Name: Kemirgenlerde Orofacial Noseptif Yanıtların Ölçüsü Olarak Yemek Süresi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Öğrenin, kemirgenlerde orofasiyal ağrıyı ölçmek için yemek süresi analizini. Bu invaziv olmayan yöntem, çene ve diş ağrısının nicel bir göstergesidir ve hayvanları kısıtlamadan sürekli gözlem imkanı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu modelde sıçanlara veya farelere yiyecek ve su reklam libitumverildi. Texas A&M Üniversitesi Baylor Diş Hekimliği Koleji Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tüm deneysel protokolleri onayladı. Aşağıdaki özel ayarlar italik olarak gösterilmiştir ve özellikle sıçan TMJ artrit modeli için kullanılır. Fareler de bu modelde kullanılabilir ve alternatif diş ağrısı ve miyojenik orofasiyal ağrı hayvan modelleri de kullanılabilir42,43.
1. Yazılım Ayarları
<ol><li>Besleyici üniteler için Animal Monitor yazılımını bilgisayara yükleyin.</li>
	<li>Animals Monitor yazılımı şimdi simgeye tıklayarak açılır ve dosya menüsü seçiminin altında "yapılandırma" aşağı çekme seçeneğini seçin.</li>
	<li>"Hayvan Monitörü Yapılandırması" penceresinde "Pelet Teslim Edilen Giriş" (Şekil 1A) başlıklı kutunun işaretini kaldırın. Not: Bu kutu genellikle varsayılan olarak fabrikada işaretli. Bu seçeneğin seçimini kaldırın. Araştırmacı bu seçeneğin seçimini kaldırdığında, sonuçlar bir pelet dağıtılırken değil, oluktan bir pelet çıkarılarak kaydedilir. Not: "Otomatik Dosya Adlandırma" kutusu işaretlendiğinde, yazılım dosyaları otomatik olarak adlandıracaktır (Şekil 1A). Bu kutu genellikle varsayılan olarak fabrikada işaretli.</li>
	<li>Zamanlayıcı ışıklarını 06:00'da (06:00) ve 20:00'de (20:00) kapanacak şekilde ayarlayın. Not: Besleyici birimlerinin donanımı, kutuların içindeki ışıkların yazılım tarafından kontrol edilmediklerinden, bunun yerine yalıtılmış 24 saat zamanlayıcıya bağlanacak şekilde değiştirilmiştir. Bu nedenle, yapılandırma yazılımında belirtilen "Ev Işığı" bu örneklerde işlevsel değildi.</li>
	<li>Aşağı çekme menüsünü düzenle'yi seçin ve Deneme'yi seçin. "Kutu 01 -" başlıklı bir pencere görüntülenir (Şekil 1B).</li>
	<li>Verilerin bu pencereye kaydedileceği dosya adını girin. Not: Dosya adı girilmezse, veri dosyaları yazılım tarafından otomatik olarak adlandırılır. Denemenin ayrıntıları bu pencereye eklenebilir ve veri dosyalarıyla kaydedilebilir. Penceredeki bilgiler de kaydedilebilir ve sonraki denemeler için kullanılabilir.</li>
	<li>"Deneme Uzunluğu (Günler):" başlıklı giriş kutusuna denemenin toplam süresinden daha büyük bir sayı girin. Not: Bu, deney tamamlanana kadar yazılımın verileri kaydetmesini sağlayacaktır, bu değeri çok kısa ayarlamakta bir hata olabilir, bu da hayvanlar hala besleme modüllerinde olsa bile yazılımın verileri kaydetmesini durdurur.</li>
	<li>"Günde Saat Sayısı" başlıklı giriş kutusuna 24 girin. Not: uzunluk, deneycinin özelliklerine göre değiştirilebilir.</li>
	<li>"Yemek Dönemi Bitiş Ölçütleri (min):" başlıklı kutuya 10 girin Not: Sıçanlar için bir yemek, önceki çalışmalara dayanarak 10 dakikalık bir yemek sonu kriteri kullanılaraktanımlanmıştır 48 (yani bir yemek, pelet alınmadan 10 dakikalık bir süre önce ve sonra parantez içine alınmıştır) ve minimum yemek boyutu bu yazılım paketinde yemek başına üç pelet olarak ayarlanmıştır.</li>
	<li>"Pelet Boyutu (mg)" başlıklı kutuya 45girin. Bir kişi bu pencerede fare girişi 20 kullanmak isterse.</li>
	<li>Sıçanlar için besleyici dağıtıcı haznesine 45 mg kemirgen chow peletleri ekleyin. Not: Fareler için chow hunisine 20 mg kemirgen çorbası peletleri ekleyin.</li>
	<li>Deneme penceresinin "Aşama" bölümüne, "Ad" alanına ve "Saat sayısı" alan türüne 24 (Şekil 1B)Terim Günü girin. Not: "Aşama" bölümünün altında iki büyük açık alanvardır. İlk büyük açık alan, önceki "Aşama" ve "Ad" alanlarına girilen metinle doldurulur.</li>
	<li>Bir sonraki büyük açık alanda "Gün Aşaması" başlığı "Işık sözcük" başlıklı alana girin ve 60 sayısını "Yüzde" başlıklı alana girin. Not: Bu girilen metin aşağıdaki büyük alanı doldurur.</li>
	<li>Daha sonra Koyu kelimesini "Ad" başlıklı alana girin ve "Yüzde" başlıklı alana 40 sayısını girin. Not: Bu girişlerle günün %60'ı ışık evresine, %40'ı ise karanlık faza atfedilecektir. Yazılım yemek düzenlerini hesapladığında bu bilgiler kullanılacaktır. Bu ayarlar, 14:10 açık / karanlık bir döngüde tutulan dişi hayvanları bisiklete binmek için tipiktir.</li>
	<li>"Tüm Kutuları Böyle Ayarla" düğmesini seçin. Bu bilgileri kaydedin ve Tamam'a basın.</li>
