Name: Terapiler Omurilik Teslimat için Cerrahi Tekniği: Göttingen Minipigs Prosedürü gösterilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Öğrenin omurilik içine gen ve hücre tedavileri teslim etmek için güvenli bir cerrahi teknik. Göttingen minipiglerde laminektomi ve spinal derrick kullanılarak gösterilen bu yöntem, insan uygulamalarına kolayca aktarılabilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz veteriner bakımı için Hayvan Kaynakları personel Emory Üniversitesi Bölümü ederim. Finansman kaynakları şunlardır: ALS Derneği, Savunma Bakanlığı ve Neuralstem, Inc

1. Hayvan Kullanımı Burada gösterilen Prosedürleri Emory Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Yaklaşık olarak 15-20 kg ağırlığındaki dişi Göttingen minipigs kullanılır. 2. Anestezi Hayvanlar ameliyat öncesinde yaklaşık 12 saat oruç vardır. Hayvan sedasyon ve indüksiyon intramusküler ketamin (35 mg / kg), Acepromazine (1.1 mg / kg), ve atropin (0.04 mg / kg) oluşan bir karışımla oluşur. Hayvanlar daha sonra entübe oksijen ve% 1-3 izofluran genel anestezi tutulur. Bu noktada geri ve her biri bir baş hayvan traş edilir. Anestezi derinliği veteriner personeli tarafından izlenir. , Interdijital kornea ve palpebral refleksleri, yanı sıra kalp ve solunum hızı, nabız oksimetre, dolaylı / doğrudan kan basıncı, end-tidal karbon dioksit ölçümleri ve kas tonusunu / zararlı uyarıcıya tepki olmaması derinliği izlemek için kullanılır<html> Anestezi. 3. Konumlandırma Hayvanlar ameliyathaneye alınır ve bir Jackson spinal cerrahi masaya hasta konumlandırma taklit etmek için tasarlanmış bir çerçeve özel bir yüzükoyun pozisyonda yerleştirilir. Çerçeve karın ve göğüs ve buna epidural venöz kanama (Şekil 1) üzerindeki baskıyı minimize, bu nedenle karın ücretsiz asmak için izin verilmesi ve, hayvanın göğüs ve pelvis altına yerleştirilir ayarlanabilir askılar kullanır. Çerçeve de prosedürü 1 için omurganın dış immobilizasyon sağlar. Buna ek olarak, hayvan vücut sıcaklığı ve sıvı idare ve ameliyat sırasında gerekli ilaç dağıtımı için kateterize bir marjinal kulak damar korumak için ısıtılmış bir yeniden sirküle eden ped üzerine yerleştirilir. Son olarak, cerrahi alan alkol ve Chlorhexadine veya Betadine solüsyonu ile prepped ve cerrahi örtüler cerrahi alanında yerleştirilir. le &quot;&gt; 4. Laminektomi An yaklaşık 10-15 cm cilt insizyonu yapılır ve paraspinal kaslar bilateral omurga kapalı disseke edilir. Daha sonra, bir sırt çok seviyeli laminektomi gerçekleştirilir. Üç omur örten C3-C5 veya L2-L4 segmentleri lamina ve spinöz süreçleri rongeurs ve cerrahi matkap kullanarak kaldırılır. 5. Spinal Derrick Yerleştirme Biz Spinal Derrick omurilik 2-5 içine (gen ve hücre) tedavilerin teslimat için tasarlanmış cihaz arayın. Bu cihazın tasarım ve evrim ile ilgili ayrıntılı tartışma Riley ve ark., 2011 bulunabilir. 4 Hasta için aygıt sabitlemek için, perkütan mesaj birincil kesik üstünde ve altında 1 cm deri kesiklerle yerleştirilen ve birinci kesik üstünde ve altında lamina monte edilir. Daha sonra, iki entegre retraktörlerin fo bağlıdırkesi yeri yukarıda ve aşağıda ur perkütan mesajları laminektomi uğramıştır omurga alana maruz. 6. Dural Açılış Bir Woodson diş aracı yardımı ve 11 bıçak ile, 2.5 cm&#39;lik kesi omurilik açığa dura aracılığıyla yapılır. Dura 4-0 Nurolon sütür kullanarak pial katmanı uzak yansır ve derin paraspinal kas sabitlenir. Cerrahi köftesi açılış rostral ve kaudal uç yerleştirilir. Bunlar beyin omurilik sıvısı akışı için kısmi bir bariyer sağlamak ve aynı zamanda kabloya zarar vermeden enayiler yerleştirmek için cerrahlar için güvenli bir hedef sağlayabilir. İnsanlarda, cerrahi mikroskop büyütme altında, pial yüzeyi bu noktada disseke edilir. Teknik kısıtlamalar nedeniyle, bu prosedür gerekli ya da hayvanlarda mümkün değildir. 