Name: Septik Artrit Boyuna değerlendirilmesi için MR Hedefli Kontrast Ajan kullanarak in vivo Makrofaj Görüntüleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-20T21:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Öğrenin septik artritli tavşan modelinde USPIO kontrast ajanı ile makrofaj MR görüntüleme yöntemini. Bu teknik, tedavi etkinliğini invaziv olmayan şekilde değerlendirmeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz içtenlikle video prodüksiyon ve düzenleme yardım için F. Bierry teşekkür ederim.

Hayvan denekler üzerinde yapılan tüm işlemler Üniversitesi Hastanesi Kurumsal Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Eklem içi Bakteriyel Aşılama <ol><li> Enjeksiyondan önce, kurucu spinae kas içinde ksilazin (4 mg / kg) ile karıştırıldı ketaminin kas içi enjeksiyonu (30 mg / kg vücut ağırlığı) ile anestetize tavşan. Hayvanların pençe tutam yanıt başarısız kontrol ederek tam anestezi olduğundan emin olun. Bu protokol diz ekleminin eklem içi enjeksiyon için yeterli anestezi sağlar. Anestezi sırasında oksijen maskesi altında hayvanların yerleştirin. </li><li> Hayvanların diz tıraş. Povidon-iyot solüsyonu uygulaması takip povidon-iyot fırçalayın ve alkol 3 alternatif mendil tarafından aseptik enjeksiyon için diz hazırlayın. </li><li> El gösterildiği gibi steril bir iğne kapağı veya steril bir prob kullanarak diz ön yönü bir elastik yapı olarak patellar tendon belirlemek. </li><li&gt; görsel kontrol ile ve anterior yaklaşım kullanarak, patellar tendon ile 12 tavşan her birinin sağ diz perkütan bir 25 G iğne yerleştirin. </li><li> 10 6 arasında bir konsantrasyonda UFC / ml &#39;de Staphylococcus aureus bakteriyel süspansiyon (Neumann suşu) 1 ml&#39; si ile her diz enjekte edilir. Direnci olmayan bir enjeksiyon iğne ucunun eklem içi konumu onaylar. </li><li> Enjeksiyon işlemleri sonra, ısı kaybını önlemek ve göğüs hareketi gözlemleyerek solunum hızı izlemek için konvektif kaynak altında hayvan tutun. Bir kez uyanık, yiyecek ve su ücretsiz erişim ile kafeslerde hayvanlar tutmak. </li><li> 0.1 mg / kg &#39;buprenorfin, her 8 saatte bir kas içi enjeksiyon ile tatbik ağrı yönetme. </li><li> Klinik olarak yiyecek ve su, kilo kaybı, sıcaklık ve genel davranış tüketilen miktarda izlenmesi, her gün tavşan gözlemlemek. </li><li> Görüntü için enfeksiyon akut faz en kısa sürede ilk MR görüntüleme oturumu gerçekleştirmekBir hayvan önemli bir kilo kaybı sunulur olarak (% 10), genel olarak bu yaklaşık 2 gün sonra ortaya çıkar. </li><li> Intravenöz ilaç uygulama MR incelemeden önce gerekiyorsa, bir kulak venöz erişim (bkz. aşağıda) yüklenebilir. </li></ol> 2. MRI Sınav Görüntüleme hayvanlar yaşadığında, dikkatli bir hayvan kurulum hayvan konfor ve en uygun anestezi sağlamak için önemli bir özelliktir. Bu en iyi görüntüleme sonuçları için izin ve uzunlamasına çalışmalar için bir üreme görüntü elde etme sağlayacaktır. Hayvanın boyutu nedeniyle, bir klinik boyutlu MR ünitesi (1.5 T veya T 3), bir çok uygundur. Bu tavşan diz keşif için uygun çözünürlük ve kontrast-gürültü oranı sağladığı gibi 8 kanallı klinik diz bobin kullanılır. <ol><li> Görüntüleme