	<li>"Kutuları Başlat" ekranı görünür, etkinleştirmek için besleyicileri seçin ve Tamam 'a(Şekil 1C)basın.</li>
	<li>Daha sonra Hayvan Monitörü Çalışma Zamanı pencereleri yemek deseni verileriyle birlikte görünecektir (Şekil 1D). Not: Sıçanın mevcut sağlığını belirlemek için bu pencereden "Dağıtılan Peletlerin # "# "iz" i izleyin ve kaydedin. Yaklaşık 300 g ağırlığındaki sağlıklı bir erkek sıçan genellikle günde 300-800 45 mg pelet yiyecektir.</li>
	<li>Dosyalar günlük olarak oluşturulur ve otomatik olarak kaydedilir. CSV uzantısı. Gıda alımı, yemek numarası, yemek süresi, yemek boyutu veya ara aralık gibi yemek deseni verilerini almak için bu dosyaları açın. Bu yemek desenlerinin aralıkları tüm gün boyunca veya Karanlık ve Aydınlık fazı gibi günün bir aşaması için hesaplanabilir. Yukarıda belirtildiği gibi, ayarlar 14:10 açık / karanlık bir döngü içindir. Her peletin oluktan ne zaman çıkarıldığına ilişkin ham veriler de ham olarak kaydedilir. CSV dosyası. Not: Yazılımın eski sürümlerinde, oluşturma hesaplamalarında minimum 3 pelet yemek boyutu kullanılmaz. CSV dosyası.  Ayrıca, eski yazılımı kullanarak ortalama yemek süresini elde etmek için , öğesinin Ortalama Yemek Süresi sütunundaki değerlerden 10 dakika çıkarmanız gerekir. CSV dosyası. Yazılım çalışırken operatör dosya çekme menüsü seçeneğini manuel olarak seçebilir ve günlük olarak "ham verileri kaydet" i seçebilir. Bu, ham verileri tüm deney yerine 24 saat boyunca saklayacaktır. Bu ham veriler, kullanıcının takdirine bağlı olarak alternatif yazılımlar tarafından işlenebilir. Not: Gösterilen sonuçlarda, minimum 3 pelet yemek boyutu dahil etmek için alternatif yazılımlar kullandık.</li>
</ol>2. Yemek Süresi Tahlili
<ol><li>Tek tek sıçanları fotobeam bilgisayarla etkinleştirilen pelet besleyicilerle donatılmış ses zayıflatılmış odalara yerleştirin. Not: Bu besleme ünitelerinde, kalın emici kağıt tabakasının yer aldığı dereceli su şişeleri ve atık tavalar vardır. Besleyici dağıtıcı haznesinde sıçanlar için 45 mg kemirgen chow peletleri eklenebilir veya fareler için 20 mg kemirgen chow peletleri eklenebilir. Chow peletleri V şeklinde bir besleme oluğuna dağıtılmıştır ve bu oluğun dibinde bir fotobamam vardır. Bu fotobeam kırılarak oluğa dağıtılan bir pelet tespit edilecektir. Bir sıçan bu peleti besleyici oluğundan çıkardıktan sonra fotobeam geri yüklenir ve bu, bilgisayara başka bir pelet düşürmesi için sinyaller. Fotobeam'in restorasyonu ayrıca bilgisayarı tarih ve saati kaydetmeye tetikler ve dağıtılan peletlerin çalışan bir çetelesini tutar. Bu pelet çetelesi daha sonra Med Assoc. Inc. yazılımı kullanılarak günün herhangi bir bölümünde gıda alımını, yemek numarasını, yemek süresini, yemek boyutunu veya ara aralığı belirlemek için analiz edilir. Yine ham. CSV veri dosyası dış yazılım39,40,49-51tarafından analiz edilebilir.</li>
	<li>Deney sırasında sıçanların genel sağlığını ayırt etmek için toplam yenilen pelet sayısını, tüketilen su miktarını ve hayvanların ağırlığını kaydedin.</li>
	<li>Su şişelerini durulayın ve günlük olarak tatlı suyla doldurun ve gerektiğinde besleyici haznesine yemek ekleyin.</li>
	<li>Atık tavasını ve kalın emici kağıdı her gün kafesin altına dökün ve besleyicinin hareketli kısmındaki tozu yüksek basınçlı hava kullanarak günlük olarak üfleyin. Not: kişisel koruma ekipmanı(örneğin önlük, eldiven, maske ve maske) gereklidir.</li>
	<li>Deney tamamlandıktan sonra zeminleri, atık tavaları ve su şişelerini çıkarın ve bu bileşenleri yıkayın. Ayrıca, besleme elektroniklerini kafes yıkamadan elle veya bulaşık makinesinde çıkarın.</li>
</ol>3. TMJ Artrit İndüksiyonu
<ol><li>Hayvanları deneyden en az 4 gün önce besleyicilere yerleştirin. Not: Bu veriler, temel bir besleme davranışı elde etmek için ön gün olarak bildirilecektir. Daha sonra hayvanlar tedavi için besleyiciden çıkarılır. Bir tür tedavi artritli TMJ'ye neden olmaktı. Bu model için sıçanlar izofluran ile uyuşturulduktan sonra(%5 akış) saat 08:00'de (yani ışık fazının başlangıcı) tam Freund'un adjuvan (CFA) ile enjekte edilir.</li>
	<li>Her TMJ'nin periartiküler uzayına iki taraflı olarak 50 L'de 250 mg CFA enjekte edin. Not: örnekte (Şekil 2) Her TMJ'ye 50 L'de 250 mg CFA enjekte edildi, ancak 15 μl kadar küçük hacimlerde 10 mg kadar düşük dozlar daha kısa sürelerde etkilidir52.</li>
	<li>Kontrol sıçanları TMJ'ye 50 L%0.9 salin enjekte edin. Not: Anestezi indüksiyonu sonrasında tüm hayvanlar 5 dakika veya daha kısa sürede hareketliydi. Daha az hacimde daha küçük bir CFA dozu verilmesi durumunda, kontrol sıçanları aynı miktarda salin alır.</li>
</ol>

