Name: INTERCEPT Kan Sistemi kullanılarak hazırlanması ve Çift Doz Buffy Coat Trombosit Ürünleri Patojen inaktivasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T11:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Öğrenin, INTERCEPT Kan Sistemi kullanarak çift doz trombosit konsantresi hazırlama yöntemini. Yedi adet buffy coat havuzlanarak patojen inaktivasyonu sağlanır ve yedi günlük saklama süresince kalite değerlendirmesi yapılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yayın için Harçlar Cerus Corp, INTERCEPT Kan Sistemi üreticisi tarafından sağlanır.

1. Tam Kan Toplama <ol><li> 450 ml üst gönüllü bağışçılardan kan toplayın / alt koleksiyonu lokal kan toplama kurallarına göre ayarlar. </li><li> Tam kan santrifüjleme ve ayırmasından önce bir soğutucu plaka üzerinde 2 saat arasında, en az saklanır. </li></ol> 2. Buffy Coat Hazırlık <ol><li> Kırmızı kan hücreleri, buffy coat, ve plazma: üç kat içine kan ayırmak için bir sabit döndürme ile tam kan santrifüjleyin. Ikinci Santrifüj değerleri ± 2 ° C&#39;de 22 dakika süreyle 4,880 11 RCF idi </li><li> Toplama kaplarına buffy coat bırakarak, üst uydu çantası ve alt uydu torbaya kırmızı kan hücreleri (RBC) içine plazma ifade etmek için bir otomatik kan ayırıcı kullanılır. Buffy kat sırasıyla yaklaşık 48 ml ve% 37, olan hacim ve hematokrit aralıkları demek hedefleyin. </li><li> Buffy-mont 22 ± 2 ° C&#39;de trombosit karıştırıcı gecede saklanır </li></ol><ol><li> Steril connect 7 buffy mont ve paralel çizgiler bulunan bir tren yapılandırmada SSP + trombosit katkı çözeltisi (PAS), 300 ml tren uzunluğunu azaltmak için; PAS trenin üstünde olmalıdır. PAS ve ilk buffy coat arasındaki çizgi Kelepçe. </li><li> Buffy coat birimler arasındaki steril bağlantıları açın ve buffy kat son kabın içine boşaltın. </li><li> Kaynak ve PAS ve ilk buffy coat arasındaki kelepçesini açın. Katkı çözelti üçte biri sırayla buffy coat kapların her biri yoluyla durulama izin verin. 2 kez daha kalan PAS yarısını kullanarak her zaman tekrarlayın. </li><li> Ortalama buffy coat havuz hacminin yaklaşık olarak 600 ml olmalıdır. Bireysel buffy kat hedef hacmi ve hematokrit yerine getirilirse, plazma oranı 32 olacak -% 47 daha sonra işlem içinde INTERCEPT patojen inaktivasyonu tedavisi için gerekli olduğu gibi. </li><li> Boş SSP + ve buffy atınkat kaplar. </li><li> Optimum trombosit kurtarma için, santrifüj önce 1 saat boyunca karıştırıcı üzerinde havuz tutmak. </li><li> Steril buffy coat havuza entegre leukoreduction filtre ile trombosit saklama kabı bağlayın. </li><li> Süspansiyon trombositlerin (9 dak, 20 sn için 462 RCF) gelen kırmızı kan hücreleri ayırmak için buffy coat havuz &quot;yumuşak spin&quot; gerçekleştirin. Trombosit saklama kabı içine leukoreduction filtre üzerinden otomatik bir kan ayırıcı kullanarak trombosit süspansiyonu ifade. </li><li> 420 ml&#39;lik hacim, 2,5-7,0 x 10 11 trombosit dozu ve ≤ 4 x 10 6 / ml kırmızı hücreleri - Daha önce açıklandığı gibi, işleme gereklilikleri trombosit süspansiyonu INTERCEPT 300 ml işleme özelliklerine uygun olduğundan emin olun. </li></ol> 4. Tedavi KESMENOKTASI <ol><li> Toplandıktan sonra, 1. Gün sonunda (gün 0 toplama günü) önce INTERCEPT tedaviyi gerçekleştirin. </li><li> INTERCEPT İşleme Seti unwrapŞeffaf plastik torbadan Çift Saklama Kapları ile. </li><li> Steril INTERCEPT işleme sette amotosalen kabın hortumuna trombosit süspansiyonu konteyner bağlayın. </li><li> Yerel gereksinimler aşağıdaki uygun kan ürünü tanımlama ile INTERCEPT işleme seti saklama kapları etiketleyin. </li><li> Trombositler asın ve aydınlatma kabına akmaya amotosalen çözüm sağlayan, ilk amotosalen kapsayıcısındaki alt kanül bölünürler. Trombositler aydınlatma kabına amotosalen konteyner akmasına izin amotosalen kapsayıcısındaki üst kanül kırın. </li><li> Yavaşça trombosit ve amotosalen karışımı karıştırın ve amotosalen kabına aydınlatma kabından hava ifade. </li><li> Hortumun yaklaşık 4 cm, doldurma borusuna trombosit karışım küçük bir miktar ifade eder. Bu tüp ve aydınlatma kabı hem de trombositler patojen inactivati ​​geçmesi sağlanırtedavi. </li><li> Aydınlatma konteyner ve amotosalen konteyner arasındaki boru mühürleyin. Aydınlatma konteyner uzanan boru yaklaşık 4 cm&#39;den daha bırak. Çıkarın ve atın boş trombosit ve amotosalen kaplar ve örnekleme torbalar üzerindeki kelepçe kapatın. </li><li> Soldaki büyük bölme içinde aydınlatma kap ve sağ tarafta daha küçük bölme içinde düzenleyici ile aydınlatıcı içine işleme grubu yerleştirin. </li><li> Aydınlatıcı içine bağışı kimliği, ürün kodu, ve işleme set lot numarası girmek için el barkod aygıtı kullanın. Metal kapağını kapatın ve aydınlatıcı grafik arayüzü istendiğinde, çekmeceyi kapatın. Aydınlatma başlatmak için &quot;Başlat&quot; düğmesine basın. </li><li> Aydınlatma sonra aydınlatıcıdan işleme seti kaldırın. Aydınlatıcı otomatik işlenmiş trombosit birim (ler) için tedavi raporu yazdırır. </li><li> Organizatörü konteyner açmak ve p asmaklatelets ve işlem seti, aydınlatma kabın çıkışındaki kanül kırmak ve trombositler bileşik emme cihazı (CAD) bir kaba akmasına izin verir. </li><li> Bir plazma çıkarıcı kullanarak aydınlatma kabına CAD kabından hava ifade, CAD gofret eğmemeye bakımı. </li><li> CAD konteynerin giriş noktasına