7. Omurilik Enjeksiyonlar ve Ek Enjeksiyon için Spinal Derrick Yanal Deplasmans Enjeksiyon hemen önce, metil (125 mg, IV) &#39;ün bir bolus şişme omurilik önlemek için verilmiştir. Bu noktada, bir platform ray sisteminin bağlı olduğu ve yan raylar uygun uzunlukta uygun şekilde ayarlanır. Gondol olduğunu 2 bar üst üzerine yüklenmiş ve Z sürücü üniversal mafsal üzerine monte edilir. Daha sonra, yüklenen kanül Microdrive üzerine yerleştirilir. Mikroenjeksiyon platform üzerinde üniversal eklem kullanarak, koronal ve sajital açıları spinal Enjeksiyonlar kanül takip yerleştirme yüzeyine dik bir yörünge sağlamak için ayarlanır. İğne dorsal kök giriş bölgesi (DREZ) buna göre medial konumlandırılmış. DREZ 3.5x cerrahi büyüteç büyütme altında tanımlanır ve bir noktada kord yüzeye bir dik yörünge &lt;mediale 1 mm penetre olur. İnsanlarda, bir pre-operatif MR izlenmesi ve değerlendirilmesi o sağlaroperatif planlama için f omurilik boyutları. Ayrıca, omurilik kalınlığı ventral boynuzu hedef derinliği belirlemek için ölçülür. Süspansiyon pial temas 4 mm arasında bir derinliğe kaynaştırılmıştır. Ultem plastikten yapılmış bir flanş istenenden daha derin ilerleyen ikinci iğne önlemek için pia yüzeyi üzerinde bir durdurucu olarak hizmet vermektedir. İğne ucu hedef konumlandırılmış sonra, katı metal dış kol esnek tüp maruz bırakarak, yukarı çekilir. Enjeksiyon tamamlandıktan sonra, iğne kanülü enjeksiyon yolu kadar hücre reflü önlemek için ek bir 1 dakika süreyle yerinde bırakılır. Bakımı biraz Microdrive reflünün veya rostro-kaudal ya ayarlayarak yüzey damar önlemek için alınır. Penetrasyon sitelerden bazıları kanama oluşabilir. Bu tür kanama karşılaşıldığında, mikro köftesi kanama ponksiyon üzerine yerleştirilir ve emme kanül penetr kanını emiyor onları uygulanıration site ve kordda birikmesini önlemek. Bu güvenilir koagüle kan sağlar. Doğrudan basınç olarak Koter önlenir. Iğne çıkarılmasının ardından, stereotaksik aparat omuriliğin dorsal yüzeyinde görünür kan damarları önlemek için gerekli 2 veya 4 mm veya ayrılmış rostro-kaudal ekseni boyunca bir sonraki hedef siteye taşındı. Belirli bir yöntem önerilmiştir gibi bu işlem birçok defa tekrarlanır. 8. Yüzer Kanül Dar çaplı özel bir infüzyon kanülü enjeksiyonlar için kullanılır. Kanül değişken uzunlukta, 30-gauge esnek borular silastik bağlanmış sabit uzunlukta bir 30-gauge iğne eğimli oluşur. Distal uç mikroenjektör bir pompaya bağlı olan bir Hamilton luer kilit ile donatılmıştır. Proksimal silastik hortumu 24-gauge sert dış kanülün içinde ensheathed olduğu enjeksiyon iğnesi flanş proksimal ucunda koltuklar. Bu flanş hem koltukdış kanül ve enjektör iğnesi için bir derinlik durağı olarak hizmet vermektedir. Her enjeksiyon için, tedavi edici bir süspansiyon, uygun hacim ile kaynaştırılmıştır bir dakika başına 5 ul bir oranda bir önceden kalibre edilmiş Minj-PD mikroenjektör pompa (TriTech Research, Inc, Los Angeles, CA) kullanılarak. 9. Kapatma Tüm enjeksiyonlar yapıldıktan sonra, spinal Derrick hafifçe kaldırılır ve kesiler dört kat olarak kapalıdır. Dura su geçirmez bir moda, bir 4.0 Nurolon dikiş kullanılarak kapatıldı. 0 vicryl derin kas tabakası için kullanılır. Alınlık sonra su geçirmez bir şekilde de 0 Vicryl dikiş ile kapatılır. Dermal tabaka sonunda çalışan bir dikiş ile, 2.0 Vicryl ile kapatılır. Cilt kapatılması 3-0 naylon sütür kullanılarak tamamlanmıştır. 10. Kurtarma ve Ağrı Yönetimi Hayvanlar 2 saat aşağıdaki anestezi kurtarma ekstübe ve izlenmektedir. Daha sonra, bireysel hayvanların c aktarılıryaş ve gıda tüketimi, dışkılama ve işeme için en az günde bir kez izlenir. Ağrı yönetimi için, bir transdermal fentanil yaması (75 mcg) post-operatif analjezi üç gün boyunca hayvanların sırtında zımbalanır. Ayrıca, Buprenorfin (0.05 mg / kg, BID, IM) da yukarı operasyon sonrası üç gün için verilebilir. 11. Sonuçlar ve Örnek Çıktıları Klinik ve davranış gözlemleri çalışma tasarımına göre nokta kadar ameliyat öncesi yapıldı ve daha sonra gün 1 ile 7 kaydedilir ve haftalık edilir. Davranışsal veriler önceden 6 açıklandığı gibi nörolojik morbidite değerlendirmek için toplanır. Duyu ön ve arka bacak ayak mekanik uyaran bir çekilme yanıt varlığı ya da yokluğu ile tespit edilir. -, 1 - arka bacaklarda Algılanabilir tonusu, hafif m Felç, hiçbir hareket 0: Motor fonksiyon Tarlov skoru (Tablo 1) aşağıdakiovement; 2 - arka bacak hareketleri, ama oturmak veya ayakta duramayan, 3 - stand ve fakat ataksik ve kısa süreler için yürümek becerisi; 4 - Komple kurtarma, normal motor fonksiyonu. Işlem güvenliği operasyon öncesi baz dönmek için bir hayvan yeteneği belirlenir. Geçici nörolojik defisit çoğunlukla hayvanların ırk ve prosedür bağlı olarak bazı farklılıklar (enjeksiyon sayısı, diğer parametreler arasında) ile, post-operatif gün 1 ve 7 arasında çözmelidir. Kalıcı morbidite hayvanlar IACUC varsayılan bitiş noktası (Şekil 2) ulaşmak zaman çözmez kalıcı nörolojik defisitler ile tanımlanır.