Açıklayacak bir şey yok.

Orofasiyal ağrılı TMJ hastaları, çiğneme süresinin artmasıyla ağrıyı artırdı, böylece çiğneme döngüsü bireyin45,53-56çiğneme süresi kadar uzar. Davranışsal testimiz, yemek süresini ölçerken sıçanlarda ve farelerde benzer testlere izin verir39. Yakın zamanda yayınlanmamış bir çalışma, von Frey filament testinin yemek süresi ölçümlerinden daha fazla hassasiyete sahip olduğunu ve daha uzun bir süre için önemli bir değişiklik gösterdiğini, ancak von Frey filament testinin bir refleks yanıt bileşenine sa...

Hayvan modelleri orofasiyal hasar ve veya iltihap1,2ile ilişkili ağrı ve nosiception incelemek için kullanılmıştır, ancak uygun hayvan modellerinin eksikliği mekanizmaların eksik anlaşılmasına neden olur. Mevcut modeller akut ve kronik orofasiyal ağrıda yer alan çeşitli mekanizmaları anlamamıza yardımcı olsa da, bu hayvan modellerinde güçlü ve zayıf yönler vardır.
Birçok model kısa süreler için davranışsal nosceptive yanıtları ölçmektedir. Yüz tımarı, yüz sinirlerinin daralmasını takiben bilinen bir davranışsal yanıttır3. Diğerleri, ipsilateral ön ayak veya hindpaw ile yüz sürtünmesini ölçtü ve temporomandibular ekleme (TMJ) veya dudağa formalin enjeksiyonları uyguladıktan sonra başın flinching'ini ölçtü. Kafa çekme gecikmeleri, bir sıçanın tıraşlı vibrissae pad'ine ısı uyguladıktan sonra noseptif yanıtı(yani kafa çekme) nicel hale getirmek için modifiye bir kuyruk fiske analjezi ölçerin kullanıldığı noseptif davranışı ölçmek için başka bir modeldir8. Digastrik ve masseter kas aktivitesi de TMJ9'aglutamat enjeksiyonlarından sonra ağrının bir korelasyon olarak kaydedilmiştir. Başka bir çalışma, iltihaplı bir TMJ ile erkek ve dişi sıçanlarda nosiptif yanıtları değerlendirmek için uyku parametrelerindeki değişiklikleri ölçtü, bu parametreler uyku gecikmesi, hızlı göz hareketi (REM), REM dışı uyku yüzdesi ve REM uykusu yüzdesi10 .. Davranışsal nosceptive yanıtları ölçen çoğu hayvan modeli kısa bir zaman dilimi kullanır, yani günde11-14saat dakika . Ek olarak, çoğu hayvan modeli testi ışık fazı sırasında gerçekleşir ve bir sıçan gibi gece hayvanında, bu, noseptif sonuçları15-18şaşırtabilecek strese neden olabilir. Yukarıdaki tahliller, farklı orofasiyal koşullarda ancak kısa süreli olarak noseptif yanıtı ölçmektedir ve bu nedenle sadece akut bozuklukları incelemek için kullanılabilir. Alternatif bir tahlil, orta süreli nosiception'un bir ölçüsü olarak yüz ifadesini kullanmıştır, ancak bu metodoloji öznel olabilir19.
Kalıcı veya kronik orofasiyal nosasiypsiyonları değerlendirmek için bazıları sinir daralmasına veya TMJ iltihabına maruz kalan hayvanların mekanik hassasiyetini değerlendirmek için cildin yüzeyinde bir von Frey filament uygulamasını kullanmıştır3,20. Liverman ve ark. 2009, sıçanların masseter kasına CFA enjeksiyonlarını takiben dereceli monofilamentler kullanarak yoksunluk yanıtlarını ölçtü 21,22. Yamazaki ve ark. 2008, TMJ'ye CFA enjekte etti ve 14 gün boyunca TMJ bölgesi üzerinde uygulanan mekanik veya ısı veya soğuk stimülasyona noseptif davranışları ölçtü. Ne yazık ki, bu nosceptive davranışsal tahliller, stres hormonları, öğrenme veya ölçülen sonuçlara müdahale edebilecek alternatif davranışlar üreten hayvan kısıtlamasını içerir.