yakın boru kapatılmalıdır. Çıkarın ve boş aydınlatma kabı atın. </li><li> En az 6 saat boyunca bir karıştırıcı üzerinde trombosit bağlı depolama kapları ile CAD konteyner, ancak en fazla 16 saat yerleştirin. Bu ≤ 2 uM&#39;lik bir konsantrasyona kalıntı amotosalen azalma ile sonuçlanacaktır. </li><li> CAD Tedaviden sonra, karıştırıcı gelen trombosit birimleri çıkarın. Trombositler asın. Kanül kırın ve trombosit saklama kapları içine akmasına izin verin. </li><li> CAD kabına saklama kapları havayı ifade eder. Rezidüel trombosit konsantresi geri akışı saklama kapları içine tarafından Letyerçekimi. Y-uydurma Yukarıda tüp mühür ve boş CAD kabı çıkarın. </li><li> Gerektiği gibi saklama kapları arasındaki yeniden dağıtın hacmi. Cilt ayarlamalar depolama konteynerleri tartı ile yapılır. Bir kaç santimetre saklama kabının giriş yukarıdaki her bir depolama konteyner için hortum mühür; 5.2 &#39;de tarif edildiği gibi bu, son ürünün bir steril bir örnek elde kolaylaştırır. </li></ol> 5. Ürün Örnekleme <ol><li> Rutin QC test için nihai depolama kapları saklama kapları üzerinde örnekleme kese kullanılarak kez tadılabilir. Bunu yapmak için, platelet birim iyice karıştırılmış sağlamak, daha sonra torba için kelepçeyi açmak ve birkaç kez sıkın. Kese trombositler ile doldurduktan sonra tüp mühürleyin. Uygun bir laboratuvar tüpüne trombosit örneği aktarın ve hemen testleri gerçekleştirin. </li><li> Bu tür bir çalışmada, doğrulama için olduğu gibi, depolama boyunca birden çok zaman noktasında örnekler elde etmek için, steril bağlamakTrombosit saklama kabı boru için yeni bir numune kabı. Trombositler de örnekleme konteynere aktarmak için önce karıştırılmalıdır emin olun. </li></ol> 6. In vitro Fonksiyonunun Değerlendirilmesi <ol><li> Bu validasyon çalışması için, in vitro değerlendirilmesi CAD tedavisi (Gün 1 veya Gün 2, CAD süresine bağlı olarak) sonra tekrar 4. Gün yapıldı (veya Gün 5) ve Günlük 7. Vitro ölçümlerde hacmi, trombosit sayımı, pH, dahil kan gazı (pO 2, pCO 2), glikoz, laktat ve dönen. </li><li> Cilt katkı maddesi çözelti içinde, trombositler &#39;in özgül ağırlık olarak 1.01 g / ml ile ağırlık ile tespit edildi. </li><li> Hemoglobin kontaminasyon bir renk skalası ile karşılaştırma kullanılarak görsel olarak değerlendirildi. </li><li> Dönen bir görsel olarak tespit edilmiştir. </li><li> Diğer testlerin metodolojisi için &quot;ekipman Tablosu&quot; na bakınız. </li></ol> 7. Temsilcisi Sonuçlar D üretme süreciouble doz buffy coat trombosit hacmi ve hematokrit için hedef özelliklerine uygun bireysel buffy mont üretimi ile başlar. Bu son işlem doğrulama sırasında bireysel buffy kat hematokrit ölçmek için pratik olmadığı gibi, biz sürekli olarak hedef hacmi ve hematokrit karşılamak olabilir sağlamak için elimizden buffy kat optimize etmek için ayrı bir çaba üstlenerek başladı. Tablo 1 de gösterildiği gibi, Optimize buffy kat 46, hacim ve hematokrit her ikisi de ± 2 ml ve 37 ±% 3, sırasıyla için hedef değerleri ile karşılaştırıldığında olumlu. Havuzlama sonra, buffy coat havuz hacminin ve hematokrit, sırasıyla, yumuşak sıkma santrifüj işleminden önce yaklaşık olarak 600 mL% 20 olmalıdır. Tablo 2 de gösterildiği gibi, havuzlar buffy coat 615 ortalama ± 5 ml; hematokrit 19 ortalama ±% 1. Bir çift doz trombosit kons içinde yumuşak sıkma santrifüj sonuçlarıINTERCEPT Kan Sistemi DS işleme seti kullanılarak patojen inaktivasyonu için girdi şartlarını karşılayacak entrate. INTERCEPT tedavi için anahtar giriş parametreleri hacmi, trombosit, plazma oranı ve RBC içerik bulunmaktadır. Ayrıca, buffy coat havuzu ile karşılaştırıldığında trombosit konsantresi içinde trombositlerin ≥% 75 kurtarmak hedefliyoruz. Yerel gereksinimlere Per, beyaz kan hücresi (WBC) kirlenme &lt;1x10 6 / birim olmalıdır. Trombosit, doğrulama içinde konsantre KESMENOKTASı tedavisi yanı sıra WBC kirlenme ve Tablo 3&#39;te gösterildiği gibi trombosit kurtarma için hedefler için anahtar parametreler araya. Patojen inaktivasyonu için INTERCEPT işlemi tek bir INTERCEPT işleme seti kullanarak çift doz trombosit konsantresi yapılır. Işlem seti, tedavi edilen birim yol tamamlanmasından az iki ayrı terapötik trombosit doz halinde bölünebilir izin veren iki tamamlayıcı depolama konteynerleri içermektedirogen inaktivasyonu süreci. Avrupa yönergeleri test birimlerinin% 75 ≥ 200x10 9 trombositler içermesini gerektirir başına terapötik dose1; İsveç&#39;teki yerel gereksinimler test birimlerinin% 75 içerdikleri&gt; doz başına 240x10 9 trombositler gerektirir. INTERCEPT Tedaviden sonra, ortalama trombosit içeriği 265 oldu ± 22 x10 9 (n = 24). Ayrıca, ünitelerin% 88 yerine veya terapötik doz başına 240x10 9 trombositler aştı; Bu Avrupa yönergeleri ve İsveç yasalarına hem dahilindedir. Çift doz buffy coat hazırlanması ve sırasıyla KESMENOKTASı tedavi süreçlerinin bir örnek için Şekil 1 ve 2&#39;ye bakınız. Bu doğrulama için, trombosit in vitro özellikleri INTERCEPT tedavisi (bireysel depolama kapları içine bölünmüş sonra yani) sonra konsantreleri ölçülür; parametreleri depolama 7 gün boyunca ölçüldü. Ortalama ve standart sapma için toplandıtrombosit dozunun, pH, pO2, pCO 2, laktat üretim ve glukoz tüketimi. Şekil 3, depolama, 7 gün boyunca KESMENOKTASı tedavi sonrası bölünme ürünlerinin her biri içinde KESMENOKTASı tedavi ve ortalama trombosit doz verilmeden önce iki doz trombosit konsantresi trombosit başlangıç ​​dozu ortalaması gösterilmiştir. Depolama sırasında Trombosit kaybı yaklaşık% 9 idi. Bu azalma konvansiyonel trombositlerin depolama sırasında trombositlerin beklenen kayıp farklı değildir. 