<ol><li>Usvald, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+dosing+regimen+and+reproducibility+of+intraspinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+immunosuppressed+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs.</a> Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+stabilized+platform+and+microelectrode+recording+guidance+validation%5BTitle%5D)+AND+%22Stereotact.+Funct.+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Targeted spinal cord therapeutics delivery: stabilized platform and microelectrode recording guidance validation.</a> Stereotact. Funct. Neurosurg. 86, 67-74 (2008).</li>
<li>Federici, T., Riley, J., Park, J., Bain, M., Boulis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+viral+vector+direct+injection+approach+to+the+cervical+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Transl.+Sci%22%5BJournal%5D)">Preclinical safety validation of a stabilized viral vector direct injection approach to the cervical spinal cord.</a> Clin. Transl. Sci. 2, 165-167 (2009).</li>
<li>Riley, J. P., Raore, B., Taub, J. S., Federici, T., Boulis, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platform+and+Cannula+Design+Improvements+for+Spinal+Cord+Therapeutics+Delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Platform and Cannula Design Improvements for Spinal Cord Therapeutics Delivery.</a> Neurosurgery. 69, 147-154 (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+spinal+cord+therapeutics+delivery%3A+preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+microinjection+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Cervical spinal cord therapeutics delivery: preclinical safety validation of a stabilized microinjection platform.</a> Neurosurgery. 65, 754-761 (2009).</li>
<li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy%3A+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36, 164-171 (2011).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+stem+cell+therapy+for+amyotrophic+lateral+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Translational stem cell therapy for amyotrophic lateral sclerosis.</a> Nat. Rev. Neurol. , (2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspinal+Stem+Cell+Transplantation+in+ALS%3A+A+Phase+I+Safety+Trial%2C+Technical+Note+%26+Interim+Safety+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intraspinal Stem Cell Transplantation in ALS: A Phase I Safety Trial, Technical Note & Interim Safety Outcomes.</a> Neurosurgery. 71 (2), 405-416 (2012).</li>
<li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+intraspinal+injection+of+neural+stem+cells+in+patients+with+ALS%3A+results+of+a+Phase+I+trial+in+12+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Lumbar intraspinal injection of neural stem cells in patients with ALS: results of a Phase I trial in 12 patients.</a> Stem Cells. 30 (6), 1144-1151 (2012).</li>
</ol>