Dişlerde nosiception ölçmek için modeller çene açma refleksini kullanır, ancak bu yöntem güvenilmez olabilir23 veya kesin olmayan24. Elektromiyografik aktivite diş nosiception ölçmek için kullanılmıştır25, ancak bu yöntem tipik olarak hayvanın bilinçsiz olmasını gerektirir, ancak bir çalışmada diş nosypsiyonu serbestçe hareket eden sıçanlarda araştırılmıştır26. 2008 yılında Khan, hassas bir gerinim ölçer27 kullanarak diş nosapsiyonu ve mastikatör fonksiyonu arasındaki ilişkiyi inceledi, ancak bu ısırık süresi modeli hayvanı normal aktiviteden kısıtlamayı gerektirir 28. Isırık kuvveti insanlarda diş ağrısının güvenilir bir ölçüsüdür, ancak sıçanlar ısırık kuvvetini ölçmek için eğitim ve / veya kısıtlama gerektirdiğinden, şüpheli fizyolojik öneme sahip bulgular üretebilecek bir stres kaynağı getirilmiştir29-31
Bazı kısıtlama ve stres sınırlamaları, algılayıcı davranışları değerlendirmek için operant bir tasarım kullanılarak aşılabilir. Bir operant model değerlendirmek ve orofacial nociception32-35karakterize etmek için rahatsız edici bir sıcaklık kaçınma kullanır. Bu ödül çatışması modeli, kemirgenlerin yüzünü ısıtılmış veya soğutulmuş bir termal prob34,36'yakarşı gönüllü olarak konumlandırmasını sağlamak için tatlandırılmış süt ödülüne dayanmaktadır. Bununla birlikte, test hayvan eğitimi gerektirir, ancak testin bir gücü, verilerin otomatik bir şekilde toplanmasıdır.
Yine de başka bir hayvan modeli, orofacial nosiception indeksi olarak nosiception kaynaklı kemirme disfonksiyonu kullandı37. Bununla birlikte, kemirgen bir tüple sınırlıdır ve tek kaçışı çıkmak için bir dübelden kemirmektir. Bu modelin bir avantajı, farelerde akut veya kronik çene hasarından sonra çene fonksiyonunu ölçmesidir. Bununla birlikte, kemirgen sınırlıdır, bu da şaşırtıcı bir alternatif rakip davranış, yani kaçış ekler, bu da stresli olur ve böylece nociception tahlil sonuçlarını etkileyebilir.
Yemek süresi, TMJ artrit38-41,diş hamuru maruziyeti 42 ve kas hasarı43olan hayvanlarda nosiception ölçmek için kullanılmıştır. Orofacial nosiception yaşayan bir kemirgen, hayvan bir yemek başlattıktan sonra daha yavaş yedi. TMJ ağrısı yaşayan hastaların da yiyeceklerini çiğnemeleri daha uzun sürer ve TMJ ağrısı44-46azaldığında döngü uzunluğu kısalır. TMJ ağrısı mevcut olduğunda yemek süresinin uzamasının, operasyonel olarak nosceptive davranış olarak tanımlanan bir "koruma davranışı" olması beklenir47.
Yemek süresi, erkek ve dişi sıçanlarda 19 güne kadar ve erkek farelerde 6 güne kadar (test edilen en uzun süre) noninvaziv bir yöntem kullanarak TMJ nociception'ı ölçer ve nosiception38-41'inbiyolojik belirteci olarak tanımlanabilir. Yemek süresinin noseptif yanıtları ölçtüğünü desteklemek için, hayvanın yemek süresinin normal38.40,41'edönmesine neden olan farmakolojik müdahale ile nosiception azaltılabilir. Bu aynı zamanda noseptif nöronlar kapsaisin kullanılarak tahrip edildiğinde de doğrulandı; sinir yıkımından sonra, CFA'nın TMJ 40'a enjekte edilmesinden sonra hayvanların yemek süresi artırılmış değildir.
Aşağıda, yemek süresi verilerinin nasıl eldeılacağı ve istatistiksel olarak analizılacağına ilişkin protokol verilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Hayvan Monitörü yazılımı</td><td>Med Assoc. Inc</td><td>SOF-710</td><td>East Fairfield, VT</td></tr><tr><td>Tozsuz Hassas Peletler, Kemirgen, Tahıl Bazlı&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>F0165</td><td>45 mg peletler, 50.000/kutu</td></tr><tr><td>Tozsuz Hassas Peletler, Kemirgen, Tahıl Bazlı&nbsp;</td><td>Bio-Serv</td><td>FO163</td><td>20 mg peletler</td></tr><tr><td>Komple Freund'un Adjuvanı</td><td>Chondrex, Inc.</td><td>7001</td><td>Hiçbir loger 5 mg / ml konsantrasyonu sağlamaz. Araştırmacı bu kaynağı tutarlı bir şekilde kullandığı sürece diğer kaynaklardan CFA'yı kullanabilir</td></tr></tbody></table>

