Prostat Karsinogenezde ve İyi Huylu Prostat Büyümesi ve Değerlendirilmesi için böbrek Kapsül Xenografting ve Derialtı Pelet İmplantasyonu

Bu videoda gösterilen teknikler, karsinogenezin hormonal regülasyonunu ve prostatın iyi huylu büyümesini değerlendiren deneylerde faydalıdır. İlk olarak, sürekli uygulamaya izin verecek hormon peletleri yapmak için kullanılan temyiz presleri. Daha sonra böbrek dıştan alındıktan sonra yuvarlak uçlu cam pipetler hazırlanır.

Pipet ucu, greft yerleştirilmesine yardımcı olmak için kullanılır. Sıkıştırılmış hormon peletleri daha sonra deri altına implante edilir. Sonuç olarak, hormon tedavisinin iyi huylu doku ksenogreftlerinin büyümesi üzerindeki etkilerini gösteren sonuçlar elde edilir.

Bu videoda sunulan tekniklerin uygulanması basittir ve tekrarlanabilir. Bu yöntem, iyi huylu hücrelerin maligniteye dönüşümünde hormonların nasıl rol oynadığı ve prostatın iyi huylu büyümesinin hormonlar tarafından nasıl düzenlendiği gibi alandaki önemli soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin etkileri, iyi huylu protez hiperplazisi ve prostat kanseri için potansiyel yeni tedavilere ve önleme stratejilerine kadar uzanır.

Genel olarak, bu tekniğe yeni olan kişiler böbrek kapsülünün teknik yönü ile mücadele edeceklerdir. Xenograft Peletleri, çapraz kontaminasyonu önlemek için pelet yapma ekipmanını %70 etanol ile iyice temizlemeye başlamak için uygun koruyucu ekipman giyilirken kimyasal bir güvenlik başlığı içinde hazırlanır. Daha sonra, istenen miktarda hormon tozunu tartın ve presleme sırasında kayba karşı yaklaşık% 5 ekstra malzeme elde edin.

Bazı hormonlar, pelet üreticisinden önce karıştırılan bir bağlayıcı madde veya dolgu maddesi gerektirir. Burada estradiol, kolesterol dolgusu ile birleştirilerek 25 miligramlık bir pelet elde edilir. Her şey tartıldıktan ve birleştirildikten sonra, tozu dset'e aktarın.

Boyayı presin altına yerleştirin ve peleti sıkıştırmak için kolu sıkıca aşağı doğru itin. Sabit yüzey alanı / hacim oranını korumak için tutarlı basınç kullanın. Ardından, boya tutucuyu ters çevirin ve peleti serbest bırakmak için kolu tekrar aşağı itin.

Peleti bütünlük açısından inceleyin ve nihai kütlenin istenen aralıkta olup olmadığını belirleyin. Peletler ameliyattan önce yapılabilir ve uygun koruma giyilirken kullanılan hormon veya ilacın stabilitesine göre saklanabilir. Ateşte cilalanmış, yuvarlak bir uç oluşturmak için bir cam hamur makinesi pipetinin ucunu alevden, bir bunsen brülöründen geçirin.

Sıcak noktalardan kaçınmak için pipetin sabit ve hafif hareketini koruyun. Ardından, kavisli yuvarlak bir uç oluşturmak için pipeti yaklaşık 60 derecelik bir açıyla aleve yerleştirin. Bu uç, böbrek kapsülünün altında greft için bir cep oluşturmak için kullanılacaktır.

Cerrahi işleme başlamadan önce gerekli tüm aletleri sterilize edin ve çalışma alanını hazırlayın. Hayvan uygun şekilde uyuşturulduktan sonra, cerrahi bölgeyi tekrarlanan Betadine ve alkol uygulamalarıyla dezenfekte edin. Bölgeye steril örtüler uygulandıktan sonra iki ila üç santimetrelik sırt orta hat kesisi yapılır.

Daha sonra, alttaki dermisi vücut duvarından ayırın. İki taraflı aşılama için kesiğin her iki tarafını veya tek taraflı aşılama için sadece bir tarafını ayırın. Ayrıldıktan sonra, fareyi yanal bir konuma getirin ve böbrek profilini kas duvarından görüntüleyerek böbreğin yerini belirleyin.