Dr Boulis insan omurilik güvenli ve doğru bir enjeksiyon sağlamak için cihazların mucidi. Neuralstem, Inc bu teknoloji için özel bir lisans satın aldı. Dr Boulis Bu ücretin invento payı aldı, ve bu teknolojinin dağıtımı için telif ödemeleri haklara sahiptir. Diğer yazarlar ifşa etmek başka bir şey var.

İnsanlarda 7-9 açıklanan tekniği ile devam etmek onayına rağmen, kritik sorulara başarılı spinal kord tedaviler için sırayla cevap beklemektedir. Intraparankimal enjeksiyon omurilik hoşgörü titiz bir anlayış, dejeneratif demiyelinizan ve travmatik omurilik hastalığı için tedaviler geliştirilmesi çalışmalarının planlama ve yürütme etkinleştirmek için gereklidir. Şu anda, büyük memeli omurilik geçici ve kalıcı morbidite tahammül enjeksiyonların sayısını belirgin bir anlayış mevcuttur. Benzer şekilde, e...

<table border="1"><tbody><tr><td> Ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Spinal Derrick </td><td> Neuralstem, Inc </td><td></td><td> Neuralstem, Inc bu teknoloji için özel bir lisans satın aldı </td></tr><tr><td> Minj-PD mikroenjektör pompası </td><td> TriTech Research, Inc </td><td></td><td> Bu özel uygulama için özelleştirilmiş </td></tr><tr><td> Yüzer Kanül </td><td> Neuralstem, Inc </td><td></td><td> Bu özel uygulama için özel olarak hazırlanmış </td></tr></tbody></table>

terapiler omurilik teslimat için cerrahi tekniği: göttingen minipigs prosedürü gösterilmesi

Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs

Bu, omurilik içine (gen ve hücre) tedavilerin teslim için cerrahi tekniği ve aygıt bir arada kompakt bir görsel bir açıklamasıdır. Tekniği hayvan gösterilmiştir iken, prosedür FDA onaylı ve şu anda ALS hastalarının omurilik içine kök hücre nakli için kullanılan olduğunu. FDA son derece karakterize edilen kemirgen modellerinde terapötik etkinlik üzerinde kanıtı prensip veri kabul ederken, büyük hayvanların kullanımı bir cerrahi prosedürün bir kombinasyon, bir cihaz, ve insan kullanımı için bir son tedavinin güvenli doğrulanması için kritik olarak kabul edilir . Boyutu, anatomi ve domuz omurga ve omurilik genel güvenlik açığı daha iyi bir model insan hesaplanmaktadır. Ayrıca, açığa ve manipüle omurilik hem de domuz da yara kapatma cerrahi işlem insan neredeyse ayırt edilemez. Biz sağlıklı domuz modeli hükümetlerinin faaliyetleri konusun temsil inanıyorumprosedürel emniyet çalışmada cal ilk adımı.

<table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Tarlov Puan </td></tr><tr><td> 0 </td><td> Felç, hiçbir hareket </td></tr><tr><td> 1 </td><td> Arka bacaklarda Algılanabilir tonusu, hafif bir hareket </td></tr><tr><td> 2 </td><td> Arka bacak hareketleri, ama oturmak veya ayakta duramayan </td></tr><tr><td> 3 </td><td> Fakat ataksik ve kısa süreler için ayağa kalkmak ve yürümek yeteneği </td></tr><tr><td> 4 </td><td> Tam iyileşme, normal motor fonksiyon </td></tr><...

Omuriliğe (gen ve hücre) tedavilerin teslimat için kullanılan cerrahi teknik ve cihaz Kısa görsel açıklama. Bu teknik, hayvan içinde gösterdi ama tamamen çevrilebilir ve şu anda insan uygulaması için kullanılmaktadır olmasıdır.

Terapiler Omurilik Teslimat için Cerrahi Tekniği: Göttingen Minipigs Prosedürü gösterilmesi

Bu, spinal bölgeye (gen ve hücre) tedavilerinin iletilmesi için kullanılan bir cerrahi teknik ve cihaz kombinasyonunun kompakt bir görsel açıklamasıdır...

