Name: A Noninvaziv Yöntemi In situ Kadın American Istakozların çiftleşme Başarı (Belirlenmesi Homarus americanus) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Öğrenin, Homarus americanus dişi ıstakozların çiftleşme başarısını denizde invaziv olmayan bir yöntemle nasıl değerlendireceğinizi. Bu teknik, sürdürülebilir balıkçılık yönetimi için üreme dinamiklerini anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Onların işbirliği çok takdir - Yazarlar olan tekneler biz örnekleme için izin verildi, tüm New England ticari lobstermen teşekkür etmek istiyorum. Buna ek olarak, biz Little Bay Lobster Şirketi (Newington, NH) ve bize kendi tesislerinde örnekleme yapmak izin Champlains Seafood (Point Judith, RI) teşekkür ederim. Aşağıdaki UNH öğrenciler bu çalışma boyunca değerli yardım sağladı: Haley Beyaz, Françoise Morrison, Sarah HAVENER, Audra CHAPUT ve Mayıs grose. Bu proje whw (proje # R/CFR-11) ve JSG bir UNH Deniz Programı Hibe NH SeaGrant hibe tarafından desteklenmiştir.

Kısım A: Alan Örnekleme Tekniği 1.. Kadın Ölçümler <ol><li> Her dişi ıstakoz, karapas uzunluğu (CL) ve kaliperler bir çift kullanarak en yakın 1.0 mm, ikinci karın segmentinin genişliğini ölçmek. NOT: (dişiler yumurta taşıyan) karın genişliği cinsel olgunluk göstergesidir çünkü ikinci karın segmenti ölçülür. Buna ek olarak, (adım 1.2), daha sonra üreme aşaması ile, bu veriler için gerekli dökücü sahne tespit edilmesi avantajlı olabilir. </li><li> Karın pleopods birinde (İstakozlarda standart bir metodolojik protokol) kapalı bir küçük distal bölümünü Klip ve daha sonra bir diseksiyon mikroskobu 9 görüntüleme için temiz deniz suyunda pleopod saklayın. NOT: Bu adım aynı zamanda dişiler yumurtalarını 10 a&#39;ya hazırlanıyor bir göstergesidir pleopods, çimento bezlerinin varlığını ortaya çıkarabilir. </li></ol> 2. İğne Insertion <ol><li> (18, G Tablo 1 e bakınız), şırınga iğnesi kaydedin ~ 45 ° (Şekil 1) ° &#39;de, kuyruk doğru açılı seminal deponun içine 1 cm. Not: önce seminal deponun altındaki sperm en yüksek konsantrasyonu (Şekil 1) ulaşmak için sperm tamponundan itilir gibi dokunulmamış sperm fişli ıstakoz, iğne, sokma esnasında bir direnç karşılayabilir. NOT: fiş varlığı, kendi içinde, ıstakozlar evlendirilen olduğunu güvenilir bir göstergedir. Bazı hayvanlarda hiçbir spermatofor mevcut olabilir, çünkü çok az direnç olabilir, spermatofor henüz bir fiş içine sertleştirilmiş edilmemiştir, ya da daha önce yumurta bir veya daha fazla kavramaları dölleme için kullanılmış olabilir küçüktür. </li></ol><img alt="Şekil 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50498/50498fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50498/50498fig1.jpg" width = &quot;600px&quot; /&gt; Şekil 1. İğne ekleme ve ıstakoz seminal kabın görüntüle. Sperm örneği ayıklamak için ıstakoz seminal yuvasına künt uçlu iğne takma. İğnenin açısı ve derinliği de tutarlı bir numune elde etmek için kritiktir. Sağ: disseke ve dikey olarak bölünmüş olan bir seminal deponun göster. Spermatozoa deponun dibinde (derin noktası) seviyesinde yer alan ise sperm fiş, kabın en üst ya da en dış kısmını kaplar. Bu bir derinlikten numune kabını delinerek kan kirlenmiş numunesi neden olabilir dikkat etmek önemlidir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50498/50498fig1highres.jpg" target="_blank">resmi büyütmek için buraya tıklayın</a> . 3. Sperm Tak Penetran <ol><li> Başlangıçtaki yerleştirme sonrası, (vücut eksenine dik olarak) yaklaşık dikey iğne açısını yükselmek ve çok yavaş çalışmaya başlaraşağı kabın içine. </li><li> Uç kuyruk doğru hafifçe işaret edilmektedir, böylece belirli bir açıda eğimli iğne tutun. Sonunda matris içine nüfuz kadar bu durumda, iğne ucu, tıpanın üst sıkıştırma edilir. </li><li> Direnç kez daha hissedilir kadar yavaş yavaş aşağıya doğru itmek için iğne devam - bu kabın alt ve numune alınır burada. </li></ol> 4. Sperm Kaldırma <ol><li> Haznenin dibinden bir örnek (çoğunlukla katı fiş madde, sıvı, sperm ve diğer sıvı) çıkarın ve 2.0 ml işaretlenmiş bir plastik tüpe örnek yatırmak. </li><li> Soğuk deniz suyu ~ 0.1-0.5 ml yuvasını yıkayın. </li><li> Aynı tüp içerisinde sıvı ve yeri, yaklaşık 0.3 ml çıkarın. </li><li> Buz üzerinde mağaza sperm numuneleri laboratuvarda incelenir kadar. Bölüm B: Lab Sperm Örneklerinin İncelenmesi Not: Bireysel l seminal kapların kaldırılır Örnekler<html> obsters sperm hücreleri mevcut veya yok olmadığını belirlemek için muayene edilmelidir. </li><li> Her plastik tüp, bir kapak kayma ile bir cam slayt üzerinde bir yerde, ve bir bileşik mikroskop ile 100X at görünümünde ~ sıvının 50 ul çıkarın. </li><li> Gibi örnekler Puan: kıt sayıda, ya da hiç sperm (bu çalışmada gerçek sperm sayıları, Şekil 2 ölçmek vermedi). </li></ol><img alt="Şekil 2," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50498/50498fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50498/50498fig2.jpg" width="600px" /> Şekil 2. Istakoz sperm örneği görüntüler. 40X büyütmede bir bileşik mikroskop ile bakıldığında, bir dişinin seminal priz alınan ıstakoz sperm örneklerinin Görüntüler. Soldaki resim, diğer (sağ), seyrek bir örneği (ölçek bar = 10 mikron) göstermektedir ise çok sayıda sperm bulunan bir örnek gösterir.. Jpg &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; büyük resmi görebilmek için buraya tıklayın.