2 Tablo 4 tek birimler halinde tedavi ve bölme sonra INTERCEPT trombositlerin in vitro özelliklerini özetlemektedir. Avrupa standartlarına Per, trombositlerin pH raf ömrünün sonuna kadar 6.4 üzerinde kalmalıdır. Işlem sırasında, trombosit pH değeri hafifçe trombosit konsantrasyon, ses ve trombosit sto gaz geçirgenliği esas damla konsantreöfke konteyner. Şekil 4, depolama, 7 gün boyunca bölünmüş trombosit ürünlerin pH göstermektedir. Depolama sırasında, pH kararlı olduğunu ve iyi işleme ihtiyaç içinde yapılmaktadır. Olarak Şekil 5A ve 5B, trombosit O2 tüketimi ve CO 2 de gösterildiği depolama 7 gün boyunca PL2410 kap içinde INTERCEPT trombositlerinde solunum devam etmektedir. Şekil 6A ve 6B, depolama, 7 gün boyunca laktat ve glikoz düzeyleri göstermektedir . Trombosit glukoz tüketimi ve laktat üretimi depolama 7 gün boyunca birbirleri ile tutarlıdır. 5 birim glikoz seviyesi daha az 1.11 mmol / l (glükoz tahlil için alt sınır) vardı. Özellikle, hacmi, trombosit, plazma oranı ve kırmızı bl; buffy coat hazırlanması ve havuzlama doğrulama üretilen trombosit olduğunu KESMENOKTASı tedavisi için giriş kriterlerini karşılayan konsantreleriood hücre kontaminasyonu. Nihai birimleri trombosit dozu ve pH dahil depolama 7 gün içinde geçerlilik kriterlerini karşıladı. <table border="1"><tbody><tr><td> Parametre </td><td> Hedef Aralığı </td><td> Sonuçlar ± SD </td></tr><tr><td> Hacim (ml) </td><td> ~ 48 </td><td> 46 ± 2 </td></tr><tr><td> Hematokrit (%) </td><td> ~ 37 </td><td> 37 ± 3 </td></tr><tr><td> Havuzlama önce zaman tutun </td><td> Karıştırıcı üzerinde Overnight </td><td> Karıştırıcı üzerinde Overnight </td></tr></tbody></table> Bireysel Buffy Palto (n = 19) Tablo 1. Özellikler. <table border="1"><tbody><tr><td> Parametre </td><td> Hedef Aralığı </td><td> Sonuçlar ± SD </td></tr><tr><td> Hacim (ml) </td><td> ~ 600 </td><td> 615 ± 5 </td></tr><tr><td> Hematocrit (%) </td><td> ~ 20 </td><td> 19 ± 1 </td></tr><tr><td> Santrifüj önce zaman tutun </td><td> Karıştırıcı üzerinde 1 saat </td><td> Karıştırıcı üzerinde 1 saat </td></tr></tbody></table> Buffy Coat Havuzları (n = 12) Tablo 2. Özellikler. <table border="1"><tbody><tr><td> Parametre </td><td> Hedef </td><td> Sonuçlar ± SD </td></tr><tr><td> Hacim (ml) </td><td> 370-420 </td><td> 404 ± 8 </td></tr><tr><td> Trombosit sayımı (x10 9 / birim) </td><td> 250 - 700 </td><td> 577 ± 62 </td></tr><tr><td> Trombosit kurtarma (%) Ortalama </td><td> ≥ 75 </td><td> 75 ± 4 </td></tr><tr><td> Plazma oranı (%) </td><td> 32-47 </td><td> 38 ± 1 </td></tr><tr><td> RBC (x10 6 / ml) </td><td> ≤ 4 </td><td> 1.2 ± 0.4 </td></tr><tr><td> WBC (x10 6 </s&gt; / birim) </td><td> ≤ 1 </td><td> 0.11 ± 0.1 </td></tr><tr><td> INTERCEPT (saat) önce zaman tutun </td><td> Günde 1 ≤ sonu </td><td> Günde 1 ≤ sonu </td></tr></tbody></table> Çift Doz Trombosit Tablo 3. Özellikleri (n = 12) konsantreler. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Ortalama ± SD </td><td> Min </td><td> Maksimum </td></tr><tr><td> Hacim (ml) </td><td> 199 ± 16 </td><td> 182 </td><td> 236 </td></tr><tr><td> Trombosit sayımı (x10 9 / birim) </td><td> 265 ± 22 </td><td> 225 </td><td> 292 </td></tr><tr><td> pH (22 ° C) </td><td> 6.9 ± 0.1 </td><td> 6.8 </td><td> 7 </td></tr><tr><td> pO 2 (kPa) </td><td> 21.4 ± 4.8 </td><td> 12.8 </td><td> 27.3 </td></tr><tr><td> pCO 2 (kPa) </td><td> 4.3 &amp; plusmn; 0.4 </td><td> 3.3 </td><td> 4.9 </td></tr><tr><td> Laktat (mmol / l) </td><td> 9.1 ± 1.7 </td><td> 6.8 </td><td> 12.4 </td></tr><tr><td> Glukoz (mmol / l) </td><td> 5.3 ± 0.9 </td><td> 3.7 </td><td> 6.5 </td></tr></tbody></table> INTERCEPT Tedavi Trombositler Gün 1/2 (Tek Üniteleri, n = 24) Tablo 4. Özellikler. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig1.jpg" /> Şekil 1. 7 buffy kat havuzundan bir çift doz trombosit konsantresi üretimi. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/4414/4414fig2.jpg" /> Şekil 2. INTERCEPT Kan Sistemi ile çift doz trombosit konsantresi Patojen inaktivasyon. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig3.jpg" /> Şekil 3. Önce ve için trombosit dozu ortalamaINTERCEPT uygulamadan sonra 7 gün (n KESMENOKTASı önce = 12; KESMENOKTASı sonra n = 24). <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/4414/4414fig4.jpg" /> Şekil 4. KESMENOKTASI tedavisi (n = 24) sonra trombosit pH ± SD. <img alt="Şekil 5A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5a.jpg" /> Şekil 5A. KESMENOKTASI tedavisi (n = 24) sonra pO 2 ± SD. <img alt="Şekil 5B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5b.jpg" /> Şekil 5B. KESMENOKTASI tedavisi (n = 24) sonra pO 2 ± SD. <img alt="Şekil 6A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6a.jpg" /> Şekil 6A. KESMENOKTASI tedavisi (n = 24) sonra laktat düzeyleri ± SD. <img alt="Şekil 6B&#39;de" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6b.jpg" /> Şekil 6B. &amp; Glukoz düzeyi ortalamaplusmn; SD KESMENOKTASI tedaviden sonra (n = 24).