Başparmak ve işaret parmağıyla hafif bir baskı uygulamak, ince iris makası kullanarak iç organları görselleştirmeye ve büyük damarlardan ve omurilik sinirlerinden kaçınmaya özen göstermeye yardımcı olabilir. Omurgaya paralel olarak vücut duvarında bir santimetrelik bir kesi yapın. Makası nazikçe daha geniş açarak bu kesiği bir buçuk ila iki santimetreye genişletin.

Bunları ilk kesiye yerleştirdikten sonra, böbreğin her iki tarafındaki kas duvarının dışına hafif bir baskı uygulayarak böbreğin dışını dıştan çıkarın. Daha sonra, cilt kenarlarını vücut duvarına dayanacak olan dışsal böbreğin altına sıkıştırın. Başka yapılar da mevcutsa, böbrek dışlanırken nazikçe içeri sokulabilirler.

Steril salin uygulayarak böbrek kapsülünün hidrasyonunu koruyun. Böbrek kapsülünü yavaşça kaldırın ve iki ila dört milimetrelik bir kesi yapın. Kesinin boyutu greftin boyutuna göre belirlenir, ancak kapsülün bütünlüğünü korumak için en aza indirilmelidir.

Daha önce hazırlanan pipetin yuvarlatılmış kapalı ucunu böbreğin yüzeyine teğet olan kapsülün altına yerleştirin. Yerleştirildikten sonra, böbreğe zarar vermemek için büyük özen göstererek greftler için küçük bir cep açın. Parankim dokusu greftleri, cerrahi rezeksiyon sırasında elde edilen taze prostat dokusundan hazırlanır.

Böbrek kapsülünün kesik kenarını kaldırın ve grefti cebe yerleştirin. Pipet ucu kullanılarak, böbrek kapsülünün altına birkaç greft yerleştirilebilir ve böbrek yüzeyine eşit aralıklarla yerleştirilebilir. Greftleme tamamlandığında, böbreği vücut boşluğuna geri yerleştirmek için kas duvarı kesisinin kenarlarını nazikçe kaldırın.

Greftin kapsülün altından kaymadığından emin olun. Deri altı pelet implantasyonuna devam etmeden önce kas duvarını kapatmak için tek bir dikiş kullanılır. Aşılama tamamlandığında, alttaki dermisi vücut duvarından kraniyal yönde ayırın.

Hormon peletini tutarken bir cep oluşturmak için cilt kesisinin kraniyal yönünü nazikçe kaldırın Düz tırtıklı forseps ile nazikçe, peleti boynun tırnağına yerleştirin. Dişli forseps kullanarak cilt kenarlarını hizalayın ve kesiyi kapatmak için iki ila üç cerrahi yara klipsi uygulayın. Bu örnekte, iyi huylu prostat hiperplazisi olan hastalardan alınan primer doku ksenogreftleri, eksojen testosteron ile desteklendi.

Bir ay boyunca, ok uçları ksenogreft konumlarını gösterir. Renal kapsül greftlemesi hormonal karsinogenezi değerlendirmek için de kullanılabilir. Burada, iyi huylu prostat epiteli ve indüktif ürogenital meki içeren hücre rekombinantları, tedavi edilmeyen farelerde iyi huylu büyümeler oluşturur.

Bu örnekte, aynı greft, dört ay boyunca deri altı testosteron ve estradiol peletleri alan ve böbrek kapsülünü istila eden prostat karsinomunu seçen bir konakçıda büyütülür. Bu videoyu izledikten sonra, sıkıştırılmış hormon peletlerinin nasıl üretileceği ve implante edileceğinin yanı sıra ameliyat için ateşle parlatılmış bir cam pipetin nasıl oluşturulacağı ve renal kapsül ksenogreftinin nasıl gerçekleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Bu prosedürü denerken, böbrek kapsülünü nazikçe tutmayı, nemi korumayı ve böbrek parankimine zarar vermekten kaçınmayı unutmamak önemlidir.

Histoloji, immünohistokimya ve R-N-A-D-N-A veya ilgilenilen proteinleri tespit etmek için moleküler teknikler gibi diğer yöntemler de uygulanabilir. Bu, gözlemlenen iyi huylu veya kötü huylu büyümenin doğasının daha iyi değerlendirilmesine izin verecektir. Bu deneylerde kullanılan hormonların potansiyel olarak teratojenik ve kanserojen olduğunu unutmayın.

Sıkıştırılmış hormon pelet üreticisi her zaman bir kimyasal güvenlik davlumbazında gerçekleştirilmelidir. Bu videoda özetlenen prosedürün her adımı için her zaman uygun kişisel koruyucu ekipman giyilmelidir.