Name: Zebra balığı Larva otomatik Yüksek verim Davranış Analizleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 28 s
Description: Öğrenin, zebra balığı larvalarında yüksek verimli otomatik davranış analizi yaparak toksik maddelerin ve ilaçların erken beyin gelişimi üzerindeki etkilerini inceleyin. Bu yöntem, davranışsal nörobilim araştırmalarında karmaşık davranış değişikliklerini tespit etmek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz davranış testinin optimizasyonu yardım için Sean Pelkowski teşekkür ederim. Bu çalışma Çocuk Sağlığı ve İnsan Gelişimi Ulusal Enstitüsü, R01 HD060647 ve Çevre Sağlığı Bilimleri Ulusal Enstitüsü, F32 ES021342 ve R03 ES017755 tarafından desteklenmiştir.

1. Zebra balığı Embriyolar toplanması ve Larva Raising <ol><li> &quot;Sahte&quot; çim (yeşil iplikten yapılmış) (Şekil 1) ile cam Pyrex yemekleri Zebra balığı embriyolarının toplamak için şafakta tankları içine yerleştirilir ve iki saat bırakılmalıdır. Embriyoları içeren cam yemekleri bir el süzgeç üzerine dökülür ve deiyonize su ile durulanmalıdır. Embriyolar daha sonra yumurta suda yetiştirilmelidir. Yumurta su iyonu giderilmiş su ve 0.25 mg / küf önleyici olarak kullanılır metilen mavisi, L Anında Okyanus, 60 mg / l içerir. </li><li> Da, bireysel deneye olduğu hipotezini bağlı olarak, embriyolar hemen veya toksik maddelerin ya da eczacılık ile geliştirme belirli aşamalarında tedavi edilebilir. Toksik ve eczacılık genelde DMSO&#39;da çözündürülür (bir 1000 X konsantrasyonda) ve daha fazla yumurta su ortamı içinde doğrudan seyreltilmelidir. </li><li> Ilaç veya zehirli madde ile embriyonik ve larva tedavisi sırasındas, larva ve embriyolar 7 dpf (yumurta su çözeltisi iki günde en az bir bakteri / mantar üremesini önlemek için değiştirilmesi gerekir da davranışsal analiz sonu 50, ml başına yaklaşık 50-60 larva yoğunluğunda derin bir petri levhalar içinde muhafaza edilebilir ölü embriyolardan). </li></ol> 2. Davranış Analizleri için kalıplar hazırlanıyor <ol><li> Özel x 7,6 cm x 5 mm içi-özel inşa edilmiş 11.7 cm boyutlarında plastik kalıpları geliştirdi. Kalıplar Thermo Scientific gelen tek iyi plastik tabak içine dökülür agaroz kullanarak şerit oluşturmak için gereklidir. Tek iyi plakaları ölçü 12,4 cm x 8,1 cm x 1,2 cm. </li><li> Kalıp kenarlarına 60 ° açılı olduğu beş şerit içerir. Kalıplara şerit alt genişlik 14 mm iken, en geniş olan en az 18 mm&#39;lik bir baz ile yüksek bir 3.5 mm &#39;dir. Kalıp şerit (Şekil 2) arasında 4 mm boşluk vardır. </li><li> Şerit erimiş agaroz 50 ml (Deiyonize yılında% 0.8 agaroz dökün hazırlamak içinTek plaka 60 mg / L Anında Okyanusu) ile d su. Kalıp daha sonra herhangi bir kabarcık oluşumunu ortadan kaldırmak için sıvı agaroz üzerinde çok yavaş bir şekilde yerleştirilmesi gerekir ve (yaklaşık 45 dakika sürer) agaroz soğuduğunda kaldırılabilir. </li><li> Davranışsal deney (kurumasını agaroz önlemek için) şerit yaklaşık 36 saat için yemekleri kapaklı oda sıcaklığında saklanabilir çalıştırmak için önce agaroz şeritleri en erken bir daha gün yapılmalıdır. Agaroz şerit sadece bir deney için kullanılmalıdır ve atılmalıdır. </li></ol> 3. Görüntü Yakalama <ol><li> En fazla 20 larva plakaların her şerit yerleştirilebilir. Hat başına tipik olarak 5 larva yüzmek hızı en doğru izleme kolaylaştırmak ve deney başına gereken larvaların sayısını azaltmak için kullanılır. Şeritli yumurta su ile veya deneme bağlı olarak ilaç veya toksik maddeler olmadan doldurulabilir. Bununla birlikte, şerit f olmamalıdıronlar görüntüleme dolaplar yerleştirilir kadar tüm yol kadar illed, bu taşma engeller. Onlar agaroz kalıpları yerleştirilir ve dizüstü bilgisayar ekranın üst kısmında konumlandırılmış sonra tutarlılık için, larva on dakika bir iklimlendirme dönemi olmalıdır. Verimli Petri kabı agaroz şeride larva hareket larva stresi azaltmaya yardımcı olacaktır. Larvaları sığ tanklarda veya Petri kapları yerleştirilmiştir, bu en kolay yoldur. </li><li> Görüntüleme dolapları zaman atlamalı fotoğraf ve bir dizüstü bilgisayar için kullanılan bir Canon dijital kamera yer alıyor. Kamera kabinin üst kısmında yer ve 15.6 inç ekranlı dizüstü bilgisayar ekranı (Şekil 3) yukarı bakacak şekilde yerleştirilmelidir kabinin altına doğru hedeflenmelidir. Dört plakaları doğrudan dizüstü bilgisayar ekranın üst kısmında elle yerleştirilmelidir. Bu (l kenarlarında gölgeler ortadan kaldırmak için sokağın üst seviyede olacak şekilde şu anda şerit yumurta su veya kimyasal tedavi ile kapalı tepesinde olabilirgörüntüler anestezi). </li><li> Bir PowerPoint sunumu larvaları için caydırıcı bir uyarıcı olarak kullanılır. Geçmiş hareketli kırmızı top 6 ya da 12 çok iyi plakaları 15,17,18 larva balığı gösterilmiştir. Mevcut PowerPoint plakanın üst yarısının (Şekil 4) üzerinde hareket eden kırmızı renkli çubuk 15 dakika, ardından 15 dakika boyunca boş bir beyaz arka plan ile başlar. Larva aşırı ısınma ortadan kaldırmak için, bu 28 üzerinde gitmez bir ekran ° C ile bir dizüstü bilgisayar satın almak en iyisidir Agaroz şerit içinde sıvının buharlaşmasıyla önlemek için, maksimal görüntüleme zamanı bir saat altında tutulmalıdır. </li><li> Dijital fotoğraf makinesi Deneme başına 300 görüntü olmak üzere toplam resim her 6 saniye alarak, zaman atlamalı fotoğraf için programlanmalıdır. Ancak, frekans ve uzunluk ve davranışsal deney miktar bağlı olarak ayarlanabilir. Geçmişte uzun görüntüleme zamanlarda her resim arasında uzun aralıklarla kullanarak istihdam edilmiştir. CamerBir video hızı (saniyede 30 kare) de görüntüleme için daha düşük bir çözünürlükte ayarlanabilir. Düşük çözünürlüklü tek bir multiwell plaka için kayıtları sınırlar ise, video kayıtları görüntüleme hızlı yüzme olaylar 15 için uygundur. </li></ol> 4. Görüntü Analizi <ol><li> Görüntüler ImageJ ile açıldı ve özellikle de içi yazılmış bir makro ile birlikte kullanılmalıdır. Makro otomatik olarak, kırmızı renk çıkarılabilir, böylece renk kanalları böler arka çıkarma, bir eşik uygular ve partikül analizi ile larvaları tanımlar. Beş şeritli larva analiz için en güncel makro Zebrafish_macro25k olduğunu. Görüntü sayısı, çıkarılabilir renk, görüntü eşiği, vb ayarlamak için makroda ister kullanın </li><li> Tüm görüntüleri ImageJ makro ile çalıştırmak sonra, bir sonuç dosyası görüntülenir ve x içerecek, y görüntü numarası ve şerit numarası ile birlikte her resim için tek tek larvaların koordine eder. </li&gt; <li> Sonuçlar dosya bir Excel biçiminde kaydedilir ve daha sonra boş bir arka plan vs hareketli bar arka plan ve kuyu sayısı dayalı tasnif edilmelidir. Excel şablonu otomatik olarak kuyularda larvaların yerleşimini belirler inşa denklemler, larva arasındaki mesafe, hareket hızı ve dinlenme miktarda olduğu kullanılmalıdır. En güncel Excel şablonu 25ib istek üzerine kullanılabilir olduğu, Créton laboratuvar oluşturulur. Farklı tedavi grubu gösteren grafikler tedavi grubu ve kontrol grubu arasında karşılaştırma için t-testi ile birlikte Excel sayfası içine inşa edilmelidir. Ayrıca istatistiksel analiz SPSS kullanılarak yapılabilir. </li></ol>

