Name: Streptococcus pneumoniae ile İntranazal Kolonizasyon Sırasında İnflamatuar Yanıtların Karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 12 s
Description: Öğrenin, farelerde Streptococcus pneumoniae ile nazofarenks kolonizasyonu ve burun lavajı yöntemiyle bakteri ve bağışıklık hücrelerinin izolasyonu. Bu teknik, solunum yolu enfeksiyonlarında immün yanıtları incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar, Streptococcus pneumoniae'ninklinik suşlarını hediye eden Pennsylvania Üniversitesi'nden Dr. Jeffery Weiser'a teşekkür etmek istiyor. Bu çalışma Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri tarafından finanse edildi. CV, M. G. DeGroote bursu ve Kanada Toraks Derneği'nden bir burs tarafından finanse edildi. Bu çalışma Ontario Akciğer Derneği ve Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri (CIHR) tarafından finanse edildi. Bowdish laboratuvarındaki çalışmalar kısmen Michael G. DeGroote Bulaşıcı Hastalık Araştırmaları Merkezi ve McMaster İmmünoloji Araştırma Merkezi tarafından desteklenmektedir.

<ol><li>Bogaert, D., de Groot, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+pneumoniae+colonisation%3A+the+key+to+pneumococcal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Streptococcus pneumoniae colonisation: the key to pneumococcal disease.</a> Lancet Infect. Dis. 4, 144-154 (2004).</li>
<li>Kadioglu, A., Weiser, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+Streptococcus+pneumoniae+virulence+factors+in+host+respiratory+colonization+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The role of Streptococcus pneumoniae virulence factors in host respiratory colonization and disease.</a> Nat. Rev. Microbiol. 6 (4), 288-301 (2008).</li>
<li>McCool, T. L., Cate, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immune+response+to+pneumococcal+proteins+during+experimental+human+carriage%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">The immune response to pneumococcal proteins during experimental human carriage.</a> J. Exp. Med. 195, 359-365 (2002).</li>
<li>Nelson, A., Roche, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capsule+enhances+pneumococcal+colonisation+by+limiting+mucus-mediated+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Capsule enhances pneumococcal colonisation by limiting mucus-mediated clearance.</a> Infect. Immun. 75, 83-90 (2007).</li>
<li>van Rossum, A., Lysenko, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+and+bacterial+factors+contributing+to+the+clearance+of+colonisation+by+Streptococcus+pneumoniae+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Host and bacterial factors contributing to the clearance of colonisation by Streptococcus pneumoniae in a murine model.</a> Infect. Immun. 73, 7718-7726 (2005).</li>
<li>Barocchi, M. A., Ries, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pneumococcal+pilus+influences+virulence+and+host+inflammatory+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A pneumococcal pilus influences virulence and host inflammatory responses.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 2857-2862 (2006).</li>
<li>Malley, R., Henneke, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+pneumolysin+by+Toll-like+receptor+4+confers+resistance+to+pneumococcal+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Recognition of pneumolysin by Toll-like receptor 4 confers resistance to pneumococcal infection.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100, 1966-1971 (2003).</li>
<li>McCool, T. L., Weiser, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+role+of+antibody+in+clearance+of+Streptococcus+pneumoniae+in+a+murine+model+of+colonization%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Limited role of antibody in clearance of Streptococcus pneumoniae in a murine model of colonization.</a> Infect. Immun. 72, 5807-5813 (2004).</li>
<li>Gingles, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+genetic+resistance+in+invasive+pneumococcal+infection%3A+identification+and+study+of+susceptibility+and+resistance+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Role of genetic resistance in invasive pneumococcal infection: identification and study of susceptibility and resistance in inbred mouse strains.</a> Infect. Immun. 69 (1), 426-434 (2001).</li>
<li>Jeong, D., Jeong, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Difference+in+resistance+to+Streptococcus+pneumoniae+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim.+Res%22%5BJournal%5D)">Difference in resistance to Streptococcus pneumoniae infection in mice.</a> Lab Anim. Res. 27, 91-98 (2011).</li>
<li>Wu, H. Y., Virolainen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+Streptococcus+pneumoniae+nasopharyngeal+colonization+model+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Pathog%22%5BJournal%5D)">Establishment of a Streptococcus pneumoniae nasopharyngeal colonization model in adult mice.</a> Microb. Pathog. 23, 127-137 (1997).</li>
<li>Southam, D. S., Dolovich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+of+intranasal+instillations+in+mice%3A+effects+of+volume%2C+time%2C+body+position%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Physiol%22%5BJournal%5D)">Distribution of intranasal instillations in mice: effects of volume, time, body position.</a> Lung Physiol. 282, 833-839 (2002).</li>
