Name: Görme Kusurları karakterize Kronik Oküler Hipertansiyon bir Lazer-kaynaklı Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Öğrenin farelerde trabeküler ağ lazer fotokoagülasyonu ile kronik oküler hipertansiyon modeli oluşturmayı. Görsel keskinlikteki değişiklikleri optomotor testlerle değerlendirin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu yazıda yer alan çalışma Amerikan Sağlık Yardım Vakfı (XL), Körlük Engellenir Research William &amp; Mary Greve Özel Scholar Ödülü (XL), gelen Glokom Araştırma Dr Douglas H. Johnson Ödülü tarafından desteklenmiştir Körlük Önlenmesi için Illinois Derneği (HC) ve NIH hibe R01EY019034 (XL).

Prosedürleri C57BL/6J fareler (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) Northwestern Üniversitesi Hayvan Bakım Tesisi&#39;nde yetiştirilir. Tüm hayvanlar Northwestern Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu ve NIH Neuroscience Araştırma Hayvanların Kullanımı kurallara conformed tarafından onaylanan protokoller çerçevesinde kullanılır. 1. Lazer Fotokoagülasyon Lazer fotokoagülasyon işlemi 5-7 daha önce yayınlanmış protokollerden değiştirilir. <ol><li> Ketamin (100 mg / kg, Butler, Schein Hayvan Sağlığı, OH) ve ksilazin (Iowa Shenandoah, 10 mg / kg &#39;Lloyd, Inc IA) bir intraperitoneal enjeksiyon sureti ile bir 40-60 günlük fareden anestezisi. </li><li> % 1 atropin sülfat çözeltisi bir ya da iki damlası (Alcon Labs, Inc, Fort Worth, TX) ile topikal tedavi, deney hayvanın sağ gözün gözbebeğinin genişler. </li><li> Midriyazis sonra, bir dümdüznterior odası lazer indüksiyon 6 artırmak için. Ön kamarada sıvı dışarı boşaltmak için yarık lamba altında ön alan (SL-3E, Topcon, Oakland, NJ) içine sivri ucu (Dünya Hassas Aletler A.Ş., Sarasota, FL) ile bir cam mikropipet takın. </li><li> Plastik bir koni tutucu (Braintree Bilim Inc, MA) fare dizginlemek ve (Şekil 1A bak) bir ev yapımı platformda bağladı. Süzgeç ile fare tutun ve yarık lamba arkasında ışık kaynağı için farenin sağ gözü ortaya çıkarır. Yarık lamba altında anestezi farenin sağ gözü aynı hizaya getirin. </li><li> Iki elinizle fare süzgeç tutarken, bir Argon lazer (Ultima 2000SE, Tutarlı, Santa Clara, CA) kullanılarak kornea limbus için lazer aydınlatma geçerlidir. Dik Trabeküler ağın çevresi 80-100 lazer noktalar (514 nm, 100 mW, 50 msn darbe ve 200 mikron nokta) hakkında sunun. C57BL / 6 fareler herhangi bir p için bir bariyer görevi görür pigmente iris vardurumundaki potansiyel başıboş enerji 7. </li><li> Aşılamak topikal% 0.5 moksifloksasin (Alcon Labs, Inc, Fort Worth, Teksas) lazer ile tedavi edilen alan ve% 0.5 proparakain (Bausch &amp; Lomb, Rochester, NY) ağrı gidermek için dezenfekte oküler yüzey üzerinde. </li><li> Tamamen uyanık kadar yaklaşık bir saat için kurtarma için bir ısıtma yastığı (Sunbeam Products Inc, Boca Raton, FL) üzerinde hayvan tutun. </li><li> Sol göz bir kontrol olarak hizmet tedavi edilmediğinde. </li></ol> 2. GİB Ölçümler <ol><li> Plastik huni tutacağı yüklemek ve daha sonra (Bkz. Şekil 2A) platformu üzerinde dizginlemek için bir tüp içine uyanık fare yerleştirin. </li><li> Beş ila on dakika fareyi sahibi konumuna adapte izin izin verin. Prob ucu uzak kornea 14 yüzeyinden 2-3 mm kadar fare göze ribaund tonometre (TonoLab, Colonial Tıbbi Malzeme, Franconia, NH) yaklaşım. </li><li> Prob ucu merkezi yüzeye vurmak izin ölçüm düğmesine basınhafifçe kornea. Aynı gözün GİB altı ölçümleri üç ardışık takımı satın aldı ve gözün GİB olarak ortalaması alınır. Tedavi edilmeyen kontrol göz her zaman yanında ölçülür lazer ile tedavi edilen göz için bir temel okuma almak için ilk ölçülür. </li></ol> 3. Optomotor Testi Görme keskinliği ve kontrast duyarlılık 14,15 test edilir. Bireysel farelerin iki göz sürüklenen ızgara yönünü ters çevirerek ayrı ayrı incelenir, bir saat sürüklenen ızgara, sol göz ve sağ göz 16 için saat yönünün tersine sürüklenen ızgara görme fonksiyonu tanımlamak için kullanılır yani. Her test yaklaşık 15 dakika sürer ve bağımsız iki gözlemci tarafından tekrarlanır. <ol><li> Fare yerleştirin ve fare dört bilgisayar monitörleri (Şekil 3A-B) ile çevrili yüksek bir platformda serbestçe hareket etmesine izin verir. </li><li> Onlar yatay sinüs sürüklenen göstergesi böylece monitör kurmak39 cd / m 2 ortalama parlaklık ile görsel uyaranlara olarak kafesler. Izgara hareket yönü dönüşümlü olmalıdır ardışık arasında saat yönünde ve saat yönünün tersine. </li><li> Hayvanın hareketlerini analiz edin. Görsel uyaran üzerinde ve sonra yavaş yavaş artan sonra sürüklenen ızgaralar ile uyum içinde hayvanın hareketleri 15 saniye içinde &quot;pozitif&quot; olarak kabul edilir. En yüksek tepki ortaya çıkarmak görsel uyaran hayvanın görme keskinliği 17 olarak tanımlanır. </li><li> 0.075, 0.16, ve derece başına 0.3 devir (dd): Üç önceden seçilmiş mekansal frekanslarda kontrast duyarlılık inceleyin. Her bir göz için kontrast eşiği önceden belirlenmiş sabit bir frekansta görsel yanıtları ortaya çıkarır en düşük kontrast olarak tanımlanır. Kontrast duyarlılık eşiği 17 tersidir. </li></ol>

