Name: Ayrılması Plasmodium falciparum Geç Evre-enfekte Eritrositler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 20 s
Description: Öğrenin, Plasmodium falciparum enfekte eritrositlerini hemozoinin paramanyetik özelliklerini kullanarak manyetik ayırma yöntemiyle izole etme tekniğini. Bu hızlı ve etkili yöntem, parazitlerin istilacı yeteneklerini koruyarak enfeksiyon hastalıkları araştırmalarını kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma tarafından finanse edildi hibe SORUN-009 CS ve Secretaria Nacional de Ciencia y Tecnología (SENACYT), Panama LC doktora bursu için.

Protokolünün tüm adımları, centrifugations hariç, örnek steril tutmak için bir başlık içinde yapılmalıdır. 1. P. Geç Evre İzolasyonu falciparum-enfekte Eritrositler Parazit paramanyetizma bahşeder hemozoin, cins için ortak bir metabolit olduğundan Plasmodium enfekte eritrositlerin tüm evrelerinde, bu metodoloji ile ayrılabilir. Tipik bir kültür% 2-4 hematokrit (kırmızı kan hücrelerinin hacminin yüzdesi) ve% 1-8 parazitemi (enfekte yüzdesi içerecektir ancak kültürde yüksek parazitemi (% 3-10), bu protokol ile daha iyi verim almak için tavsiye edilir kırmızı kan hücreleri). Trager ve Jansen 1 tarafından açıklandığı gibi parazitler yetiştirilebilir. <ol><li> Basit, çok parçalı kurulum her schizont izolasyon prosedürü için monte edilmelidir. Bunun için, LS kolonlar, bir manyetik MidiMACS Ayırıcı ve Miltenyi Biotec bir MACS MultiStand (Şekil 1 </strong&gt;) kullanılır. İlk olarak, metal stand için manyetik ayırıcı bağlamak ve ardından ayırıcı üzerinde kolon manyetik yerleştirin. </li><li> Ayrı bir tüp içinde (genelinde 50 ml conicals kullanın), RPMI 1640 23.2 ml ve iş çözümü oluşturmak için% 7.5 sodyum bikarbonat 750 ul karıştırın. Atılması için ise ek borular var ve akan toplama parazit kültür. </li><li> Bunu dengelemek için sütun çalışma çözeltisinin 3 ml ekleyin ve akan bir tüp içine atın. </li><li> P. 8 mL sütun falciparum kültürü, en kısa sürede çalışma çözeltisinin son bölümü olarak kültür ile sütun dışarı itilmiş olan emin, alıcı tüp bağsız kültür iyileşme başlatmak için bir toplama ile değiştirilir. Bu, daha fazla kültür seyreltilmesi önlemek için gereklidir. </li><li> Sütunu boyunca kültür akış bittikten sonra, sütunun geri kalan eritrositler dışarı itmek için çalışma çözeltisinin 1 ml eklemek. </li><li> Adım Yıkama: kolon için çalışma çözeltisi başka bir 3 ml ilave edilir ve diğer tüp içinde akan olarak kaydedilmiş olan kültür seyreltilmesi önlemek için &quot;ıskarta&quot; tüp içine akan sıvı toplamak. </li><li> Elüsyon: 3 ml kolonundan geçirilir sonra, stand ikinci çıkarın