<ol><li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+to+the+preparation%2C+use+and+quality+assurance+of+blood+components%22">Guide to the preparation, use and quality assurance of blood components</a>. , 16th, Council of Europe. (2010).</li>
<li>Van Rhenen, D. J., Vermeij, J., Mayaudon, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+characteristics+of+S-59+photochemically+treated+platelet+concentrates+derived+from+buffy+coats%5BTitle%5D)+AND+%22Vox+Sang%22%5BJournal%5D)">Functional characteristics of S-59 photochemically treated platelet concentrates derived from buffy coats.</a> Vox Sang. 79, 206-214 (2000).</li>
<li>Wollowitz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+DNA+and+RNA+in+pathogens%3A+mode+of+action+of+amotosalen+HCl%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Targeting DNA and RNA in pathogens: mode of action of amotosalen HCl.</a> Transfus. Med. Rev. 31, 11-16 (2004).</li>
<li>Irsch, J., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogen+Inactivation+of+Platelet+and+Plasma+Blood+Components+for+Transfusion+Using+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Pathogen Inactivation of Platelet and Plasma Blood Components for Transfusion Using the INTERCEPT Blood SystemTM.</a> Transfus. Med. Hemother. 38, (2011).</li>
<li>Lin, L., Dikeman, R., Molini, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photochemical+treatment+of+platelet+concentrates+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light+inactivates+a+broad+spectrum+of+pathogenic+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Photochemical treatment of platelet concentrates with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light inactivates a broad spectrum of pathogenic bacteria.</a> Transfusion. 44, 1496-1504 (2004).</li>
<li>Lin, L., Hanson, C., Alter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivation+of+viruses+in+platelet+concentrates+by+photochemical+treatment+with+amotosalen+and+long-wavelength+ultraviolet+light%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Inactivation of viruses in platelet concentrates by photochemical treatment with amotosalen and long-wavelength ultraviolet light.</a> Transfusion. 45, 580-590 (2005).</li>
<li>Allain, J. P., Cianco, C., Blajchman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protecting+the+blood+supply+from+emerging+pathogens%3A+the+role+of+pathogen+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus.+Med.+Rev%22%5BJournal%5D)">Protecting the blood supply from emerging pathogens: the role of pathogen inactivation.</a> Transfus. Med. Rev. 19, 110-126 (2005).</li>
<li>Stramer, S., Hollinger, F., Katz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+infectious+disease+agents+and+their+potential+threat+to+transfusion+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Emerging infectious disease agents and their potential threat to transfusion safety.</a> Transfusion. 49, 1S-29S (2009).</li>
<li>Nussbaumer, W., Allesdorfer, D., Grabmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+transfusion+of+platelet+components+contaminated+with+low+levels+of+bacteria%3A+a+comparison+of+bacteria+culture+and+pathogen+inactivation+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Prevention of transfusion of platelet components contaminated with low levels of bacteria: a comparison of bacteria culture and pathogen inactivation methods.</a> Transfusion. 47, 1125-1133 (2007).</li>
<li>Schlenke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Transfusion-Associated+Graft-versus-Host+Disease+in+Blood+transfusion%3A+Is+Gamma-Irradiation+the+Only+Answer%3F+Transfus%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hemother%22%5BJournal%5D)">Protection against Transfusion-Associated Graft-versus-Host Disease in Blood transfusion: Is Gamma-Irradiation the Only Answer? Transfus.</a> Med. Hemother. 31, 24-31 (2004).</li>
<li>Lin, L., Corash, L., Osselear, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li>
<li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li>
</ol>