<ol><li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glaucoma+as+a+neurodegenerative+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Glaucoma as a neurodegenerative disease.</a> Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).</li>
<li>Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+death+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Neuronal death in glaucoma.</a> Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).</li>
<li>McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+retinal+ganglion+cell+death+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 88, 816-824 (2009).</li>
<li>Pang, I. H., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+glaucoma+retinopathy+and+optic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Glaucoma%22%5BJournal%5D)">Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy.</a> J. Glaucoma. 16, 483-505 (2007).</li>
<li>Levkovitch-Verbin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translimbal+laser+photocoagulation+to+the+trabecular+meshwork+as+a+model+of+glaucoma+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Translimbal laser photocoagulation to the trabecular meshwork as a model of glaucoma in rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43, 402-410 (2002).</li>
<li>Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+mouse+ocular+hypertension%3A+establishment+of+the+model%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Experimental mouse ocular hypertension: establishment of the model.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44, 4314-4320 (2003).</li>
<li>Grozdanic, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+mouse+model+of+chronic+ocular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 44, 4337-4346 (2003).</li>
<li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+microbead+occlusion+model%3A+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 51, 207-216 (2010).</li>
<li>Ding, C., Wang, P., Tian, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+general+anesthetics+on+IOP+in+elevated+IOP+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of general anesthetics on IOP in elevated IOP mouse model.</a> Experimental Eye Research. 92, 512-520 (2011).</li>
<li>Kalesnykas, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+morphology+after+optic+nerve+crush+and+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell morphology after optic nerve crush and experimental glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53, 3847-3857 (2012).</li>
<li>Shareef, S. R., Garcia-Valenzuela, E., Salierno, A., Walsh, J., Sharma, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+ocular+hypertension+following+episcleral+venous+occlusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Chronic ocular hypertension following episcleral venous occlusion in rats.</a> Experimental Eye Research. 61, 379-382 (1995).</li>
<li>Chiu, K., Chang, R., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+chronic+ocular+hypertension+model+on+SD+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats.</a> J. Vis. Exp. (10), e549(2007).</li>
<li>Fu, C. T., Sretavan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-induced+ocular+hypertension+in+albino+CD-1+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Laser-induced ocular hypertension in albino CD-1 mice.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51, 980-990 (2010).</li>
<li>Rangarajan, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+visual+deficits+in+aging+DBA%2F2J+mice+by+two+behavioral+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Detection of visual deficits in aging DBA/2J mice by two behavioral assays.</a> Curr. Eye Res. 36, 481-491 (2011).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direction-specific+disruption+of+subcortical+visual+behavior+and+receptive+fields+in+mice+lacking+the+beta2+subunit+of+nicotinic+acetylcholine+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Direction-specific disruption of subcortical visual behavior and receptive fields in mice lacking the beta2 subunit of nicotinic acetylcholine receptor.</a> J. Neurosci. 29, 12909-12918 (2009).</li>
<li>Douglas, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+visual+threshold+measurements+in+the+two+eyes+of+freely+moving+rats+and+mice+using+a+virtual-reality+optokinetic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Independent visual threshold measurements in the two eyes of freely moving rats and mice using a virtual-reality optokinetic system.</a> Visual Neuroscience. 22, 677-684 (2005).</li>
<li>Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+quantification+of+adult+and+developing+mouse+spatial+vision+using+a+virtual+optomotor+system%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45, 4611-4616 (2004).</li>
<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64, 85-96 (1997).</li>
<li>Cone, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+anesthesia%2C+mouse+strain+and+age+on+intraocular+pressure+and+an+improved+murine+model+of+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of anesthesia, mouse strain and age on intraocular pressure and an improved murine model of experimental glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 99, 27-35 (2012).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain-derived+neurotrophic+factor+and+TrkB+modulate+visual+experience-dependent+refinement+of+neuronal+pathways+in+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Brain-derived neurotrophic factor and TrkB modulate visual experience-dependent refinement of neuronal pathways in retina.</a> J. Neurosci. 27, 7256-7267 (2007).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+neonatal+development+of+retinal+ganglion+cell+dendrites+by+neurotrophin-3+overexpression%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Regulation of neonatal development of retinal ganglion cell dendrites by neurotrophin-3 overexpression.</a> The Journal of Comparative Neurology. 514, 449-458 (2009).</li>
<li>Sun, W., Li, N., He, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+morphological+survey+of+mouse+retinal+ganglion+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells.</a> The Journal of Comparative Neurology. 451, 115-126 (2002).</li>
<li>Feng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+Ocular+Hypertension+Induces+Dendritic+Degeneration+of+Mouse+Retinal+Ganglion+Cells+that+Depends+on+Cell-type+and+Location%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Sustained Ocular Hypertension Induces Dendritic Degeneration of Mouse Retinal Ganglion Cells that Depends on Cell-type and Location.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. , (2013).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim. Yazarlar Northwestern Üniversitesi tam zamanlı çalışanlarıdır. Yazarlar bu makalede kullanılan reaktifler ve aletleri üreten firma tarafından sağlanan NO fon aldı.