Bu prosedürün genel amacı, biyolojik terapötiklerin omurilik içindeki hedeflenen spesifik intraparenkimal bölgelere güvenli bir şekilde iletilmesini ve doğru şekilde hedeflenmesini sağlamaktır. Bu işlem, öncelikle hayvanın cerrahiye hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. Ardından laminektomi uygulanır ve spinal derrick düzeneği kurulur.Ardından dura açılır ve intraspinal enjeksiyonlar gerçekleştirilir. Son olarak dura, kaslar, fasya ve cilt kapatılır. Nihayetinde, davranışsal ve hedefleme verilerinin toplanması yoluyla güvenlik ve hedefleme sonuçlarını gösteren bulgular elde edilebilir.Bu makalede sunulan teknik, spinal korda biyolojik bir yük iletimi için stabilizatör bir platformun yanı sıra esnek bir kanülün kullanımıyla ilgilidir. Bu yaklaşımın avantajları, spinal kordun hareketliliği nedeniyle uygulanması zor olan standart stereotaktik tekniklerin yerini alarak iletimde hassasiyet sağlamasıdır. Hassasiyetin yanı sıra bu teknik, hastanın hareket etmesi durumunda bir güvenlik payı sağlar.Bu durumda, immobilizasyon platformu sayesinde domuzda omurilik hasarı meydana gelmez ve kanülün esnekliği sayesinde solunum ile kalp atışı sırasında kanal içerisinde gerçekleşen omurilik hareketleri omuriliğe daha fazla zarar vermez. Mini domuz 12 saat aç bırakıldıktan ve ketamin, ace, promazin ve atropin intramüsküler enjeksiyonu ile sedatize edildikten sonra, hayvan entübe edilir ve oksijen ile %1 ila %3 isofloran altında tutulur. Anestezi derinliği, yazılı protokolde belirtildiği şekilde izlenir.Hayvanın baş ve sırt kısmındaki tüyleri tıraşlayın. Sedatize edilmiş hayvanı ameliyathaneye taşıyın ve Jackson spinal cerrahi masası üzerindeki konumlandırmayı taklit etmek için özel bir çerçeve üzerinde yüzüstü (prone) pozisyonda yerleştirin. Çerçeve, hayvanın göğüs ve pelvisinin altına yerleştirilen ayarlanabilir askılar kullanarak abdomenin serbestçe sarkmasını sağlar; böylece abdomen ve göğüs üzerindeki basınç ve buna bağlı olarak gelişen epidural venöz kanama minimize edilir.Çerçeve aynı zamanda omurganın harici immobilizasyonunu da sağlar. Prosedür için, vücut sıcaklığını korumak amacıyla hayvanı ısıtmalı bir resirkülasyon pedine yerleştirin. Ardından, cerrahi sırasında sıvı yönetimi ve ilaç uygulaması için marjinal kulak ven kateteri yerleştirin.Ardından cerrahi alanı alkol ve klorheksidin veya Betadine solüsyonu ile hazırlayın ve cerrahi alan üzerine steril örtüler yerleştirin. 10 ila 15 santimetrelik bir cilt insizyonu yapın ve paraspinal kasları bilateral olarak disseke etmek için monopolar elektrokoter kullanın. Sonrasında, spinöz çıkıntıları kaldırmak için Rongeur'lar ve cerrahi matkap kullanarak dorsal çok seviyeli bir laminektomiye başlayın ve C3 ile C5 veya L2 ile L4 segmentlerinin üzerindeki vertebraların laminotomisini gerçekleştirin.Spinal Derrick, gen ve hücre tedavilerini omuriliğe iletmek için tasarlanmış bir cihazdır; cihazı hastaya sabitlemek için ana insizyonun üstüne ve altına bir santimetre uzunluğunda cilt insizyonları yapın. Omuriliğin gerekli alanını açığa çıkarmak ve laminektomiyi tamamlamak için insizyonlar aracılığıyla perkütan postlar yerleştirin ve bunları laminaya monte edin. Entegre ekartör bıçaklarını yerleştirin ve bunları derrick cihazına sabitleyin.Spinoz prosesleri yukarı doğru çekerek dokuyu geri çekin. İnterspinöz ligamentleri ve ligamentum flavum'u kesin ve laminektomiyi tamamlayın. Kanül, iki metal kılıfa (bir dış hareketli kılıf ve bir iç sabit kılıf) sahip 30 gauge elastik tübe bağlı 30 gauge bir iğneden oluşur.Bir mikro enjeksiyon pompasına bağlı Hamilton lure lock kullanarak, distal ucu yerleştirin ve enjeksiyon iğnesi flanşı ile kılıfının proksimal ucuna oturan 24 gauge dış kanül ile spinal kordu açığa çıkarmak için proksimal ucu konumlandırın. İlk olarak, bolus şeklinde metil prednizon uygulayın. Ardından, durayı kordun üzerinden kaldırmak için dikkatlice yerleştirin.Dura boyunca 2,5 santimetrelik bir insizyon yapmak için bir Woodson dental aleti ve 11 numara bistüri ucu kullanın. Ardından, durayı peel tabakasından uzaklaştırmak için four aught nulon sütür kullanın ve durayı derin paraspinal kas yapısına sabitleyin. Korda çevresine cerrahi tamponlar yerleştirin.Ardından, önce üst kısımdan platform ray sistemini takın, gondolu iki çubuğun üzerine yerleştirin ve Z sürücüsünü üniversal mafsala monte edin. Sonra, yüklü kanülü mikro sürücüye yerleştirin ve spinal enjeksiyonların yüzeyine dik bir yörünge sağlamak amacıyla mikro enjeksiyon platformundaki üniversal mafsalı kullanarak, kanül yerleşimini takip eden koronal ve sagital açıları ayarlayın. Ardından iğneyi dorsal kök giriş bölgesinin (dres) mediyaline konumlandırın ve esnek tüpü açıkta bırakacak şekilde sert metal dış kılıfı yukarı çekin.Önceden kalibre edilmiş bir mikro enjektör pompası kullanarak hedef bölgeye enjeksiyon yapın. Ardından, hücrelerin kanül enjeksiyon yolu boyunca geri akışını önlemek için iğneyi bir dakika daha yerinde bırakın. İğneyi çıkardıktan sonra, spinal kordun dorsal yüzeyindeki görünür kan damarlarından kaçınmak için stereotaksik aparatı, rostral-kaudal eksen boyunca iki ila dört milimetre uzaklıktaki bir sonraki hedef bölgeye taşıyın.Spinal retraktörü nazikçe çıkardıktan sonra, durayı su sızdırmaz şekilde kapatmak için 4-0 nöral dikiş kullanın. Derin kas tabakası ve fasya tabakaları Vicryl sütür ile kapatıldıktan sonra, cildi kapatmak için 3-0 naylon sütür kullanın; anestezi sonrası iyileşmeyi takiben ekstübe edin ve hayvanı iki saat boyunca izleyin. Postoperatif analjezi için, hayvanın sırtına üç gün boyunca kalacak şekilde transdermal bir fentanil yaması zımbalayın.Ek olarak, gerekirse ameliyat sonrası üç güne kadar buprenorfin uygulayın. Ardından hayvanı bireysel bir kafese aktarın ve günde en az bir kez izleyin. Nörolojik morbiditeyi değerlendirmek için gıda tüketimi, defekasyon ve mikrobesin davranışsal verileri toplanır.Daha önce açıklandığı üzere, prosedürün güvenliği, bir hayvanın ameliyat öncesi bazal durumuna dönebilme yeteneği ile belirlenir. Geçici nörolojik defisitlerin, cinslere ve prosedüre bağlı olarak bazı farklılıklar göstermekle birlikte, çoğunlukla ameliyat sonrası birinci ve yedinci günler arasında düzelmesi beklenir. Kalıcı morbidite, bu prosedürü takiben hayvanlar iacuc varsayılan sonlanma noktasına ulaşana kadar düzelmeyen kalıcı nörolojik defisitler olarak tanımlanır.Hücrelerin canlılığı, hücre göçü ve enjeksiyonun doğruluğu gibi önemli verileri belirlemek için immünokimya gibi diğer yöntemler kullanılabilir.

