Name: Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Keşfedin fare karotis arterine stent implantasyonu tekniğini, damar duvarı reaksiyonlarını ve restenoz mekanizmalarını incelemek için. Bu yöntem, ilaç salınımlı stentlerin etkilerini hızlı ve güvenilir şekilde araştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz plastik gömülü stent kesit en mükemmel teknik yardım için Bayan Angela Freund teşekkür ederim. Biz immünhistokimya boyama ile profesyonel yardım için de Bayan Roya Soltan ve Bayan Angela Freund teşekkür ederim.

1. Stent hazırlanması ve İmplantasyon <ol><li> Stent-dikmeler (Fort Wayne Metal, Castlebar, İrlanda) örgülü ve daha sonra Tekstil Teknolojisi ve Makine Mühendisliği, Almanya RWTH Aachen Üniversitesi (Şekil 1A) Enstitüsü&#39;nde istediğiniz boyuta kesti. </li><li> Implantasyondan önce, stentler forseps kullanılarak, 2 cm silikon tüp içine transfer edilir ve (Şekil 1A) ön uç adlandırılan, bir terminal ucunda en az 2 mm yerleştirilir. </li><li> Ön uç implantasyon için keskin bir uç sağlamak için, eğik olarak kesilmelidir. </li><li> Implantasyon önce, stent kayma sağlamak için, bol sulu olmalıdır. </li></ol> 2. Stent İmplantasyonu <ol><li> 10-12 haftalık erkek C57BL / 6 yabanıl tip fareler, 25-27 gram 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile anestezi uygulanır. Uygun anesthetization refleksleri eksikliği ameliyat öncesinde doğruladı ve birsakal hareket. Anestezi altında, fare göz bepanthene krem ​​bir film kapsamındadır ise kuruluğu önlemek için. </li><li> Tıraş ve ventral boyun bölgesinde uygun dezenfeksiyon sonra, 1 cm küçük bir medyan kesi makas kullanarak, bir stereo mikroskop altında yapılır. Steril kavisli bir forseps ile 2 yağlı Oluşumu ayrıldıktan sonra, sol ortak karotid arter, trakea ile birlikte darbe görülebilir. </li><li> 1 sol karotis arter cm ve çatallanma ücretsiz hazırlıklı olmalıdır. 5/0 ipek iplik kullanarak 1 düğüm sol karotis arter etrafında bağlı olacak, 7/0 ipek ipler kullanarak 2 knot sol eksternal karotis arter etrafında bağlı olacak ve 7/0 ipek iplik kullanarak 1 düğüm bağlı olacaktır internal karotis arter etrafında (Şekil 1B). </li><li> Kan akışı daha sonra sıkıca yanı sıra, düğüm çevre çekerek dahili karotid arter ve harici karotid arter proksimal düğümlendiği bağlayıcı kesintiyekarotis arter ing. Geminin ortak ve dış karotid arter düz bir çizgi olan bir şekilde sabit olmalıdır. </li><li> Eksternal karotid arter küçük bir kesi bir Vannas makas kullanarak, proksimal düğüm yakın yapılır. Stent içeren silikon tüp bir kılavuz-tel kullanarak, önünde keskin ucu, dış karotis arter içine tanıtıldı. Stent istenilen konuma ulaştıktan sonra, silikon tüp kılavuz-tel üzerinden geri çekti ve stent (Şekil 1B) şekli-bellek genişletme izin verir. </li><li> Eksternal karotid arter distal düğüm böylece kan akışını geri, kesi ve iç ve karotis arter knot site kaldırılır close sıkıca bağlamak edilir. </li><li> Cilt kesisi 3-4 Michel dikiş klipleri ve Michel forcep kullanılarak kapatılır. Fare tam iyileşme kadar kırmızı ışık altına yerleştirilir. Bir analjezik tedavi gerekli değildir. </li><li>Plak 1-3 hafta sonra analiz edilebilir. Yeniden endotelizasyon incelemek için, önceki bir son zaman noktası gerekli olduğu (3-4 gün). Biz 4 hafta Bu cerrahi girişim sonrasında, özellikle minyatür stent biofunctionalize özgü kaplama kullanılarak, neoangiogenesis numunenin yaklaşık% 30&#39;unda oluşur stent bizim modelinde gözlenen. Bu farklı mekanizmaları ve başka bir patolojik sorun temsil ile, yeniden ve rejeneratif süreçleri için bir arka olan. Stent implantasyonu sonrası 3 hafta bir son zaman noktasında neoangiogenesis başlangıcı neden olduğu rejeneratif etkileri ile karıştırmak için değil faydalı olacaktır bu yan etkilerinin altında yatan mekanizmaları neointima oluşumu, in-stent darlık ve / veya analiz konsantre. </li></ol> 3. Plak oluşumu analizi <ol><li> Son zaman noktasında, hayvanlar 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile anestezi uygulanır.Uygun anesthetization refleksleri ve sakal hareket eksikliği ameliyat öncesinde onaylanır. </li><li> Hayvanlar kalp içindeki kesilmesi ile öldürüldü. Kan serumundaki daha fazla analiz için toplanır. </li><li> Göğüs boşluğu açılması ve PBS% 4 paraformaldehid (PFA) çözümü ile kalp içindeki ponksiyon, bir vücut perfüzyon ile yıkandıktan sonra 5 dakika boyunca gerçekleştirilir. Stent içeren sol karotid arter, parçalara doğrudan bir% 4 PFA bir çözeltiye yerleştirilmiş ve en az 16 saat sonra plastik embbeded edilir. </li><li> 50 mikron kalınlığında kesitler gördüm bir elmas bant ile plastik-gömülü örneklerinden yapılmaktadır. </li><li> Plak boyutunu ölçmek için, Giemsa boyama yapılır. </li><li> Kabın stentli alanı içinde yeniden endotelizasyon oranını incelemek için, von Willebrand faktörü (vWF) için immünohistokimya gerçekleştirilir. </li></ol>