sistemi kurulum önce, bir kulak damar yoluyla bir periferik venöz erişim yükleyin. Bu erişim kontrast madde enjekte hizmet edecektir. <ol><li> Tıraş ve kulak dezenfekte edin. </li><li&gt; lidokain deri altı enjeksiyonu ile lokal anestezi uygulayın. </li><li> Lateral kulak damar içinde 25 G kateter yerleştirin. </li><li> 1 ml steril fizyolojik serum enjeksiyonu ile geçirgenlik değerlendirin. </li><li> Yapışkan dokunarak ile kateter koruyun. </li></ol></li><li> Ksilazin (4 mg / kg) ile karıştırıldı ketaminin kas içi enjeksiyonu (30 mg / kg vücut ağırlığı) ile hayvanların anestezisi. Onlar pençe tutam yanıt vermeyen kez Hayvanlar tam anestezi. 200 ml / dk &#39;lık bir akış oranı ile oksijen vererek, tavşan, bir yüz maskesi yerleştirin. </li><li> Bir kez tam anestezi, MR görüntüleme ünitesine hayvan almak. Yeri hayvanlar böylece diz MR bobinin merkezinde yer olduğunu. Tibia uzun ekseni MR görüntüleme ünitesi tabloya paralel şekilde, tam uzantısı hayvanların ayakları yerleştirin. En iyi bacak konumunu korumak için Velcro bağlantı elemanları veya kum torbaları kullanın. </li><li> Hayvanların kardiyo-solunum izleme olarak gerekli değildiranestezi protokolü spontan solunum derin anestezi sağlar, ancak hayvanlar anestezi kaynaklı ısı kaybını önlemek için örtülü olması gerekir. </li><li> MR protokolü Tablo 1&#39;de ayrıntılı olarak verilmiştir. En iyi kurulum dahil toplam satın alma için ortalama süresi 20 dk. </li><li> Farklı düzlemlerde MR görüntüleme gerçekleştirin. Bu sıralı boyuna sınavları için görüntü konumu anatomik tekrarlanabilirliği sağlar ve histolojik dilimleri ile en iyi korelasyon izin verdiği Bununla birlikte, diz enine düzlemi (tibia dik) referans planıdır. </li><li> Artırılmamış dizilerinin tamamlandığında, kulaktan venöz erişim yoluyla UPSIO kontrast maddesi enjekte edilir. Yavaş yavaş 150 mmol Fe / kg &#39;lık tek bir doz olarak, demir oksit parçacıkları yönetmek. Steril fizyolojik serum, 1 ml enjeksiyonu ile kateter durulayın. </li><li> Enjeksiyon sonrası gelişmiş GRE ağırlıklı dizisi 24 saat tekrarlayın. Bu gecikme, bu parçacıklar tarafından fagosite izin verirmakrofajlar. </li><li> Ilaç etkisi (antibiyotikler, steroidler, anti-makrofaj antikorlar, vb.) Değerlendirilmesi uzunlamasına çalışmalar, yukarıda tarif edilen protokol kullanılarak sıralı MR incelemeleri tekrarlayın. </li></ol> 3. Görüntü Analizi <ol><li> Boyuna değerlendirilmesi için aynı anatomik seviyede ölçümler, ve kolayca tanımlanabilir dönüm noktası tanımlar. Örneğin, patella en geniş çapı görülmektedir eksenel düzlem boyunca elde tekrarlanabilir ölçümü (Şekil 1) elde etmek için güvenilir bir yoldur. </li><li> Bir DICOM tabanlı yazılım (örneğin Osirix gibi) veya bir resim işleme yazılımı (ImageJ) kullanarak görüntü analizi yapın. </li><li> ImageJ yazılımı kullanarak, &quot;düzensiz alan&quot; çizim aracını kullanarak USPIO-gelişmiş GRE T2 ağırlıklı görüntü sinyal kaybı gösteren sinovyal alanının segmentasyon gerçekleştirin. Karanlık sinyali ile sinovyum özetlenen sonra, / alan elde etmek için &quot;Analiz&quot; tıklayınpiksel sayısı (Şekil 2). </li></ol>