<ol><li>FAO and Agriculture Organization of the United Nations). Fisheries and Aquaculture Department. , Available from: 
 
 <a target="_blank" href="http://www.fao.org">http://www.fao.org</a> (2012).</li>
<li>MacDiarmid, A., Butler, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+economy+and+limitation+in+spiny+lobsters%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Ecol.+Sociobiol%22%5BJournal%5D)">Sperm economy and limitation in spiny lobsters.</a> Behav. Ecol. Sociobiol. 46, 14-24 (1999).</li>
<li>Kendall, M. S., Wolcott, D. L., Wolcott, T. G., Hines, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+male+size+and+mating+history+on+sperm+content+of+ejaculates+of+the+blue+crab+Callinectes+sapidus%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Influence of male size and mating history on sperm content of ejaculates of the blue crab Callinectes sapidus.</a> 230, 235-240 (2002).</li>
<li>Sato, T., Ashidate, M., Goshima, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+male+mating+frequency+and+male+size+on+ejaculate+size+and+reproductive+success+of+female+spiny+king+crab%2C+Parolithodes+brevipes%5BTitle%5D)+AND+%22Mar.+Ecol.+Prog.+Ser%22%5BJournal%5D)">Effects of male mating frequency and male size on ejaculate size and reproductive success of female spiny king crab, Parolithodes brevipes.</a> Mar. Ecol. Prog. Ser. 296, 251-262 (2005).</li>
<li>Sato, T., Goshima, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impacts+of+male-only+fishing+and+sperm+limitation+in+manipulated+populations+of+an+unfished+crab%2C+Hapalogaster%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Impacts of male-only fishing and sperm limitation in manipulated populations of an unfished crab, Hapalogaster.</a> 313, 193-204 (2006).</li>
<li>Rondeau, A., Sainte-Marie, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+mate-guarding+time+and+sperm+allocation+by+male+snow+crabs+%28Chionoecetes+opilio%29+in+response+to+sexual+competition%2C+and+their+impact+on+the+mating+success+of+females%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Bull%22%5BJournal%5D)">Variable mate-guarding time and sperm allocation by male snow crabs (Chionoecetes opilio) in response to sexual competition, and their impact on the mating success of females.</a> Biol. Bull. 201, 204-217 (2001).</li>
<li>Waddy, S. L., Aiken, D. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWaddy%2C+SL+%22Mating+and+insemination+in+the+Ameri+can+lobster%2CHomarus+americanus.+Crustacean+sexual+behavior%22">Mating and insemination in the Ameri can lobster,Homarus americanus. Crustacean sexual behavior</a>. Bauer, R. T., Martin, J. W. , Columbia University Press. NY. 126-144 (1990).</li>
<li>Johnson, K. J., Goldstein, J. S., Watson, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+methods+for+determining+the+fertility+status+in+early-stage+American+lobster%2C+Homarus+americanus%2C+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Crust.+Biol%22%5BJournal%5D)">Two methods for determining the fertility status in early-stage American lobster, Homarus americanus, eggs.</a> J. Crust. Biol. 31, 693-700 (2011).</li>
<li>Aiken, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proecdysis%2C+setal+development%2C+and+molt+prediction+in+the+American+lobster+%28Homarus%29%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Proecdysis, setal development, and molt prediction in the American lobster (Homarus).</a> 30, 1337-1344 (1973).</li>