Biz sürekli oküler hipertansiyon üzerinde rapor fare gözünde lazer aydınlatma ile uyarılabilir. Tuzlu enjeksiyon modeli 18 ve damar koter modeli geniş mikrocerrahi beceri gerektiren her ikisi de 11 ile karşılaştırıldığında, lazer aydınlatma gerçekleştirmek için oldukça basit ve kolaydır. Genellikle 2-3 saat içinde 4-6 fareler için lazer aydınlatma gerçekleştirebilirsiniz. Sürekli GİB artışı elde etmek için önemli adımlar lazer aydınlatma için lazer ve parametreleri önce düzleştirme ön kamara bulunm...

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagent</td></tr><tr><td>moksifloksasin</td><td>Alcon Labs, Inc.</td><td>NDC 0065-4013-03</td><td>%0,5, Rx yalnızca</td></tr><tr><td>Proparakain Hidroklorür</td><td>Bausch Lomb</td><td>NDC 24208-730-06</td><td>%0,5, Rx yalnızca</td></tr><tr><td>Oftalmik Çözelti USP</td><td>Bausch Lomb</td><td>NDC 24208-730-06,5</td>%<td>, Rx yalnızca</td></tr><tr><td>ketamin</td><td>Butler Schein Hayvan Sağlığı</td><td>NDC 11695-0550-1</td><td>100 mg / kg </td></tr><tr><td>ksilazin</td><td>LLOYD Inc. Iowa</td><td>NADA 139-236</td><td>10 mg / kg </td></tr><tr><td>atropin sülfat çözeltisi</td><td>Alcon Labs, Inc.</td><td>NDC 61314-303-02</td><td>%1, yalnızca</td></tr><tr> Rx<td colspan="4">Ekipman </td></tr><tr><td>Yarık Lamba, TOPCON </td><td>Visual Systems Inc</td><td>SL-3E</td>, <td>PS-30A</td></tr><tr><td>OptoMotry 1.8.0 sanal</td><td>CerebralMechanics Inc.</td> tarafından desteklenmektedir.<td></td><td></td></tr><tr><td>opto-kinetik test sistemi</td><td>CerebralMechanics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tonometre, TonoLab, fareler için</td><td>Koloni Tıbbi Malzeme</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Sunbeam Products Inc</td><td>722-810</td><td></td></tr><tr><td>Argon lazer </td><td>Coherent Inc</td><td>Ultima 2000SE</td><td></td></tr><tr><td>DECAPICONE Plastik koni tutucu </td><td>Braintree Sci Inc.</td><td>Fare için</td> <td>MDC-200</td></tr></tbody></table>

görme kusurları karakterize kronik oküler hipertansiyon bir lazer-kaynaklı fare modeli

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Sık sık yüksek göz içi basıncı (GİB) ile ilişkili Glokom, körlüğün önde gelen nedenlerinden biridir. Biz insan yüksek gerilim glokom taklit etmek oküler hipertansiyon bir fare modeli kurmak için çalıştı. Burada, lazer aydınlatma açı kapanması neden olan, sulu bir çıkış photocoagulate için kornea limbusa uygulanır. GİB değişiklikler lazer tedavi öncesi ve sonrası bir canlanma tonometre ile izlenmektedir. Bir optomotor davranış testi görsel kapasitesi karşılık gelen değişiklikleri ölçmek için kullanılır. Lazer aydınlatma sonra sürekli GİB yükselmesi geliştirilen bir fare temsilcisi sonucu gösterilir. Bir azalmış görme keskinliği ve kontrast duyarlılık bu göz hipertansif fare görülmektedir. Birlikte, Çalışmamızda glokom farelerde nöronal dejenerasyon ve altta yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için değerli bir model sistem tanıttı.

Gibi prosedürler tarif, lazer aydınlatma açı kapanması (Şekil 1) uyaran, sulu çıkış photocoagulate için limbal bölgede trabeküler ağ hedefleniyor. En Lazerli göz önceki bulgularla 6 tutarlı anlamlı fiziksel hasar, pigment dekolmanı ya da enfeksiyon, sergiledi. Farelerin küçük bir grup (tüm Lazerli hayvanların% 5&#39;inden az) gibi sönük göz topları, ağır katarakt, önemli pigment dekolmanı veya kanama gibi ciddi hasar fiziksel belirtileri sergiledi, biz hemen onları ötenazi. Lazerli gözlerin y...

