Çözelti konsantrasyonunun ardındaki kavramları anlamak ve laboratuvarda hacim ölçümü yapmak, hemen hemen her deneyin iki önemli yönüdür.
Çözeltiler, homojen bir karışım elde etmek için bir çözücünün içinde çözünmüş bir çözünenden oluşur.
Çözeltiler genellikle bileşenleri ve bunlara karşılık gelen konsantrasyonları ile tanımlanır.
Doğru çözelti konsantrasyonuna sağlıklı bir şekilde ulaşmak için, hacim ölçümleri için mevcut olan birçok farklı kaba aşina olmanız gerekir.
Hacim ölçümü sırasında yapılan teknik hatalar, yanlış konsantrasyonlara yol açabilir ve deneyin başarısı ile başarısızlığı arasındaki farkı belirleyebilir.
Deneyler gerçekleştirilirken, kullanılan çözeltilerin kesin konsantrasyonunun bilinmesi zorunludur.
Konsantrasyon en yaygın olarak molarite şeklinde ifade edilir. Bir molar çözelti, litre başına bir mol çözünen madde içerir (B+C). Laboratuvarda çözeltiler hazırlanırken, çözünen maddenin mol sayısı, molekülün ölçülen kütlesinden ve moleküler ağırlığından belirlenebilir.
Çözeltiler ayrıca, çözücü birim hacmi başına çözünen maddenin ağırlığına göre yüzde konsantrasyonlar şeklinde hazırlanabilir ve miktarlandırılabilir; bu yöntem yüzde ağırlık-hacim çözeltisi olarak bilinir.
Çözünen maddenin bazen sıvı formda olduğunu unutmayın. Bu durumda yüzde konsantrasyon, çözücü birim hacmi başına sıvı çözünen maddenin hacmi olarak ifade edilebilir; buna da yüzde hacim-hacim çözeltisi denir.
Sık kullanım için, stok çözeltiler olarak bilinen kararlı bileşiklerin konsantre çözeltileri hazırlanabilir. Stok çözeltiler, nihai çalışma çözeltisindeki konsantrasyonun bir katı olarak etiketlenebilir. Burada 10X'lik bir çözelti görüyorsunuz.
Bu stok çözeltiler, istenen konsantrasyona ulaşmak için gerektiğinde çözücü ile seyreltilebilir.
Alternatif olarak, paralel seyreltme yöntemi kullanılarak daha konsantre bir çözeltiden bir seyreltme hazırlanabilir. Bu basit hesaplama kullanılarak, bilinen konsantrasyondaki bir stok çözeltiden istenen konsantrasyonda ve istenen hacimde bir çözelti hazırlanabilir. Elde edilen hacim, istenen konsantrasyona ulaşmak için çözeltinin toplam hacmine tamamlanacak şekilde seyreltilebilir.
Ancak bazı durumlarda, nihai hacmin seyreltme için gereken stok çözelti hacmine bölünmesine eşit olan seyreltme faktörü çok büyüktür. Bu durum, gerekli stok çözelti hacminin doğru şekilde ölçülemeyecek kadar küçük olması nedeniyle paralel seyreltmeyi pratik olmaktan çıkarır.
Seri seyreltme tekniği ile, bir stok çözelti kullanılarak seyreltik bir çözelti hazırlanabilir; bu çözelti daha sonra istenen konsantrasyona ulaşana kadar daha da seyreltilerek daha seyreltik çözeltiler elde edilebilir.
Laboratuvarda hacim ölçümü yaparken sıvı tutabilen birçok kapla karşılaşırsınız. Ancak, bu kapların tamamının hacmi doğru şekilde ölçmek için tasarlanmadığını fark etmek önemlidir.
Beherler ve Erlenmeyer flaskları gibi volumetrik olmayan kaplar, çözeltileri karıştırmak ve saklamak için tasarlanmıştır ve genellikle kalibre edilmemişlerdir. Bunun yerine, yan taraftaki ölçümler veya çizgiler, sıvı kapasitesinin yaklaşık değerlerini temsil eder.
Aksine, volumetrik laboratuvar malzemeleri, sıvı maddelerin kesin hacimlerini ölçmek için tasarlanmıştır. Volumetrik laboratuvar malzemeleri, tutmak üzere kalibre edildikleri kapasitenin yanı sıra TC veya TD harfleriyle belirtilir.
TC, "to contain" (içermek için) anlamına gelir ve genellikle kesin bir sıvı hacmini tutmak üzere kalibre edilmiş olan volumetrik flasklar ve mezürlerde bulunur.