<ol><li>Gerlai, R., Lahav, M., Guo, S., Rosenthal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drinks+like+a+fish%3A+zebra+fish+%28Danio+rerio%29+as+a+behavior+genetic+model+to+study+alcohol+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Drinks like a fish: zebra fish (Danio rerio) as a behavior genetic model to study alcohol effects.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 67, 773-782 (2000).</li>
<li>Selderslaghs, I. W. T., Hooyberghs, J., De Coen, W., Witters, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locomotor+activity+in+zebrafish+embryos%3A+A+new+method+to+assess+developmental+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Locomotor activity in zebrafish embryos: A new method to assess developmental neurotoxicity.</a> Neurotoxicol. Teratol. 32, 460-471 (2010).</li>
<li>Norton, W., Bally-Cuif, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+zebrafish+as+a+model+organism+for+behavioural+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Adult zebrafish as a model organism for behavioural genetics.</a> BMC Neuroscience. 11, 90(2010).</li>
<li>Levin, E. D., Cerutti, D. Ch. 15. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLevin%2C+ED+%22Methods+of+behavioral+analysis+in+neuroscience%22">Methods of behavioral analysis in neuroscience</a>. Buccafusco, J. J. , CRC Press. (2009).</li>
<li>Kimmel, C., Ballard, W., Kimmel, S., Ullmann, B., Schilling, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Dyn%22%5BJournal%5D)">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev. Dyn. , 203-253 (1995).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterfield%2C+M+%22The+zebrafish+book.+A+guide+for+the+laboratory+use+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%22">The zebrafish book. A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio)</a>. , 5 edn, Univ of Oregon Press. (2007).</li>
<li>Kokel, D., Bryan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+behavior-based+identification+of+neuroactive+small+molecules+in+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Chem.+Biol%22%5BJournal%5D)">Rapid behavior-based identification of neuroactive small molecules in the zebrafish.</a> Nat. Chem. Biol. 6, 231-237 (2010).</li>
<li>Rihel, J., Prober, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+Behavioral+Profiling+Links+Drugs+to+Biological+Targets+and+Rest%2FWake+Regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Zebrafish Behavioral Profiling Links Drugs to Biological Targets and Rest/Wake Regulation.</a> Science. 327, 348-351 (2010).</li>
<li>Cachat, J., Stewart, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+behavioral+and+endocrine+responses+to+novelty+stress+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measuring behavioral and endocrine responses to novelty stress in adult zebrafish.</a> Nat. Protoc. 5, 1786-1799 (2010).</li>
<li>Cachat, J., Stewart, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-Dimensional+Neurophenotyping+of+Adult+Zebrafish+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Three-Dimensional Neurophenotyping of Adult Zebrafish Behavior.</a> PLoS ONE. 6, e17597(2011).</li>
<li>Sledge, D., Yen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+duration+of+exposure+for+developmental+chlorpyrifos-induced+neurobehavioral+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Critical duration of exposure for developmental chlorpyrifos-induced neurobehavioral toxicity.</a> Neurotoxicol. Teratol. 33, 742-751 (2011).</li>
<li>Stewart, A., Wu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+modulation+of+anxiety-like+phenotypes+in+adult+zebrafish+behavioral+models%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neuropsychopharmacol.+Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Pharmacological modulation of anxiety-like phenotypes in adult zebrafish behavioral models.</a> Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 35, 1421-1431 (2011).</li>
<li>Eddins, D., Cerutti, D., Williams, P., Linney, E., Levin, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+provide+a+sensitive+model+of+persisting+neurobehavioral+effects+of+developmental+chlorpyrifos+exposure%3A+comparison+with+nicotine+and+pilocarpine+effects+and+relationship+to+dopamine+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish provide a sensitive model of persisting neurobehavioral effects of developmental chlorpyrifos exposure: comparison with nicotine and pilocarpine effects and relationship to dopamine deficits.</a> Neurotoxicol. Teratol. 32, 99-108 (2010).</li>
<li>Emran, F., Rihel, J., Dowling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+behavioral+assay+to+measure+responsiveness+of+zebrafish+to+changes+in+light+intensities%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A behavioral assay to measure responsiveness of zebrafish to changes in light intensities.</a> J. Vis. Exp. (20), e923(2008).</li>
<li>Pelkowski, S., Kapoor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+high-throughput+imaging+system+for+automated+analyses+of+avoidance+behavior+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">A novel high-throughput imaging system for automated analyses of avoidance behavior in zebrafish larvae.</a> Behav. Brain Res. 223, 135-144 (2011).</li>
<li>Richendrfer, H., Pelkowski, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+developmental+toxicity+by+automated+analyses+of+behavior+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Unpublished+observations%22%5BJournal%5D)">Assessment of developmental toxicity by automated analyses of behavior in zebrafish larvae.</a> Unpublished observations. , (2012).</li>
<li>Richendrfer, H., Pelkowski, S., Colwill, R. M., Creton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+edge%3A+pharmacological+evidence+for+anxiety-related+behavior+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">On the edge: pharmacological evidence for anxiety-related behavior in zebrafish larvae.</a> Behav. Brain Res. 228, 99-106 (2012).</li>
<li>Richendrfer, H. A., Pelkowski, S., Colwill, R., Creton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+sub-chronic+exposure+to+chlorpyrifos+reduces+anxiety-related+behavior+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Developmental sub-chronic exposure to chlorpyrifos reduces anxiety-related behavior in zebrafish larvae.</a> Neurotoxicol. Teratol. , (2012).</li>
<li>Egan, R. J., Bergner, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+behavioral+and+physiological+phenotypes+of+stress+and+anxiety+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Understanding behavioral and physiological phenotypes of stress and anxiety in zebrafish.</a> Behav. Brain Res. 205, 38-44 (2009).</li>
<li>Colwill, R., Creton, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aColwill%2C+R+%22Zebrafish+protocols+for+neurobehavioral+research%22">Zebrafish protocols for neurobehavioral research</a>. Kalluef, A., Stewart, A. 66, Springer Protocols. (2012).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.