Kronik oküler hipertansiyon fare gözünde Trabeküler ağın laser kullanılarak meydana gelir. Göz içi basıncı (GİB) lazer tedavi sonrası birkaç ay boyunca yükselir. Görme keskinliği ve Deney hayvanlarının kontrast duyarlılık azalması optomotor testi kullanılarak izlenir.

Görme Kusurları karakterize Kronik Oküler Hipertansiyon bir Lazer-kaynaklı Fare Modeli

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Bu prosedürün genel amacı, farelerde trabeküler ağın lazer fotokoagülasyonu ile kronik oküler hipertansiyon indüklemektir. Fare anestezi altına alındıktan sonra, hedef gözlerin pupillaları dilate edilir ve ardından ön kamara düzleştirilir. İkinci adım, lazer ışınının trabeküler ağ çevresi boyunca yüzeye dik olarak uygulanmasıyla oküler hipertansiyonun indüklenmesidir.Ardından, faredeki göz içi basıncı bir tonometre kullanılarak zaman içinde takip edilir. Son adım, görme keskinliğindeki değişimleri göstermek için otomatik testlerin gerçekleştirilmesidir. Nihayetinde, hipertansiyonun neden olduğu görme kusurları zaman içinde izlenebilir.Onaylanmış bir I-A-C-U-C protokolü elde ettikten sonra, 40 ila 60 günlük bir C 57 black six faresini ketamin ve ksilazinın intraperitonal enjeksiyonu ile anestezi edin. Ardından, sol kontrol gözüne dikkatlice göz merhemi sürün ve ardından sağ gözün pupilini %1'lik atropin sülfat çözeltisinden bir veya iki damla ile topikal tedaviyle dilate edin. Pupil tamamen dilate olduktan sonra, ön kamaradaki sıvıyı boşaltmak için gözün ön boşluğuna keskin bir cam mikro pipet yerleştirin.Bu işlem ön kamrayı düzleştirecek ve lazer indüksiyonunu artıracaktır. Ardından fareyi biyomikroskop (slit lamp) altına yerleştirin, fareyi plastik bir kon tutucuyla sabitleyin ve ev yapımı bir platform üzerine yerleştirip güvenlik altına alın. Sonrasında, dalga boyunu 514 nanometre, gücü 100 milliwatts, darbe uzunluğunu 50 milliseconds ve spot boyutunu 200 micrometers olarak ayarlayarak Argonne lazer kaynağını hazırlayın.Lazer hazırlandığında, fareyi sabitleyici ile tutun ve lazeri hizalamak için farenin sağ gözünü biyomikroskobun arkasındaki ışık kaynağına maruz bırakın. Ardından, argon lazeri kullanarak kornea limbusuna lazer ışınımı uygulayın; trabeküler ağın çevresi boyunca dik olarak 80 ila 100 lazer noktası oluşturun. 57 siyah altı fareye bakın.Potansiyel kaçak enerjiler için bir bariyer görevi gören pigmente bir irise sahip olun. Prosedürün ardından, lazerle tedavi edilen alanıledezenfekte etmek için oküler yüzeye topikal %0,5 moxifloxacin ve ağrıyı hafifletmek için %0,5 propane damlatın. Hayvanı, tamamen uyanana kadar yaklaşık bir saat boyunca iyileşme için bir ısıtma pedinin üzerinde tutun.Uyanık bir fareyi tüpe yerleştirin ve ardından plastik kon tutucuya yükleyin. Daha sonra fareyi platform üzerinde sabitleyin. Fareyi aşırı derecede sıkmamaya dikkat edin, çünkü bu durum intraoküler basınç ölçümlerinin yapay olarak artmasına neden olabilir.Farelerin tutucu pozisyonuna adapte olmaları için beş ila 10 dakika bekleyin. Ardından, prob ucu kornea yüzeyinden iki ila üç milimetre uzaklığa gelene kadar rebound kronometreyi kontrol gözüne doğru yavaşça yaklaştırın. Bir sonraki