<li>Miller, M. A., Stabenow, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+Murine+Intranasal+Dosing+Efficiency+Using+Luminescent+Francisella+tularensis%3A+Effect+of+Instillation+Volume+and+Form+of+Anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Visualization of Murine Intranasal Dosing Efficiency Using Luminescent Francisella tularensis: Effect of Instillation Volume and Form of Anesthesia.</a> PLoS ONE. 7 (2), (2012).</li>
<li>Briles, D. E., Novak, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+Colonization+with+Streptococcus+pneumoniae+includes+subpopulations+of+surface+and+invasive+pneumococci%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Nasal Colonization with Streptococcus pneumoniae includes subpopulations of surface and invasive pneumococci.</a> Infect. Immun. 73 (10), 6945-6951 (2005).</li>
<li>Wu, H. -Y., Virolainen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+Streptococcus+pneumoniae+nasopharyngeal+colonization+model+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Pathog%22%5BJournal%5D)">Establishment of a Streptococcus pneumoniae nasopharyngeal colonization model in adult mice.</a> Microb. Pathog. 23, 127-137 (1997).</li>
<li>Mo, Y., Wan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+reverse+transcription-PCR+and+real-time+PCR+in+nanotoxicity+research%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Application of reverse transcription-PCR and real-time PCR in nanotoxicity research.</a> Methods Mol. Biol. 926, 99-112 (2012).</li>
<li>Kuper, C. F., Koornstra, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+nasopharyngeal+lymphoid+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of nasopharyngeal lymphoid tissue.</a> Trends Immunol. 13, 219-224 (1992).</li>
<li>Zhang, Q., Leong, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+regulatory+T+cells+in+nasal+associated+lymphoid+tissue+in+children%3A+relationships+with+pneumococcal+colonization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Characterisation of regulatory T cells in nasal associated lymphoid tissue in children: relationships with pneumococcal colonization.</a> PLoS Pathog. 7, (2011).</li>
<li>Briles, D. E., Novak, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+colonization+with+Streptococcus+pneumoniae+includes+subpopulations+of+surface+and+invasive+pneumococci%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Nasal colonization with Streptococcus pneumoniae includes subpopulations of surface and invasive pneumococci.</a> Infect. Immun. 73, 6945-6951 (2005).</li>
<li>Weinberger, D. M., Trzcinski, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumococcal+capsular+polysaccharide+structure+predicts+serotype+prevalence%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Pneumococcal capsular polysaccharide structure predicts serotype prevalence.</a> PLoS Pathog. 5, (2009).</li>
<li>Bryant, W. P., J,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+Pneumococcal+Serogroups+Cause+the+Most+Invasive+Disease%3A+Implications+for+Conjugate+Vaccine+Formulation+and+Use%2C+Part+I.%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Which Pneumococcal Serogroups Cause the Most Invasive Disease: Implications for Conjugate Vaccine Formulation and Use, Part I.</a> Clin. Infect. Dis. 30, 100-121 (2000).</li>
<li>Hausdorff, W. P., Feikin, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiological+differences+among+pneumococcal+serotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Epidemiological differences among pneumococcal serotypes.</a> Lancet Infect. Dis. 5, 83-93 (2005).</li>
<li>Brueggemann, A., Griffiths, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+Relationships+between+Invasive+and+Carriage+Streptococcus+pneumoniae+and+Serotype+and+Clone+Specific+Differences+in+Invasive+Disease+Potential%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Clonal Relationships between Invasive and Carriage Streptococcus pneumoniae and Serotype and Clone Specific Differences in Invasive Disease Potential.</a> J. Infect. Dis. 187, 1424-1432 (2003).</li>
<li>Mohler, J., Azoulay-Dupis, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+pneumoniae+strain-dependent+lung+inflammatory+responses+in+a+murine+model+of+pneumococcal+pneumonia%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Streptococcus pneumoniae strain-dependent lung inflammatory responses in a murine model of pneumococcal pneumonia.</a> Intensive Care Med. 29, 808-816 (2003).</li>
<li>Wu, H. Y., Virolainen, A., Mathews, B., King, J., Russell, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+Streptococcus+pneumoniae+nasopharyngeal+colonization+model+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microb.+Pathog%22%5BJournal%5D)">Establishment of a Streptococcus pneumoniae nasopharyngeal colonization model in adult mice.</a> Microb. Pathog. 23, 127-137 (1997).</li>
<li>Zhang, Z., Clarke, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+effectors+mediating+Th17-dependent+clearance+of+pneumococcal+colonization+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Cellular effectors mediating Th17-dependent clearance of pneumococcal colonization in mice.</a> J. Clin. Invest. 119, 1899-1909 (2009).</li>
<li>Parker, D., Martin, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptococcus+pneumoniae+DNA+initiates+type+I+interferon+signaling+in+the+respiratory+tract%5BTitle%5D)+AND+%22MBio%22%5BJournal%5D)">Streptococcus pneumoniae DNA initiates type I interferon signaling in the respiratory tract.</a> MBio. 2, (2011).</li>
