RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50751-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Gıda kısıtlı sıçanlarda arayan ilacın sağlam bir yükselişin bir gösteri sağlayan bir prosedür açıklanmıştır. Eroin öz-yönetim eğitimi takiben, fareler hafif kısıtlı yiyecek vardır sırasında, bir ilaç içermeyen bir ortamda, bir yoksunluk dönemi geçmesi. İlaç arayan sonra ilaç ile ilişkili olarak test edilir.
Bu prosedürün genel amacı, kronik gıda kısıtlamasının, yoksunluk koşulları altında laboratuvar sargılarında eroin arayışına nüksetme üzerindeki etkilerini incelemektir. Bu, bir iyileşme dönemini takiben eroinin kendi kendine uygulanmasına izin vermek için önce farenin juguler venine cerrahi olarak intravenöz bir kateter yerleştirilerek elde edilir. Sıçanlar, 10 günlük bir süre boyunca edimsel şartlandırma odalarında eroini kendi kendine uygulamak üzere eğitilir.
Prosedürün bir sonraki adımı, sıçanların hayvan tesisine taşındığı ve yiyeceğe kısıtlı veya sınırsız erişim süresine tabi tutulduğu yoksunluk aşamasıdır. Son olarak, sıçanlar, eroin bozulma koluna verilen tepkilerin, eroin dağıtımının yokluğunda bir işaret, ışık ve tonun aktivasyonu ile sonuçlandığı bir eroin arama testine tabi tutulmak üzere edimsel koşullandırma odalarına geri gönderilir. Nihayetinde, kronik olarak gıda kısıtlı sıçanlar Eroin öyküsü olan, kendi kendine uygulama, uyuşturucu alma ortamına ve ilaçla ilişkili ipuçlarına yeniden maruz kalmaktan kaynaklanan yoksunluk koşulları altında eroin arayışında güçlü bir artış gösterecektir.
Bu tekniğin, eski haline getirme prosedürü gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, insan durumunda gözlenmeyen açık edimsel yok oluşun olmamasıdır. Ayrıca, kronik ve akut manipülasyonların kullanılması, insanlık durumuna göre daha fazla yapı geçerliliğine izin verir. Bu yöntem, uyuşturucu ve yiyecek arama davranışlarının altında yatan yaygın nörolojik mekanizmalar gibi uyuşturucu bağımlılığı alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.
Kateterler toplu olarak hazırlanır ve uzun süre kullanım için otoklavda sterilize edilir. Bir kateter yapmak için önce elastik boruyu 12 santimetre uzunluğunda parçalar halinde keser. Kateterin etrafına uçtan üç santimetre uzakta küçük bir silikon damlası yerleştirmek için bir kürdan veya 18 gauge iğne kullanın.
Otoklavlamadan önce silikonun 24 saat kurumasını bekleyin, otoklavlamadan önce plastik kaideye dik açıda bir konektör görevi görecek olan beş yukarı kanülün uzun tüpünü bükün. Ameliyat günü kateterleri monte etmek için, skolastik tüpün uzun tarafını, plastik kaidenin yaklaşık yarısına kadar beşli kanülün bükülmüş metal tüpünün üzerine itin. Beş yukarı tüpü tigon tüpü ve harmanlanmış 22 gauge iğne ile steril salinle doldurulmuş bir mililitrelik bir şırıngaya bağlayın.
Engelsiz akışı sağlamak için salini kateterden yıkayın. Tıraştan önce hayvanı uyuşturmaya başlamak ve sağ omuzdaki ve baştaki alanı alkol ve cerrahi bir ovma ile temizlemek. Kurumayı önlemek için gözlere jel uyguladıktan sonra, enfeksiyon ve dehidrasyona karşı korumak için penisilin ve salin enjekte edilir.
Çevreleyen dokudan izole edildikten sonra dış juguler veni ortaya çıkarmak için standart teknikler kullanın. Kaldırılmış ve hafifçe gerilmiş tutmak için damarın altına kavisli forseps yerleştirin. Damar üzerinde V şeklinde küçük bir kesi yapın ve kesiği açık tutun.