Biz sürekli yeni davranış tahlil iyileştirilmesi olsa da, her zaman kaçınma ve Zebra balığı larvaları 15 thigmotaxis davranış tespiti için yararlı olmuştur. Pek çok çalışma, örneğin kullanılan uyarıcı renk olarak, tahlilin sonuçları optimize etmek için yapılmıştır, şerit başına larva ve davranış tahlilinde uzunluğunu doğru sayısı. Daha önce, çok iyi plakaları (6 ya da 12 kuyucuklu) 15,17,18 kullanılır. Ancak, son zamanlarda bize tek bir deneyi 16 (Şekil 5) davranışsal önlemler daha çok sayıda toplamak için izin larvaları için daha büyük bir yüzme alanı oluşturmak için yeni şerit kalıp oluşturduk. Diğer değişiklikler PowerPoint işletmeler varyasyonları (testinin değişmiş hareket ya da uzunluk) ve (biz de daha dar yolları için kalıplar var) kullanılan şerit büyüklüğü içerir. Şu anda, bu yüksek verimli otomatik sistem ZEBR davranışları geniş bir ürün yelpazesi ölçmek için yeteneği benzersizdirBu hız, kaçınma, diğer larva yakınlık ve çok şeritli plakalar thigmotaxis aynı zamanda Afish larva. Sonuçlar hızlı bir şekilde elde edilebilir ve larva, çok sayıda görüntüleme zamanda analiz edilebilir. Sistem kurmak için oluşturmak için ucuz ve hızlı ve kolay hem de. Bu sistemin bir sınırlama 3-D hareketleri Zebra balığı larvaları değerlendirilemez olmasıdır. Yetişkin Zebra balığı izlemek otomatik sistemler 3-Ge kapasitesi var ve bu hareket yukarı veya aşağı su sütunu 10,19 içinde gibi davranışların daha geniş belirleyebilir. Başka bir sınırlama bizim görüntüleme sistemi şu anda görüntü hızda yüksek verimlilik analizleri için optimize olmasıdır. Daha düşük bir çözünürlük 15 için kamera ayarlarken video hızlı görüntüleme mümkündür, ama bu tek plaka için analiz kısıtlar. Yeni oluşturulan &quot;şerit&quot; yöntemi kullanılarak, tahlil çeşitli yerlerinde hassas bir şekilde yürütülür gerekiyordu. T larvaları yerleştirirkeno şerit, bu plakalar laptop ekranın üst kısmında konumlandırılmış kadar sıvı seviyesinin çok sığ olduğundan emin olmak için önemlidir. Şerit sıvı çok dolu ise, larva plakanın çevresine kaçacak. Buna ek olarak, agaroz kalıbın, bakım zaman çok yavaş kalıp düşürmek için gerekli önlemler alınmalıdır. Kalıp çok hızlı takılırsa, kabarcıkları agaroz oluşturacak ve ek larva olarak Resim J makro tarafından tespit edilecektir. Bu agaroz şerit hatta birkaç kabarcıkları varsa, bu yenilerini yapmak için en iyi tavsiye edilir. Gelecekte, bu tür Zebra balığı larvaları öğrenme gibi diğer karmaşık davranışları analiz ve öğrenme erken gelişiminde toksik ve ilaç maruz etkilenebilir nasıl incelemek için bizim davranış tahlil optimize etmek istiyorum. Şu anda davranışsal sonuçları beyin bölgeleri olduğu tespit kolaylaştırabilir hangi öğrenme davranışlarını analiz için yararlı olabilir testleri üzerinde çalışıyoruzgelişim sırasında bazı toksik maddeler veya ilaç etkilenir. Otomatik deneyleri Zebra balığı larvaları 20 ve bu deneylerde davranışları öğrenme çok şeritli plakalar sağlam kaçınma tepkisi kullanarak yüksek verimli tarama için iyileştirilebilir olabilir ölçmek için geliştirilmiştir. Bu davranış tahlilinde, ilaç ve toksik maddeler, çok sayıda gelişimsel etkilerini test etmek için daha sonraki çalışmalarda kullanılabilir öneriyoruz. Bu tür çalışmalar belirli risk faktörleri üzerine bilgi hazinesi sağlamak ve hamile kadınlar ve çocuklar için daha iyi sağlık ve güvenlik kurallarına ayar katkıda bulunacaktır.