Bu makalenin Üretim ve Serbest Giriş Cerus tarafından desteklenmektedir.

Buffy coat trombositler birkaç işlem adımları gerektiren trombosit adet üretim toplam maliyeti çarpanlarına olmalıdır personeli zaman, sarf malzemeleri, ekipman ve atıklar dahil post-toplama maliyetleri, sonuç. Her buffy coat gelen trombosit verimi (buffy coat hacmi ve hematokrit optimize yoluyla) Geliştirilmesi yedi buffy kat havuzundan bir çift doz buffy coat trombosit ünitesi üretimini sağlar. Bu iyileştirme işlemi gerçekleştirildiğinde, buffy kat sayısı trombosit doz, sabit bir sayı üretmek için gerekli azaltılabilir, böylece buffy kat genel kullanımını geliştirmek ve ilave trombosit üretimi (PC) konsantre olanak tanır. Personel zaman yanı sıra havuzlama setleri, trombosit katkı çözeltisi, steril bağlantısı gofret, filtre setleri ve santrifüj işlemleri gibi sarf ve ekipman maliyetlerini% 50 kadar azalır. Trombosit üretimini optimize edip, thi ilişkili maliyetleri azaltmanın yanı sıras havuzlama yöntemi bize de bizim transfüzyon alıcılara gelişmiş koruma sağlamak için izin, KESMENOKTASI ikili saklama kabı işleme seti ile kullanmak için giriş gereksinimi karşılayan bir trombosit konsantresi (PC) üretebilirsiniz. Patojen inaktivasyonu için INTERCEPT Kan Sistemi nükleik asit çoğaltma ve hastalığa neden yapamaz render patojenlerin önlenmesi, kovalent çapraz bağ DNA ve RNA amotosalen ve ultraviyole A (UVA) ışık kullanır. 3. Bu etkili virüs, bakteri gibi patojenlerin geniş bir yelpaze inaktive , parazitler ve kirletici donör beyaz kan hücreleri. 4-6 KESMENOKTASI yeni bir test geliştirdi ve sonuçta uygulamak için önemli bir finansal yatırım gerektiriyor ise tarihsel önemli bir gecikme içerir çıkan patojenler için mevcut test paradigma, bir alternatif sağlar zaman bir test kullanılabilir hale gelir. 7,8 ayrıca gereksiz emniyet measu bir alternatif sağlayabilirbakteriyel algılama 9 ve gama ışınlama gibi res. Ayrıca 10-12, KESMENOKTASI bize çift doz trombosit birimleri tedavi sağlayan üretim verimliliği faydaları ve bize bizim bütçe uygun olur. KESMENOKTASı ve çift doz buffy coat yöntemi kan merkezi iş akışları çeşitli adapte edilebilir. Örnek olarak, tam kan koleksiyon 500 ml &#39;ye edilebilir; koleksiyonları da 22 gece boyunca saklanabilir ° C ayırma ile elde edilebilir. Buna ek olarak, alternatif bir buffy coat biriktirme yöntemi mümkün değildir (örneğin bir ahtapot yöntem yerine bir tren metod) ve / veya otomatik bir cihaz (örneğin TACSI) geri kalan kırmızı hücrelerden ikinci santrifüjleme ve trombosit süspansiyonu ayrılması için kullanılabilmektedir . Artmış trombosit içerik gerekiyorsa, çeşitli teknikler trombosit sayımı, tam kan gecelik inkübasyon, adjus dayalı donörlerin ön seçimi de dahil olmak üzere mevcutsantrifüj ayarlar tment, 7 ya da yerine 8 buffy kat bir havuz sunulabilir. Araya gelme sınırlaması nedeniyle mevcut ve santrifüj kova kapasitesi setleri, buffy coat havuzunun toplam hacmi yaklaşık 600 ml olmalıdır. Bu protokolü açıklanan santrifüj işlemi ve ayarlar 7 buffy kat bir havuz için KESMENOKTASI parametreleri karşılayan ürünü elde etmek için optimize edilmiştir. Havuzda buffy kat sayısı değiştirilirse santrifüj ayarlarını modifiye edilmelidir. Bazı ülkelerde, asgari trombosit dozu yüksek ve QC gereksinimleri İsveç&#39;te daha katıdır. Bu nedenle, bizim sonuçlar evrensel olarak uygulanabilir olmayabilir. Bu ülkelerde, önceki KESMENOKTASI tedaviye çift doz PC KESMENOKTASI tedavi ve bölünme sonra yerel gereksinimlerini karşılamak amacıyla trombositlerin sayıda içermesi gerekir. Çünkü maksimum trombosit içeriği ve tedavi volümü for INTERCEPT sırasıyla 7x10 11 trombosit ve 420 ml &#39;dir, KESMENOKTASI işleme gereksinimlerini aşan veya iki terapötik doz bölünebilir yetersiz trombosit içeriğe sahip birimlerinin yüzdesi gibi trombosit dozu, QC kriterler için yerel gereksinimler gibi faktörlere bağlı olarak değişir buffy coat optimizasyon sonuçları ve üretim istikrarı. Bir çift doz PC INTERCEPT işleme gereksinimlerini aşarsa, elle gereksinimlerini karşılamak için ayarlanabilir ve daha sonra tedavi edilebilir. 7-buffy coat havuzu KESMENOKTASI sonra bir çift doz ürün için yetersiz trombosit verir bu birkaç kez, biz KESMENOKTASI tedavi gerçekleştirmek için değil seçer. Alternatif olarak, diğer kan merkezleri açarak tüm birimler üzerinde patojen inaktivasyonu gerçekleştirerek, tek doz KESMENOKTASI işleme seti (Büyük Hacimli kümesi yani) ile PC tedavi ve tek bir büyük terapötik doz olarak PC saklamayı seçebilirsiniz. Biz karşılamak sağlamak için bizimQC gereksinimleri ve patojen mümkün olan trombosit birimlerinin çok, biz havuza zaman havuzda 5.6x10 11 trombositlerin az trombosit içeriği neden olur, donör trombosit sayımı esas buffy kat seçin inaktive eder. Bu INTERCEPT tedavi sonrası iki tedavi edici dozlarda üretmek için yeterli trombosit içeriği sağlar. Bizim doğrulama 7 tam kan türetilmiş buffy coat birimleri başarıyla toplanmış ve trombositler için INTERCEPT işlemi ile tedavi, imalat (İsveççe gereksinimleri ve Avrupa kılavuzlar) ve hastaların desteği için kabul kriterlerini karşılayan 2 patojen inaktive trombosit ürünler elde edilebileceğini göstermektedir klinik uygulama kılavuzları ve İsveç&#39;te standart trombosit infüzyonu yöntemlere göre trombosit transfüzyonu gerektiren.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Tam kan bağışı, primer ayırma ve trombosit üretimi</td></tr><tr><td>Kan toplama paketi</td><td>Fenwal</td><td>R6485</td><td>Üst/Alt set</td></tr><tr><td>Otomatik bileşen çıkarıcı</td><td>Fenwal</td><td>Optipress-II</td><td></td></tr><tr><td>Kan karıştırıcı ve terazi sistemi</td><td>Baxter</td><td>Easymix V3</td><td></td></tr><tr><td>Trombosit lökosit filtrasyon seti</td><td>Fenwal</td><td>K4R7042</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Hettich</td><td>Roto Silenta 63 RS</td><td>Sürüm 5.5</td></tr><tr><td>Trombosit katkı solüsyonu - SSP+</td><td>MacoPharma</td><td>SSP2030U</td><td>300 ml</td></tr><tr><td>Steril tüp kaynak cihazı</td><td>Terumo</td><td>T-SCD</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">INTERCEPT tedavisi &amp;amp; saklama</td></tr><tr><td>INTERCEPT işlem seti</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT2503</td><td>Çift Depolama (DS) seti</td></tr><tr><td>INTERCEPT Aydınlatıcı</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT100</td><td></td></tr><tr><td>PC örnek paketi</td><td>Fenwal</td><td>FTX 1122</td><td></td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td>Helmer</td><td>PC2200/PC3200</td><td></td></tr><tr><td>Karıştırıcı</td><td>Helmer</td><td>PF48H/PF96H</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Değerlendirilmesi &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; Trombosit Fonksiyonu</td></tr><tr><td>Kan gazı analizörü</td><td>Radyometre</td><td>ABL 735</td><td>pH, kan gazları ve laktat ölçümü için kullanılır</td></tr><tr><td>Kimya sistemi</td><td>Ortho Clinical Diagnostic</td><td>Vitros 5.1</td><td>Glikoz ölçümü için kullanılır</td></tr><tr><td>Hematoloji analizörü</td><td>Boule Medical AB</td><td>Medonic CA620-Cellguard</td><td>Trombosit sayımı ölçümü için kullanılır</td></tr><tr><td>Akış sitometresi</td><td>BD</td><td>FACSCanto</td><td>Beyaz kan hücresi ölçümü için kullanılır</td></tr></tbody></table>

intercept kan sistemi kullanılarak hazırlanması ve Çift doz buffy coat trombosit Ürünleri patojen inaktivasyon