<li>Haya, D. L., Camilli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+identification+of+serotype+4+Streptococcus+pneumoniae+virulence+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Large-scale identification of serotype 4 Streptococcus pneumoniae virulence factors.</a> Mol. Microbiol. 45, 1389-1406 (2002).</li>
<li>Nakamura, S., Favis, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+stimulation+of+type+I+interferons+during+influenza+virus+coinfection+promotes+Streptococcus+pneumoniae+colonization+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Synergistic stimulation of type I interferons during influenza virus coinfection promotes Streptococcus pneumoniae colonization in mice.</a> J. Clin. Invest. 121, 3657-3665 (2011).</li>
<li>Kim, J. O., Weiser, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+intrastrain+phase+variation+in+quantity+of+capsular+polysaccharide+and+teichoic+acid+with+the+virulence+of+Streptococcus+pneumoniae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Association of intrastrain phase variation in quantity of capsular polysaccharide and teichoic acid with the virulence of Streptococcus pneumoniae.</a> J. Infect. Dis. 177, 368-377 (1998).</li>
<li>Roche, A. M., King, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+attenuated+Streptococcus+pneumoniae+strains+induce+serotype-independent+mucosal+and+systemic+protection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Live attenuated Streptococcus pneumoniae strains induce serotype-independent mucosal and systemic protection in mice.</a> Infect. Immun. 75, 2469-2475 (2007).</li>
<li>Cohen, J. M., Khandavalli, S., Camberlein, E., Hyams, C., Baxendale, H. E., Brown, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+contributions+against+invasive+Streptococcus+pneumoniae+pneumonia+of+antibody+and+Th17-Cell+responses+to+nasopharyngeal+colonisation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Protective contributions against invasive Streptococcus pneumoniae pneumonia of antibody and Th17-Cell responses to nasopharyngeal colonisation.</a> PLoS One. 6 (10), (2011).</li>
<li>Cohen, J. M., Khandavalli, S., Camberlein, E., Hyams, C., Baxendale, H. E., Brown, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+contributions+against+invasive+Streptococcus+pneumoniae+pneumonia+of+antibody+and+Th17-Cell+responses+to+nasopharyngeal+colonisation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Protective contributions against invasive Streptococcus pneumoniae pneumonia of antibody and Th17-Cell responses to nasopharyngeal colonisation.</a> PLoS One. 6 (10), (2011).</li>
<li>Richards, L., Ferreira, D. M., Miyaji, E. N., Andrew, P. W., Kadioglu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunising+effect+of+pneumococcal+nasopharyngeal+colonisation%3B+protection+against+future+colonisation+and+fatal+invasive+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Immunobiology%22%5BJournal%5D)">The immunising effect of pneumococcal nasopharyngeal colonisation; protection against future colonisation and fatal invasive disease.</a> Immunobiology. , 215-251 (2010).</li>
<li>Lanie, J. A., Ng, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+sequence+of+Avery%27s+virulent+serotype+2+strain+D39+of+Streptococcus+pneumoniae+and+comparison+with+that+of+unencapsulated+laboratory+strain+R6%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Genome sequence of Avery's virulent serotype 2 strain D39 of Streptococcus pneumoniae and comparison with that of unencapsulated laboratory strain R6.</a> J. Bacteriol. 189, 38-51 (2007).</li>
<li>Robertson, G. T., Ng, W. L., Foley, J., Gilmour, R., Winkler, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+transcriptional+analysis+of+clpP+mutations+of+type+2+Streptococcus+pneumoniae+and+their+effects+on+physiology+and%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Global transcriptional analysis of clpP mutations of type 2 Streptococcus pneumoniae and their effects on physiology and.</a> 184, 3508-3520 (2002).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J. Infect. Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li>
<li>Orihuela, C. J., Gao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ-specific+models+of+Streptococcus+pneumoniae+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Scand.+J.+Infect.+D%22%5BJournal%5D)">Organ-specific models of Streptococcus pneumoniae disease.</a> Scand. J. Infect. D. 35, 647-652 (2003).</li>
<li>Swirski, F. K., Nahrendorf, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+splenic+reservoir+monocytes+and+their+deployment+to+inflammatory+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification of splenic reservoir monocytes and their deployment to inflammatory sites.</a> Science. 325, 612-616 (2009).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu çalışmada, Streptococcus pneumoniae'nin klinik bir izole suşu kullanılarak farelerin intranazal kolonizasyonu ve bakteriye yanıt olarak nazofarenkse alınan bağışıklık hücrelerinin izolasyonu ve karakterizasyonu için ayrıntılı yöntemler sunduk. Bakteriyel bir inoculumun besin bakımından zengin medyada nasıl kültürlendirilebileceğini ve başlangıçta nazofarenks ile sınırlı olan farelerde bir kolonileşme olayı oluşturmak için nasıl kullanılabileceğini gösterdik. Daha sonra nazofarenkse katılan yanıt veren immün h...

