür çözeltisidir ve dalak başına 5 mL kullanacağım.Üç dalak örneğim olduğu için 15 mililitre amonyum klorür kullanacağım ve bu işlemi buz üzerinde gerçekleştireceğim. Eritrositleri parçalamak için pipetle üç dakika boyunca nazikçe yukarı ve aşağı çekeceğim. Tamam, burada daha yüksek pozlamaya sahip olan bu çekimi kullanalım.Böylece elektrositleri üç dakika boyunca analiz etmiş oldum. Şimdi tüpümü PBS ile dolduracağım; alternatif olarak besiyeri de kullanabilirsiniz. Bu işlem, çözeltinin ozmolaritesini hücreler için normal aralığa geri getirmek içindir.Hücreleri çöktürmek için daha önce yaptığım gibi 8 ila 10 dakika boyunca santrifüj edeceğim. Ardından, antibiyotikli aynı PBS'yi kullanarak onları iki kez yıkayacağım. Şimdi, eritrositleri hemoliz ettikten sonra hücreleri santrifüj ediyoruz; eritrositlerin yüzde yüz oranında salınmadığına dair endişe duymayın.Böylece pelet hâlâ kırmızı olacak, ancak süpernatant daha berraklaşacaktır. Şimdi süpernatantı boşaltacağım, peleti çözeceğim, 50 ml'ye tamamlayacak kadar PBS ekleyeceğim, santrifüj edeceğim ve iki yıkama yapmış olmak için bu adımı bir kez daha tekrarlayacağım. Ardından sayım yapabileceğim. Miyositleri iki kez yıkadım, ardından onları kültür ortamında süspanse ettim ve sitometre kullanarak saydım.Beklendiği gibi. Üç daldaktan yaklaşık 600 milyon hücre elde ettim; bir dalağın normalde 200 ila 250 milyon hücre vermesi nedeniyle bu beklenen bir sonuçtur. Bu nedenle şimdi, hücrelerimi %10 fetal calf serum ile desteklenmiş ortamımda mililitre başına 2 milyon olacak şekilde ekim yapacağım.Hücreleri stimüle etmek için bu ortama 2 µg/mL konsantrasyonda Conc A ekleyeceğim. Ardından hücreleri 48 saat boyunca inkübatörde bekleteceğim. Hücreler şu anda 48 saattir inkübatörde ve size göstereceğim üzere oldukça iyi büyüdüler.Besiyeri turuncu renge dönüştü. Böylece TCGF hazırlığımızı tamamlamaya hazırız. Hatırlayacağınız üzere, hücreleri aktive etmek için hücre süspansiyonuna kon carnaval eklemiştim.Yani Concanavalin A bir lektindir. T-hücresinin tüm reseptörlerindeki şekerlere bağlanacak ve tüm bu hücreleri yapay olarak aktive edecektir. Şu an karşılaştığımız sorun, hücre süpernatantında hâlâ bir miktar Concanavalin A bulunmasıdır.Ve hücreleri genişletmek için diğer T hücresi kültürlerinde snat kullanacağımızdan, bu hücre kültürlerinde con carnaval in a bulunmasını istemiyoruz. Bu nedenle, ondan kurtulmak için con naval in a'nın bağlandığı aşırı miktarda bir şeker ekleyeceğim; bu da burada gösterilen methyl alpha D cyte'dır. Bu şekerden aşırı miktarda ekleyip tamamen çözeceğim.Geriye kalan tüm konkanaval'a bağlanacaktır ve bu işlem tamamlandığında, hücre süpernatantlarımı steril filtreleyip önümüzdeki birkaç hafta veya ay boyunca kullanmak üzere tüm sıvıları donduracağım. Öyleyse bu son adım için başlayalım. Hücrelerden kurtulmak için santrifüj edebilmek amacıyla hücre kültürü süpernatantımı 50 ml'lik tüplere ekliyorum.Bu nedenle, gerekli sayıda tüpü dolduruyorum ve bunu kültür kabininde yapmıyorum; yapabilirdim ancak şeker eklediğim için solüsyonumu sonunda herhangi bir şekilde filtrelemem gerekecek, şeker steril değildir, bu yüzden bunu doğrudan tezgahta yapıyorum. Bu şekilde daha kolay oluyor. Şu anda tüm hücrelerimi ve süpernatantı 50 ml'lik falcon tüplerine aktardım.Şimdi onları santrifüje götüreceğim ve yaklaşık 10 dakika boyunca döndüreceğim. Döndürmenin tek nedeni, hücreleri çöktürerek berrak süpernatantlar elde etmektir. Hücreler şu an çöktürülmüş durumda, dolayısıyla süpernatant berrak ve toplamak istediğim şey buydu.Şimdi tüm süpernatanı temiz bir 150 santimetrekarelik erlene toplayacağım. Bu erlene şekeri ekleyeceğim. Hücreler çöktürülürken, süpernatan başına 15 mg/ml eklemek için yeterli miktarda şekeri tarttım.Tamamen çözünmesini bekleyeceğim ve ardından süpernatantımı steril filtreleyeceğim. Şimdi süpernatantın ml başına 15 miligram şeker ekleyeceğim. Kapağı geri kapatıyorum ve steril koşullar altında çalışmadığım için kapağa gelmesinin bir önemi yok, bu yüzden tüm şeker çözünene kadar karıştırıyorum.Bu işlem oldukça hızlı sürecektir. Evet, şekerin tamamı şu an çözünmüş durumda. Bu yüzden tek yapmam gereken, süpernatantı steril filtreyle süzmek ve ardından alikotlara ayırmaktır.Normalde -20 °C'de sakladığım 10 ila 15 µL'lik alikotlar hazırlarım. Bu tür alikotlar birkaç ay boyunca saklanabilir. TCGF'yi buzdolabında da saklayabilirsiniz, ancak bu durumda önümüzdeki 10 ila 15 gün içinde kullanmanızı öneririm.Son iki gün boyunca size T-hücre büyüme faktörünün nasıl hazırlanacağını gösterdim; bu süpernatantın hazırlanması oldukça basittir ve maliyeti çok düşüktür. Bu nedenle, pahalı sitokin kokteylleri satın almak zorunda kalmadan T-hücre hatlarımızı kültürde tutmak için laboratuvarda bunu çok sık kullanıyoruz. Deneylerinizde başarılar dilerim.