ve 15 ml tüp üstüne yerleştirin. </li><li> Yine, sütun için çalışma çözelti 3 ml eklenir. Bu adım sütun boncuk mahsur kalmışlardı geç evre parazit ile enfekte eritrositler elutes. </li></ol> Not: bu noktada, ve gereken parazitlerin miktarına bağlı olarak, orijinal kültür içinde parazitemi sınırları belli tabi toplama başka yuvarlak / lar, başlar. Akışını istikrarlı bir devlet korur gibi sütun sürece yeniden kullanılabilir. <ol start="9"><li> Toplanan parazitlerin konsantrasyonu: Oda sıcaklığında 150 x g&#39;de 5 dakika boyunca elüsyon içeren 15 ml&#39;lik santrifüjparazitlenmiş eritrositten karanlık bir pelet oluşturur. </li><li> Çok küçük bir örnek almak ve (aşağıya bakınız adım 2) mikroskopi ile konsantrasyonu ve toplam verim belirlemek için yeterli sıvı bırakarak Süpernatantı. </li><li> Geç evre parazit izolasyonu ve yakalama biçimde gerçekleştirilir, bu noktada, taze medya ile tekrar toplanan kültür inkübe edin. </li><li> Müteakip deneyler için gerekli hacim ve çözelti içinde toplanmış parazit seyreltilir. </li></ol> 2. Saflık ve Verim Analizi <ol><li> Hemasitometre kullanarak ve bir ışık mikroskobu altında sayılarak elde edilen parazitlerin konsantrasyonu doğrulayın. Saymak için, hemasitometre bir kapak kayma altında toplanan parazit ve medya karışımı 10 ul ekleyin. Hemasitometre dört kadran parazit sayısını sayın ve 4 ile toplam sayısını bölün. Enfekte e konsantrasyonu elde etmek için 10 4 ile bu sayı çarpmaml başına rythrocytes. </li></ol> Notlar: karışımı a) konsantrasyon daha fazla veya daha az orta ekleyerek, pelet resuspending yapıldığı andaki kullanıcı tarafından belirlenecektir. Önerilen bir çalışma konsantrasyonu ul başına 5,5 X 10 4 schizontes (bu genellikle toplanan parazitler 100-300 ul ekleyerek elde edilir) &#39;dir. Bu konsantrasyon 20 ul ortam ve eritrositler, tipik bir% 4 hematokrit kültür içinde yaklaşık% 1 arasında bir parazitemi 100 ul karışım nihai hacmi eklenmiş ise elde edilecektir. b) hemasitometre altında Sayma eritrositler odasının içindeki örnek kurudukça parçalama başından beri, hızlı olmak zorunda. Çoğunluk olmalı Enfekte eritrositler, non-enfekte olanlardan onları ayıran bir karanlık nokta içinde gösterecektir. <ol start="2"><li> İnce tabaka Giemsa,% 10 metanol içinde çok hızlı bir şekilde slaytlar sabitleme onları kurutma, ve t daldırarak toplama saflığını belirlemek için leke gerçekleştirmeGiemsa bir% 20 çözelti halinde kenar damıtık su ile seyreltilmiştir leke. Onlar hava ile kurutulur ve mikroskop altında incelenebilir sonra 10 dakika için slaytlar Leke. De% 70 üzerinde bir parazitemi ulaşılabilir olmalıdır. </li></ol>