kemirgenlerde orofacial noseptif yanıtların Ölçüsü olarak yemek süresi

Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents

Yemek süresinde bir uzatma, orofasiyal ağrılı insanların koruma davranışıyla benzerlikleri olan orofasiyal mekanik hiperaljezideki bir artışı ölçmek için kullanılabilir. Yemek süresini ölçmek için sınırsız sıçanlar, besleme davranışını kaydetmek için günlerce ila haftalar boyunca sürekli olarak ses zayıflatılmış, bilgisayarlı besleme modüllerinde tutulur. Bu ses zayıflatılmış odalar chow pelet dağıtıcıları ile donatılmıştır. Dağıtıcı, oluğun dibine yerleştirilmiş bir fotobura sahip bir pelet oluğuna sahiptir ve bir kemirgen besleyici oluğundan bir pelet çıkardığında, bu ışın artık engellenmez ve bilgisayara başka bir pelet düşürmesi için sinyal verir. Bilgisayar, peletlerin oluklardan alındığı tarih ve saati kaydeder ve bu verilerden deneyci yemek parametrelerini hesaplayabilir. Yemek parametreleri hesaplanırken bir yemek önceki çalışmalara göre tanımlanmış ve 10 dakika olarak ayarlanmıştır (başka bir deyişle, hayvan 10 dakika boyunca yemek yemediğinde, hayvanın yemeğinin sonu olacaktır) ayrıca minimum yemek büyüklüğü 3 pelet olarak ayarlanmıştır. Yemek süresi, yemek numarası, gıda alımı, yemek büyüklüğü ve ara öğün aralığı daha sonra operatörün istediği herhangi bir süre için yazılım tarafından hesaplanabilir. Yemek süresi hesaplanan beslenme parametrelerinin, erkek sıçanlarda, farelerde ve dişi sıçanlarda orofasiyal nosiception'ın sürekli noninvaziv biyolojik belirteci olduğu gösterilmiştir. Yemek süresi ölçümleri niceldir, eğitim veya hayvan manipülasyonu gerektirmez, kortikal katılım gerektirir ve deneysel olarak indüklenen diğer davranışlarla rekabet etmez. Bu faktörler, bu tahlilleri orofasiyal nosiception kaydetmek için diğer operant veya refleks yöntemlerden ayırır.

Yemek süresi orofasiyal ağrının davranışsal bir korelasyondur ve TMJ artriti (Şekil 2) ve diş çürüğü olan hayvanlara yemek süresi ölçümleri uygulanmıştır (Şekil 3). Bir deneyde, sıçanlar yüksek 250 mg CFA dozu uyguladıktan sonra TMJ artriti vardı ve bu tedavi 19 gün boyunca yemek süresinde önemli bir artışa neden oldu(Şekil 2). Her TMJ eklemine enjekte edilen daha düşük doz cfa (10 mg) sadece 2-3 gün boyunca yemek süresinde daha küçük bir artış üretti52 bu yem...