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Kan merkezleri maksimize üretim aldıkları kan ürünü bağışlardan verimi yanı sıra transfüzyon bulaşan hastalıklardan korunma dahil transfüzyon hastalar için güvenlik en üst düzeyde sağlanması da dahil olmak üzere pek çok sorun ile karşı karşıyayız. Bu sarf malzemeleri, ekipman, atık, ve diğerleri arasında personel giderleri de dahil olmak üzere işletme giderleri en aza indiren bir mali açıdan sorumlu bir şekilde yerine getirmesi gerekir. Çeşitli yöntemler trombosit transfüzyonu konsantreleri üretmek için kullanılabilir. En yaygın olanlarından biri, tek bir terapötik trombosit ünitesi (birim başına ya da yerel yönetmeliklere başına ≥ 2,0 x10 11 trombositler) altı tam kan bağış kadar gelen buffy coat tabakası havuzu tarafından hazırlanan olduğu buffy coat yöntemdir. &quot;Çift doz&quot; tam kan türetilmiş trombosit üretimi için bir prosedür sadece son zamanlarda geliştirilmiştir. Hazırlanması için yeni bir yöntem olup burada sunulançift ​​doz tam kan türetilmiş trombosit 7 buffy mont ve sonradan patojen inaktivasyonu için INTERCEPT Kan Sistemi ile çift doz birimleri tedavi havuzları yoğunlaşmaktadır. INTERCEPT virüsler, bakteriler, parazitler ve bağışlanan kan mevcut olabilir kirlenmesine donör beyaz hücreleri etkisiz hale geliştirilmiştir. , Çift Saklama Kapları (&quot;DS kümesi&quot;) ile ayarlayın INTERCEPT İşleme kullanarak çift doz buffy coat yöntemi ile KESMENOKTASI eşleştirme böylece hasta güvenliği maksimize, kan merkezleri tek bir patojen inaktivasyonu işleme seti kendi çift doz birimlerinin her tedavi sağlar maliyetleri en aza indirirken. Çift doz buffy coat yöntemi az buffy kat gerektirir ve tek doz buffy coat trombosit birimlerin hazırlanması ve tedavi ile karşılaştırıldığında% 50 (örneğin havuzlama setleri, filtre setleri, trombosit katkı çözümü ve steril bağlantı gofret) varan sarf kullanımını azaltır . Diğer maliyet tasarrufu daha az atık, daha az ekipman Maintenan dahilce, düşük güç gereksinimleri, personel zamanı azalır ve daha düşük toplama maliyeti aferez teknikle karşılaştırıldığında.

Bu makalede, tam kan bağışlarından hazırlanmıştır ve patojen inaktivasyonu için INTERCEPT Kan Sistemi ile tedavi çift doz buffy coat trombosit konsantreleri üretmek için Örebro Üniversitesi Hastanesi tarafından kullanılan işlem açıklanmaktadır.<em&gt; In vitro</emNihai trombosit birimlerin&gt; kaliteli depolama 7 gün içinde değerlendirilir.

INTERCEPT Kan Sistemi kullanılarak hazırlanması ve Çift Doz Buffy Coat Trombosit Ürünleri Patojen inaktivasyon

Kan merkezleri, aldıkları kan ürünü bağışlarından üretim verimini maksimize etmenin yanı sıra ... sağlamak da dahil olmak üzere birçok zorlukla karşı karşıyadır.