TD, "to deliver" (aktarmak için) anlamına gelir ve genellikle pipetler ve şırıngalar gibi sıvı dağıtmak için tasarlanmış ölçüm cihazlarında bulunur.
Volumetrik flasklar genellikle belirli bir konsantrasyondaki çözeltileri hazırlamak için kullanılır. Çözünen madde çözüldükten sonra, toplam hacim mezür çizgisine ulaşana kadar flaska çözücü eklenir. Bu hacme ulaşmak için "yeterli miktar" ekleme işlemine çözeltiyi Q.S.'lemek denir.
Çözelti Q.S.'lendiğinde, sıvının üst kısmı flaskla buluştuğu yerde kavislenir. Yüzey geriliminden kaynaklanan bu kavislenmeye menisküs denir. Sulu bir çözeltide menisküs konkavdır (içbükeydir) ve eğrinin en alt noktasından okunmalıdır.
Belirli sıvı hacimlerini ölçmek ve aktarmak için tasarlanmış birkaç farklı kap vardır. Volumetrik laboratuvar malzemesi seçerken, en yüksek doğruluğu elde etmek için her zaman istenen hacmi karşılayacak en küçük cihazı seçin.
50 mL üzerindeki sıvı hacimlerini ölçerken mezürler uygun seçimdir.
Serolojik pipetler genellikle 0.1 ile 50 mL aralığındaki hacimleri ölçmek ve aktarmak için kullanılır.
0.2 µL ile 5 mL arasındaki hacimler için mikropipetler kullanılmalıdır.
Plastik pipet uçları ölçülecek sıvıyla uyumlu olmadığında, mikrolitre aralığındaki hacimlerin doğru ölçümü için alternatif olarak cam Hamilton şırıngaları kullanılır.
Çözeltilerle çalışmanın temellerini ele aldığımıza göre, bu kavramların bazılarının araştırmalarda nasıl uygulandığını tartışacağız.
DNA jel elektroforezi, negatif yüklü molekülleri deniz yosunundan elde edilen bir karbonhidrat olan agarozdan yapılmış bir jel matrisi boyunca hareket ettirmek için bir elektrik alan uygulayarak, karışık bir DNA fragman popülasyonunu ayırmak ve boyutlarını tahmin etmek için kullanılan bir tekniktir.
Jel matrisi hazırlanırken, %1 ağırlık/hacim oranında agaroz jeller hazırlamak için yaygın olarak ağırlık/hacim yüzde çözeltileri kullanılır.
Genellikle elektroforez, büyük miktarlarda çalışma tamponu gerektirir. Sık kullanımları ve yüksek hacimleri nedeniyle, bu tamponlar genellikle daha konsantre 10x stok çözeltilerden seyreltilir.
İstenen 1x tamponu elde etmek için, bir birim hacimdeki stok çözelti, 9 birim hacim saf su ile seyreltilir.
Mikroplaka okuyucu deneylerinde, bilinmeyen protein örneklerinin konsantrasyonu genellikle standartlar olarak adlandırılan, konsantrasyonları bilinen bir dizi örneğe dayanarak belirlenir.
Kademeli olarak artan konsantrasyonlarda standartlar oluşturmak için sıklıkla seri dilüsyonlar kullanılır; böylece nihayetinde bir standart eğrisi oluşturulabilir ve bilinmeyen örneğin konsantrasyonu belirlenebilir.
JoVE'nin konsantrasyonu anlama ve hacim ölçme konusundaki giriş videosunu izlediniz. Bu videoda konsantrasyon hesaplama, dilüsyon yapma ve hacimlerin ölçülmesinde farklı laboratuvar ekipmanlarının nasıl kullanıldığı gibi bazı temel kavramları gözden geçirdik. Ayrıca, bu videoda sunulan bazı kavramların moleküler biyoloji ve biyokimya alanlarındaki uygulamaları da tartışıldı.
İzlediğiniz için teşekkürler; hacim ölçümü yaparken her zaman doğruluk ve hassasiyete dikkat etmeyi unutmayın.
Çözeltiler, hemen hemen tüm biyolojik araştırma uygulamalarında belirli bir ölçüde kullanılır. Bu nedenle, çözeltilerin nasıl ölçüleceğini ve manipüle…
Bu videodaki bölümler
0:00
Overview
1:02
Quantifying and Diluting Solutions
3:43
Measuring Volumes
6:34
Applications
8:10
Summary
Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.