Zebra balığı genetik, gelişimsel ve davranış bilimleri 1-4 için popüler bir modeli haline gelmektedir. Bunlar, 2-3 gün sonra döllenme (DPF) kendi chorions gelen yumurtadan 4-5 dpf&#39;e tarafından tam olarak işleyen bir organ geliştirmek ve 7 dpf 5,6 ile davranışların çok sayıda sergiler. Balığı larvaları ideal nedeniyle küçük boyutu 7,8 yüksek verimlilik analizler için uygundur. Yazılım larva ve yetişkin zebrabalıkları 9-14 davranış otomatik analiz için ticari olarak temin edilebilir. Ancak bu yazılım pahalı ve çok iyi plakaları Zebra balığı larvalarının karmaşık davranışları ölçmek için sınırlı seçeneği vardır. Biz kurmak ve 7 dpf Zebra balığı larvaları 15,16 farklı davranışlar bir dizi sayısal olarak ucuz yeni bir yüksek verimli görüntüleme sistemi oluşturdu. Sistem, bir dizi embriyonik maruz kaldıktan sonra bize hızlı ve verimli bir şekilde ince bir davranış bozukluğu test etmeye imkan vermektedirilaç ve çevresel toksik atıkları 16-18. Sistem, kabin üstündeki evin bir dijital fotoğraf makinesi ahşap dolaplar, kullanılarak inşa edilmiştir. Kamera bir dizüstü bilgisayar 15 yukarı bakacak şekilde ekran yerleştirilir kabinin altına aşağı karşı karşıya. Zaman atlamalı görüntüleme şerit larvaların yerleştirme yakalamak için kullanılır. Larva laptop ekranın üst kısmında konumlandırılmış dört çok iyi veya çok şeritli plakalara kadar muhafaza edilebilir. Biz larva kenar (thigmotaxis) 15,17 doğru uzaklaşıyor (kaçınma) ve yüzme cevap için caydırıcı bir uyarıcı olarak bir PowerPoint sunumu kullanın. Görüntüler otomatik makro, renk kanalları bölünmüş arka plan çıkarma ve bireysel larva tanımlamak için bir eşik uygulamak için kullanıldığı ImageJ alınır. Koordinatlar her resim her larva için listelenen ve kaçınma ve thigmota ölçmek için kullanabileceğiniz bir Excel dosyasına eklenebilirxis davranış, balık mesafe balık, hız ve dinlenme 16 miktarı yüzmek.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagent</td></tr><tr><td>Instant Ocean</td><td>That Pet Place</td><td>198262</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Fisher</td><td>BP1356-100</td><td></td></tr><tr><td>Metilen Mavisi</td> O <td>Evcil Hayvan Yeri</td><td>214325</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Equipment</td></tr><tr><td>One kuyu plakaları</td><td>Fisher</td><td>12-565-493</td><td></td></tr><tr><td>Dijital fotoğraf makinesi</td><td>Canon</td><td>EOS Rebel T1i</td><td></td></tr><tr><td>Görüntüleme Kabinleri</td><td>WoodCraft Towers</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dizüstü Bilgisayarlar</td><td>Acer Aspire</td><td>Any, 15.6 inç olduğu sürece iyidir. 1366 x 768 piksel çözünürlüğe ve 220 cd/m parlaklığa sahip LCD ekran2.</td><td></td></tr><tr><td>Kamera Lensi</td><td>Canon</td><td>EF-S 55 - 250 mm f/4.0 - 5.6 IS yakınlaştırma lensi</td><td></td></tr><tr><td>Plastik difüzör</td><td>Pendaflex</td><td>52345</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Software</td></tr><tr><td>PowerPoint 2010</td><td>Microsoft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/" target="_blank">http:// rsb.info.nih.gov/ij/</a></td></tr><tr><td>Excel 2010</td><td>Microsoft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İstatistik yazılımı</td><td>SPSS 20</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