aşamada ölçülecek olan lazerle tedavi edilmiş göz için bazal bir değer elde etmek amacıyla, öncelikle tedavi edilmemiş kontrol gözü ölçülür.Rebound kronometre konumlandırıldıktan sonra, prob ucunun korneanın merkez yüzeyine hafifçe çarpmasını sağlayacak şekilde ölçüm düğmesine basın. Aynı gözün göz içi basıncı için ardışık olarak altışar ölçümlük üç set alın. Bu ölçümler daha sonra her bir göz için ortalanır; görsel keskinlik ve kontrast duyarlılığı bir motor test kullanılarak test edilir.Bu işlem, öncelikle farenin dört bilgisayar monitörüyle çevrili yükseltilmiş bir platforma yerleştirilmesi ve serbestçe hareket etmesine izin verilmesiyle gerçekleştirilir. Optometri cihazının monitörlerini, görsel uyaranlar olarak metre kare başına 39 kanula ortalama luminansa sahip, yatay olarak kayan sinüzoidal çizgileri görüntüleyecek şekilde ayarlayın. Çizgilerin hareket yönü, saat yönü ve saat yönünün tersi arasında ardışık olarak değişmelidir.Test sırasında, farenin üzerine yerleştirilmiş bir kamera kullanarak farenin hareketlerini kaydedin. Sol gözün görme fonksiyonunu belirlemek için saat yönünde sürüklenme derecelendirmesini, sağ göz için ise saat yönünün tersine sürüklenme derecelendirmesini kullanın.Her bir test yaklaşık 15 dakika sürer ve iki gözlemci tarafından bağımsız olarak tekrarlanır; test sırasında sürüklenen derecelendirmelerle uyumlu olan hareketler pozitif hareketler olarak sayılır. Eğer bu hareketler başlatıldıktan sonraki 15 saniye içinde gerçekleşirse, en yüksek yanıtı bulmak için görsel uyaranı artırın; bu uyaran hayvanın görsel keskinliği olarak belirlenir. Ardından, her bir hayvanın kontrast duyarlılığını önceden seçilmiş üç uzaysal frekansta inceleyin; her bir göz için kontrast eşiğini, önceden belirlenmiş frekanslarda görsel yanıtları ortaya çıkaran en düşük kontrast olarak tanımlayın.Lazerle tedavi edilen hemen her gözde göz içi basıncının yükselme eğiliminde olduğu görüldü. Bununla birlikte, farelerin %5'inden azında sönmüş göz küreleri, şiddetli katarakt, belirgin pigmentasyon, ayrılma veya kanama gibi ağır hasarın fiziksel belirtileri gözlemlendi. Göz içi basıncı değişimine bir örnek burada gösterilmiştir.Lazer tedavisinden bir hafta sonra. Tedavi edilen gözün göz içi basıncı, tedavi edilmeyen göze göre neredeyse iki kat daha yüksekti ve yaklaşık 16 hafta boyunca yüksek seyretmeye devam etti. Yükselen basınç, neredeyse normal seviyelere geri döndü.Yaklaşık 20. haftada, işlem sonrası tedavi edilen gözde görme keskinliğinde bir azalma meydana geldi. Bu durum en az altı ay boyunca devam etti ve göz içi basıncındaki artıştan daha uzun sürdü.Benzer şekilde, intraoküler basıncı yükseltilmiş olan tedavi edilen gözde daha düşük bir kontrast duyarlılığı gözlemlenmiştir.

a-laser-induced-mouse-model-chronic-ocular-hypertension-to

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Glokom, dünyada körlüğün en önemli nedenlerinden biridir. Yükselmiş göz içi basıncı önemli bir risk faktörüdür. Lazer fotokoagülasyon bağlı oküler hipertansiyon, iyi kurulmuş hayvan modellerinde biridir. Bu video sıçan Argon lazer fotokoagülasyon oküler hipertansiyon nasıl ikna göstermektedir.