<ol><li>Jensen, J. B., Trager, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmodium+falciparum+in+culture%3A+use+of+outdated+erythrocytes+and+description+of+the+candle+jar+method%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Plasmodium falciparum in culture: use of outdated erythrocytes and description of the candle jar method.</a> J. Parasitology. 63 (5), 883-886 (1977).</li>
<li>Guzman, I. Y., Francis, S. E., Oksman, A., Smith, C. E., Duffin, K. L., Goldberg, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Order+and+specificity+of+the+Plasmodium+falciparum+hemoglobin+degradation+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Order and specificity of the Plasmodium falciparum hemoglobin degradation pathway.</a> J. Clin. Invest. 93, 1602-1608 (1994).</li>
<li>Rosenthal, P. J., Meshnick, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemoglobin+catabolism+and+iron+utilization+by+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biochem.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Hemoglobin catabolism and iron utilization by malaria parasites.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 83 (2), 131-139 (1996).</li>
<li>Fitch, C. D., Chevli, R., Kanjananggulpan, P., Dutta, P., Chevli, K., Chou, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+ferriprotoporphyrin+IX+is+a+lytic+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Intracellular ferriprotoporphyrin IX is a lytic agent.</a> Blood. 62 (6), 1165-1168 (1983).</li>
<li>Hebbel, R. P., Eaton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathobiology+of+heme+interaction+with+the+erythrocyte+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Hematol%22%5BJournal%5D)">Pathobiology of heme interaction with the erythrocyte membrane.</a> Semin. Hematol. 26 (2), 136-149 (1989).</li>
<li>Egan, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemozoin+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biochem.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Haemozoin formation.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 157 (2), 127-136 (2008).</li>
<li>Hempelmann, E., Marques, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+malaria+pigment+from+Plasmodium+falciparum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Analysis of malaria pigment from Plasmodium falciparum.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 32 (1), 25-30 (1994).</li>
<li>Fitch, C. D., Kanjananggulpan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+state+of+ferriprotoporphyrin+IX+in+malaria+pigment%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">The state of ferriprotoporphyrin IX in malaria pigment.</a> J. Biol. Chem. 262 (32), 15552-15555 (1987).</li>
<li>Moore, L. R., Fujioka, H., Williams, P. S., Chalmers, J. J., Grimberg, B., Zimmerman, P. A., Zborowski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemoglobin+degradation+in+malaria-infected+erythrocytes+determined+from+live+cell+magnetophoresis%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Hemoglobin degradation in malaria-infected erythrocytes determined from live cell magnetophoresis.</a> FASEB J. 20 (6), 747-749 (2006).</li>
<li>Spadafora, C., Gerena, L., Kopydlowski, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+in+vitro+invasive+capabilities+of+Plasmodium+falciparum+schizonts+isolated+by+Percoll+gradient+or+using+magnetic+based+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Malaria+J%22%5BJournal%5D)">Comparison of the in vitro invasive capabilities of Plasmodium falciparum schizonts isolated by Percoll gradient or using magnetic based separation.</a> Malaria J. 10, 96(2011).</li>
<li>Jackson, K. E., Spielmann, T., Hanssen, E., Adisa, A., Separovic, F., Dixon, M. W., Trenholme, K. R., Hawthorne, P. L., Gardiner, D. L., Gilberger, T., Tilley, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+permeabilization+of+the+host+cell+membrane+of+Plasmodium+falciparum-infected+red+blood+cells+with+streptolysin+O+and+equinatoxin+II%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+J%22%5BJournal%5D)">Selective permeabilization of the host cell membrane of Plasmodium falciparum-infected red blood cells with streptolysin O and equinatoxin II.</a> Biochem. J. 403, 167-175 (2007).</li>
<li>Goodyer, I. D., Johnson, J., Eisenthal, R., Hayes, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+mature-stage+Plasmodium+falciparum+by+gelatine+flotation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Trop.+Med.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Purification of mature-stage Plasmodium falciparum by gelatine flotation.</a> Ann. Trop. Med. Parasitol. 88 (2), 209-211 (1994).</li>
<li>Pasvol, G., Wilson, R. J., Smalley, M. E., Brown, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+viable+schizont-infected+red+cells+of+Plasmodium+falciparum+from+human+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Trop.+Med.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Separation of viable schizont-infected red cells of Plasmodium falciparum from human blood.</a> Ann. Trop. Med. Parasitol. 72, 87-88 (1978).</li>
<li>Pertoft, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fractionation+of+cells+and+subcellular+particles+with+Percoll%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biochem.+Biophys.+Methods%22%5BJournal%5D)">Fractionation of cells and subcellular particles with Percoll.</a> J. Biochem. Biophys. Methods. 44 (1-2), 1-30 (2000).</li>
<li>Paul, F., Roath, S., Melville, D., Warhurst, D. C., Osisanya, J. O. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+malaria-infected+erythrocytes+from+whole+blood%3A+use+of+a+selective+high-gradient+magnetic+separation+technique%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Separation of malaria-infected erythrocytes from whole blood: use of a selective high-gradient magnetic separation technique.</a> The Lancet. 318, 70-71 (1981).</li>
<li>Trang, D. T., Huy, N. T., Kariu, T., Tajima, K., Kamei, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-step+concentration+of+malarial+parasite-infected+red+blood+cells+and+removal+of+contaminating+white+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Malar.+J%22%5BJournal%5D)">One-step concentration of malarial parasite-infected red blood cells and removal of contaminating white blood cells.</a> Malar. J. 3, 7(2004).</li>
<li>Nillni, E. A., Londner, M. V., Spira, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+separation+of+uninfected+erythrocytes+from+those+infected+with+Plasmodium+berghei+and+for+isolation+of+artificially+released+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Parasitenkd%22%5BJournal%5D)">A simple method for separation of uninfected erythrocytes from those infected with Plasmodium berghei and for isolation of artificially released parasites.</a> Z. Parasitenkd. 64, 279-284 (1981).</li>
</ol>