<ol><li>Ross, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+to+injury+and+atherogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Response to injury and atherogenesis.</a> Am. J. Pathol. 86, 675-684 (1977).</li>
<li>Virmani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+the+vulnerable+plaque%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Pathology of the vulnerable plaque.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 47, 13-18 (2006).</li>
<li>Farb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+acute+and+chronic+coronary+stenting+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Pathology of acute and chronic coronary stenting in humans.</a> Circulation. 99, 44-52 (1999).</li>
<li>Weber, C., Noels, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis%3A+current+pathogenesis+and+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis: current pathogenesis and therapeutic options.</a> Nat. Med. 17, 1410-1422 (2011).</li>
<li>Lenzen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+and+outcome+of+patients+with+established+coronary+artery+disease%3A+the+Euro+Heart+Survey+on+coronary+revascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Management and outcome of patients with established coronary artery disease: the Euro Heart Survey on coronary revascularization.</a> Eur. Heart J. 26, 1169-1179 (2005).</li>
<li>Babapulle, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hierarchical+Bayesian+meta-analysis+of+randomised+clinical+trials+of+drug-eluting+stents%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">A hierarchical Bayesian meta-analysis of randomised clinical trials of drug-eluting stents.</a> Lancet. 364, 583-591 (2004).</li>
<li>Wiviott, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intensive+oral+antiplatelet+therapy+for+reduction+of+ischaemic+events+including+stent+thrombosis+in+patients+with+acute+coronary+syndromes+treated+with+percutaneous+coronary+intervention+and+stenting+in+the+TRITON-TIMI+38+trial%3A+a+subanalysis+of+a+randomised+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Intensive oral antiplatelet therapy for reduction of ischaemic events including stent thrombosis in patients with acute coronary syndromes treated with percutaneous coronary intervention and stenting in the TRITON-TIMI 38 trial: a subanalysis of a randomised trial.</a> Lancet. 371, 1353-1363 (2008).</li>
<li>van Werkum, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+coronary+stent+thrombosis%3A+the+Dutch+Stent+Thrombosis+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Predictors of coronary stent thrombosis: the Dutch Stent Thrombosis Registry.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 53, 1399-1409 (2009).</li>
<li>Finn, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+responses+to+drug+eluting+stents%3A+importance+of+delayed+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Vascular responses to drug eluting stents: importance of delayed healing.</a> Arterioscler. Thromb Vasc. Biol. 27, 1500-1510 (2007).</li>
<li>Joner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+drug-eluting+stents+in+humans%3A+delayed+healing+and+late+thrombotic+risk%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 48, 193-202 (2006).</li>
<li>Cines, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+cells+in+physiology+and+in+the+pathophysiology+of+vascular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders.</a> Blood. 91, 3527-3561 (1998).</li>
<li>Hristov, M., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progenitor+cells%3A+characterization%2C+pathophysiology%2C+and+possible+clinical+relevance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Mol.+Med%22%5BJournal%5D)">Endothelial progenitor cells: characterization, pathophysiology, and possible clinical relevance.</a> J. Cell Mol. Med. 8, 498-508 (2004).</li>
<li>Rabelink, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progenitor+cells%3A+more+than+an+inflammatory+response%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb.+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Endothelial progenitor cells: more than an inflammatory response?</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24, 834-838 (2004).</li>
<li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+evaluation+of+drug-eluting+stents+for+peripheral+applications%3A+recommendations+from+an+expert+consensus+group%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Preclinical evaluation of drug-eluting stents for peripheral applications: recommendations from an expert consensus group.</a> Circulation. 110, 2498-2505 (2004).</li>
<li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+neointimal+response+to+coronary+artery+injury+in+pigs+and+dogs.+Implications+for+restenosis+models%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb%22%5BJournal%5D)">Differential neointimal response to coronary artery injury in pigs and dogs. Implications for restenosis models.</a> Arterioscler. Thromb. 14, 395-400 (1994).</li>
<li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restenosis+and+the+proportional+neointimal+response+to+coronary+artery+injury%3A+results+in+a+porcine+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Restenosis and the proportional neointimal response to coronary artery injury: results in a porcine model.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 19, 267-274 (1992).</li>
<li>Ali, Z. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+in-stent+stenosis+in+ApoE+knockout+mice%3A+insights+from+a+novel+mouse+model+of+balloon+angioplasty+and+stenting%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb.+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Increased in-stent stenosis in ApoE knockout mice: insights from a novel mouse model of balloon angioplasty and stenting.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 27, 833-840 (2007).</li>
<li>Chamberlain, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse+model+of+in+situ+stenting%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">A novel mouse model of in situ stenting.</a> Cardiovasc. Res. 85, 38-44 (2010).</li>
<li>Rodriguez-Menocal, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse+model+of+in-stent+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">A novel mouse model of in-stent restenosis.</a> Atherosclerosis. 209, 359-366 (2010).</li>
<li>Costa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalent+immobilization+of+antimicrobial+peptides+%28AMPs%29+onto+biomaterial+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Covalent immobilization of antimicrobial peptides (AMPs) onto biomaterial surfaces.</a> Acta Biomaterialia. 7, 1431-1440 (2011).</li>
<li>Soehnlein, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-derived+cathelicidin+protects+from+neointimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-derived cathelicidin protects from neointimal hyperplasia.</a> Science Translational Medicine. 3, 103ra198(2011).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