zebra balığı larva otomatik yüksek verim davranış analizleri

Automated High-throughput Behavioral Analyses in Zebrafish Larvae

Biz çok şeritli plakalar 7 günlük eski Zebra balığı larvaları davranış analizi için yeni bir yüksek verimli görüntüleme sistemi oluşturduk. Bu sistem bir PowerPoint sunumu ile larva gösterilir spontan davranış ve caydırıcı bir uyarana tepki, ölçer. Kaydedilen görüntüler, otomatik olarak renk kanalları böler bir ImageJ makro ile analiz edilir arka plan çıkarır ve şerit bireysel larva yerleştirme tanımlamak için bir eşik geçerlidir. Daha sonra yüzme hızı, sokağın kenarına ya da yan için tercih, dinlenme davranış, thigmotaxis, larva arasındaki mesafe ve kaçınma davranışı ölçmek için bir Excel sayfası içine koordinatları alabilirsiniz. Davranış ince değişiklikler kolayca çevresel toksik maddeler veya ilaçlara maruz kaldıktan sonra davranış analizleri için yararlıdır, bizim sistemi kullanılarak tespit edilir.

Daha önceki analizlerde, vahşi tip larva iyi (kaçınma davranışı) &#39;de yüzerek ve iyi (thigmotaxis davranış) 15 kenarlara doğru hareket topu cevap, top zıplatma caydırıcı uyarıcı tedavi olduğunu kullanarak. Daha sonra bu tahlilde thigmotaxis davranış zebrabalıkları larvaları 17. Anksiyete ile ilgili bir davranış önlem olduğunu doğruladı. Boş bir beyaz arka karşılaştırıldığında larvaları hareketi önemli farklılıklar uzağa top ve kenar tercihi vardı. Bu davranışlar da hareketli kırmızı çubuk kullanarak yeni tahlil doğrulanmıştır ve daha güçlü 16 olan var. Ayrıca, şimdi yüzme hızı, dinlenme, iyi sonunda ya da yan için tercih, ve balık arasındaki mesafe (Şekil 5) de dahil olmak üzere tek bir deneyde davranışları daha çok sayıda örnek olabilir. Yumurta su yetiştirilen Kontrol larva artan bir tercih çanak ve sokağın kenarında bir aşağı olmak göstermekFrangoulis onlar caydırıcı bir uyaran (kırmızı çubuğu hareket) mevcuttur. Larva 1 ug / ml DMSO, yaygın olarak 1.000 x stok çözeltiler gibi çeşitli ilaç ve toksik maddeler çözmek için kullanılan bir çözücüyü içeren yumurta su yetiştirilen benzer sonuçlar elde edilmiştir. Örnek sonuçlar yumurta su ve DMSO (kontrol olarak) ve genellikle organik olmayan besinlerde bulunan bir organofosfat pestisit değişen konsantrasyonları ile muamele edilmiş larvalarda Şekil 5 &#39;de gösterilmiştir. Gösterilen sonuçlar, bir deneyde bir örnekleme. Ancak, tekrar, sonuçlar yüzme hızı ve thigmotaxis davranış insan gıdası tüketimi 18 düzeyleri taklit organofosfat pestisitlerin düşük konsantrasyonlarda, tarafından değiştirilmiş olduğunu gösterir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/50622/50622fig1.jpg" /> Şekil 1. Koleksiyon Tepsiler. Cam Pyrex yemekleri e toplamak için kullanılıryetişkin balık tankları mbryos. Pyrex yemekleri kapakları kesilmiş ve plastik ızgaraları ve yeşil iplik plastik ızgaraları üzerine dikilir ile yerleştirildi. Bu doğal çevre taklit ederek yetişkin zebrafish için bir üreme ortamı oluşturur. <img alt="Şekil 2," fo:content-width="/files/ftp_upload/50622/50622fig2highres.jpg" fo:width="6in" src="/files/ftp_upload/50622/50622fig2.jpg" /> Şekil 2. Plastik kalıp ve agaroz şerit. A) kalıp solda gösterilir. % 0.8 agaroz tek plaka içine dökülür; kalıp yavaş yavaş eklenir ve agaroz soğuduğunda sonra kaldırılır B) sağ plakası plastik kalıp agaroz oluşturulan şerit gösterir.. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/50622/50622fig3.jpg" /> Şekil 3,. Görüntüleme Dolaplar. Görüntüleme dolapları speciall edildiy Laboratuvarımızda inşa edilmiş ve yüksek verimli davranış analizleri için kullanılır. Bir 15 megapiksel dijital kamera, bir dizüstü ekranın üstüne yerleştirilir multilane plakalar larvaların zaman atlamalı görüntüleri toplamak için aşağı bakacak şekilde kabinin üst bağlıydı. Plakaları ve ekran arasında toplanan görüntüler hareli desenleri önlemek için kullanılan bir plastik difüzör var. <img alt="Şekil 4," fo:content-width="/files/ftp_upload/50622/50622fig4highres.jpg" fo:width="4.5in" src="/files/ftp_upload/50622/50622fig4.jpg" /> Şekil 4. Boş arka plan ve PowerPoint caydırıcı uyarıcı. Bu Zebra balığı larvaları davranış değişiklikleri uyandırmak için kullanılan geçerli PowerPoint. Bu A) boş bir arka plan ve B) hareketli kırmızı çubuk arasındaki sağlam davranış farklılıkları sağlar. <img alt="Şekil 5," fo:content-width="/files/ftp_upload/50622/50622fig5highres.jpg" fo:width="5.5in" src="/files/ftp_upload/50622/50622fig5.jpg" /> Şekil 5,. Yüksek verimli test Sayısallaştırılmış Davranışlar. Biz x, larva y koordinatları için kullandığınız Excel sayfası içinde bizim davranış testte sayısal vardır davranışların örneği. Beyaz bar boş bir arka plan maruz kalan ve kırmızı çubuklar PowerPoint kırmızı hareketli bar maruz larva verileri göstermek larva verileri göstermektedir. Grafikler) B, sokağın ucunda larva yüzdesi, C) sokağın kenarında larva yüzdesi, D) Mesafe arasındaki şeritte larvaların A) Yüzde aşağı davranış analizi elde edilebilir ölçümler göstermektedir balık (mm), E) larvaları (mm / dak), F) larvaların yüzdesi dinlenme hızı yüzün. Gösterilen grafiklerin, veri Tedavi danDMSO kontrolü ve 0.001 0.1 mcM (genellikle insan diyet bulundu düzeyleri) arasında değişen bir pestisit çeşitli konsantrasyonlarda larvaların ent. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50622/50622fig5large.jpg" target="_blank">büyük rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