Biz ifşa etmek başka bir şey var.

Sıtma paraziti P. in vitro kültürlerde falciparum kültürü daha fazla olan en yüksek çoğalma noktada enfekte olmamış kırmızı kan hücrelerinin yarısından, sınırlı parazitemi sergiler. En çok araştırma deneyleri için, enfekte olmuş eritrositler ile birlikte çalışmak için sadece arzu edilir. Bu amaçla, bir ayırma tekniği, enfeksiyon göre kültür bölmek için gereklidir. Yararlı yöntemler enfekte olmamış eritrositler 11 ve iki grupların farklı yoğunluk yararlanmak diferansiyel centrifugations varya...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> RPMI 1640 Hepes Modifiye </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> R4130 </td><td> % 10 insan serumu,% 2 glükoz, ve% 0.2 sodyum bikarbonat ile desteklenmiş </td></tr><tr><td> MidiMACS Ayırıcı </td><td> MACS Miltenyi BioTec </td><td> 130-042-302 </td><td></td></tr><tr><td> MACS MultiStand </td><td> MACS Miltenyi BioTec </td><td> 130-042-303 </td><td></td></tr><tr><td> LS Sütunlar </td><td> MACS Miltenyi BioTec </td><td> 130-042-401 </td><td></td></tr><tr><td> Hemasitometre </td><td> Grafco </td><td> Grafco Neubauer Odası </td><td> Diğer birçok tedarikçileri yoluyla bulunabilir </td></tr></tbody></table>

ayrılması<em&gt; plasmodium falciparum</emmanyetik yoluyla&gt; geç evre-enfekte eritrositler

Separation of Plasmodium falciparum Late Stage-infected Erythrocytes by Magnetic Means

Diğer Plasmodium türlerin aksine, P. falciparum onun çalışma 1 kolaylaştırır laboratuar, kültüre edilebilir. Elde parazitemi ≈% 40 sınırına ulaşabilir olsa da, araştırmacı genellikle yaklaşık% 10 oranda tutar. Pek çok durumda, kültür zenginleştirmek ve belirli bir deney ile devam etmek için enfekte olmamış olanlardan parazit içeren kırmızı kan hücrelerinin (eritrositler), izole etmek için gereklidir. Zaman P. falciparum eritrosit bozar, parazit düşürür ve hemoglobin 2, 3 beslenir. Ancak, parazitin bir çok toksik demir içeren haem parçası 4, 5 ile ilgilenmek zorundadır. Parazit haemozoin 6, 7 olarak adlandırılan bir inert kristal polimer içine haem dönüştürerek kendi toksisite eludes. Bu demir içeren moleküller, gıda vakuol içinde depolanır ve bir metal haem 8 biri farklı bir oksidasyon durumuna sahiptir. Haem demir ferrik durumuozoin bu bulaşmamış eritrosit eksik olan paramanyetik özellikte bahşeder. Işgalci parazit olgunluğa ulaşır gibi haemozoin içeriği de P. son aşamalarında daha paramanyetizma ihsan, 9 da artar eritrosit içindeki falciparum. Bu paramanyetik özelliği, P. son aşamalarında dayanarak falciparum enfekte-kırmızı kan hücreleri manyetik boncuklar ihtiva eden bir sütun içinden geçen kültür tarafından ayrılabilir. Bunları içeren sütunlar bir mıknatıs tutucu üzerine konulduğunda Bu boncuklar manyetik hale gelir. Flow-through içerecektir iken onların paramanyetizma nedeniyle Enfekte RBCs, sonra çoğunlukla, enfekte olmamış eritrosit ve parazit içerenler erken aşamalarında için, sütun içine hapsolmuş edilecektir. Burada, biz iyi parazit canlılığı 10 korur manyetik sütunlar ile geç evre parazitlerin nüfusu zenginleştirmek için metodoloji açıklanmaktadır.Bu yordamı gerçekleştirdikten sonra, bekâr kültürü kalan parazitler büyümeye devam sağlamak için bir inkübatör iade edilebilir.