In-stent trombozu ve restenoz riskini azaltmak için ve ilaç salınımlı stentler, bir hayvan modelinde stent implantasyonu kolay, basit ve erişilebilir yöntemi için yeni kaplama gelişimini sürdürmek için gereklidir. Fare stent ve bu ilaçların etkinliğini sonra arteriyel yeniden karmaşık mekanizmaları incelemek için ideal bir sistem sağlar. Fare in-stent restenoz için mevcut modeller zordur, yüksek cerrahi beceri gerektiren ve kanama veya felç 17-19 gibi komplikasyonlar açısından yüksek risk anlamına. Örneğin, kabın balon dilatasyon ve daha sonra bir alıcı fare 17. karotid artere stentli kademeli transplantasyonundan sonra bir verici fare göğüs aort içine stent implantasyonu modelinde, pato-mekanizmalarının çalışma değildir sadece donör malzeme alıcı reaksiyonu ile değil, aynı zamanda vaza vazorum ve adventisyanın büyük zarar etkilenmiştir. Bir paslanmaz Stee implantasyonubalon dilatasyon-19 hemen sonra abdominal aort içine l stent nedeniyle Arteriyotomi sitede abdominal aorta tromboz veya kanama sonra arka bacak felç gibi yüksek bir mortalite oranı (% 35) takip etmektedir. Bir spiral şekilli femoral arter 18 ile abdominal aort içine nitinol-stent kendini genişletme İmplantasyon körü körüne sağ tarafta stent yerleştirmek için aorta femoral arterden dallanma birlikte stent yönlendiren çoğunlukla nedeniyle yüksek cerrahi beceri, ihtiyacı var. Bu prosedür, arka bacak yüksek bir femoral sinir hasar görme tehlikesi, bu nedenle felç tarafından takip edilir. Bu işlemler ile karşılaştırıldığında, fare stent implantasyonu bizim model yüksek cerrahi beceri gerekmez. Bizim modeli arter yeniden farklı ilaç-kaplama etkilerini analiz etmek için basit, kolay ve etkili bir yöntem sunuyor, stent yerleştirilmesi görüş altında yapılan ve zarar sinirler ya da diğer yapıların hiçbir risk söz konusudur. Comkarmaşık moleküler mekanizmaları geminin doğrudan erişim ile sadece, fare karotis arter stent bizim modelinde daha kolay araştırıldı, aynı zamanda farklı knock-out farelerde suşlarının varlığı nedeniyle olabilir. Bir sınırlama olarak, klinik prosedürü ile karşılaştırıldığında, bizim modeli sağlıklı fareler / arterler kullanır ve (değil-stent restenoz, ancak in-stent darlık) önceden var olan plaklar üzerinde stent gerçekleştirmez. Ayrıca stent-implantasyon öncesinde balon-dilatasyon yapmazlar. Bununla birlikte, her iki modelde de damar duvarının büyük hasar nedeniyle, reparatory süreç aynıdır. Ne yazık ki, metal türetilmiş eserler, neointimal büyümesinin in vivo izlenmesinde bir ultrason veya bilgisayar tomografisi gibi mevcut görüntüleme yöntemleri ile mümkün değildir. Başka bir sınırlayıcı faktör metal işleme bazı uzmanlık gerektiren metal bazlı stentlerin ince kesit vardır. Bu yöntemi kullanarak, biznötrofil-talimat LL-37 girişimsel tedavi 21 sonrası vasküler iyileşmesini sağlamak için yeni bir kavram sağlayan, restenoz-stent içinde azaltmak kaplı nitinol-stent minyatür biofunctionalized olduğunu, göstermek mümkün. Bu kısıtlamalara rağmen, bu model, şimdiye kadar, en uygun sistem olarak böylece para ve zaman tasarrufu, arteriyel yeniden sırasında moleküler olaylar stent ve etkileri için yeni ilaç-kaplamalar araştırmak gibi görünüyor. Ayrıca, bu model kolaylıkla her terapötik hipotez daha büyük bir hayvan ya da hoş olmayan ve beklenmedik etkileri önlemek için, insan için uygulamadan önce kontrol edilebilir, böylece, insan daha benzer hamster, adapte edilebilir.