Bu videoda, yedi adet Buffy coat havuzundan çift doz trombosit konsantresi hazırlanacak ve ardından Intercept ile işlemden geçirilecektir. Bu videoyu izledikten sonra, patojenleri inaktive edilmiş çift doz trombosit konsantresinin nasıl üretileceği konusunda kapsamlı bir bilgiye sahip olmalısınız. İlk olarak şematik bir genel bakış sunulacak, ardından uygulama gösterilecektir.Bağışlanan tam kanın ilk yedi ünitesi, hacim ve hematokrit hedeflerini karşılayan yedi buffy coat ünitesi elde etmek için santrifüjlenir ve ayrıştırılır. Buffy coat'lar birbirine bağlanır, havuzlanır ve santrifüjlenir. Daha sonra, patojenleri ve lökositleri inaktive etmek amacıyla çift doz trombosit konsantresi üretmek için trombosit süspansiyonu, kalıntı eritrositlerden ayrılır.Çift doz trombosit konsantresi, nükleik asitleri çapraz bağlayan intercept sistemi kullanılarak işlenir. Sonuç olarak bu prosedür; pH, glukoz, laktat, PO₂ ve PCO₂ ile CD62P değerlendirmeleriyle belirlendiği üzere, yedi günlük saklama süresi boyunca kabul edilebilir in vitro kaliteye sahip iki terapötik trombosit dozu sağlar. Kan merkezinden bir teknisyen prosedürü uygulamalı olarak gösterecek, biz ise işlem gereksinimlerini açıklayacağız.İlk olarak, çift doz trombosit konsantresinin 300 ile 420 mililitre arasındaki intercept işleme spesifikasyonlarını karşıladığından emin olun. Hacim 2,5 ile 7 × 10¹¹ trombosit dozu ve mililitre başına 4 × 10⁶'dan daha az eritrosit olmalıdır. Bu prosedüre, 450 mililitrelik üst-alt toplama setlerinde toplanmış yedi ünite tam kan ile başlayın.Kan ünitelerini santrifüj kaplarına yerleştirin ve üretici talimatlarına uygun olarak, oda sıcaklığında, B5 fren ayarıyla 11 dakika boyunca 4.880 RCF'de sert santrifüj işlemi gerçekleştirin; santrifüj sonrası kan üç katmana ayrılacaktır: eritrositler, buffy coat ve plazma. Yaklaşık 48 mL'lik buffy coat'u ve %37 hematokriti toplama kabında bırakarak, plazmayı üst uydu torbasına, eritrositleri ise alt uydu torbasına aktarın.Buffy coat'ları oda sıcaklığında gece boyunca bir trombosit ajitatörüne yerleştirin; yedi adet buffy coat'ı ve 300 milliliters SSP artı trombosit katkı solüsyonunu steril şekilde bağlayın. Katkı solüsyonu en üstte olacak şekilde bir drenaj konfigürasyonunda, katkı solüsyonu ile ilk buffy coat arasındaki hattı burada gösterildiği gibi klempeleyin. Buffy coat üniteleri arasındaki kaynakları açın ve bunların son buffy coat kabına boşalmasını sağlayın.Ardından, katkı çözeltisi ile ilk buffy coat arasındaki klempi ve kaynağı açın; klempi kapatmadan önce, yaklaşık 100 mililitre katkı çözeltisinin yaklaşık üçte birinin sırasıyla her bir Buffy coat kabından geçerek durulama yapmasını sağlayın; yıkama işlemini, her seferinde yaklaşık 100 mililitre katkı çözeltisi kullanarak iki kez daha tekrarlayın. Havuzlanmış buffy coat kabını boş kaplardan ayırın. Katkı çözeltisi dahil buffy coat havuz hacmi yaklaşık 600 mililitre olmalıdır.Birleştirilmiş buffy coat'ları oda sıcaklığında bir saat boyunca ajitatöre yerleştirin. Ardından, entegre bir lökosit azaltma filtresine sahip bir trombosit saklama kabını, buffy coat havuzunu içeren torbaya bağlayın. Birleştirilmiş buffy coat'ları ve trombosit saklama kabını bir santrifüje yerleştirin ve 462 RCF'de dokuz dakika 20 saniye boyunca döndürün.Santrifüj işleminin ardından, trombosit süspansiyonunu Luca redüksiyon filtresinden geçirerek trombosit saklama kabına aktarın. Sonuç, 420 mililitrede yaklaşık 7 × 10¹¹ trombosit içeren ve patojen inaktivasyonu için Intercept ile işleme tabi tutulabilen çift doz trombosit konsantresidir. Çift doz trombosit konsantresi; antoin kabı, aydınlatma kabı ve çift saklama kaplarından oluşan bir Intercept işlem seti kullanılarak işlenir.Trombosit süspansiyon kabını, intersept işlem setindeki amin kabına bağlayın. Ardından trombositleri asın. Çözeltinin aydınlatma kabına akmasını sağlamak için amin kabındaki alt kanülü kırın.Ardından, trombositlerin Amin kabından aydınlatma kabına akmasını sağlamak için Amin kabındaki üst kanülü kırın. Trombosit ve am tosin karışımını nazikçe karıştırın. Aydınlatma kabındaki havayı dışarı atmak için kabı hafifçe sıkın.Aydınlatma kabı ile amato kabı arasındaki hortumu, aydınlatma kabından dört santimetreden fazla hortum çıkmayacak şekilde mühürleyin. Boş kapları çıkarıp atın. İşleme setini, aydınlatma kabı soldaki geniş bölmede ve düzenleyici sağ taraftaki daha küçük bölmede olacak şekilde aydınlatıcıya yerleştirin.Bağış kimliğini tarayın. Ürün kodu ve işlem. Lot numarasını aydınlatıcıya girin.Metal kapağı ve çekmeceyi kapatın. Aydınlatmayı başlatmak için başlat düğmesine basın. Aydınlatıcı, aydınlatma kabındaki trombosit amin karışımına kontrollü bir UVA ışığı dozu sağlar.Amin, trombosit ünitesinde bulunabilecek patojenlerin nükleik asit baz çiftleri arasına yerleşir. Işığa maruz kalındığında, DNA veya RNA'yı birbirine bağlayan kalıcı çapraz bağlar oluşur; böylece patojenler artık çoğalamaz ve kan ürününe maruz kalan alıcıda hastalığa neden olamaz. Işınlama işleminden sonra, işlem setini çıkarın.Ardından, kapları düzenleyiciden çıkarın, trombositleri ve işlem setini asın. Aydınlatma kabının çıkışındaki kanülü kırın ve trombositlerin CAD kabına akmasını sağlayın. CAD kabının içinde, kan ürünündeki kalıntı amin seviyelerini düşüren, immobilize makrogözenekli polistiren boncukların bulunduğu bir wafer yer almaktadır.CAD wafer'ı bükmemeye dikkat edin. CAD konteynerindeki havayı aydınlatma konteynerine aktarın. CAD konteynerinin giriş portunun yakınındaki boruyu mühürleyin.Boş aydınlatma kabını çıkarın ve atın. Ekli saklama kaplarıyla birlikte CAD kabını altı ila 16 saat boyunca bir trombosit ajitatörüne yerleştirin. Bu işlem, artık amlin konsantrasyonunun iki mikromolar veya daha düşük bir seviyeye indirilmesini sağlayacaktır.CAD işleminden sonra, trombosit ünitelerini ajitatörden çıkarın, trombositleri asın, CAD konteynerinin çıkışındaki kanülü kırın ve trombositlerin iki depolama konteynerine akmasını sağlayın. Ardından, depolama konteynerlerindeki havayı tahliye edin. Y bağlantı aparatının üzerindeki tüpleri mühürleyin ve CAD konteynerini çıkarın.Sonuç olarak, in vitro trombosit fonksiyonunu değerlendirmek için patojenleri inaktive edilmiş iki trombosit konsantresi elde edilmiştir. Trombosit dozu, pH, PO₂, iki PC O₂, laktat üretimi ve glukoz tüketimi belirlenmiştir. Trombosit konsantreleri, saklamanın yedinci gününe kadar takip edilmiştir.Bu şekil, intersept tedavisi öncesindeki çift doz trombosit konsantresinin ortalama başlangıç trombosit dozunu ve saklama süresinin yedinci gününe kadar tedavi edilen her bir bölünmüş üründeki ortalama trombosit dozunu göstermektedir. Burada görülebileceği üzere, saklama sırasındaki trombosit kaybı yaklaşık %9 olmuştur. Bu azalma, konvansiyonel trombositlerin saklanması sırasında beklenen trombosit kaybından farklı değildir. Avrupa gereklilikleri uyarınca, trombositlerin pH değeri raf ömrünün sonuna kadar 6.4'ün üzerinde kalmalıdır.İşleme sırasında, trombosit konsantrelerinin pH değeri, trombosit konsantrasyon hacmine ve trombosit saklama kabının gaz geçirgenliğine bağlı olarak hafifçe düşer. Bu şekil, ayrıştırılmış trombosit ürünlerinin yedi günlük saklama süresi boyunca pH değerlerini göstermektedir; saklama süresince pH stabil kalmakta ve işleme gereklilikleri dahilinde iyi korunmaktadır. Saklanan trombositlerde aerobik metabolizmanın devam etmesi beklenir ve bu durum, trombositlerin bir hastaya transfüzyon yapıldıktan sonra in vivo işlev görme yeteneğinin bir göstergesidir.Trombositlerin O2 tüketimi ve CO2 üretimi, PL 24 10 kabındaki intersept trombositlerin yedi günlük saklama süresi boyunca solunumun devam ettiğini göstermektedir. Benzer şekilde, saklanan trombositlerde anaerobik metabolizma da devam etmelidir. Bu nedenle, glukoz tüketimi ve laktat üretimi de trombositlerin transfüzyon sonrası fonksiyon görme yeteneklerinin göstergeleridir.Bu iki şekil, yedi günlük saklama süresi boyunca laktat ve glikoz seviyelerini göstermektedir. Trombosit glikoz tüketimi ve laktat üretimi birbiriyle tutarlıdır. Yedi günlük saklama süresi boyunca, beş ünitenin glikoz seviyeleri, glikoz analizinin alt sınırı olan 1.11 millimoles per liter değerinden daha düşük çıkmıştır.Buffy coat hazırlama ve havuzlama doğrulaması; hacim, trombosit sayısı, plazma oranı ve eritrosit kontaminasyonu gibi intersept tedavisi giriş kriterlerini karşılayan trombosit konsantreleri üretmiştir. Nihai üniteler, trombosit dozu ve pH dahil olmak üzere yedi günlük saklama süresi boyunca doğrulama kriterlerini karşılamaktadır. Tek dozluk trombosit konsantresi üreten geleneksel buffy coat hazırlama yöntemine kıyasla bu tekniğin temel avantajı; kan alımlarından bileşen verimini maksimize etmesi, çift doz tekniği kullanarak işletme giderlerini azaltması ve transfüzyonla bulaşan patojenleri inaktive ederek hasta güvenliğini artırmasıdır.