Şekil 2&#39;de, manyetik sütun içinden geçen kültür önce gösterilmiştir (A) ve işlemden sonra (B). Şekil 2A oklar ile enfekte eritrositleri işaret ile, Şekil 2 &#39;de gösterildiği gibi bir veya iki enfekte eritrositler genellikle bir 100X büyütme alan üzerinde görülür. Tipik bir prosedürde asitleştirme,% 5 parazitemi (Şekil 2A) bir kültür ile başlayarak, bu işlemin performansı genellikle% 97 ile% 100 (Şekil 2B) olan bi...

Hemozoin bir paramanyetik özelliklerinin geç aşamalarında izole etmek için kullanılırlar<em&gt; Plasmodium falciparum</emKültüründe büyüyen&gt;-enfekte kırmızı kan hücreleri. Bu yöntem çok kolay ve hızlı ve parazitlerin sonraki invazif yetenekleri etkilemez.

Ayrılması<em&gt; Plasmodium falciparum</emManyetik Yoluyla&gt; Geç Evre-enfekte Eritrositler

Unlike other Plasmodium species, P. falciparum can be cultured in the lab, which facilitates its study 1. While the parasitemia achieved can reach the ...

Plasmodium Falciparum, yalnızca kırmızı kan hücreleri içinde yaşayan bir insan parazitidir. Büyüme sürecinde, beslenmek için eritrositlerdeki molekülleri kullanır ve hemoglobin içindeki demir molekülleri parazit için toksik olacağından, bunları alarak hemin adı verilen inert bir kristal yapıya yerleştirir. Bu hemo kristali, parazitlere bir miktar paramanyetizma kazandırır.Enfekte eritrositleri, içinde parazit taşımayanlardan ayırmak için bu paramanyetik özellik kullanılır. Bir mıknatıs yardımıyla, parazit yüzdesi çok düşük olan bir kültür, neredeyse yüzde yüze yakın parazit oranına ulaşana kadar konsantre edilebilir. Enfekte kırmızı kan hücrelerinin enfekte olmayanlardan bu şekilde ayrılması, parazitin belirli bir özelliğinin, fazla eritrositlerin oluşturacağı karıştırıcı faktörler olmadan incelenmesi gereken birçok deneyde oldukça istenir bir durumdur.Burada gösterilen metodoloji hızlı, basit ve parazit için zararsızdır. Bugün, plasmodium falciparum'un şizont aşamasının ayrılma prosedürünü açıklayacağız. Bu çok bileşenli ekipmanın her izolasyon işlemi için kurulması gerekir.Öncelikle kolon tutucusunu metal standın üzerine yerleştirin ve ardından manyetik kolonu sabit tutucuya yerl

separation-plasmodium-falciparum-late-stage-infected-erythrocytes

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Seçimi Plasmodium falciparum İnsan Beyninin endotel hücreleri Cytoadhesion için Parazitler

RNA Floresan tarafından Tek hücreli Gen Transkripsiyon Analizi<em&gt; In Situ</em&gt; Hibridizasyon (FISH)

Bir<em&gt; In vitro</emOkumak&gt; Co-enfeksiyon Modeli<em&gt; Plasmodium falciparum</emİnsan İlköğretim Monosit kökenli Bağışıklık Hücrelerde&gt;-HIV-1 Etkileşimleri

Bu yöntem, Platelet dolayımlı topaklanma fenotip...