<table><tbody><tr><td>Anti-Fare Ly6C FITC</td><td>BD Pharmingen</td><td>553104</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare Ly6G PE</td><td>BD Pharmingen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare CD45.1 eFluor 450 eBioscience</td><td></td><td>48-0453-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare F4 / 80 Antijen</td><td>APC eBioscience</td><td>17-4801-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare CD11c PerCP-Cy5.5</td><td>eBioscience</td><td>45-0114-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare CD11b PE-CY7</td><td>eBioscience</td><td>25-0112-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare CD3 Alexa Fluor 700</td><td>eBioscience</td><td>56-0032-82</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Fare CD4 eFluor 605NC eBioscience</td><td></td><td>93-0041-42</td><td></td></tr><tr><td>Intramedik Polietilen Boru - PE20</td><td>Becton Dickinson</td><td>427406</td><td></td></tr><tr><td>BD 1 ml Şırınga</td><td>Becton Dickinson</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>BD 26 G 3/8 İntradermal Konik</td><td>Becton Dickinson</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>Tampon RLT Lizis Tamponu</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td></td></tr><tr><td>Difco Triptik Soya Agar</td><td>Becton Dickinson</td><td>236950</td><td></td></tr><tr><td>Defibrine Koyun Kanı</td><td>PML Mikrobiyolojikler</td><td>A0404</td><td></td></tr><tr><td>RNAqueous-Micro Kit</td><td>Ambion</td><td>AM1931</td><td></td></tr><tr><td>M-MuLV Ters Transkriptaz</td><td>New England Biolabs</td><td>M0253L</td><td></td></tr><tr><td>GoTaq qPCR Master Mix</td><td>Promega</td><td>A6001</td><td></td></tr></tbody></table>