<ol><li>Madri, J. Inflammation and healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMadri%2C+J+%22Anderson%27s+Pathology%22">Anderson's Pathology</a>. Kissane, J. , 67-110 (1990).</li>
<li>Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSephel%2C+G+%22Rubin%27s+Pathology%22">Rubin's Pathology</a>. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).</li>
<li>Verdrengh, M., Tarkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+macrophages+in+Staphylococcus+aureus-induced+arthritis+and+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Role of macrophages in Staphylococcus aureus-induced arthritis and sepsis.</a> Arthritis Rheum. 43 (10), 2276-2282 (2000).</li>
<li>Heale, J., Speert, D. Macrophages in bacterial infection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeale%2C+J+%22The+Macrophage%22">The Macrophage</a>. Burke, B., Lewis, C. , Oxford University Press. Oxford, England. 210-252 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+activity+in+infected+areas+of+an+experimental+vertebral+osteomyelitis+model%3A+USPIO-enhanced+MR+imaging--feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Macrophage activity in infected areas of an experimental vertebral osteomyelitis model: USPIO-enhanced MR imaging--feasibility study.</a> Radiology. 248 (1), 114-123 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+of+macrophages+in+infectious+knee+synovitis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR+Am.+J.+Roentgenol%22%5BJournal%5D)">MRI of macrophages in infectious knee synovitis.</a> AJR Am. J. Roentgenol. 194 (6), W521-W526 (2010).</li>
<li>Lutz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+synovial+macrophages+in+an+experimental+rabbit+model+of+antigen-induced+arthritis%3A+ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide-enhanced+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Detection of synovial macrophages in an experimental rabbit model of antigen-induced arthritis: ultrasmall superparamagnetic iron oxide-enhanced MR imaging.</a> Radiology. 233 (1), 149-1457 (2004).</li>
<li>Weissleder, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide%3A+an+intravenous+contrast+agent+for+assessing+lymph+nodes+with+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasmall superparamagnetic iron oxide: an intravenous contrast agent for assessing lymph nodes with MR imaging.</a> Radiology. 175 (2), 494-498 (1990).</li>
<li>Lefevre, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Septic+arthritis%3A+monitoring+with+USPIO-enhanced+macrophage+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Septic arthritis: monitoring with USPIO-enhanced macrophage MR imaging.</a> Radiology. 258 (3), 722-728 (2011).</li>
<li>Sigovan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid-clearance+iron+nanoparticles+for+inflammation+imaging+of+atherosclerotic+plaque%3A+initial+experience+in+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Rapid-clearance iron nanoparticles for inflammation imaging of atherosclerotic plaque: initial experience in animal model.</a> Radiology. 252 (2), 401-409 (2009).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Nonspesifik gadolinyum tabanlı kontrast ajanlar hücre dışı alanı hacmi ve perfüzyon hakkında bilgi sağlarken, USPIO-gelişmiş MR ile makrofaj görüntüleme doku örnekleme 9 gerek kalmadan kesin bir anatomik lokalizasyon ve enfekte sinovya içinde makrofaj infiltrasyonu niteliksel bir değerlendirme sağlar. Yüksek hassasiyeti nedeniyle, USPIO bile ince hücresel enfeksiyonun erken aşamalarında mevcut sızmak gösterebilir. Patojenler giderek kaldırılır başarılı antibiyotik tedavisi altında, bu sızma sinovyum içinde US...