Aterosklerozun ilerlemesini neden Kardiyovasküler hastalıklar sanayileşmiş ülkelerde önde gelen ölüm nedenidir. Ateroskleroz koroner damar yoluyla kan akışını etkileyen damar lümeni içine bir uzun plak oluşumu ile sonuçlanan endotel hasar 1 damar duvarının bir odak, enflamatuar fibro-proliferatif cevap, vardır. Iltihaplı plak 2 ince fibröz kapak rüptürü miyokard enfarktüsü sonucu% 75 üzerinde. Bu komplikasyon ölümcül olabilir bu yana, stent implantasyonu ile perkütan (koroner) anjiyoplasti (PTCA) Mevcut tıbbi uygulamada ilk tedavi seçeneği haline gelmiştir. Yöntem daralmış koroner arterin genişlemesi ve böylece kan akımının restorasyonu sağlar. Aynı zamanda, bu endotel ve damar duvarı 3&#39;e kadar bir oranda yaralanmasına neden olmaktadır. Bununla birlikte, bu tedavinin uzun süreli etki, bir aşırı arteryel remode ile sınırlıdırling ve restenoz 4. Stentler istihdam, PTCA akut damar kapanması sonra 5 revaskülarizasyon sağlayan karmaşık lezyonların tedavisinde daha etkili olmuştur. Bu yöntem, en az 10% 6 ile in-stent restenoz olayını azaltır. Bu avantajları yanında, koroner revaskülarizasyon için ilk seçenek tedavisi de in-stent trombozu ve restenoz yaşamı tehdit eden riskler taşımaktadır. In-stent trombozu trombositler ve yaralı sitesine fibrin büyük bir yapışma takip geminin bir de-endotelizasyon, neden olur. Hastaların% 26 in-stent trombozu ve miyokard infarktüsü 7 63% die muzdarip. Restenoz neointimal hiperplazi (göç ve çoğalması damar düz kas hücrelerinin (VSMC), hücre dışı matriks (ECM) birikimi ve yeniden içeren, damar duvarına mekanik yaralanma sonrası yara iyileşme sürecini ifade ederGeminin. Çoğu zaman, bir invazif yeniden girişim in-stent restenoz tromboz ve nedeniyle ciddi bir şekilde daralmış aterosklerotik damar dilatate için gerekli hale gelir. In-stent trombozu engellemek için, bir anti-trombotik bir ilaç ile uzun süreli tedavi 8 gereklidir. Restenoz önlemek için, ilaç salınımlı stentlerin yeni nesil bu birkaç ay 9,10 için bir polimer kaplama immünsupresif ilaçlar (örneğin sirolimus, everolimus, zotarolimus) ve anti-kanser ilaçlar (örneğin paklitaksel) gibi anti-proliferatif maddeler Zehir. Bu ilaçların neointima oluşumunu ve restenoz rağmen, inhibe yeniden endotelizasyon tarafından in-stent tromboz riski yüksek korur. Arteryel yaralanma sonra endotel bölmesinin bakım trombotik komplikasyonların önlenmesi için gereklidir. Fizyolojik koşullar altında, insan endotel küçük bir devir hızı 11 göstermektedir. Patoloji altındaogical koşullar, ancak endotelyal bütünlüğü olgun endotel hücreleri çevreleyen ve endotelyal progenitör hücreleri (EPC) dolaşan tarafından hızlı bir iyileşme 12,13 gereklidir, böylece bozulur. Büyük hayvanların 14-16 ya da fare aort arterde bu karmaşık moleküler mekanizmaların çalışma sınırlı veri 17-19 sunan, çok zor bir işlemdir. In-stent trombozu ve restenoz yeni modeller azaltmak için yeni stent-kaplama etkinliğini test etmek için zorunludur. Nitinol çünkü başarılı bir klinik kullanımda çıplak metal stent olarak kullanılan onun &#39;yüksek elastikiyet, şekil hafıza etkisi ve hastada iyi tolerans, bir stent için ideal bir platform temsil eder. Bu alaşım 20 kaplı ve farelerin karotid artere implante edilebilir 500 mikron, bir dış çapa sahip bir minyatür stent oluşturmak mümkün kıldı. Fare c için bir minyatür nitinol stent gelişimiarotid arter, stent implantasyonu ile oluşturulan hassas moleküler mekanizmalarının çalışma sağlar ve restenoz önlemek için hızlı ve verimli bir farklı ilaç-kaplamaların etkilerini test imkanı sunuyor. Ayrıca, farklı knock-out fareler suşları varlığını neointima büyüme ve in-stent trombozu yer alan farklı moleküllerin rolünü açıklığa kavuşturulması büyük bir avantaj sağlar.