streptococcus pneumoniae ile İntranazal kolonizasyon sırasında İnflamatuar yanıtların karakterizasyonu

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Streptococcus pneumoniae tarafından nazofarengeal kolonizasyon akciğerlere veya kan dolaşımına istilanın ön koşuludur1. Bu organizma, nazofarenksin mukozal yüzeyini kolonileştirebilir, burada konakçının diğer dokularına istila etmek için konak savunmalarını barındırabilir, çoğaltabilir ve sonunda üstesinden gelebilir. Normalde alt solunum yollarında bir enfeksiyonun kurulması zatürre ile sonuçlanır. Alternatif olarak, bakteriler kan dolaşımına yayılabilir ve yüksek ölüm oranları2ile ilişkili olan bakteriyemiye neden olabilir veya doğrudan pnömokok menenjitinin gelişmesine yol açabilir. Nazofarengeal kolonizasyonun kinetiğini ve immün yanıtlarını anlamak S. pneumoniae enfeksiyon modellerinin önemli bir yönüdür.
İntranazal kolonizasyon fare modelimiz insan modellerindenuyarlanmıştır 3 ve nazofarenks4-7konak-patojen yanıtlarının incelenmesinde birden fazla araştırma grubu tarafından kullanılmıştır. Modelin ilk bölümünde, insan yetişkinlerde taşıma olaylarına benzer, kendi kendini sınırlayan bir bakteri kolonizasyonu oluşturmak için S. pneumoniae'nin klinik bir izolesini kullanıyoruz. Burada ayrıntılı olarak açıklanan prosedür, bakteriyel bir inoculumun hazırlanmasını ve ardından inoculumun intranazal bir uygulama yolu ile teslim edilmesi yoluyla bir kolonileşme olayının kurulmasını içerir. Yerleşik makrofajlar, sabit durum sırasında nazofarenksteki baskın hücre tipidir. Tipik olarak, enfekte olmayan farelerde az sayıda lenfosit vardır8, ancak mukozal kolonizasyon, bağışıklık yanıtı ve daha sonra konak bağışıklık hücrelerinin işe alınmasıyla sonuçlanacak düşük ila yüksek dereceli inflamasyona (bakteri türlerinin ve suşunun virülansına bağlı olarak) yol açacaktır. Bu hücreler, nares yoluyla trakeal içeriğin bir lavajı ile izole edilebilir ve enfeksiyonun kinetiğini daha iyi anlamak için kolonizasyon bakterilerinin yoğunluğu ile ilişkilidir.

Şekil 1, protokolün ana adımlarını özetleyen bir genel bakış şemasını temsil eder. Şekil 2-3, burada açıklanan protokollere özgü mikrobiyolojik metodolojinin görselleştirilmesini sağlar. Şekil 4, intranazal kolonizasyon yapmak için bir farenin uygun şekilde konumlandırılmasını temsil ederken, Şekil 5 tipik olarak S. pneumoniae suşu P1547 ile kolonize edilen farelerin ağırlığındaki değişiklikleri gösterir. Şekil 6-7, bu iki tekni...

Murine nazofarenksin Streptococcus pneumoniae ile kolonizasyonu ve daha sonra yapışık veya işe alınan hücrelerin çıkarılması açıklanmaktadır. Bu teknik, nazofarenksin yıkanmasını ve sıvının nares yoluyla toplanmasını içerir ve diferansiyel hücre niceliği ve mRNA ekspresyonunun yerinde analizi dedahil olmak üzere çeşitli okumalar için uyarlanabilir.