Yemek süresinde bir uzatma, orofasiyal ağrısı olan insanların koruma davranışına benzer kemirgenlerde orofasiyal noseptif davranışı temsil eder. Yemek, eğitim veya hayvan manipülasyonu gerektirmeyen, kortikal katılım gerektiren ve bu tahlilleri alternatif refleks veya operant ölçümlerden ayıran diğer deneysel olarak indüklenen davranışlarla rekabet etmeyen bir davranıştır.

Kemirgenlerde Orofacial Noseptif Yanıtların Ölçüsü Olarak Yemek Süresi

A lengthening in meal duration can be used to measure an increase in orofacial mechanical hyperalgesia having similarities to the guarding behavior of ...

Bu prosedürün genel amacı, öğün süresi ölçümlerinin çene ve diş ağrısı ile kantitatif bir korelasyon gösterip göstermediğini belirlemektir. Bu işlem, öncelikle sıçanların öğün süresi bazal ölçümlerini almak için besleme kafeslerine yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Bazal ölçümler elde edildikten sonra, temporal mandibuler ekleme veya kontrol olarak diz eklemine ağrıya neden olan bir ajan enjekte edilir.Enjeksiyondan sonra hayvan besleme kafesine geri götürülür ve beslenme davranışı temel seviyelere dönene kadar gözlemlenir. Sonuç olarak, çene ağrısı olan hayvanların öğün sürelerinin daha uzun olduğunu göstermek için veriler toplanır ve analiz edilir. Kemirgen modellerinde ağrıyı analiz etmek için öğün süresi ve öğün modellerini kullanmanın birçok avantajı vardır; ancak bu modelin diğer model türlerine göre iki temel avantajının, hayvanların zapt edilmesine gerek olmaması ve hayvanın eğitilmesinin gerekmemesi olduğunu düşünüyoruz.Birkaç yıl önce, bir hayvan modelinde oral fasiyal ağrıyı ölçmek için iyi bir yöntemin olmadığını fark ettik. Bu durum, bizi yemek düzeni analizinin oral fasiyal ağrıyı ölçmek için kullanılabileceği olasılığını araştırmaya yöneltti. Bu süreç, oral fasiyal ağrıyı ölçmek için bugün kullandığımız modelin geliştirilmesini sağladı.Öğün süresi çalışmaları, 45 milligram pelletlerden oluşan kemirgen yemini yem haznesine ekleyen bilgisayar kontrollü pellet besleyicilerle donatılmış ses yalıtımlı odalarda gerçekleştirilir. Bu pelletler, altında bir fotoelektrik hücre (photo beam) bulunan yalağa dökülür. Parçacıkların ışın yolunu kapatmasını önlemek için fotoelektrik hücre açıklığının üzerine bir cam lamel yerleştirilmiştir.Sıçan peleti oluktan çıkardığında, foto-ışın geri yüklenir ve bilgisayara başka bir pelet düşürmesi için sinyal gönderilir. Bu sayede, hayvanın herhangi bir ek çaba sarf etmesine gerek kalmadan her zaman bir pelet hazır bulunur. Su şişesini doldurduktan sonra, altındaki atık tavasına emici kağıt yerleştirin.Başlamak için hayvan izleme yazılımını yükleyin ve besleme ünitelerini kurmak için açılır menüden konfigürasyonu seçin. Peletin dağıtıldığı an yerine oluktan alındığı anı kaydetmek için pelet teslim edildi giriş kutusundaki işareti kaldırın. Ardından, dosyaları otomatik olarak adlandırmak için otomatik dosya adlandırma kutusunu işaretleyin.Düzenle açılır menüsünden deney seçeneğini seçtikten sonra, verilerin düzgün bir şekilde toplandığından emin olmak için yeni pencereye dosya adını girin. Deney süresi gün kutusuna, deneyin toplam süresini aşan bir değer girin. Ardından, öğün dönemi ve kriterler için bir gündeki saat sayısını 24 olarak ayarlayın.10 dakika değerini girin. Pellet boyutu miligramlar başlıklı kutucuğa 45 yazın. Deney penceresinin faz bölümündeki isim alanına ve saat sayısı alanına "gün" terimini girin.Örnek olarak 24 yazın. Gün fazı (day phase) başlığı altında, isim alanına light kelimesini girin ve yüzde alanına 60 yazın. Bu işlemi, isim alanına dark yazıp yüzde değerini 40 girerek tekrarlayın.Ardından, bu düğmeye benzer tüm kutuları seç düğmesini seçin. Bu bilgileri kaydedin ve ardından tamam'a tıklayın. Başlangıç kutuları ekranı göründüğünde, etkinleştirilecek besleyicileri seçin ve tamam'a tıklayın.Ardından, öğün paterni verilerinin yer aldığı hayvan izleme çalışma zamanı pencereleri görünecektir. Temel beslenme davranışı gözlemlendikten sonra, temporomandibular eklem artriti ağrısı indüksiyonu için hayvanı besleyiciden çıkarın. Anestezinin ardından temporomandibular eklemi bulun ve ilgili boşluğa komple Freund adjuvanı enjekte edin.Bu işlemi diğer tarafta tekrarlayın. Kontrol sıçanlarına 50 µL %0,9'luk salin enjekte edilir. Diğer bir hayvan grubunun diz eklemine CFA enjekte edilir.Enjeksiyondan sonra, hayvanlar anesteziden çıkar çıkmaz besleme ünitesine geri yerleştirin. Öğün süresi analizi sırasında, artritik sıçanların beslenme davranışlarını öğün süreleri bazal seviyelere dönene kadar izleyin. Bu süre, CFA dozuna bağlı olarak 1 ila 19 gün arasında değişebilir.Daha önce yapılandırılan yazılım ayarları, analiz sırasında belirli bir süre boyunca verilen pelet sayısını takip edecektir. Su şişelerini her gün durulayıp tazeleyin ve yem haznesine yem ekleyin. En iyi sonuçlar için gerektiğinde emici kağıdı günlük olarak değiştirin.Yüksek basınçlı hava kullanarak teknedeki ve besleyici hareketli parçalardaki tozları temizleyin ve kapak camını günlük olarak silerek temizleyin. Tıkanıklık gözlemlenirse foto-ışın yolunu temizleyin. Çalışma tamamlandığında, tüm kafes bileşenlerini çıkarın ve yıkayın.Dosyalar günlük olarak oluşturulur ve gıda alımı, öğün sayısı veya öğün süresi gibi öğün paterni verilerini elde etmek için bu dosyalar otomatik olarak açılır. Alternatif olarak, bu deneydeki araştırmacının ihtiyaçlarına bağlı olarak, özel yazılımlar kullanılarak öğün paternleri hesaplanabilir. CFA ile indüklenmiş temporomandibular eklem artriti ağrısı olan sıçanlar, serum fizyolojik enjekte edilen hayvanlarla veya dize CFA enjeksiyonu yapılanlarla karşılaştırıldığında, 19 gün boyunca öğün süresinde belirgin bir artış göstermiştir.Bu yöntem, burada gösterildiği gibi diğer oral ağrı biçimlerine de uygulanabilir. Diş pulpa ekspozisyonu sonrası ağrı yaşayan sıçanlarda öğün süresi de artmıştır. Bu prosedür uygulanırken, muhtemelen günlük olarak sorun gidermeniz gereken iki konu vardır.Yaklaşık 300 gram ağırlığındaki spray dolly sıçanlarını kullandığınızda, günde yaklaşık 300 ila 600 arasında pelet yemeleri gerekir. Eğer örneğin 300'den daha az pelet yiyorlarsa, muhtemelen besleme ünitesinin üst kısmındaki sensörde bir sorun vardır ve bunun temizlenmesi gerekir. Eğer 600'den fazla pelet yiyorlarsa, sorun muhtemelen yem yalağındaki sensördedir ve bunun temizlenmesi gerekir.Bu nedenle, bu testi gerçekleştirirken aklınızda bulundurmanız gereken sadece bu iki husustur. Yemek paterni analiz modeli, oral fasiyal ağrı çalışırken diğer modellere göre çeşitli avantajlara sahiptir. Model, kortikal yolları içerir ve bu nedenle sadece refleks mekanizmalarını ölçmemektedir.Model, günün 24 saati kullanılabilir ve alternatif davranışlar tetiklemez. Bu durum, modeli oral fasiyal ağrının incelenmesinde oldukça güçlü bir araç haline getirir.

meal-duration-as-measure-orofacial-nociceptive-responses

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Bu video, infraorbital siniri bağlayarak bir sıçan modelinde orofasiyal nöropatik ağrının indüksiyonunu göstermektedir. Bu, sinir hasarı ve iltihaplanma ile sonuçlanır, anormal ağrı sinyaline neden olur ve orofasiyal ağrı testini incelemek için kullanılabilecek kronik ağrı durumlarını taklit eder.

İnfraorbital Sinir Ligasyonları Yoluyla Bir Sıçan Modelinde Orofasiyal Nöropatik Ağrının İndüklenmesi

Biz uyanık, bilinçli kemirgenlerde ağrı davranışların değerlendirilmesi için kullanıcı dostu, yüksek verimli edimsel sistemi mevcut. Orofasiyal Ağrı Değerlendirme Ölçeği (OPAD) böylece test daha insancıl bir şekilde sağlayan bir ödül / çatışma paradigma ile ağrı değerlendirebilir. Bu protokol kemirgenler daha fazla klinik ve öteleme veri verecektir.

Nosiseptif Davranış değişiklikler Tedbir Edimsel Orofasiyal Ağrı Değerlendirme Ölçeği (OPAD) kullanımı

Bu opioid kaynaklı hiperaljezi ve farelerde tolerans gelişimini incelemek için bir protokol açıklar. Naif ve morfin ile tedavi edilen hayvanların, termal ve mekanik nosiseptif yanıtların ölçümü dayanarak, ağrı duyarlılığı (hiperaljezi) 'de artışı ölçmek ve kronik opiat uygulama ile bağlantılı analjezi (tolerans) azalma sağlar.

Termal ve Mekanik nosiseptik Usuller kullanma Farelerde Morfin kaynaklı Hiperaljezi ve Analjezik Hoşgörü Değerlendirilmesi

Bu yazıda biz üretim yöntemleri ve bir IL4-10 rekombinant füzyon protein kalite kontrolü için ayrıntıları sağlar. Biz de bir fare modeli enflamatuar ağrı ağrı gidermek için bu proteinin etkinliğini test etmek nasıl göstereceğim.

Kronik ağrı tedavisinde rekombinant proteinler gelişimi

Burada verilen kronik post-iskemi ağrı (CPIP) bir hayvan modeli kurmak için adımları ayrıntıları bir protokoldür. Bu insan kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I taklit iyi tanınan bir modeldir. Mekanik ve termal hipersensitiviteler daha da değerlendirilir, ayrıca CPIP sıçan modelinde gözlenen kapsaisin kaynaklı nosifensif davranışlar.

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Migrenin en önemli belirtisi şiddetli baş ağrısıdır ve bunun meninksleri innerve eden duyusal nöronlar tarafından aracılık ettiği varsayılmaktadır. Burada, yüz aşırı duyarlılığını bir çıktı olarak kullanırken, maddeleri duraya minimal invaziv bir şekilde lokal olarak uygulamak için bir yöntem sunuyoruz.

Preklinik Bir Baş Ağrısı Modeli Olarak Farelerde Dural Stimülasyon ve Periorbital von Frey Testi

Mekanik çatışmadan kaçınma testi, farelerde ağrı duyarlılığının refleksif olmayan bir okuması olarak kullanılır ve çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri daha iyi anlamak için kullanılabilir.

Farelerde Ağrı Davranışını Ölçmek için Mekanik Çatışmadan Kaçınma Testi

Bu protokol, operant tabanlı bir orofasiyal ağrı değerlendirme cihazı kullanılarak nöropatik orofasiyal ağrının bir sıçan modelinde mekanik aşırı duyarlılığın değerlendirilmesini açıklar.

Sıçanlarda Sinir Hasarına Bağlı Mekanik Aşırı Duyarlılığın Orofasiyal Operant Ağrı Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Farelerde distal infraorbital sinirin kronik daralma yaralanması, devam eden ağrı ve allodinin belirtileri olan dokunsal stimülasyona (von Frey saç stimülasyonuna aşırı duyarlılık) yanıt olarak spontan davranışta (artmış yüz bakım aktivitesi) ve nosifensif davranışta değişikliklere neden olur ve trigeminal nöropatik ağrı için bir model görevi görür.

Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Farelerde Distal İnfraorbital Sinirin (DIoN-CCI) Kronik Daralma Hasarı

Bu protokol, Komple Freund Adjuvanı (CFA) ile indüklenen inflamatuar temporomandibular eklem (TME) ağrısında ısırma kuvveti ve baş çekilme eşiğinin ölçülmesinin ağrı davranışını nasıl yakalayabileceğini açıklar.

Farelerde Isırma Kuvveti ve Von Frey Filament Deneyleri ile Temporomandibular Eklem Ağrısı Ölçümü

Ağrı araştırmalarındaki son gelişmeler, farmakolojik olmayan bir tedavi olarak yeşil ışık yayan diyotların (GLED) kullanılmasının potansiyelini vurgulamaktadır. GLED ağrı yollarını modüle ederek etkili ağrı kesici sağlar. Bu makale, GLED maruziyet protokollerini standartlaştırmayı ve iyileştirmeyi, çalışmalar arasında tutarlılığı artırmayı ve bu tedavinin klinik uygulamasını ilerletmeyi amaçlamaktadır.

Yeşil Işık Yayan Diyotların Ağrı Yönetimindeki Rolünü Değerlendirmek için Fotonöromodülasyon Tekniklerinin Optimize Edilmesi

Öğrenin, kemirgenlerde orofasiyal ağrıyı ölçmek için yemek süresi analizini. Bu invaziv olmayan yöntem, çene ve diş ağrısının nicel bir göstergesidir ve hayvanları kısıtlamadan sürekli gözlem imkanı sunar.

Kemirgenlerde Orofacial Noseptif Yanıtların Ölçüsü Olarak Yemek Süresi

Daha fazla video keşfet