<li>Aiken, D. E., Waddy, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cement+gland+development%2C+ovary+maturation%2C+and+reproductive+cycles+in+the+American+lobster+Homarus+americanus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Crust.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cement gland development, ovary maturation, and reproductive cycles in the American lobster Homarus americanus.</a> J. Crust. Biol. 2, 315-327 (1982).</li>
<li>Pugh, T. L., Goldstein, J. S., Lavalli, K. L., Clancy, M., Watson, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((At-sea+determination+of+female+American+lobsters+%28Homarus+americanus%29+mating+activity%3A+Patterns+vs.+expectations%5BTitle%5D)+AND+%22Fish.+Res%22%5BJournal%5D)">At-sea determination of female American lobsters (Homarus americanus) mating activity: Patterns vs. expectations.</a> Fish. Res. 147, 327-337 (2013).</li>
<li>Bauer, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetic+trends+in+sperm+transfer+and+storage+complexity+in+decapod+crustaceans%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Crust.+Biol%22%5BJournal%5D)">Phylogenetic trends in sperm transfer and storage complexity in decapod crustaceans.</a> J. Crust. Biol. 6, 313-325 (1986).</li>
<li>Talbot, P., Helluy, S. Reproduction and embryonic development. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTalbot%2C+P+%22Biology+of+the+Lobster%3A+Homarus+americanus%22">Biology of the Lobster: Homarus americanus</a>. Factor, J. R. , Academic Press. NY. 177-216 (1995).</li>
<li>Cooper, R. A., Uzmann, J. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCooper%2C+RA+%22Ecology+of+juvenile+and+adult+Homarus.+The+biology+and+management+of+lobsters%22">Ecology of juvenile and adult Homarus. The biology and management of lobsters</a>. Cobb, J. S. 2, Academic Press. NY. 97-142 (1980).</li>
<li>Estrella, B. T., McKiernan, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catch-per-unit-effort+and+biological+parameters+from+the+Massachusetts+coastal+lobster+%28Homarus+americanus%29+resource%3A+description+and+trends%5BTitle%5D)+AND+%22NOAA+Tech.+Rep.+NMFS%22%5BJournal%5D)">Catch-per-unit-effort and biological parameters from the Massachusetts coastal lobster (Homarus americanus) resource: description and trends.</a> NOAA Tech. Rep. NMFS. 81, (1989).</li>
<li>Waddy, S. L., Aiken, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+fertilization+and+consecutive+spawning+in+large+American+lobster%2C+Homarus+americanus%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Fish.+Aquat.+Sci%22%5BJournal%5D)">Multiple fertilization and consecutive spawning in large American lobster, Homarus americanus.</a> Can. J. Fish. Aquat. Sci. 43, 2291-2294 (1986).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atlantic+States+Marine+Fisheries+Commission+%28ASMFC%29.+American+lobster+stock+assessment+report+for+peer+review%5BTitle%5D)+AND+%22ASMFC+Stock+Assessment%22%5BJournal%5D)">Atlantic States Marine Fisheries Commission (ASMFC). American lobster stock assessment report for peer review.</a> ASMFC Stock Assessment. , Washington, D.C. (2009).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması beyan ederim.

Bu video ve kağıt anahat ve dişi ıstakoz başarıyla evlendirilen varsa belirlemek için bir yöntem ortaya koymaktadır. Bu yaklaşım kullanıcıların çeşitli denizde ıstakoz büyük ölçekli örnekleme için kullanılabilir olması yeterince basittir. Bu yöntem çiftleşme sırasında erkek ikinci dişi ıstakoz geçirilen seminal hazne içinde bir spermatofor varlığını tespit dayanmaktadır. Bu spermatophores kısmen da hazne içinde yatırılır kısa bir süre sonra, bir sperm fiş halinde sertleşmesi, bu yüzden, bir sperm tıpanın varlığı da çift...