preparation-pathogen-inactivation-double-dose-buffy-coat-platelet

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, monositler ve lenfositler içeren periferik kan mononükleer hücrelerinin, PBMC'lerin yoğunluk gradyanlı santrifüjleme ile bir insan buffy tabakasından izolasyonunu gösteriyoruz. İzole edilmiş PBMC'ler daha fazla analiz için kullanılabilir.

İnsan Buffy Paltolarından Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinin İzolasyonu

Bu videoda, murin tam kanından trombositlerin saflaştırılması ve ardından trombosit agonisti trombin ile aktivasyonu için bir protokol açıklanmaktadır. Akış sitometrisi ile analiz edildiğinde, saflaştırılmış dinlenme trombositleri, hücre yüzeyi markörü CD41'in ekspresyonuna dayalı olarak karakterize edilirken, saflaştırılmış aktive edilmiş trombositler, hem yüzey markörleri CD41 hem de CD62P'yi birlikte eksprese eder.

Murin Tam Kanından Trombositlerin Saflaştırılması ve Aktivasyonu

Bu video, insan trombosit ürünlerinde yüksek titreli bakteriyel kontaminasyona karşı riboflavin ve UV ışık bazlı patojen azaltma sürecini göstermektedir. Bu işlem, bakteriyel kontaminasyon ile ilişkili ciddi advers transfüzyon olayları riskini azaltmaya yardımcı olabilir.

Bakterileri ortadan kaldırmak için trombosit ürünlerinin riboflavin ve UV ışığı tedavisi

Trombosit ürünlerinin saklama koşulları, bakteriyel kontaminantların tehlikeli seviyelere çoğalması için ideal bir ortam yaratır.  Bu çalışmanın amacı, insan trombosit ürünlerinde yüksek titreli bakteriyel kontaminasyona karşı riboflavin bazlı bir patojen azaltma sürecini değerlendirmek için bir koloni oluşturma testi kullanmaktı.

Riboflavin ile Trombosit Ürünleri ve UV Işık Tedavisi: Yüksek Titre Bakteriyel Kontaminasyon Karşı Etkinliği

Trombosit transfüzyonu ve hemostazı, kan bankacılığı trombositlerinin işlevini araştırmak için kan sulandırma ve mikroakışkan akış odaları kullanılarak modellendi. Veriler, trombosit depolama lezyonunun in vitro olarak hemostaz üzerindeki sonuçlarını göstermektedir.

Mikroakışkan Akış Chambers Hemostaz ve Trombosit Transfüzyon Model Sulandırılarak Kan kullanma<em&gt; İn Vitro</em

Bu yazıda, endotel von Willebrand değerlendirmek için bir yöntem tarif faktör yayın ve sonraki trombosit yakalama inflamatuar bizi canlı tutan bir vitro akış odası sistemi kullanarak sıvı kesme oluşuyor.

Soruşturma von Willebrand faktör patofizyolojisi kullanarak bir akışı odası Model von Willebrand faktör-trombosit dize oluşumu

Microparticle içeriği trombosit konsantreleri eleme üzerinde trombosit stok yönetimi, hastane kan bankaları yeni bir kalite iyileştirme girişimidir. Trombosit kullanımını optimize etmek için trombosit sigara-harekete geçirmek harekete geçirmek ayırt etmek için hedeftir. Hematoloji-Onkoloji hastaları için aktif trombosit sağlayan ateşe dayanıklı olmak için yüksek risk azaltabilir.

Trombosit transfüzyonları Microparticles için yöntem eleme rutin

Bu protokol, aşağı akış analizleri ve akış sitometrisi ve RNA dizilimi gibi iş akışları için uygun periferik kan mononükleer hücrelerinin toplanması, saklanması ve çözülmesi için erişilebilir bir kılavuz sunar. Plazma ve buffy coat koleksiyonları da sergilenmektedir.

Tam Kandan Yüksek Derecede Canlı İnsan Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinin İzolasyonu ve Dondurularak Saklanması: Yeni Başlayanlar İçin Bir Kılavuz

Bu protokol, biyobankacılık ve diğer amaçlar için insan periferik kan mononükleer hücrelerini izole etmek için yüksek verimli otomasyonla uyumlu bir yöntemi detaylandırır.

İnsan Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinin Buffy Coats'tan Yüksek Verimli İmmünomanyetik Boncuk Ayırma ile İzole Edilmesi

Akış altındaki trombosit fonksiyonu değerlendirilebilir ve simüle edilmiş hemostatik resüsitasyon, travma ve transfüzyon tıbbında uygulamaları olan bir mikroakışkan cihaz kullanılarak modellenebilir.

Trombosit Fonksiyonunun Değerlendirilmesinde Mikroakışkanlar

Trombosit metabolizması, özellikle kanama ve trombotik bozukluklarda trombosit hiper ve hipoaktivitesinin rolü ile ilgili olduğu için ilgi çekicidir. Bazı metabolik tahliller için trombositlerin plazmadan izole edilmesi gereklidir; Burada sunulan, yıkanmış trombositlerden hücre içi metabolitlerin izole edilmesi için bir yöntemdir.

Kantitatif metabolik akı çalışmaları için yıkanmış insan trombositlerinin hazırlanması

Öğrenin, INTERCEPT Kan Sistemi kullanarak çift doz trombosit konsantresi hazırlama yöntemini. Yedi adet buffy coat havuzlanarak patojen inaktivasyonu sağlanır ve yedi günlük saklama süresince kalite değerlendirmesi yapılır.

INTERCEPT Kan Sistemi kullanılarak hazırlanması ve Çift Doz Buffy Coat Trombosit Ürünleri Patojen inaktivasyon

Daha fazla video keşfet