surgical-technique-for-spinal-cord-delivery-therapies-demonstration

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bilim yerli ve minyatür domuz kullanımı son yıllarda önemli ölçüde artmıştır. Entübasyon, transüretral mesane kateterizasyonu, femoral arter ve ven kateterizasyon, yanı sıra transcardial perfüzyon nasıl gerçekleştirileceğinin ortaya koyarak, biyomedikal araştırma Göttingen minipigs değerini daha da artırmayı hedefliyoruz.

Göttingen Minipig Cerrahi Temel Teknikleri: Entübasyon, Mesane Kateterizasyon, Femoral Gemi Kateterizasyon, ve Transcardial Perfüzyon

Kaynak: Unger, MD, et al., Domuzlarda Lomber Dorsal Kök Ganglion Erişimi ve Enjeksiyonu için Laminotomi. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, konveksiyonla zenginleştirilmiş dağıtım kullanılarak hedeflenen nöroterapötik uygulama için lomber dorsal kök ganglionuna erişmek için anestezi uygulanmış bir domuzda bir laminotomi prosedürünü göstermektedir.

Bir Domuz Modelinde Lomber Dorsal Kök Ganglionuna Hedefli Enjeksiyon için Laminotomi

Bu video, yumuşak bir elektrokortikografi dizisinin implantasyonunu ve bir minipigde uzun süreli kortikal kayıtları göstermektedir. Dizinin minidomuzun işitsel korteksi üzerine cerrahi olarak implante edilmesi ve hem temel hem de ses uyaranıyla uyarılan nöronal aksiyon potansiyellerinin kaydedilmesiyle ilgili adımları ana hatlarıyla belirtir.