<html> Amerikan ıstakoz (Homarus americanus) Kuzey Atlantik (~ $ 390,000,000 üzerinde değerli 2011 yılında 56.000 mt) 1 en verimli balıkçılık biridir. Ancak, vahşi popülasyonlar bu türün üreme dinamikleri konusunda anlayış genel bir eksikliği vardır. Aktif üreme katılan bireylerin sayısı ve boyutları da dahil olmak üzere üreme çıkış daha doğru tahminler, üreten bir stok değerlendirme sürecini iyileştirmek olabilir. Dikenli ıstakoz 2, mavi yengeç 3, kral yengeç 4, taş yengeçler 5 ve kar yengeç: Örneğin, nedeniyle sperm sınırlaması tam üreme potansiyelini elde engellenir kadın dahil olmak üzere birçok ticari istismar deniz kabuklular için bir endişe olarak tespit edilmiştir 6. Genel amaç sperm sınırlama yanı sıra Amerikan ıstakoz balıkçılığın belirli bölgelerinde bir faktör olabilir eğer belirlemektir. nt &quot;&gt; (gözle görülür sağlam, son zamanlarda sıkılır yumurta) ovigerous kadın ıstakoz ile alakasız bir etiketleme çalışması yapılırken İstakozlarda potansiyel bir sperm sınırlama sorununun ilk belirtileri gözlendi. ~ bu hayvanların% 15 düşmüş olduğu belirtilen balıkçıların raporları Recapture onların yumurta kavramaları sadece 1-2 ay sonra. çalışma hipotezi bazı ıstakoz döllenmiş olmasaydı yumurta taşıma ve, sonuç olarak, &#39;düştü&#39; 7., bir sonraki çalışmasının ön veriler gerçeği doğruladı olduğunu olduğunu ıstakoz olacak başarıyla evlendirilen değil ve bu döllenmemiş yumurta, sadece ~ 1 ay 8 uygulansa bile yumurta a&#39;ya. Dolayısıyla, doğal popülasyonlarının döllenmemiş yumurta taşıyan dişilerin gözlem verilen, biz sperm sınırlama katkıda olabilir için kapsamını belirlemek için çalıştı cinsel olgun ıstakozlarına üreme bir submaksimal düzeyde. Bu hedefe ulaşmak için, teknik spermatositlerde algılamak için geliştirilmiştirPhore çiftleşme sırasında erkek tarafından yatırılır. Bu kağıt ve video kadın ıstakoz çiftleşme başarısını tespit etmek için geliştirilen bir invaziv olmayan, basit bir yöntem. Teknik denizde, ya araştırma ya da ticari balıkçı teknelerinde hızlı ve güvenilir şekilde kullanılabilir. Bu numune alma yöntemin ayrıntıları yanı sıra bazı temsili bulgular tekniğinin uygulanmasını göstermek için sunulmuştur.

<table><tbody><tr><td>Kaliperler</td><td>Mitutoyo Digimatic</td><td>500-196-20</td><td>http://www.globalindustrial.com</td></tr><tr><td>3 ml Luer-Lok şırınga</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>309585</td><td></td></tr><tr><td>www.bd.com Monoject alüminyum göbek künt iğneler, 18 G x 1</td><td>Webster Veteriner</td><td>8881202348</td><td>www.mywebstervet.com</td></tr><tr><td>2.0 ml Plastik saklama tüpleri</td><td>Eppendorf</td><td>wu-06333-72</td><td>http://www.coleparmer.com</td></tr><tr><td>Buzlu</td><td></td><td></td><td></td>strafor soğutucu</tr><tr><td>Bileşik ışık mikroskobu</td><td>Olympus</td><td>BH System</td><td>http://www.olympusamerica.com</td></tr><tr><td>Kapak kızaklı</td><td></td><td></td> cam kenarlar <td>75 mm x 25 mm, ~1 mm kalınlık</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık uçlu</td><td></td><td></td><td></td> pipetleyici</tr></tbody></table>

a noninvaziv yöntemi<em&gt; in situ</em&gt; kadın american istakoz&#39;ların çiftleşme başarı (belirlenmesi<em&gt; homarus americanus</em&gt;)

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters (Homarus americanus)