Laboratuvarımız 7 günlük eski Zebra balığı larvaları birkaç farklı davranışların tespiti için yararlı bir yeni yüksek verimli otomatik görüntüleme sistemi geliştirdi. Sistem, larva çevresel toksik ya da eczacılık maruz kalmış sonra davranış ince değişiklikleri tespit etmek için kullanılabilir.

Zebra balığı Larva otomatik Yüksek verim Davranış Analizleri

We have created a novel high-throughput imaging system for the analysis of behavior in 7-day-old zebrafish larvae in multi-lane plates. This system ...

Bu prosedürün genel amacı, toksik maddeler veya farmasötikler ile tedavi edilen zebra balığı larvalarındaki davranışsal kusurları belirlemektir. Bu işlem, öncelikle embriyoların veya larvaların toplanması ve gelişimin ilk yedi gününe kadar kimyasallar ile tedavi edilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım ise özel olarak tasarlanmış kalıplar kullanılarak agar yüzme şeritleri oluşturmaktır.Ardından, işlem görmüş larvalar, zaman ayarlı fotoğrafçılık kullanılarak davranışsal analiz yapılmak üzere agros kanallarına yerleştirilir. Son adım, görüntülerin ImageJ programına aktarılması ve kanallardaki larvaların XY koordinat verilerini toplamak için kurum içinde yazılmış özel bir makronun kullanılmasıdır. Nihayetinde, yüksek kapasiteli davranışsal analiz yöntemi; tedavi grupları arasındaki kaçınma ve figma ekseni davranışlarının yanı sıra yüzme hızı ve dinlenme sürelerindeki farklılıkları belirlemek için kullanılır.Bu tekniğin, ticari olarak mevcut olanlar gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, yöntemimizi daha karmaşık davranışları gözlemlemek için kullanabilmemizdir. Ayrıca kurulumu kolay ve maliyeti düşüktür. Bu yöntem, toksik maddelerin erken embriyonik maruziyet sırasında beyin gelişimini ve davranışını nasıl etkilediği gibi, davranışsal nörobilim alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.Ayrıca, mevcut diğer toksisite taramalarıyla tespit edilemeyen, insanlardaki hafif beyin defektleri hakkında da bilgi sağlayabilir. Genellikle, bu yöntemi ilk kez uygulayan kişiler, larvaları yakalamanın zor olması nedeniyle güçlük çekeceklerdir. Protokol özel yapım sistemler içerdiğinden ve adımların bir öğrenme süreci olduğundan, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşımaktadır.Bu prosedüre başlamak için, tankların içine yeşil ipten yapılmış yapay çimlerin bulunduğu Pyrex cam kaplar yerleştirin. Zebrafish embriyolarını toplamak amacıyla, kapları şafak vaktinde iki saat boyunca tanklarda bırakın. Embriyoları içeren cam kapları, deiyonize su ile durulanmış el tipi bir süzgecin üzerine boşaltın.Ardından, embriyoları, deiyonize su içinde 60 mg/L instant ocean ve küf inhibitörü olarak kullanılan 0,25 mg/L metilen mavisi içeren yumurta suyunda büyütün. Embriyolar, toksikanlarla işlem görmeye hazır hale gelene kadar, 50 mL başına 50 ila 60 larva olacak şekilde veya daha büyük üretim tanklarında tutulabilir. Her bir deneyin hipotezine bağlı olarak embriyolar, genellikle DMSO içinde çözülen ve ardından doğrudan yumurta suyu ortamında daha fazla seyreltilen toksikanlar veya farmasötikler kullanılarak hemen veya gelişimin belirli aşamalarında işleme tabi tutulabilir.Mavi renk, embriyo ve larva tedavisi sırasında video gösterim amaçlı kullanılmıştır. Larvalar ve embriyolar, döllenmeden sonraki yedinci gündeki davranışsal analize kadar, 50 mililitreye yaklaşık 50 ila 60 larva düşecek şekilde derin Petri kaplarında tutulabilir; ölü embriyolardan kaynaklanabilecek fungal veya bakteriyel büyümeyi önlemek için yumurta suyu çözeltisi en geç iki günde bir değiştirilmelidir. Thermo Scientific marka tek kuyucuklu plastik plakalar içerisine dökülen agar kullanılarak şeritler oluşturmak için plastik kalıplar hazırlanmıştır.Kalıplar, kenarları 60 derecelik açıyla eğimli olan beş kanala sahiptir. Kalıpların ve plakaların boyutları için bu videoya eşlik eden metin protokolüne bakınız. İlk olarak, 60 miligram/litre instant ocean içeren deiyonize su içerisinde %0,8 agar eriterek agarları hazırlayın.Ardından, eritilmiş agarozun 50 mililitresini tekli bir kuyucuk plakasına dökerek kanalları oluşturun. Daha sonra, herhangi bir kabarcık oluşumunu önlemek için kalıbı sıvı agarozun üzerine çok yavaşça yerleştirin. Agaroz soğuduğunda kalıbı çıkarın.Aros şeritleri, kapların kapakları kapalı şekilde oda sıcaklığında 36 saate kadar saklanabilir. Yüksek kapasiteli davranışsal analizler için, görüntüleme kabinleri, kabinin üst kısmına monte edilmiş ve aşağıya, kabin tabanına bakan 15 megapiksellik bir dijital kamera ile hazırlanır. Ekranı yukarı bakacak şekilde 15,6 inç ekranlı bir dizüstü bilgisayar yerleştirilir.Larvaların aşırı ısınmasını önlemek için, ekran sıcaklığı 28 °C'nin üzerine çıkmayan bir dizüstü bilgisayar kullanılması en iyisidir. Agros