<table><tbody><tr><td>nitinol-stentler (nitinol-payandalardan kendi kendine yapılan)</td><td>Fort Wayne Metals, Castlebar, İrlanda NiTi # 1, süper elastik, düz tavlanmış, hafif oksit, çap 500 & # 956; m</td><td>ısmarlama ürün</td><td>Tekstil Teknolojisi ve Makine Mühendisliği Enstitüsü</td></tr><tr><td>silikon tüp</td><td>IFK Isofluor, Almanya</td><td>ısmarlama ürün</td><td>çapı 500 &mu; m, kesit kalınlığı 100 &mu; m, politetrafloretilen kateter</td></tr><tr><td>stereomikroskop</td><td>Olympus</td><td>SZ/X9</td><td></td></tr><tr><td>forseps</td><td>FST, Almanya</td><td>91197-00</td><td>standart uç kavisli 0.17 mm</td></tr><tr><td>Ketamin %10</td> <td>CEVA, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin %2</td> <td>Medistar, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene</td><td>Bayer, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>FST, Almanya</td><td>91460-11</td><td>Düz</td></tr><tr><td>Vannas makas</td><td>Aesculap, Almanya</td><td>OC 498 R</td><td></td></tr><tr><td>5/0 İpek</td><td>Seraflex</td><td>IC 108000</td><td></td></tr><tr><td>7/0 İpek</td><td>Seraflex</td><td>IC 1005171Z</td><td></td></tr><tr><td>kılavuz tel</td><td>Abbott Vascular</td><td>1001782-HC</td><td>0.014 inç anjiyoplasti kılavuz tel</td></tr><tr><td>Michel sütür klipsleri</td><td>Aesculap, Almanya</td><td>BN507R</td><td>7,5 x 1,75 mm</td></tr><tr><td>Michel Forcep</td><td>Aesculap, Almanya</td><td>BN730R</td><td></td></tr></tbody></table>

restenoz Çalışmaları karotis arter stent İmplantasyonu bir murin modeli

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Son yıllarda stent geliştirmeye yapılan önemli gelişmelere rağmen, kalp-damar hastalıkları batı ülkelerinde ölümlerin ana nedeni olmaya devam etmektedir. Farklı ilaç salınımlı stentlerin geliştirilmesi sunduğu faydaları yanında, koroner revaskülarizasyon da in-stent trombozu ve restenoz yaşamı tehdit eden riskler taşımaktadır. Yeni tedavi stratejileri Araştırma stent ve restenoz süreçleri incelemek için uygun yöntemlerin eksikliği bozulur. Burada, gemi yeniden ve farklı ilaç kaplamaların etkileri moleküler mekanizmaları uygun bir şekilde çalışma imkanı sunuyor fare karotid arter, stent implantasyonu hızlı bir ve erişilebilir prosedürü açıklar.