Kuzeybatı Atlantik&#39;te en verimli balıkçılık biri olmasına rağmen, çok Amerikan ıstakoz doğal üreme dinamikleri hakkında bilinmemektedir. Sömürülen kabuklu nüfus (yengeç ve ıstakoz) son çalışmalar olgun kadın nedeniyle sperm sınırlaması tam üreme potansiyeline ulaşmak mümkün durumlar vardır olduğunu göstermektedir. Amerikan ıstakoz balıkçılık farklı bölgelerinde bu olasılığı incelemek için, güvenilir ve ağrısız bir yöntem denizde kadın ıstakoz çok sayıda örnekleme için geliştirilmiştir. Bu yöntem, bir sperm fiş varlığını veya yokluğunu belirlemek için ve sperm varlığı açısından incelenebilir bir örnek geri alma dişinin seminal deponun içine bir küt uçlu bir iğne ekleme içerir. Kontrol çalışmalarında bir dizi bu tekniğin güvenilirliğini test etmek için dock ve laboratuarda yapılmıştır. Bu çabalar 294 kadın ıstakoz onaylamak için örnekleme getirdiğini varlığı ofa sperm fiş güvenilir bir kap içinde sperm göstergesidir ve dolayısıyla, çiftleşme oldu. Bu kağıt metodoloji ve örneklenen toplam kadın bir alt elde edilen sonuçları göstermektedir. George Bankası ve Cape Ann, MA örneklemeyi 230 kadın ıstakoz (boyut aralığı = Kabuk uzunluğu olarak 71-145 mm),% 90.3 sperm için pozitiftir. Bazı kadınlarda sperm yokluğu için potansiyel açıklamalar şunlardır: gelişmemişlik (fizyolojik olgunluk eksikliği), yumurtası döllemek için kullanılan sonra sperm fiş dökümünü ve çiftleşme aktivite eksikliği. Anketler kadın ıstakoz çiftleşme başarısını incelemek için bu teknik doğal popülasyonlarının üreme aktivitesini belgelemek için alanda kullanılabilecek güvenilir bir vekil olduğunu göstermektedir.

<html> Burada bildirilen veriler nearshore ve offshore yerlerde hem kökenli kadın ıstakoz bir alt kümesi için vardı. Nearshore grup Cape Ann, Massachusetts yakın kıyı sularında yakalanan ve inceleme için laboratuvara soğutucularda taşınan 44 ıstakoz oluşuyordu. 186 deniz ıstakoz toplam George Bank yakalanan ve New Hampshire&#39;da bir ticari tutma tesiste örneklenmiştir. Sperm numuneleri yukarıda tarif edilen yöntemlere göre tüm hayvanların elde edilmiş ve hemen sperm varlığı ya da yokluğu iç...

Böyle Amerikan ıstakoz balıkçılık gibi sömürülen kabuklu balıkçılık için balıkçılık kaynaklı değişimler, potansiyel çiftleşme başarısında düşüşe neden üreme dinamiklerini etkileyebilir. Bu çalışmanın amacı, fizyolojik veya işlevsel olgun olabilir dişi ıstakoz çiftleşme başarısını tespit etmek için non-invaziv bir yöntem geliştirmek için oldu.

A Noninvaziv Yöntemi<em&gt; In situ</em&gt; Kadın American Istakoz&#39;ların çiftleşme Başarı (Belirlenmesi<em&gt; Homarus americanus</em&gt;)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American ...