Manyetik rezonans görüntüleme (MRG) yüksek uzaysal çözünürlüğü ve yumuşak doku kontrastı nedeniyle bulaşıcı sinovit gösterilmesi için tercih edilen görüntüleme yöntemi olarak kabul edilir. Vazodilatasyon ve anjiyogenez 1 vaskülarite artışı nedeniyle de histolojik bulguları ile uyumlu artrit düşük T1 ve hücre dışı su içeriği artan varlığı yansıtan yüksek T2 sinyal ve gadolinyum tabanlı-kontrast madde uygulamadan sonra belirgin bir geliştirme MRG görülen sinyal değişiklikleri,. Bununla birlikte, MRI genellikle kalıcı geliştirme genişlemiş hücre dışı alanı sebat (granülasyon dokusu, fibrotik skar) 2 nedeniyle klinik ve biyolojik olarak iyileşmiş septik artritli hastaların eklem görülebilir olarak antibiyotik tedavisi sırasında enfeksiyon çözünürlüğü göstermek edemiyor. Hücre dışı değişikliklerin yanı sıra, makrofajlar yoğun bir işe alım da dahil olmak üzere inflamatuvar hücreler kitlesel olarak sızmaksinovya ödenmiyor. Makrofajlar, bakteriyel enfeksiyon 3 akut ve kronik faz hem de önemli bir rol oynamaktadır. Makrofaj kaynaklı inflamasyon 4 başlamak için onarım önlenmesi, sürece nekrotik dokular kaldırılmaz gibi devam onlar, patojen mikroorganizmaların ortadan kaldırmak için gerekli olan iltihabi reaksiyon neden ve inflamasyon çözünürlük koordine. Bu nedenle, etkin tedavi sonrası enfekte sinovya içinde makrofaj infiltrasyonu azaltılması enfeksiyon kararın güvenilir bir göstergesi olabilir. Hücresel görüntüleme patolojik doku içinde özel hücre infiltrasyonu göstermek yapabiliyor. Özel makrofaj MR kontrast madde yaygın olarak araştırılmıştır hedef kullanarak ve eklem iltihabı ya da enfeksiyon 5-7 göstermek için yeteneğini göstermiştir. Damardan bir enjeksiyondan sonra, bu tür USPIO (ultrasmall süperparamanyetik demir oksitler), partiküller gibi hedeflenen kontrast maddeleri, makrofajlar gibi fagositik hücreler tarafından alınır vekendi manyetik özellikleri nedeniyle, makrofaj infiltrasyonu 8 sunma dokularda sinyal değişikliklere neden. Boyuna bu MR sinyal değişiklikleri tedavi takip makrofaj infiltrasyonu in vivo noninvaziv değerlendirilmesinde bir sağlar ve USPIO yüklü-makrofajlar ilgili sinyal değişiklikleri bir azalma tedavi başarı gösterecektir. Bu raporun amacı noninvaziv sinovya içinde makrofaj infiltrasyonu azaltılması göstererek septik artrit izlemek için makrofaj MR görüntüleme gerçekleştirmek için nasıl sunmaktır.

<table><tbody><tr><td>Reaktif/Malzeme</td><td>Firma</td><td>Adı</td><td>Katalog Numarası Yorumlar</td></tr><tr><td>P904</td><td>Guerbet</td><td></td><td>Doz: 150 &mu; mol Fe/kg</td></tr><tr><td>Ketamin (500 mg/ml ketamin)</td><td>Virbac</td><td></td><td>Dozu: 30 mg/kg</td></tr><tr><td>Rompun (20 mg/ml Ksilazin)</td><td>Aksiyel</td><td></td><td>Dozu: 4 mg/kg</td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Vetokinol</td><td></td><td>Dozu: 0.1 mg/kg/8 saat</td></tr><tr><td>BD 22 G, 1 inç</td><td>BD Biosciences</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>BD 25 G, 5/8 inç</td><td>BD Biosciences</td><td>305122</td><td></td></tr></tbody></table>

septik artrit boyuna değerlendirilmesi için mr hedefli kontrast ajan kullanarak in vivo makrofaj görüntüleme

In vivo Macrophage Imaging Using MR Targeted Contrast Agent for Longitudinal Evaluation of Septic Arthritis