preparing-t-cell-growth-factor-from-rat-splenocytes

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bryostatin 1/Ionomycin Yoluyla Tümör-reaktif T hücrelerinin ex vivo Genişleme ve Ortak Gama Zinciri Sitokinler Formülasyon

Bu video, floresan bazlı test yoluyla immünomodülatör bileşiklerin taranmasını göstermektedir. Yeşil floresan protein ekspresyon kasetlerine sahip transgenik fare kaynaklı T lenfositleri bu bileşiklerle tedavi edilir. Geliştirilmiş ve azaltılmış GFP sinyalleri, sırasıyla bileşiklerin uyarıcı ve inhibitör etkilerinin tanımlanmasını sağlar.

İmmünomodülatör Bileşiklerin Taranması için Tasarlanmış Lenfositlerin Kullanıldığı Floresan Bazlı Bir Test

Video, sitotoksik T lenfositlerinde veya CTL yanıtlarında immünodominansı test etmek için akış sitometrisi tabanlı bir testi göstermektedir. Enjekte edilen floresan hedef hücreler, immünojenik epitoplara karşılık gelen değişen floresan sergiler. Dalak sonrası toplama ve sınıflandırma, yüksek yoğunluklu floresan hücrelerde bir azalma olduğunu ortaya koyarak CTL yanıtlarında immünodominansı doğrular.

Sitotoksik T Lenfosit Yanıtlarında İmmün Baskınlığı Değerlendirmek İçin Bir Test

Bu videoda, tümör antijenine özgü kimerik antijen reseptörü (CAR) T hücrelerinin ex vivo üretimi için bir teknik gösterilmektedir. Transgenik RNA taşıyan retroviral vektörler, T hücresi sağkalımını ve proliferasyonunu teşvik etmek için interlökin-2 ile takviye edilmiş bir ortamda dalak hücreleri ile karıştırılır. Karışım daha sonra rekombinant insan fibronektin fragmanları ile kaplanmış bir plakaya aktarılır ve virüsün hücre ile füzyonunu kolaylaştırmak için santrifüjlenir, bu da RNA'nın...