<ol><li> Farelerin sol karotis arter içine bir minyatür nitinol stent implantasyonu 25-30 dakika sürer ve müdahale sırasında geminin hasar çoğunlukla nedeniyle% 10 ölüm oranı gösterir. Daha iyi bir yaşam oranı stent implantasyonu (% 5 ölüm oranı) bir ağırlığı fazla 25 g olan farelerde görülmektedir. Bu nedenle, 25-27 gr arası ağırlıkta implantasyon fareler için seçti. Ameliyattan sonra, fareler, 2-5 dakika ve örneğin felç gibi bir fiziksel yetersizliği, içinde anestezi kurtarmak gözlenmektedir. Stent implantasyonu stent kan akımı (Şekil 1C) tarafından yerinden olmadığını gösterdi sonra mikro-bilgisayarlı tomografi (Mikro-CT) görüntüleme bir hafta yapıldı. Ne yazık ki, bu görüntüler neointima oluşumunun analizleri metal türetilmiş eserler (Şekil 1D, 1E) nedeniyle mümkün değildir. </li><li> Biz hemen stent altında, geminin unstented alan herhangi bir gemi ya da endotel hasar görülmedi, (Şekil 2A) ile histolojik ve endotelin için spesifik boyama (Şekil 2B, anti-fare CD31 antikor) ile saptanabilir. Daha iyi bir bakış için, bölüm iki foton lazer tarama mikroskobu (Şekil 2B, 2C) ile taranmıştır. </li><li> 25-27 gr arası ağırlıkta fareler tarafından: stentli damar,% 15 kalıcı dilatasyon (arter, 1,15:1 oranı stent) tespit edilir. Neointima oluşumu ve trombüs oluşumu klasik histolojik boyamaları (örneğin Hematoxilin-eozin, Giemsa, Movat, Toluidin Mavi, Masson-üçlü boyası-Goldner, Şekil 3A, 3B) ile analiz edilebilir. Lamina eksterna ve uluslararası artık görünmez olduğu için, plak boyutu dış farkını ve luminal alanları (: 234566 ± 3315 mikron 2, lümen alanını ortalama: 12036 ± 2.662 mikron 2 plak çevresi mi demek) olarak hesaplanmıştır. Dış çevresi de (: 1.799 ± 14 mikron ortalama) ölçüldü. Analizi içinhücresel kompozisyon, bölümleri belirli işaretleri ile deplastified ve lekeli gerekir. Yeniden endotelizasyon için, bir Cy3-konjüge anti-CD31 antikoru kullanılmıştır ve düz kas hücre çoğalmasının bir FITC-konjuge anti-SMA antikoru (Şekil 3C) için. Stent implantasyonu bir hafta sonra: Yeniden endotelizasyon toplam luminal yüzeyi (23.07 ± 3.14% ortalama) CD-31 pozitif lekeli yüzdesi olarak hesaplanmıştır. </li></ol> Tabii ki, özel boyama sınırsız sayıda her laboratuvarlar &#39;deneyimine bağlı olarak, mümkündür. Miyozin ağır SMC&#39;lerin daha iyi tanımlanması için zinciri, aynı zamanda infiltre hücreler analizi (monositler, lenfositler) veya farklı enflamatuar sitokinlerin boyamalar analizi, aynı zamanda, çalışmanın amacı bağlı olarak gerçekleştirilebilir. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig1highres.jpg" sr<html> c = &quot;/ files/ftp_upload/50233/50233fig1.jpg&quot; /&gt; Cerrahi işlem Şekil 1. Şematik genel bakış (A). Kan akışı sıkıca yanı sıra ortak karotid arter çevreleyen düğüm çekerek iç karotid arter ve harici karotid arter proksimal düğümlendiği bağlayıcı ile kesilir. Stent içeren silikon tüp harici karotid arter küçük bir kesikten dış karotis arteri içine yerleştirilir. Stent istenilen konuma ulaştıktan sonra, silikon tüp kılavuz-tel üzerinden geri çekti ve stent şekli-bellek genişletme izin verir. Cerrahi implantasyon (B) bir hafta sonra stent konumunu gösteren mikro-BT görüntüleri. Malzeme türetilmiş eserler nedeniyle, neointima büyüme analizi (C, D) mümkün değildir. 3fig2highres.jpg &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/50233/50233fig2.jpg &quot;/&gt; Şekil 2,. Teknenin Unstented alanı Toluidin Mavisi (A) ve endotel spesifik boyama CD31 (B, C) ​​ile gösterildiği gibi, cerrahi işlem ile etkilenmez. <img alt="Şekil 3," fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3.jpg" /> Şekil 3,. Plak analizi klasik histolojik boyamalar (örneğin, Masson-üçlü boyası-Goldner) (A) tarafından gerçekleştirilebilir. Organize trombüs bazı durumlarda, teknenin bir şekilde kapanmasına (B) görülmektedir, neointima içinde siyah boyalı fibrin çökelme ile tespit edilebilir. Yeniden endotelizasyon (Cy3, kırmızı) veya düz kas hücre çoğalması (FITC, yeşil) özel işaretleri kullanarak çift immünofloresan boyama ile tespit edildi.Counterstaining 4 &#39;,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI, mavi) (C) ile gerçekleştirildi. Biz (sağ, tek ok) yeniden endotelizasyon bir eksikliklerinin lümen göre stent dikmeler tamamlanmış bir yeniden endotelizasyon (sol, çift ok) fark ettim.

Fare karotis arter stent implantasyonu bir modeli açıklanmıştır. Diğer benzer yöntemlerle karşılaştırıldığında, bu işlem için uygun bir yol farklı ilaç salınımlı stent ve restenoz moleküler mekanizmaları için damar duvarı tepki olarak çalışma imkanı sunan, çok hızlı, basit ve erişilebilir.