Amerikan İstakozu, Atlantik Kanada'dan New England'e kadar uzanan coğrafi dağılım alanı boyunca simgesel bir türdür. Birçok bölgede, Amerika Birleşik Devletleri'nin doğusundaki en büyük tek tür balıkçılık faaliyetlerinin hedefidir. Bu balıkçılığın süregelen başarısı, kuluçka dönemindeki stokları korumaya yönelik biyolojik kontroller de dahil olmak üzere çeşitli yönetim önlemlerine bağlanmaktadır.Bu düzenlemeler, minimum ve maksimum boyut sınırlarını, yumurtalı dişilerin korunmasını ve kanıtlanmış damızlık olarak kabul edilen v-çentikli dişilerin avlanmasının yasaklanmasını içerir. Istakoz balıkçılığının geleceği, kısmen, ıstakozun çiftleşme sisteminin başarısına bağlı olan yeni bireylerin sağlıklı bir şekilde sisteme katılmasına dayanmaktadır. Bununla birlikte, dünya genelindeki diğer kabuklu deniz canlısı balıkçılıklarına benzer şekilde, bu balıkçılığın yoğun olarak sömürülmüş olması, bu türün reprodüktif dinamiklerini etkileyebilir.Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, cinsel olarak olgunlaşmış dişi ıstakozların çiftleşme başarısını belirlemek için basit ve invaziv olmayan bir yöntem geliştirmekti. Bir ıstakozun cinsiyeti, solda görülen ventral yüzeyine bakılarak en iyi şekilde ayırt edilir; dişi, öncelikle yassı ve tüylü olan ilk PLE pod çifti ile karakterize edilir. Dişiler ayrıca, erkeğin aktardığı spermi depoladıkları oval şeklinde bir seminal reseptora sahiptirler.Kısmen konik yapıda ve sertleşmiş olan ilk pleopod çifti sayesinde ayırt edilebilen erkek birey sağda gösterilmiştir. Bu gonopodlar, spermatoforun dişinin seminal reseptakülüne aktarılmasına yardımcı olur.Ayrıca, bu SPO metaforunun dışarı çıktığı erkeğin gonoporları da gösterilmiştir. Kur yapma sürecinde, erkek ve dişi ıstakozlar, kimyasal aracılı iletişim ve yuva paylaşımı dahil olmak üzere karmaşık davranışlar sergilerler. Yuva paylaşımı davranışı, dişinin deri değişimi öncesinde ve sonrasında gerçekleşir ve erkeğin koruması olarak yorumlanabilir; çiftleşme tipik olarak dişinin deri değişiminden sonraki bir saat içinde gerçekleşir ve yalnızca çok kısa bir süre devam eder.Erkek, S SPM metaforunu seminal reseptaküle aktarmak amacıyla, yeni deri değiştirmiş dişiyi sırt üstü çevirir. Dişi bir ıstakoz, çiftleşme olayından elde edilen spermleri iki yıl veya daha uzun süre saklayabilir ve bu sürenin sonunda yumurta kütlesini dışarı çıkarır. Yumurtalar, dişinin karnının alt kısmındaki pleopodlara tutunmuştur.Yumurta gelişimi genellikle dokuz ila 11 ay sürer ve deniz suyu sıcaklığına oldukça bağımlıdır. Yumurtalar ilkbahar ve yaz mevsiminde planktonik larvalar olarak açılır ve genç bireyler olarak dibe çökelmeden önce birkaç larval aşamadan geçerler. Burada tanımladığımız yöntem, ticari ıstakoz teknelerinde veya denizdeki diğer araştırma platformlarında bulunurken çok sayıda dişi ıstakozdan sperm örnekleri elde etmek için bir teknik sunmaktadır.Küt uçlu bir iğne, dişinin seminal reseptakulumuna yerleştirilir ve spermatoforun bir kısmı ile beraberindeki spermler alınır. Sperm örneği daha sonra laboratuvarda saklanabilir ve incelenebilir. Seminal reseptakulumun yapısı nedeniyle, bu teknikle ilişkili herhangi bir mortalite saptanmamıştır.Saha örneklemesi için gerekli malzemeler arasında, örnekleri soğuk tutmak için buz içeren bir soğutucu, iki mililitrelik örnek tüpleri, plastik ependorf tüpleri, üç cc'lik bir şırıngaya takılmış 18 gauge küt uçlu iğne ve soğuk, temiz deniz suyu yer almaktadır.Steril olması idealdir ancak zorunlu değildir. Ayrıca, istendiği takdirde karpus uzunluğu, abdominal genişlik ve kıskaç boyutları gibi ıstakozun morfometrik özelliklerini kaydetmek için kumpaslara ihtiyaç duyacaksınız. Bu metrikleri, numune tüplerinin tanımlama numaralarıyla birlikte kaydetmek için önceden basılmış veri sayfaları kullanılır.Numune alan kişi; örnekleme tarihi, örnekleme yeri ve ticari tuzak gibi yakalama yöntemi gibi ayrıntıları da kaydetmelidir. Örneğin, her ıstakozu kumpas kullanarak en yakın milimetreye kadar ölçün; karapaks uzunluğu, göz çukurunun arkasından karapaksın sonuna kadar dorsal yönde ölçülmelidir. Bazen, abdominal genişlik gibi ek ölçümler, olgunluk indeksini tahmin etmek için yararlı olabilir.Daha sonra, bir kumpas kullanarak standart karapaks uzunluğunu ölçün. Ardından, abdominal genişliği ölçmek için hayvanı ventral tarafı yukarı gelecek şekilde çevirin. Seminal reseptakülden sperm örneği toplamak için, dişi ıstakozu abdomen size bakacak şekilde ventral tarafı yukarıda tutun.