Tümöre özgü kimerik antijen reseptör T hücreleri oluşturmak için bir ex vivo teknik

Bu video, retroviral transdüksiyon yoluyla antijene özgü kimerik antijen reseptörü (CAR) T hücreleri oluşturmak için bir tekniği göstermektedir. Aktive edilmiş murin CD8 + T hücreleri, rekombinant fibronektin fragmanları ile kaplanmış bir mikrokuyu plakasına eklenir. Antijene özgü bir kimerik antijen reseptörünü (CAR) kodlayan transgenik RNA içeren retroviral vektörler daha sonra sokulur ve transdüksiyonu kolaylaştırmak için plaka santrifüjlenir. İnkübasyondan sonra, transdüksiyon hücreleri...

Antijene Özgü CAR T Hücrelerinin Üretilmesi için Bir Teknik

Kemoterapi ve radyasyon bakım standardının lenfodepletiktif ve immünomodülatör etkileri, T hücresi immünoterapisinin antitümör etkinliğini artırmak için kullanılabilir. EGFRvIII'e özgü kimerik antijen reseptörü (CAR) T hücrelerinin üretilmesi ve bunların glioblastoma bakım standardı bağlamında uygulanması için bir yöntemin ana hatlarını çiziyoruz.

Bakım Glioblastoma Standardı Kapsamında Adoptif Tedavisi için CAR T hücrelerinin üretilmesi

Burada, fare granulocyte-macrophage-colony-stimulating-factor-producing T yardımcı (THGM) hücreleri yalıtım saf CD4 + T hücreleri, THGM, farklılaşma da dahil olmak üzere saf CD4 + T hücrelerden ayırt etmek için bir iletişim kuralı mevcut ve farklılaştırılmış THGM hücre analizi. Bu yöntem çalışmaları Yönetmeliğin ve THGM hücre işlevi uygulanır.

Vitro Farklılaşma fare granülosit-makrofaj-koloni uyarıcı faktör (GM-CSF)-T yardımcı (THGM) hücreleri üreten

Burada, hızlı ve tekrarlanarak ayarlanabilir boyutu, şekli ve yüzey proteini tanıtımı için T hücre genişletme ex vivo veya içinde vivo hücre (aAPC) sunan biyolojik ilham, biyolojik olarak parçalanabilen articifical antijen üretmek için bir iletişim kuralı mevcut .

Yönbağımlı polimer yapay antijen hücreleri CD8 + T Hücre aktivasyonu için sunma imalatı

Doğuştan gelen bağışıklık MALT1 düzenleyen ama nasıl oluşur kötü tanımlanmış kalır. Biz doğuştan gelen sinyal MALT1 myeloid sitokinler, üretimini düzenler gösteren Toll benzeri veya C tipi lektin-benzeri reseptörler aşağı ve aşağı akım için MALT1 katkısını çözülmeye selektif MALT1 paracaspase inhibitörü MLT-827 kullanılan C tipi lektin benzeri reseptörlerinin seçerek.

Myeloid doğuştan gelen sinyal yolu düzenleme MALT1 Paracaspase etkinlik tarafından

Burada, sitotoksisik T lenfosit (CTL) yanıt olarak bir model tümör antijeni için immundominance muayene sağlayan bir akış sitometri tabanlı in vivo öldürme tahlil tarif. Biz bu zarif tahlil mekanik çalışmalar için ve ilaç etkinliği test için istihdam olabilir nasıl örnekler sunuyoruz.

Tümör-spesifik CD8+ T hücre tepkiler Immunodominance çalışması Için In vivo sitotoksisite assays terzilik

Kaçakçılık reseptörlerinin retroviral transdüksiyonu ve reseptör aracılı organ ve mikroçevreye özgü lenfosit konumlandırmasını incelemek için rekabetçi hedef arama için geliştirilmiş protokoller sunuyoruz. Bu yöntem, bağışıklık hücresi kaçakçılığı mekanizmaları hakkında değerli bilgiler sunar ve gelecekteki temel ve terapötik araştırmalarda potansiyel uygulamalara sahiptir.

Farklı Doku Mikroortamlarında GPCR Aracılı T Hücresi Lokalizasyonunu Araştırmak için Verimli Retroviral Transdüksiyon ve Rekabetçi Hedef Arama

Öğrenin, sıçan splenositlerinden T hücre büyüme faktörü hazırlama yöntemini. Concanavalin A ile uyarılmış mononükleer hücrelerden sitokin üretimi ve TCGF elde edilmesi sürecini keşfedin.

Rat splenositlerin T Hücre Büyüme Faktörü hazırlanması

Daha fazla video keşfet