plakalarının yerleştirileceği dizüstü bilgisayar ekranının üzerine plastik bir difüzör yerleştirin. Difüzör, toplanan görüntülerde daha fazla desen oluşmasını engelleyecektir.Görüntü yakalamaya başlamak için, larvaların stresini azaltmak amacıyla larvaları Petri kabından agros kanalına dikkatlice taşıyın. Her kanala 20 larvaları kadar yerleştirilebilir, ancak yüzme hızının en doğru şekilde takip edilmesini kolaylaştırmak ve deney başına gereken larva sayısını azaltmak için genellikle kanal başına beş larva kullanılır; kanalları, deneye bağlı olarak farmasötik maddeler veya toksik maddeler içeren veya içermeyen yumurta suyu ile doldurun. Taşmayı önlemek için, kanalLarı görüntüleme kabinetlerine yerleştirilene kadar tamamen doldurmayın.Aklimatizasyon süresinden sonra larvaların adapte olması için 10 dakika bekleyin. Dört plakayı elle doğrudan dizüstü bilgisayar ekranının üzerine yerleştirin. Bu aşamada, şeritlerin kenarlarındaki gölgeleri gidermek için şeritler, üst seviyeye ulaşana kadar yumurta, su veya kimyasal işlemle tamamlanabilir.Görüntüleme programında, deney başına toplam 300 görüntü olacak şekilde her altı saniyede bir fotoğraf çekecek şekilde bilgisayarı time-lapse fotoğrafçılık için programlayın. Video hızında görüntüleme yapmak için kamerayı düşük çözünürlüğe ayarlayın. Düşük çözünürlük, kayıtların tek bir çok kuyucuklu plaka ile sınırlandırılmasına neden olur.Video kayıtları, hızlı yüzme olaylarının görüntülenmesi için uygundur. Bu demonstrasyonda larvalar için aversif uyaran olarak bir PowerPoint sunumu kullanın. PowerPoint, 15 dakika boyunca boş beyaz bir arka planla başlar ve ardından plakanın üst yarısında hareket eden kırmızı bir çubuğun olduğu 15 dakikalık bir bölüme geçer.Aros kanallarındaki sıvının buharlaşmasını önlemek için, maksimum görüntüleme süresini bir saatin altında tutun. Bu gösterimde görüntüleri Image J ile açın. Beş kanallı larva analizi için kurum içi bir makro kullanılmıştır ve bu makro her kullanıcıya sağlanabilir.Görüntü sayısı ve çıkarılacak renk gibi parametreleri ayarlamak için makrodaki istemleri kullanın. Ardından makro, kırmızı rengin kaldırılabilmesi için renk kanalını otomatik olarak ayırır. Arka planı çıkarır, bir eşik değeri uygular ve partikül analizi yoluyla larvaları tanımlar.Tüm görüntüler Image J Makrosu'ndan geçirildikten sonra, her görüntü için münferit larvaların XY koordinatlarını, görüntü numarası ve şerit numarasıyla birlikte içeren bir sonuç dosyası görüntülenecektir. Sonuç dosyasını Excel formatında kaydedin ve önce boş arka plan ile hareketli çubuk arka planına, ardından kuyucuk numarasına göre sıralayın. Larvaların kuyucuklardaki konumunu, larvalar arasındaki mesafeyi, hareket hızını ve dinlenme miktarını otomatik olarak belirlemek için yerleşik denklemlere sahip bir Excel şablonu kullanın.Cretin laboratuvarında oluşturulan en güncel Excel şablonu talep üzerine temin edilebilir; bu şablon, çeşitli tedavi gruplarını gösteren grafiklerin oluşturulmasına ve tedavi grupları ile kontroller arasındaki karşılaştırmalar için T-testi uygulanmasına olanak tanır. Daha ileri istatistiksel analizler SPSS istatistik programı kullanılarak gerçekleştirilebilir. Sonuçlar, kontrol olarak yumurta suyu ve DMSO ile tedavi edilen larvalar ve organik olmayan gıdalarda yaygın olarak bulunan bir organofosfat pestisitinin farklı konsantrasyonları için gösterilmiştir.Burada beyaz çubuklar boş bir arka plana maruz kalan larvalardan elde edilen verileri, kırmızı çubuklar ise hareket eden kırmızı çubuğa maruz kalan larvalardan elde edilen verileri göstermektedir. Kontrol grubu. Yumurta suyunda büyütülen larvaların, hareket eden kırmızı çubukla karşılaştıklarında kabın alt kısmında olma tercihlerinde bir artış gözlemlenmiştir. Benar sonuçlar, larvalar, çeşitli ilaçları ve toksikanları 1000 x stok çözeltiler şeklinde çözmek için yaygın olarak kullanılan bir çözücü olan 1 µg/mL DMSO içeren yumurta suyunda büyütüldüğünde de elde edilmiştir.Grafikler; şeritte aşağıda olan larvaların yüzdesi, şeridin sonunda olan larvaların yüzdesi, şeridin kenarında olan larvaların yüzdesi, larvaların yüzme hızı arasındaki mesafe ve larvaların dinlenme halindeki süre yüzdesi dahil olmak üzere davranışsal analizden elde edilebilecek ölçümleri göstermektedir. Sunulan sonuçlar tek bir deneyden alınan bir örnelemedir. Bununla birlikte, deneyler tekrarlandığında sonuçlar, insan gıdalarındaki seviyeleri taklit eden düşük konsantrasyonlardaki organofosfat pestisitlerin yüzme hızını ve figma davranışını değiştirdiğini göstermektedir. İşlem uzmanlaşıldığında, görüntüleme ve görüntü analizleri uygun şekilde yürütülürse bir buçuk saat içinde tamamlanabilir.Bu prosedürün en önemli yönü, kültür ortamını her gün yeni ortamla değiştirerek temiz tutmayı hatırlamaktır.

automated-high-throughput-behavioral-analyses-in-zebrafish-larvae

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Görsel-Motor Yanıt hafif artışlarla ve azaltır yanıt larva zebrafish motor çıkışını ölçmek için geliştirdi. Biz de dahil olmak üzere başka bir görme testi optokinetik refleks tarafından test edildiğinde tamamen kör olduğu düşünülüyordu optokinetik yanıt (NRC) mutantlar, hiçbir zebrafish vizyon mutant inceledi.

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

Biz zebrafish transgenik embriyolar multiwell plakaları otomatik olarak görüntüleme ve analiz için bir sistem geliştirme raporu. Fibroblast Büyüme Faktörü muhabiri gen ekspresyonu üzerine küçük bir molekül, BCI, doza bağımlı etkileri ölçmek ve yüksek verimli zebrafish kimyasal ekranlar kurulması için teknoloji yeteneğini göstermektedir.

Zebrafish kimyasal ekranlar için otomatik görüntüleme ve analiz geliştirilmesi.

Video, zebra balığı larvalarının kaçınma ve timotaksis testini anlatıyor. Video, zebra balığı larvalarının görsel caydırıcı uyarana yanıt olarak davranışlarını inceler.

Zebra Balığı Kaçınma ve Timotaksis Deneyi: Caydırıcı Görsel Uyarana Yanıt Olarak Larva Davranışını İncelemek İçin Yüksek Verimli Bir Yöntem

Bu makale, zebra balıklarının larva hareketini izleyerek toksik bileşiklere karşı davranışsal tepkisini açıklamaktadır. Protokol ayrıca zebra balığı larvalarının çevresel kirleticiye verdiği tepkinin bir örneğine de bakıyor.

Larva Hareket Deneyi: Zebra Balığı Larvalarında Bir Bileşiğin Nörodavranışsal Toksisitesini İncelemek İçin Yüksek Verimli Yöntem

Zebra balığının tek tek ve gruplarını izleyebilen bir 3D otomatik video sisteminin kullanımı anlatılmaktadır. Uygulama örneği olarak, NMDA reseptör antagonisti MK-801'in zebra balığı sürüleri üzerindeki etkilerini araştırıyoruz.

Yetişkin Zebra Balığının Bireysel ve Sürülerini Kaydetmek için Otomatik Bir 3D İzleme Sistemi Kullanma

Burada, tasarım ve yüksek işlem hacmi zebra balığı embriyo bir 96-şey plaka diziliyor için böyle şablon kullanımı ayrıntılı yordam tarafından ardından arraying bir zebra balığı embriyo imal için bir protokol mevcut.

3 boyutlu (3D)-yüksek işlem hacmi zebra balığı diziliyor embriyo için şablon basılı

Bu iletişim kuralı fluorescently etiketli gıda yüksek üretilen iş moda larva zebra balığı bağırsak yoluyla transit süresini ölçmek için hedeftir.

Yüksek işlem hacmi ölçüm larva zebra balığı kullanarak Gut Transit süre

Burada, DEPDC5 geninin geçici inhibisyonundan kaynaklanan bir zebra balığı epilepsi modelinin geliştirilmesi ve karakterizasyonu için bir protokol sunuyoruz.

Zebra balığı epilepsi modelinde davranışsal ve fizyolojik analiz

Bu yazıda yetişkin zebrafish stres davranışsal ölçmek için basit bir yöntem açıklanmaktadır. Yaklaşım, stresli bir durumda, zebra balığı bir tankın alt yarısını tercih ettiği doğuştan gelen eğilimin avantajlarından yararlanır. Biz de Farmakoloji ile tahlil bağlantı için yöntemleri tarif.

Zebrafish içinde doğuştan stres eğitimi için davranışsal yaklaşımlar

Bu protokol, MPTP ile tedavi edilen zebrafish larvalarında Parkinson hastalığına benzeyen motor ve motor dışı eksiklikleri değerlendirmek için davranışsal fenotipleme paradigması oluşturur.

Davranışsal Deneye Dayalı Zebrafish Larvalarında MPTP Kaynaklı Parkinson Benzeri Davranışsal Fenotiplerin Fenotipik Profillenmesi

Öğrenin, zebra balığı larvalarında yüksek verimli otomatik davranış analizi yaparak toksik maddelerin ve ilaçların erken beyin gelişimi üzerindeki etkilerini inceleyin. Bu yöntem, davranışsal nörobilim araştırmalarında karmaşık davranış değişikliklerini tespit etmek için kullanılır.

Zebra balığı Larva otomatik Yüksek verim Davranış Analizleri

Daha fazla video keşfet