Şırınga iğnesini seminal reseptaküle yerleştirin. Eğer bir spermatofor mevcutsa, çok sert bir sperm tıkaçla karşılaşacaksınız. Dikkatlice penetre etmeniz gerekecektir; şırıngayı önceden etiketlenmiş bir tüpe boşaltın, şırıngayı az miktarda temiz deniz suyu ile doldurun ve seminal reseptaküle enjekte edin.Bu işlem, spermlerin sert tıkaçtan ayrılmasına yardımcı olacaktır. Ardından pistonu tekrar kaldırın ve bu ek örneği aynı örnek tüpüne aktarın. İğnenin açısı ve derinliği, tutarlı örnekler elde etmek için kritik öneme sahiptir.Bu görüntüde, seminal reseptakül diseke edilmiş ve dikey olarak ikiye ayrılmıştır. Sperm tıkacı reseptakülün üst kısmını doldururken, spermatozoalar reseptakülün en alt, en derin noktasında yer almaktadır. Reseptakül, dişinin boyutuna bağlı olarak yaklaşık bir santimetre derinliğindedir ve sperm örneğini toplamak için iğnenin sertleşmiş tıkacı delmesi gerekecektir.Kapla alt kısmındaki kabuk benzeri yapıya baskı yapmamaya dikkat edin. Şimdi örnekleme sürecini laboratuvar ortamında daha yavaş bir şekilde göstereceğiz.Bu tekniği kullanmak isteyen herkesin, sahada örnek toplamaya çalışmadan önce laboratuvarda pratik yapmasını öneririz. Istakozu tekrar ventral tarafı yukarıda ve abdomen size dönük olacak şekilde tutun. Seminal reseptörü delmek ve sperm tıkacını test etmek için, ucu abdomene doğru ve 45 derecelik bir açıyla başlayarak küt uçlu bir iğne kullanın.Eğer bir tıkaç varsa, sabit basınç uygulandığında direnç burada hissedilecektir. Bu penetrasyona yardımcı olmak için iğneyi hafifçe döndürün. İğneyi, gösterilen iğne üzerindeki siyah referans çizgisiyle belirtildiği üzere yaklaşık bir santimetre derinliğe kadar iterek sperm tıkacının içinden geçirin.Şırınganın içeriğini bir örnek tüpüne boşaltın. Ardından, seminal reseptikülü temizlemek için şırıngayı çok az miktarda soğuk, taze deniz suyu ile doldurun ve istakozlar arasında içeriği tekrar örnek tüpüne boşaltın. Kontaminasyonu önlemek için şırıngayı iyice yıkadığınızdan emin olun.İğneyi silin, ardından herhangi bir numune materyalinin dışarı atıldığından emin olmak için şırıngayı birkaç kez doldurup boşaltın. Başka bir ıstakozdan örnekleme yapmadan önce, spermlerin işlenmesi ve tanımlanması için şırınga ve iğnenin birkaç kullanım sonrası değiştirilmesini öneririz. 200 microliter pipet, tek kullanımlık pipet uçları, mikroskop lamları ve lamellerine ihtiyacınız olacaktır.Bir sperm örneği tüpü alın ve yaklaşık 200 µL sıvı materyal çekin. Bunu, uygun şekilde etiketlenmiş, lam ve lamelle birlikte bir mikroskop lamına damlatın; standart bir bileşik mikroskopla 100 x büyütmede mevcut sperm miktarını belirleyin. Mikroskop lamındaki spermler, dikey ve yan görünümler dahil olmak üzere birçok farklı pozisyonda konumlanmış olabilir.Bu örnek görüntülerde görüldüğü üzere, mevcut sperm miktarını tanımlamak için çok, az veya hiç yok gibi kalitatif tanımlamalar kullanmanızı öneririz. Bu tekniği denizdeki birçok konumda ve limanlardaki ıstakozlardan örnekleme yaparak başarıyla uyguladık. Burada gösterilen sonuçlar, ticari bir tutma tesisinde örnekleme yapabildiğimiz George's bank'ta yakalanan açık deniz ıstakozlarına aittir.Bu dişilerin toplam %84'ünün seminal reseptaküllerinde sperm bulunmaktaydı. Şaşırtıcı bir şekilde, sperm bulunmayanlar küçük veya potansiyel olarak olgunlaşmamış boyutlarda değil, boyut aralığının ortasındaydı. Bu teknik, sperm metaforundaki gerçek sperm miktarını belirlemek amacıyla tasarlanmamıştır.Aksine, bu yöntem, bir dişi ıstakozun başarılı bir şekilde üreyip üremediğini belirlemek için denizde kullanılabilecek non-invaziv bir yöntem sunar. Istakozlardaki üreme başarılığı hakkında ne kadar çok bilgi edinirsek, bu türün aşırı avcılığının etkilerini o kadar iyi anlayabilir ve böylece bu değerli deniz kaynağını uygun şekilde yönetebiliriz.