Lazer Kaynaklı SD Sıçanlarda Kronik Oküler Hipertansiyon Modeli

Kaynak: Lani-Louzada, R.,  ve ark., Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, bir sıçan modelinde yüksek göz içi basıncının (GİB) indüksiyonunu ve izlenmesini göstermektedir. İşlem, limbal kan damarlarının koterize edilmesini içerir, bu da damar tıkanıklığı ve yüksek GİB ile sonuçlanır. Daha sonra sıçanın iyileşmesine izin verilir ve GİB, karşılaştırma için hem deneysel hem de kontrol gözlerinde düzenli...

 Bir Sıçan Modelinde Yüksek Göz İçi Basıncının İndüksiyonu

Burada, neovasküler yaşa bağlı makula dejenerasyonunun (AMD) vasküler özelliklerini yeniden yaratan deneysel bir model olan fare lazer kaynaklı koroidal neovaskülarizasyon (CNV) protokolünü sunuyoruz. Bir kez ustalaştıktan sonra, çeşitli deneysel önlemleri test etmek için bir model sistem olarak CNV'yi güvenilir ve etkili bir şekilde indükleyebilir.

Lazer kaynaklı Koroid Neovaskülarizasyonlarında A Fare Modeli

Burada, glokom görüldüğü gibi, retinal ganglion hücre kaybına neden murin göz oküler hipertansiyon uyarılması için bir protokol mevcut. Manyetik mikroboncuklarının ön kamaraya enjekte ve sulu mizah çıkışı engellemek için bir mıknatıs kullanarak iridokorneal açı çekti.

Bir Manyetik microbead Oklüzyon Modeli Farelerde Glokom Oküler Hipertansiyon Bağımlı tetikleyebilecek

Burada, boyuna vivo içinde görüntüleme kullanışlılığı lazer kaynaklı choroidal neovaskülarizasyon farelerde morfolojik değişiklikler takip içinde mevcut.

Vivo Multimodal görüntüleme ve fare lazer kaynaklı Choroidal neovaskülarizasyon Model analizi

Kronik oküler hipertansiyon circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler, Retina ganglion hücrelerinin glokom ile tutarlı fonksiyonel ve yapısal bozulma yol uygulayarak indüklenen.

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

Burada, retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için spektral-alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını açıklamaktayız.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

Burada, gül bengal kullanarak retinal ven tıkanıklığı için optimize edilmiş bir protokol ve genetiği değiştirilmiş suşlarda tekrarlanabilirliğini en üst düzeye çıkarmak için önerilerle lazer rehberliğinde retinal görüntüleme mikroskop sistemi açıklanmaktadır.

Değişkenliği Sınırlamak için Retinal Ven Tıkanıklığı Fare Modelinin Optimizasyonu

Burada, farelerde retinopatinin tanısını ve kantitatif ölçümünü kolaylaştırmak için optik koherens tomografi kullanan bir in vivo görüntüleme tekniğini tanımladık.

Optik Koherens Tomografinin Retinopatinin Bir Fare Modeline Uygulanması

Bu protokolün amacı, subakut oküler hipertansiyonu indükleyen limbal vasküler pleksusun 360° termik koterizasyonuna dayanan yeni bir glokomatöz nörodejenerasyon modelini karakterize etmektir.

Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu

Öğrenin farelerde trabeküler ağ lazer fotokoagülasyonu ile kronik oküler hipertansiyon modeli oluşturmayı. Görsel keskinlikteki değişiklikleri optomotor testlerle değerlendirin.

Görme Kusurları karakterize Kronik Oküler Hipertansiyon bir Lazer-kaynaklı Fare Modeli

Daha fazla video keşfet