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Bu prosedürün genel amacı, damar yeniden şekillenmesinin veya farklı ilaç kaplamalarının etkilerinin incelenmesine olanak tanıyan bir stenti fare karotis arterine yerleştirmektir. İlk olarak, stent bir silikon tüpe aktarılarak implantasyon için hazırlanır. Ardından, ortak arter izole edilir ve kan akışını kesmek için sütürler yerleştirilir.Ardından stent, eksternal karotis arter üzerindeki küçük bir insizyondan içeri yerleştirilir. Yerleştirme işlemi tamamlandıktan sonra silikon tüp ve kılavuz tel çıkarılarak stent, komon karotis arterde bırakılır. Son aşamada, plak oluşumunun analizi için örnekler gemsa ile boyanır.Anlık restenoz için mevcut modeller zordur; hassas cerrahi beceriler gerektirirler ve yaygın komplikasyonlar arasında yırtılma veya felç yer alır. İmplantasyon prosedürü boyunca stent görünür tutularak komplikasyon riski modelimizde minimize edilmiştir. Bu prosedürün bazı kısımları, laboratuvarımızdan doktora sonrası araştırmacı Dr. Simsek tarafından gerçekleştirilecektir.Stentin kartilaj arterine implantasyonunu göstereceğim. Pens kullanarak stenti iki santimetrelik bir silikon tüpe aktararak başlayın. Ön uçtan iki milimetre önce duracak şekilde, tüpün açık ucu daha kolay implantasyon için diyagonal olarak kesilmelidir; yerleştirmeyi kolaylaştırmak için implantasyon öncesinde stenti nemlendirin.Ardından, yetişkin erkek farede anestezinin uygun derinliğini doğrulayın. Gözlere koruyucu merhem uyguladıktan sonra, boynun ventral bölgesini tıraş edin. Daha sonra, stereo mikroskop altında çalışarak uygulama alanını Betadine ve alkolle tekrarlanan silme işlemleriyle temizleyin.Bölgenin üzerine makasla küçük bir medyan insizyon yapın. Sol ortak karotis arteri izole edilene kadar yağ ve dokuyu ayırın. Görüntülendiğinde, bifurkasyonun yaklaşık bir santimetre uzağından ortak arterin etrafına bir sütür bağlayın.Eksternal karotis arterinin etrafına iki sütür bağlayın ve stent implantasyonuna olanak sağlamak için distal düğümü gevşek bırakın. Ardından, internal karotis arterinin etrafına bir sütür bağlayın. Sütürler sabitlendikten sonra, eksternal arterde proksimal düğümün yakınına küçük bir insizyon yapın.Bir kılavuz tel kullanarak, stenti içeren silikon tüpü yerleştirin. Yerine oturduğunda, stentin genişlemesini sağlamak için silikon tüpü çıkarın. Ardından, eksternal karotis arter üzerindeki distal düğümü sıkın ve kan akışını yeniden sağlamak için internal ve komun karotis arter üzerindeki sütürleri çıkarın.Kesi alanı sütür klipsleri ile kapatın ve hayvanı bir ısıtma lambasının altına yerleştirin. Tamamen iyileşene kadar bekleyin. Stent implantasyonundan sonraki farklı zaman noktalarında plak oluşumu incelenir.Ötenazi ve transkardiyal perfüzyonun ardından, önce sol karotis arterini izole edin ve stent içeren kısmı çıkarın. Örneği %4'lük PFA solüsyonuna yerleştirin. En az 16 saat sonra, örneği burada gösterildiği gibi plastiğe gömün.Elmas şerit testere ile 50 mikrometre kalınlığında kesitler alındıktan sonra, plak oluşumunu değerlendirmek amacıyla gem koruma işlemi gerçekleştirilmiştir. Stent implantasyonundan bir hafta sonra yapılan mikrobilgisayarlı tomografi görüntülemesi, stentin kan akımıyla yer değiştirmediğini göstermiştir. Odin mavisi ve endotel spesifik CD 31 boyamasıyla gösterildiği üzere, damarın stentlenmemiş bölgelerinde damar veya endotel hasarına rastlanmamıştır; plak oluşumunun derecesini incelemek için histolojik boyama kullanılmıştır.Burada stent, neointima içindeki siyah boyanmış fibrin olarak görülmektedir. Bazı vakalarda, damarın tamamen tıkandığı gözlemlenir. Stent desteklerinin reendotelyalizasyonu solda çift okla, lümenal reendotelyalizasyonun tamamlanmadığı durum ise sağda tek okla gösterilmiştir.Bu prosedürü uygularken, kurumasını önlemek ve stentle manipülasyonu kolaylaştırmak için çalışma alanının sürekli olarak ıslatılması gerektiğini unutmamak önemlidir.

a-murine-model-stent-implantation-carotid-artery-for-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video stent restenoz gelişimi pathobiological ve patofizyolojik süreçleri incelemek için ucuz ve güvenilir bir preklinik modeli nasıl kullanılacağını gösterir. OCT (Optik Koherens Tomografi) ve OCT görüntüleri analizi kullanarak in vivo izleme Boyuna da göstermiştir.