a-noninvasive-method-for-situ-determination-mating-success-female

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Bu video protokolü, hermafrodit tatlı su salyangozu Lymnaea stagnalis kullanarak gastropodlarda seminal sıvının etkilerini incelemek için bir yöntem göstermektedir.

Gastropod Molluskların Yumurta döflenmesi erkek Aksesuar Bezi Ürünlerinin Etkisi

Bu protokolün amacı, kullanıcılara Lymnaea stagnalis embriyolarının ve larvalarının yüksek verimli dekapsülasyonu için bir dizi yöntem sağlamaktır.

A Whole Dağı<em&gt; In Situ</emGastropoda yumuşakça için&gt; Hibridizasyon Yöntemi<em&gt; Lymnaea stagnalis</em

Burada, ayırmak ve yapısını, koku kudret ve deniz lampreys, sözde feromon bileşiklerin davranışsal yanıt karakterize bir iletişim kuralı mevcut.

Bioassay-güdümlü ayırma kullanarak deniz taşemen Feromonlar tanımlaması

Burada tek tek hayvan uzun bir süre boyunca izlemek için bir iletişim kuralı mevcut. Vaka çalışması, aynı anda nasıl evine, bilgi veren bir grup ıstakoz kullanarak el ile oluşturulmuş etiketleri kümesini tanımlamak için yöntemleri işlemek ve ıstakoz işaretlemek bilgisayarlı görme kullanır.

Cohoused suda yaşayan hayvanların uzun süreli Video izleme: Norveç ıstakoz (Nephrops norvegicus) ve günlük Lokomotor aktivite bir vaka çalışması

Bu protokol için ant Vollenhovia emeryiiçin akraba evliliği haçlar iletken ve bu haçlar başarısını değerlendiren yöntemler açıklanmıştır. Bu protokoller seks belirlenmesi sistemlerinde Hymenoptera genetik temeli anlama amaçlayan deneyler için önemlidir.

İndüksiyon ve karınca, Vollenhovia Emeryi kullanarak akraba evliliği haçlar değerlendirilmesi

Bu makalede çocukça Pasifik taşemen ve Amerikan yılan balığı bir mikro akustik etiketinde Reproduction yordamı gösterir. Bizim uygulama akustik Etiketler Yüzme yeteneği ya da hayatta kalma ve en az etiketi kaybı üzerinde hiçbir belirgin etkisi ile başarılı bir şekilde yerleştirilmiş olabilir belirtmek laboratuvar denemeleri temel alır.

Yeni bir mikro akustik etiketi Juvenil Pasifik taşemen ve Amerikan yılan balığı implantasyonu

Bu protokolün amacı, embriyo ödün vermeden gastrasyon sırasında deniz anemone nematostella vectensis genotip etmektir.

Erken gelişim sırasında deniz anemon Genotipleme

Sperm, bir ooksit döllemek için ovidukt üzerinden başarılı bir şekilde gezinmelidir. Burada, C. elegans hermafrodit uterusun içinde sperm göçünü ölçmek için bir tahlil açıklanmaktadır. Bu tahlil çiftleşme sonra rahim içinde sperm dağılımı nicel veri sağlayabilir, yanı sıra hız, yönlü hız, ve ters frekans.

Ölçme sperm rehberlik ve motilite içinde Caenorhabditis elegans hermafrodit üreme yolu

Tatlı su midyesinin korunması türlerin üreme kalıplarının ve süreçlerinin izlenmesine bağlıdır. Bu çalışma, solungaç içeriğini örneklemek, larva gelişimini karakterize etmek ve toplanan veriler için dijital bir depo sağlamak için öldürücü olmayan bir protokolü standartlaştırır. Bu protokol-veritabanı paketi, tehlike altındaki türlerin kurtarılmasında midye araştırmacıları için önemli bir araç olacaktır.

Tatlı Su Midyelerinin Üreme Durumunu ve Larval Gelişimini Karakterize Etmek Için Ölümcül Olmayan Bir Yöntemin Standartlaştırılması (Bivalvia: Unionida)

Termal bir meydan okuma sırasında kalp hızının ölçülmesi, akut çevresel değişimin bir sonucu olarak organizmaların fizyolojik tepkilerine ışık verir. Amerikan ıstakozunu(Homarus americanus)model bir organizma olarak kullanan bu protokol, geç evre omurgasızlarda kalp hızını ölçmek için empedans pnömografisinin nispeten noninvaziv ve öldürücü olmayan bir yaklaşım olarak kullanılmasını tanımlar.

Geç Evre Omurgasızlarda Kalp Hızının Minimal İnvaziv Ölçümü İçin Empedans Pnömografisi

Burada, C. elegans model organizmasını kullanarak embriyonik canlılığı ve üretilen toplam embriyo sayısını (kuluçka) belirlemek için genel bir yöntem sunuyoruz.

Caenorhabditis elegans'ta embriyonik canlılık ve yavru büyüklüğünün ölçülmesi

Öğrenin, Homarus americanus dişi ıstakozların çiftleşme başarısını denizde invaziv olmayan bir yöntemle nasıl değerlendireceğinizi. Bu teknik, sürdürülebilir balıkçılık yönetimi için üreme dinamiklerini anlamaya yardımcı olur.

A Noninvaziv Yöntemi

Daha fazla video keşfet