Streptococcus pneumoniae ile İntranazal Kolonizasyon Sırasında İnflamatuar Yanıtların Karakterizasyonu

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Bu prosedür, fare nazofarenksinin streptococcus pneumonia ile kolonize edilmesini ve ardından kolonize olan bakterilerin yanı sıra yapışmış veya mobilize olmuş hücrelerin ekstrasyonunu içerir. Bu işlem, öncelikle ilgili S pneumonia suşundan bir bakteriyel inokulum hazırlanarak gerçekleştirilir.Canlı bakteriler, daha sonra anestezi altındaki farelere, bir sabitleyici aparat içerisindeyken intranazal olarak uygulanır. İstenilen kolonizasyon süresi sonunda fareler ötanize edilir ve açıkta kalan trakeaları kanüle edilip içeriklerin burun yoluyla dışarı atılmasıyla nazal lavaj işlemleri gerçekleştirilir. Nazal lavajlarda bulunan bakteri sayıları, mikrobiyolojik teknikler kullanılarak nicelendirilebilir. Alternatif olarak, immün yanıtlar, gerek recruit edilen hücrelerin fenotiplemesi için akış sitometrisi teknikleri gerekse kantitatif PCR teknikleri kullanılarak analiz edilebilir.Başlamadan önce, ilgilenilen eksprese mRNA seviyelerini ölçmek için, prosedürün intranazal kolonizasyon kısmı için fare sabitleyiciler ve nazal lavajlar için kanüllü iğneler hazırlamanız gerekecektir. Bir fare sabitleyici, 50 mililitrelik bir falcon tüpünün konik ucunun kesilmesiyle basitçe hazırlanabilir. Açıkl

characterization-inflammatory-responses-during-intranasal

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu video, entübasyon ve bakteri süspansiyonlarının akciğer loblarına yerleştirilmesi yoluyla immünokompetan bir kemirgen modelinde akciğer enfeksiyonunun oluşumunu göstermektedir. Bu model, bağışıklığı yeterli hayvanlarda antibakteriyel etkinlik çalışmalarına olanak tanır.

İmmünkompetan Kemirgen Modellerinde Streptococcus pneumoniae'nin İntrabronşiyal Damlatılması

Deneysel insan pnömokok taşıma taşıma doğal bir modeli ve aşı geliştirme kullanım için potansiyel model sunmaktadır. Bu teknik çok değerli ama karmaşık ve bir insan bir patojen getirerek klinik risklidir. Biz ayrıntılı bir protokol geliştirmiştir.

Deneysel İnsan Pnömokok Taşıma

Streptococcus pneumoniae ciddi toplum kökenli pnömoni ve dünya çapında 2 milyondan fazla kişinin ölümünden sorumludur neden lider patojen olduğunu. Spor ya da virülans karıştığı bakteriyel faktörlerin etkisi biyolüminesens bakterileri kullanarak akut fare pnömoni veya bakteriyemi modelinde gerçek zamanlı olarak izlenebilir.

Biyoluminesen Bakteriler Kullanılarak Gerçek Zamanda Bir Akut Fare Pnömoni Modelinde Pnömokok virulans faktörlerinin etkisi aşağıdaki

Patojen enfeksiyonuna karşı konak bağışıklık tepkisi sıkı bir şekilde düzenlenmiş bir süreçtir. Farelerde bir lipopolisakarit akciğer maruz modeli kullanarak, bu hastalığın patojenezi ile ilgili kompleks mekanizmalar yüksek çözünürlüklü değerlendirme yapmak mümkündür.

Farelerde Host immün yanıtı değerlendirmek için Orofarengeal intratrakeal PAMP İdaresi ve Bronchoalveolar Lavage Kullanımı

Streptococcus pneumoniae, kalpte ayrık pürülan olmayan mikroskobik lezyonlar oluşturur. Kardiyak mikrolezyon oluşumunun bir murin modeli için protokol ana hatlarıyla belirtilmiştir. Mikroskopi kullanılarak mikrolezyon görselleştirmesi, erken ve geç mikrolezyonlar arasında ayrım ve nekahat dönemindeki hayvanların kalplerinde kardiyak yeniden şekillenmeyi tespit etme yöntemleri hakkında talimat verilmektedir.