Makrofajlar başlatılması, geliştirilmesi ve bakteriyel enfeksiyona inflamatuvar yanıt düzenlenmesinde anahtar hücrelerdir. Makrofajlar yoğun ve giderek enfeksiyonun erken aşamalarında gelen septik eklemlerde işe ve sızma patojenlerin etkili şekilde yok edilmesi elde sonra gerileme gerekiyordu. Tedavisinin akut sinovit ve izleme erken teşhis: virüslü bir ortak in vivo makrofaj aktivite tespit yeteneği bu nedenle iki ana uygulama sağlayabilir. In vivo makrofaj noninvaziv tespiti gibi ultrasmall süperparamanyetik demir oksit (USPIO) olarak demir nanopartiküller kullanarak manyetik rezonans görüntüleme ile yapılabilir. Intravasküler veya eklem içi uygulamadan sonra, USPIO özellikle kendi manyetik özellikleri nedeniyle aktive makrofajlar, ve, tarafından fagosite edilir, makrofaj infiltrasyonu gösteren dokularda sinyal değişikliklere neden. Bir quantitativparçacıkların enjeksiyon doku içindeki demir miktarı ile ilişkilidir ve bu nedenle USPIO-yüklü hücrelerin sayısını göstermektedir sonra sinyal kaybı ile alan (koyu piksel sayısı) gradyan eko MR görüntüleri üzerinde görüldüğü gibi, sızmaya e değerlendirilmesi mümkündür. Biz izin, septik artrit bir hayvan modelinde USPIO-gelişmiş MR görüntüleme kullanılarak makrofaj görüntüleme gerçekleştirmek için burada bir protokol mevcut makrofaj infiltrasyonu ve tedavi eylem bir değerlendirme in vivo noninvaziv değerlendirilmesinde bir başlangıç ​​ve boyuna.

Kontrastsız görüntülerde, enfekte diz sinovyum femur ve patella düşük sinyal yapıları (Şekil 1) olarak görünür iken, yumuşak doku çevresindeki ayırt olmayan bir ara sinyal bir yaygın şişlik sunar. USPIO-gelişmiş görüntülerde, kontrast madde verildikten sonra 24 saat, USPIO-yüklü makrofajlar içeren sinovyal alanı sinyal kaybı (Şekil 1 ve 2) gösterecektir. Sinovya zan içindeki makrofaj infiltrasyonu spesifik immün ...

Biz makrofaj MR görüntüleme sağlayan, septik artrit ultrasmall süperparamanyetik kontrast madde (USPIO) kullanarak gerçekleştirmek için nasıl göstermek bir ilk ve boyuna<em&gt; In vivo</emMakrofajlar sızma ve tedavi etkinliğinin bir değerlendirme&gt; non-invaziv değerlendirilmesi.

Septik Artrit Boyuna değerlendirilmesi için MR Hedefli Kontrast Ajan kullanarak in vivo Makrofaj Görüntüleme

Macrophages are key-cells in the initiation, the development and the regulation of the inflammatory response to bacterial infection. Macrophages are ...

Bu deneyin genel amacı, sinovyum içindeki makrofaj infiltrasyonunu boylamsal olarak değerlendirmektir. Septik artrit tavşan modelinde MR görüntüleme kullanılarak, makrofajları etiketleyen ve varlıklarını ortaya çıkaran demir oksit partiküller yardımıyla bu işlem gerçekleştirilebilir. Makrofajlar, özellikle septik artritte, artritin gelişiminde, amplifikasyonunda ve çözümlenmesinde kilit hücrelerdir.Enfekte bir eklem içerisindeki varlıklarının ve dağılımlarının in vivo olarak gösterilmesi, izleme için değerli bir araç olabilir. Antibiyotik tedavisi gören hastalıklı bir eklemin, makrofajlar tarafından yoğun şekilde infiltre edilmemesi gerekir. Makrofajlar, lizosit kaybı ile mevcut olabilir.US PIO'lar ve ultra küçük süperparamanyetik demir oksit gibi kontrast ajanları kullanılır. İntravasküler uygulama sonrası, bu ajanlar özellikle aktive olmuş makrofajlar tarafından alınır. U-S-P-I-O'lar, kristal boyutu yaklaşık 40 nanometre olan bir demir oksit çekirdeğinden oluşur.Bunlar, makrofaj içeren dokularla birlikte MR sinyal değişiklikleri oluşturan küçük mıknatıslar gibi hareket ederler. Bir tavşan dizinin bu iki aksiyel Mr.Mag görüntüsünde, USPIO uygulamasından 24 saat sonra, sinovyum varlığının ve yoğun ve yaygın sinyal kaybının görülebildiği anlaşılmaktadır. SPIO yüklü makrofajların varlığı nedeniyle, MR görüntülemede gözlemlenen koyu piksellerin sayısı, doku içindeki demir içeriğiyle ve dolayısıyla makrofaj sayısıyla korelasyon göstermektedir.Bu nedenle, U-S-P-I-O ile ilişkili R sinyal değişikliklerinin boylamsal takibi, tedavi sırasında John içindeki makrofaj varlığının InVivo değerlendirmesini sağlayabilir. Merhaba, benim adım Guian Bii. Fransa'daki University Hospital of Strat'ta radyoloji alanında yardımcı profesörüm.Bugün sizlere, septik artrit hayvan modelinde MRI kullanarak makrofaj görüntülemesinin nasıl yapılacağını sunacağız. İlk bölümde araştırma görevlimizle birlikte, stafilokokların doğrudan eklem içi uygulaması yoluyla bir tavşan dizinde septik artritin nasıl indükleneceğini açıklayacağız. Ardından ikinci bölümde, MRI incelemesinin nasıl gerçekleştirileceğini, kontrast maddenin nasıl enjekte edileceğini ve son olarak sonuçların nasıl değerlendirileceğini göstereceğiz.Hayvanı özel bir muhafaza kafesine yerleştirin, 30 dakikalık cerrahi anestezi sağlayan tiletamin ve ketamin enjeksiyonu ile hayvanı anesteziye alın. Diz bölgesini tıraş edin ve povidon ile temizleyin. Patellar ligamenti ön elastik gerici olarak tanımlayın.Ardından, ekleme girmek için içinden 35 gauge bir iğne yerleştirin. Bir mililitre bakteriyel süspansiyon enjekte edin. Enjeksiyonun direnç olmadan gerçekleşmesi, iğnenin doğru intraartiküler konumda olduğunu onaylar.Hayvanı kafesine geri yerleştirin ve her gün bovine intramüsküler enjeksiyon yoluyla analjezik tedavi uygulayın. Bir süre sonra, iki gün geçer. Hayvanda spontane uyku hareketlerinin azalmış olması, eklem enfeksiyonunun varlığını doğrular.Bu nedenle R incelemesi gerçekleştirilebilir. Hayvanı özel bir muhafaza kafesine yerleştirin. Burayı pov ile fırçalayın.Bir kulak venine 24 gauge kateter yerleştirin ve yapıştırıcı ile sabitleyin. Bu venöz hat, kontrast maddenin uygulanması için kullanılacaktır. Hayvanı, ketaminin intramüsküler enjeksiyonu ile anestezi edin.Ardından hayvanı MR diz bobini içine yüzüstü yerleştirin. Dizler tam ekstensiyondayken, bacaklar MR masasına sabitlenmeli ve ekstensiyonu korumak için bantlanabilir. MRI protokolü, gradyan ekolu T2 ağırlıklı sekanslardan oluşmaktadır.En hassas U-S-P-I-O tespitine olanak tanıdığı için bu sekans tercih edilir. Şu an kullandığımız MR parametrelerine bir örnek aşağıdadır. Bu ilk MR incelemesinin sonunda, U-S-P-I-O'yu venöz hat üzerinden yavaşça enjekte edin ve bir mililitre hücre hattı ile durulayın.İkinci MR incelemesi, kontrast madde uygulamasından 24 saat sonra, daha önce açıklanan prosedürlerin aynısı kullanılarak gerçekleştirilir. Burada, tavşan dizinin solda kontrast madde olmadan, sağda ise USPO uygulamasından 24 saat sonra çekilmiş iki adet aksiyel T2 ağırlıklı gradyan eko görüntüsünü görebilirsiniz.Sağdaki resimde görülebileceği üzere, USPI yüklü olan bölgede makrofajlar koyu piksellerle sinyal kaybı gösterecektir. Koyu piksellerin sayısı demir içeriğiyle ve dolayısıyla MicroAge infiltrasyon miktarıyla koreledir; USPI yüklü makrofajlar, demir yüklü hücreleri mavi noktalar olarak ortaya çıkaran Prussian blue boyaması kullanılarak histolojik olarak gösterilebilir. Tek bir görüntüde gözlemlenen koyu piksellerin sayısı farklı yazılımlar kullanılarak sayılabilir.M SGA yazılımı kullanılarak gerçekleştirilen bu örnekte, mevcut bölge alanlarının manuel veya otomatik eşikleme işleminden sonraki sayımı sunulmaktadır. USPA OS MRI, tedavi süresince takip edilebilen makrofaj dağılımının dolaylı bir değerlendirmesine olanak tanır. Makrofaj infiltrasyonundaki azalma, In vivo MRI görüntülemesindeki koyu piksel sayısının azalması ile ilişkili olacaktır.Özgül bir kontrast maddenin kullanımı, dizdeki makrofaj popülasyonunu invaziv olmayan bir yöntemle değerlendirmenize olanak tanır. Böylece tedavi sırasında, doku örneklemesine gerek kalmadan ve doğal ortamında makrofajların varlığını ve dağılımını takip edebilirsiniz; bu durum boylamsal çalışmalar için özellikle önem taşımaktadır.

in-vivo-macrophage-imaging-using-mr-targeted-contrast-agent-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Biz inflamatuvar aşamaları ayırt için invaziv olmayan bir görüntüleme yöntemi açıklanmaktadır. Luminol sistemik teslim nötrofillerinde MPO aktivitesi bağlı akut inflamasyon alanları ortaya koymaktadır. Bunun aksine, lusigenin enjeksiyon makrofajlarda Phox aktivitesi bağlı kronik inflamasyon görselleştirme sağlar.

In vivo Görüntüleme Yöntemi Akut ve Kronik İltihap ayırt

Biz, çok açılı bir dönme optik görüntüleme saposin C (SapC)-dioleoylphosphatidylserine (DOPS) nanovesicles tarafından sağlanan bir floresan marker in vivo nicelendirilmesi için (Maroi) sistemi tarif eder. Kanser ve artrit fare modelleri istihdam biz Maroi sinyal eğrisi analizi kesin haritalama ve hastalık süreçlerinin biyolojik karakterizasyonu için nasıl kullanılabileceğini göstermektedir.

Floresan SapC-DOPS Nanovesicles kullanma Beyin Tümörleri ve Artrit Vivo Optik Görüntüleme

Staphylococcus aureus bir biyolojik olarak ışık veren mühendislik suşu kullanılarak, ortopedik protez enfeksiyonun bir fare modelinde, optik ve uCT görüntüleme birlikte, invaziv olmayan uzunlamasına ve bakteriyel enfeksiyonun dinamikleri, hem de karşılık gelen enflamatuar yanıtı ve anatomik değişiklikleri izlemek için bir kapasite sağlamadığı Kemik.

Kombine<em&gt; In vivo</em&gt; Optik ve uCT Görüntüleme Farelerde bir Ortopedik İmplant Enfeksiyon Enfeksiyon, Enflamasyon ve Kemik Anatomisi Monitör

Anestezi uygulanmış farelerde intravital konfokal mikroskopi kullanarak kararlı durum ve enflamatuar koşullar altında mezenterik venlerdeki nötrofillerin ve monositlerin davranışını izlemek için bir protokolü detaylandırıyoruz.

Real Time Anestetize Farelerde Intravital Mikroskopi Mezenterik Damarlardaki nötrofiller ve monositler Görüntüleme

Bu yazıda, iltihaplanmanın iki farklı deneysel modelindeki temel matris metalloproteinazların in vivo aktivitesini görselleştirmek için aktive edilebilir bir optik görüntüleme probu kullanılarak floresan görüntülemenin uygulanmasını açıklanmaktadır.

Non-invaziv<emIn vivo</em&gt; Aktive Edilebilir Floresan Görüntüleme Ajanını Kullanan İnflamatuvar MMP Aktivitesinin Flüoresan Optik Görüntülemesi

Hedef özgü probları protein ifade çeşitli hastalık (Örneğin, iltihap, enfeksiyon ve tumorigenesis) gibi moleküler mekanizmaları analiz etmek için yenilikçi bir araç temsil eder. Bu çalışmada, bağırsak makrofaj infiltrasyonu F4/80 özel tomografi Floresans aracılı kullanarak kolit, fare modeli üç boyutlu bir nicel tomografik değerlendirilmesi açıklar.

Floresan-aracılı tomografi algılama ve fare bağırsak iltihabı makrofaj ile ilgili miktar

Biz birincil fare kemik iliği türevi makrofajlar fluorescently etiketli miyelin enkaz ve hücre içi lipid damlacık boyama kullanarak fagositik kapasitesini değerlendirmek için yöntemler mevcut.

Vitro Fagositoz miyelin enkaz kemik iliği türevi makrofajlar tarafından

Endochondral kemik iyileşme sırasında kırık Kallus dokusu geliştirme değerlendirilmesi iyileşme süreci izlemek için önemlidir. Burada, bir manyetik rezonans görüntüleme (MRG) kullanımı raporu-uyumlu eksternal fiksatör fare uyluk için MRG izin farelerde kemik rejenerasyon sırasında tarar.

Vivo Fare uyluk için bir MRI uyumlu Osteosentez aygıtı kullanma farelerde kemik iyileşme sırasında kırık Kallus gelişimi değerlendirme

Eklemlerin in vivo görüntülemesi, iltihaplı eklemler içindeki lökositlerin göç davranışını ve moleküler dinamiklerini ortaya çıkarmak için değerli bir tekniktir. Burada, tip II kollajen kaynaklı artritin (CIA) fare modeli kullanılarak eklemlerin in vivo görüntülemesi için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

In Vivo'da Görüntüleme, eklemlerdeki lökositlerin göç davranışını ortaya çıkarıyor

Sinovyumda akut iltihap, bulaşıcı ve yapısal değişiklikleri değerlendirebilen insan ex vivo transwell sistemi geliştirdik.

Korunmuş fonksiyon ve mimariyle ex vivo insan sinovyal dokusu kullanılarak sinovitin klinik öncesi modeli

Burada, zayıflatılmış BSL-2 onaylı Mycobacterium tuberculosis'un intravital görüntüleme protokolünü sunuyoruz. sürün akciğerinde kalıcı akciğer penceresi kullanarak. Bu yaklaşım, aynı akciğer mikro ortamında bakteriler lokalizasyonu, damar dinamikleri ve makrofaj alımı dahil olmak üzere erken konakçı-patojen etkileşimlerinin uzunlamasına, tek hücre çözünürlüklü analizini mümkün kılar.

Erken Intravasküler Enfeksiyonda Sönmüş Oksotrofik Mycobacterium Tuberculosis'in Sönük Oksotrofik Mycobacterium Tuberculosis'in Erken Intravasküler Enfeksiyonda

Öğrenin septik artritli tavşan modelinde USPIO kontrast ajanı ile makrofaj MR görüntüleme yöntemini. Bu teknik, tedavi etkinliğini invaziv olmayan şekilde değerlendirmeyi sağlar.

Septik Artrit Boyuna değerlendirilmesi için MR Hedefli Kontrast Ajan kullanarak in vivo Makrofaj Görüntüleme

Daha fazla video keşfet