Trombosit-aracılı kesekleşme için Basit Protokolü<em&gt; Plasmodium falciparum</emBir kaynak Poor Setting&gt; ile enfekte Eritrosit

Bu video, monositler tarafından etiketlenmiş ve opsonize edilmiş Plasmodium falciparum ile enfekte eritrositleri içeren akış sitometrisi tabanlı bir fagositoz testini göstermektedir. Akış sitometrisi, monositlerdeki floresansı tanımlar ve fagositoz yoluyla opsonize eritrositlerin başarılı bir şekilde tanımlandığını doğrular.

Parazitle Enfekte Eritrositlerin Antikor Aracılı Fagositozunun Ölçülmesi İçin Bir Test

Antikor fonksiyonu Ölçme Plasmodium falciparum sıtma dokunulmazlık anlamanın anahtarıdır. Bu yöntem, uygun bir merozoit saflaştırılmasını ve akış sitometresi ile opsonizasyon bağımlı fagositoz ölçümünü açıklamaktadır.

Yüksek Kapasiteli saflaştırılması<em&gt; Plasmodium falciparum</emOpsonizing Antikor Analizlerde kullanım için&gt; merozoitler

İnsan mikroRNA'ları, konak eritrositlerinden Plasmodium falciparum parazitlerine yer değiştirir. Burada, sentetik mikroRNA'ları konakçı eritrositlere transfekte etmek ve tüm RNA'ları P. falciparum'dan izole etmek için kullanılan teknikler açıklanmaktadır.  Ek olarak, bu makale, parazit transkriptlerinin ribozomal doluluğunu ve translasyon potansiyelini belirlemek için P. falciparum'da bir polizom izolasyon yöntemini detaylandıracaktır.

Yöntemler Küçük RNA&#39;ların ve Ribosomal doluluk Düzenleyici Rolü Araştırma<em&gt; Plasmodium falciparum</em

Burada, bir protokol için Plasmodium falciparum miktar virüslü sulu kırmızı kan hücrelerinde bir zayıflatılmış toplam yansıma kızılötesi Spektrometre ve çok değişkenli veri analizi kullanarak ve algılama mevcut.

Algılama ve miktar için Plasmodium falciparum içinde sulu kırmızı kan hücreleri tarafından toplam yansıma kızılötesi spektroskopi zayıflatılmış ve çok değişkenli veri analizi

Bu çalışmada, enfekte Plasmodium falciparum eritrositler tarafından yayımlanan ekstraselüler veziküller (EVs) rolünü araştırmak için iletişim kurallarını açıklar. Özellikle, endotel hücreleri ile EVs etkileşimleri odaklanmak.

Sıtma enfeksiyon sırasında hücre dışı vezikül ile değerlendirilmesi

Bu protokolün genel amacı, plasmodium falciparum enfeksiyonuna doğal olarak maruz kalan bireylerin sera veya plazmasında bulunan antikorların kapasitesinin nasıl ölçüleceklerine, parazit enfekte eritrositlerin (IEs) fagositozunu opsonize etmek ve indüklemek tir.

Akış SitometriSi-Bazlı Bir Test ile Plasmodium falciparum Parazitlerine Doğal Olarak Edinilmiş Fagositoz-Indükleyen Antikorların Ölçülmesi

Kriyo-elektron tomografisi için dalma dondurulmuş biyolojik örneklerden vitreus ızgara üzerinde lamel üretmek için odaklanmış iyon ışını frezeleme kullanımı.

Kriyo-Elektron Tomografisi için Çift Işınlı Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanarak Vitreus Biyolojik Numunelerinden Lamel Hazırlanması

Öğrenin, Plasmodium falciparum enfekte eritrositlerini hemozoinin paramanyetik özelliklerini kullanarak manyetik ayırma yöntemiyle izole etme tekniğini. Bu hızlı ve etkili yöntem, parazitlerin istilacı yeteneklerini koruyarak enfeksiyon hastalıkları araştırmalarını kolaylaştırır.

Ayrılması

Daha fazla video keşfet