Görselleştirme<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Kalp Microlesions ve sonraki Kardiyak Tadilat içinde

Konak-patojen etkileşimlerinin in vitro çalışması spesifik immün yanıtların karakterizasyonuna izin verirken, karmaşık yanıtların etkilerini gözlemlemek için in vivo modeller gereklidir. Candida albicans maruziyetini ve ardından Pseudomonas aeruginosa aracılı akciğer enfeksiyonunu kullanarak, ventilatörle ilişkili pnömoni patojenitesinde yer alan mikrobiyal etkileşimlerin bir fare modelini oluşturduk.

Mikrobiyal Toplulukları incelenmesi<em&gt; İn Vivo</em&gt;: Arası Ana aracılı Etkileşim Modeli<em&gt; Candida albicans</em&gt; Ve<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Airways

Haemophilus influenzae'nin farelerin alt solunum yollarına intra-trakeal inokülasyon prosedürünü gösteriyoruz. Bu, fare modellerinde hava yolu iltihabını düzenleyen sinyal yollarını incelemek için çok kullanışlı bir araçtır.

intra-trakeal İdaresi<em&gt; Haemophilus influenza</em&gt; Fare Modelleri Havayolu inflamasyonu Eğitim için

Çeşitli yöntemler, farelerde bakteriyel pnömoni modelleme için literatürde tarif edilmiştir. Bu yazıda, orofarinksin pipetle bakteriyel inokulum aspirasyonu (yani, inhalasyon) yoluyla zatürree uyarılması için bir non-invaziv, ucuz, hızlı bir yöntem açıklanmaktadır. akciğer doğal bağışıklık yanıtının değerlendirilmesi için aşağı akış yöntemleri de ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Farelerde Deneysel Bakteriyel Pnömoni İndüksiyonunun ve fenotipleme bir Non-invaziv ve Teknik Olmayan yoğun Yöntem

Haemophilus influenzae solunum yollarında inflamasyona neden olur. Bu makalede, bu bakteriye yanıt olarak fagositler ve lenfositler tarafından immün yanıtları tanımlamak için akım sitometrisi ve konfokal mikroskopinin kullanımı üzerinde durulacaktır.

Haemophilus Influenzae'ye Solunum İmmün Yanıtlarının Değerlendirilmesi

Bu el yazması, farelerde enfeksiyöz bir pnömoni modelinin oluşturulmasını ve bakteri yetiştirme ve intratrakeal damlatma yöntemleri ile birlikte yaralanma çözünürlüğünün ilgili karakterizasyonunu açıklamaktadır. Bağışıklık ortamını değerlendirmek için yüksek boyutlu akış sitometrisi kullanan yeni bir yaklaşım da açıklanmaktadır.

Pnömoni Çözünürlüğünü Değerlendirmek için Deneysel Model

Bu yazıda, viral enfeksiyon sırasında pnömokokların asemptomatik bir kolonizatörden hastalığa neden olan bir patojene geçişi için yeni bir fare modeli açıklanmaktadır. Bu model, hastalık progresyonunun farklı aşamalarında ve çeşitli konakçılarda polimikrobiyal ve konakçı-patojen etkileşimlerini incelemek için kolayca uyarlanabilir.

Streptococcus pneumoniae'nin Viral Ko-Enfeksiyon Üzerine Kolonizatörden Patojene Geçişi İçin Bir Fare Modeli, Yaşın Şiddetlendirdiği Hastalıkları Özetler

Öğrenin, farelerde Streptococcus pneumoniae ile nazofarenks kolonizasyonu ve burun lavajı yöntemiyle bakteri ve bağışıklık hücrelerinin izolasyonu. Bu teknik, solunum yolu enfeksiyonlarında immün yanıtları incelemek için kullanılır.

Streptococcus pneumoniae ile İntranazal Kolonizasyon Sırasında İnflamatuar Yanıtların Karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet