İskemik Sıçan Akciğer Angiogenezis

Bu prosedürün genel amacı sol pulmoner arteri bağlamaktır. Bu, önce anestezi uygulanmış bir sıçanın entübe edilmesi ve havalandırılmasıyla gerçekleştirilir. Daha sonra torakotomi yapılır ve sol pulmoner arter bağlanır.

Ligasyondan sonra göğüs kapatılır ve farenin iyileşmesine izin verilir. Sonuç olarak, sol akciğerdeki neovaskülarizasyonun derecesi, dokudaki floresan seviyesinin ölçülmesi veya diğer histolojik yöntemlerle değerlendirilebilir. Bu tekniğin temel avantajı, akciğerdeki bronşiyal dolaşımın in vivo gelişimini ve neovaskülarizasyonunu inceleme fırsatı sağlamasıdır.

Bu, ventilasyon yapan bir akciğerde bu yeni vaskülatürün karmaşık 3D yapısını incelemek için bir fırsat sağlar. Şimdi, bu, endotel hücre proliferasyonu ve kemotaksis veya tüp oluşumunu inceleyen in vitro çalışmalar yapan, DSÖ'yü oluşturan çoğu araştırmacı tarafından şu anda yapılanlardan çok farklıdır. Genel olarak, bu prosedüre yeni başlayan kişiler, sol pulmoner arter ile sol bronş arasındaki diseksiyonu yapmaya çalışmakla mücadele edeceklerdir.

Verebileceğim tek tavsiye, pratik yapmak, sabırlı olmak ve cerrahi yaklaşımda küçük ayarlamalar olup olmadığını görmek için bu videoyu sık sık izlemektir. Bu prosedürü gösteren, laboratuvarımdan bir teknisyen olan John Jenkins'tir. Başlamak için, anestezi uygulanmış bir fareyi bir ameliyat tahtasına yerleştirin ve anestezinin devamı için bir burun konisi takın, hayvanı plastik bir kateter ile entübe edin ve fareyi bir ventilatöre bağlayın.

Gözlere merhem sürdükten sonra, fareyi sağ tarafına yerleştirin ve uzantıları bantlayın. Cerrahi alanın üzerindeki tüyleri alın ve cildi tekrarlanan Betadine ve alkol fırçaları ile hazırlayın. Hazır olduğunda, deriden enine bir kesi yapın.

Daha sonra künt, göğüs kafesini ortaya çıkarmak için yağ ve doku katmanlarını inceleyin. Açığa çıktıktan sonra, üçüncü interkostal boşluğu tanımlayın ve üçüncü ve dördüncü kaburga arasında künt bir kesi yapmak için forseps kullanın. Kaburga ayırıcıları açıklığa yerleştirin ve kaburgaları akciğer görünene kadar yavaşça çekin.

Açıklığı sabitleyin. İlk olarak, sol akciğeri sağ elinizle geri hareket ettirin. Daha sonra düz forseps ile sol pulmoner arteri ve sol ile hava yolunu tutun.

Sol pulmoner arter hava yolunun üstünde yer almalı ve forseps masaya dik olmalıdır. Hizalandıktan sonra, arteri sol ana gövde bronşundan doğal sınırlarında ayırmak için oyulmuş forsepsleri uygun şekilde kullanın. Bu ayırma çizgisi, iki ayrı yapı arasında ince ve beyaz görünür.

Gemiden geçmemeye özen göstererek. Forsepsin uçlarını ayırma boyunca kaydırın. Sol pulmoner arter forsepsin eğrisi üzerine gelene kadar bu şekilde devam edin.

Sol elinizle düz forsepsleri nazikçe serbest bırakın ve önceden kesilmiş bir dikiş parçası alın. Kavisli forsepsleri açın, arteri dikişi tutacak kadar sarın. Sütürü, forsepsin eğrisine göre yukarı doğru bir hareketle yavaşça çekin.

Bir kez geçtikten sonra, sol pulmoner arteri tıkamak için dikişi sıkın ve forseps ile bir arada tutarken kalan dikişleri kesin. Kaburgaları dikin. Cildi gevşek bir şekilde dikmemeye özen göstererek.

Daha sonra kaburgaları kapatacak kare bir düğüm atın. Ventilatör ekspiratuar hattını kısa bir süre tıkayarak akciğeri hiper şişirin ve ardından dikişi sıkın. Uçları kesmeden önce başka bir tam düğüm atarak dikişi sabitleyin.

Ekspiratör ucu basıncını çıkarın ve akciğerlerin çökmemesini sağlamak için 30 saniye izleyin. Son olarak, beş damla uygulayın. Bupivakain, cildi doku tutkalı ile kapatın.

Flor gazını kapatın, ancak spontan solunum sabit bir duruma dönene kadar fareyi oda havasında bir ila iki dakika havalandırmaya devam edin. Ardından, trakeal tüpü ventilatörden ayırın ve çıkarmadan önce farenin kendiliğinden nefes aldığından emin olun. Önümüzdeki 24 saat boyunca periyodik olarak lokal bir analjezik uygulayın.

Son olarak, merhemi gözlerden silin ve istenen zamanda iyileşene kadar hayvanı izleyin. İskemi sonrası noktalara işaretli mikroküreler enjekte edilebilir. Bronşiyal perfüzyonun büyüklüğünü değerlendirmek için, etiketli mikroküreleri sol karotis artere sabit bir hızda iletmek için küçük hacimli bir infüzyon pompası kullanılır.

Kateteri künt 25 gauge bir iğneye ve dört bir musluka bağlayın. Başlamak için daha önce gösterilen cerrahi hazırlıkları takip edin. Hazır olduğunuzda, boyun boyunca orta hat üzerinde bir kesi yapın.

Trakea ve sol karotis arteri ortaya çıkarmak için dokuyu inceleyin. Karotis arterin altındaki iki sütürü geçtikten sonra izole ettikten sonra, proksimal sütürü sıkıca bağlayın. Daha sonra, arterde küçük bir kesi yapın ve tuzlu su dolu bir kateter yerleştirin.

Bunu yukarı akış sütürü ile yerine sabitleyin. Bu vasküler alçı, akciğerdeki bronşiyal anjiyogenezin dikkate değer bir görselleştirmesini sağlar. Burada sol pary arter ligasyonundan 28 gün sonra, asyondan üç gün sonra sol akciğerden bir hava yolu kesiti gösteriliyor.

Hava yolu duvarı içinde bulunan kırmızı kan hücreleri ile dolu iki belirgin bronşiyal damara dikkat edin. İç kısım, bronşiyal arterin proliferatif endotel hücrelerini gösterecek şekilde boyanır. Bu örnek, ligasyondan 14 gün sonra alınan bir sol akciğer bölümünü göstermektedir.

Bu zaman noktasında bronşiyal damarların artan boyutuna ve sistemik perfüzyonun büyüklüğünü değerlendirmek için kullanılan solmuş pulmoner arter floresansına, saf sıçanların sol akciğerinde neredeyse hiç tespit edilmediğine dikkat edin. Bununla birlikte, sıçanlardan sol akciğerde ölçülen önemli, anlamlı ve tutarlı bir seviye vardı. Ligasyondan 14 gün sonra incelendi Bir kez ustalaştı.

Bu teknik, uygun şekilde yapılırsa bir saatten daha kısa sürede yapılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, fareyi nasıl entübe edeceğinizi, torakotominin nasıl gerçekleştirileceğini ve pulmoner arterin nasıl başarılı bir şekilde bağlanacağını iyi anlamış olmalısınız. Sonuç değişkeninize bağlı olarak, sol karotis arteri kanüle edebilmeli ve perfüzyon analizi için etiketli mikroküreleri infüze edebilmelisiniz.