Görüntüleme-stent restenoz: Ucuz, güvenilir ve hızlı bir Preklinik Modeli

Bu video, immün yetmezlik modelindeki bir sıçanda, insan damarı (IMA) kullanılarak stent yerleşimi sonrası intimal hiperplazi gelişimini inceleyen bir modeli göstermektedir.

İnsan internal meme arter (İMA) Transplantasyon ve Stent: In-Stent Restenozis Geliştirme Eğitim Bir İnsan Modeli

Anevrizma endogreft dışlama sonra histolojik ve biyokimyasal değişiklikler hala belirsiz. Bir fare anevrizma üzerinde endogreft implantasyon yeni bir model tarif. Kalıcı dolaşan kan akışı arayüzü ve yeni endovasküler biyomalzemeler değerlendirme olan ve olmayan trombüs analizi sayesinde, bu model daha iyi endovasküler anevrizma dışlama patobiyolojisi anlamanıza yardımcı olacaktır.

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Aşağıda açıklanan sıçan karotis balon yaralanması modeli, araştırmacıların yaralanmaya bağlı arteriyel hiperplaziyi ortadan kaldıran ilaçları veya terapötikleri değerlendirmesine olanak tanır. Hayvanın ameliyat öncesi detaylı hazırlığı, cerrahi prosedürü ve ameliyat sonrası bakımları anlatılır.

Rat Karotis Balon Yaralanma Modeli Anti-vasküler Tadilat Therapeutics Test

Bu çalışmada farelerde hızlandırılmış ateroskleroz indüksiyonu için invaziv bir prosedür açıklanmaktadır. Elektrik veya kriyo kaynaklı yaralanma yöntemi ile karşılaştırıldığında, mekanik kaynaklı yaralanma revaskülarizasyon tedavileri sonrası restenoz insan durumunu taklit eder ve ilgili moleküler mekanizmaların çalışması için idealdir.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Kardiyovasküler prosedürleri takiben yapılan restenoz (baypas cerrahisi, anjiyoplasti veya stentleme) bu prosedürlerin dayanıklılığını azaltmakta önemli bir sorundur. İdeal bir terapi düz kas hücresi (VSMC) proliferasyonunu inhibe ederken endotelin rejenerasyonunu teşvik eder. VSMC çoğalması ve endotel fonksiyonunun in vivo olarak eşzamanlı olarak değerlendirilmesi için bir model tanımlıyoruz.

Murin Aort Kırma Yaralanması: Verimli<emIn vivo</em&gt; Düz Kas Hücresi çoğalması ve Endotel Fonksiyon Modeli

Reproducable deneysel hayvan modelleri intrakranial anevrizma (IA) Endovasküler tıkanıklığı tedavisi için tasarlanmış roman embolizasyon malzemelerin test etmek için ihtiyaç vardır. Bir sıçan hayvan modelinde saccular Anevrizmalarının destekli stent embolizasyon için güvenli ve standart cerrahi tekniği geliştirmek mevcut çalışma amaçlamaktadır.

Bir sıçan modelinde - cerrahi tekniğin getirilmesi Saccular Anevrizmalarının biyobozunur magnezyum Stent tedavisi

Sıçan şahdamar balonu yaralanması, aterosklerotik damarlarda kan akışını geri kazanmak için yapılan klinik anjiyoplasti prosedürünü taklit eder. Bu model, arteriyel duvarı dağıtarak ve endotel hücrelerinin intimal tabakasını indirgeyerek arteriyel yaralanma yanıtını indükler, sonuçta yeniden şekillendirmeye ve intimal hiperplastik yanıta neden olur.

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Bu protokol, insan koroner stentlerin trans-femoral erişim kullanılarak apoE-/- arka plan ile sıçanların karın aortuna implantesini açıklar. Diğer hayvan modelleriyle karşılaştırıldığında, murine modelleri yüksek verim, tekrarlanabilirlik, kullanım ve muhafaza kolaylığı ve moleküler belirteçlerin geniş bir kullanılabilirliği avantajlarını taşır.

Trans-Femoral Erişim Kullanılarak İnsan Büyüklüğünde Koroner Stentlerin Rat Abdominal Aort'a yerleştirilmesi

Bu protokol, tek bir cerrahi operasyonla bir murin modelinde karotis anevrizmalarının indüklenmesi için standart bir cerrahi yöntemi tanımlamaktadır.

Karotis Anevrizması Oluşumunun Bir Murin Modeli

Keşfedin fare karotis arterine stent implantasyonu tekniğini, damar duvarı reaksiyonlarını ve restenoz mekanizmalarını incelemek için. Bu yöntem, ilaç salınımlı stentlerin etkilerini hızlı ve güvenilir şekilde araştırır.

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Daha fazla video keşfet