Minipiglerde Kortikal Elektrofizyoloji Kaydı için Yumuşak Elektrokortikografi Dizisinin Subdural İmplantasyonu

Servikal omurilik yaralanmasını hem kendi kendine birleşen peptitler (SAP) hem de nöral öncü hücreler (NPC) ile tedavi etmek, büyüme faktörleri ile birlikte, rejenerasyon ve iyileşmeyi teşvik etmek için umut verici bir yaklaşımdır. Kontüzyon/kompresyon anevrizması klip sıçan servikal SKY modeli ve SAP enjeksiyonu ve NPC transplantasyonunu içeren kombine tedavi oluşturuldu.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Omurilik yaralanması ciddi morbidite ve mortalitesi yüksek bir neden travmatik bir durumdur. Bu çalışmada detaylı olarak nöral kök hücrelerin bir nakli ardından farelerde omurilik yaralanması bir kontüzyon modelini tarif.

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Burada, in vivo domuz lomber omurga modelini kullanarak transpediküler vidaları değerlendiren bir yöntem sunuyoruz.

Transpediküler Vidaların Değerlendirilmesinde Anestezi, Cerrahi ve Hasat Yöntemi<emIn vivo</em&gt; Domuz Kemik Omurgası Modeli

Omurilik mikroskrkülasyonu omurilik yaralanmasında önemli bir rol oynar. Çoğu yöntem, mikroskrkülasyon hedefli tedavilerin geliştirilmesi için gerekli olan omurilik mikroskrkülasyonunun gerçek zamanlı değerlendirilmesine izin vermez. Burada, büyük bir iskemi /reperfüzyon hayvan modelinde Lazer-Doppler-Akış İğne probları kullanarak bir protokol öneriyoruz.

İskemi/Reperfüzyon Porsin Modelinde Omurilik Mikroperfüzyonunun Gerçek Zamanlı Değerlendirilmesi

Burada, sıçanlarda laminektomiyi ortadan kaldıran açık omurilik yaralanmasını modelleyen yeni ve hızlı bir teknik tanımlanmıştır. Lateral hemiseksiyon mikroskopla görüntülenirken yapılır. Teknik çok yönlüdür ve diğer hayvanların omuriliğinin servikal, torasik ve bel bölgelerinde de kullanılabilir.

Sıçanlarda Açık Omurilik Yaralanmalarını Modellemek için Minimal İnvaziv, Hızlı Omurilik Lateral Hemikesim Tekniği

Minimal invaziv teknikler ve basit bir laboratuvar cihazı, deney hayvanlarına operatif hasarı azaltarak ve anatomik morfoloji bakımına izin vererek omurilik yaralanması modelinin tekrarlanabilirliğini arttırır. Yöntem değerlidir, çünkü güvenilir sonuçlar ve tekrarlanabilir prosedür, hastalık onarım mekanizmalarının araştırılmasını kolaylaştırır.

Minimal İnvaziv Bir Tekniğe Dayalı Bir Fare Kontüzyonu Omurilik Yaralanması Modelinin Oluşturulması

Bu cerrahi protokol, hedefe yönelik tedavi sağlamak için bir kemirgenin spinal subdural boşluğuna intratekal kateter yerleştirmek için adım adım bir kılavuzdur.

Tedavi sunumu için kemirgen omuriliğinin subdural boşluğuna erişim

Öğrenin omurilik içine gen ve hücre tedavileri teslim etmek için güvenli bir cerrahi teknik. Göttingen minipiglerde laminektomi ve spinal derrick kullanılarak gösterilen bu yöntem, insan uygulamalarına kolayca aktarılabilir.

Terapiler Omurilik Teslimat için Cerrahi Tekniği: Göttingen Minipigs Prosedürü gösterilmesi

Daha fazla video keşfet