Bir damar genişletici kullanarak, kateterin üç santimetrelik kısa ucunu, silikon damlası kesi noktasına gelene kadar kalbe doğru damar içine ilerletin. Kateteri damara üç dikişle bağlayın, biri mümkün olduğunca sıkışık. Biri silikon damlasına sadece rostral ve üçüncüsü mümkün olduğunca rostral.
Tıkalı kaldığından ve dikişlerin çok sıkı olmadığından emin olmak için kateterden tuzlu su geçirin. Ardından, sıçan ventral tarafı aşağı gelecek şekilde yerleştirin. Kafayı kesin ve cildi alttaki dokudan ayırmak ve deri altı bir cep oluşturmak için bir hemostat yerleştirin.
Hemostatı cilt altında, kateterin yerleştirildiği omuzlardaki açıklığa doğru yönlendirin. Bağ dokusunu kırın ve kateteri beşin tabanının altındaki en rostral noktada sıkıca sıkıştırın. Beşi ayırın ve kateterin uzun ucunu derinin altından geçirin ve başın üst kısmında bulunan kesiden dışarı çıkarın.
Kanama durdurucunun klemplendiği yerin altındaki kateteri kesmek için makas kullanın ve beşin uzun ucunu tekrar takın. Serbest akışı sağlamak için kateteri beşin metal şaftı boyunca plastik kaide geçişine kadar çekin. Yaraları dikişlerle kapattıktan sonra, fareyi stereotaksik bir aparata yerleştirin.
Açıkta kalan kafatası temiz ve kuru olduğunda, yüzeye dört ila beş delik açmak için manuel bir matkap ucu kullanın. Ardından, kafa kapağı için iskele görevi görecek şekilde makine vidalarını deliklere yerleştirin. Beşli konektörü vidaların arasına yerleştirin ve kateterin fazla uzunluğunu daha önce yapılan deri altı cebe sıkıştırın.
Son olarak, beşi kafatasının tepesine kadar sabitlemek için diş çimentosu kullanın. Çimento tamamen kuruduktan sonra fareyi stereotaksik aparattan çıkarın ve tamamen iyileşene kadar izleyin. Sıçanlar, edimsel koşullandırma odalarında ayrı ayrı barındırılır.
Bir fan ile donatılmış ses azaltma bölmeleri içine yerleştirilmiştir. İki geri çekilebilir kol, her bir kolun üzerinde bir işaret ışığı ile sağ yan duvarın zemininden dokuz santimetre yükseğe monte edilmiştir. Aktif kolun üzerine bir ton modülü yerleştirilmiştir ve sol yan duvarın üst orta kısmına kırmızı bir ev ışığı yerleştirilmiştir.
Libitum'da yiyecek ve su mevcuttur. İlaç pompası, metal bir yay ile korunan bir sıvı fırdöndü ve tigon borusu ile katetere bağlanır. Eroinin kendi kendine uygulanması, ameliyattan sonra iyileşme ve 24 saatlik bir alışma döneminden sonra başlatılır.
Başlamak için, kateteri bir heparin gentamisin çözeltisi ile yıkayın. Ardından, beş yukarı konektörü Tigon tüpüne bağlayın ve metal yayı takın. Her seansa, karanlık fazın başlangıcında, aktif ve aktif olmayan kolların uzatılmasının yanı sıra ev ışığının aydınlatılması ve Q ışık tonu kompleksinin aktivasyonu ile başlayın.
30 saniye boyunca, sıçanların üç saatlik aralıklarla ayrılmış üç üç saatlik seans boyunca 10 gün boyunca eroini kendi kendilerine uygulamalarına izin verilir. Aktif kol üzerindeki tepkiler, ilaç pompasının aktivasyonuna ve ev ışığının kapatıldığı ve aktif kolun üzerindeki Q ışık tonu kompleksinin etkinleştirildiği 22. bir zaman aşımı süresinin başlatılmasına neden olur. Etkin olmayan kol tepkileri kaydedilir, ancak programlanabilir sonuçları yoktur.
Kendi kendine yönetim eğitiminden sonra, fareleri işlevsel şartlandırma odalarından çıkarın ve onları yiyecek ve suya sınırsız erişimi olan hayvan tesisinde ayrı ayrı barındırın. Ertesi gün bir ilaç yıkama günü için, doymuş grupta gıdaya sınırsız erişimi sürdürürken, yoksunluk dönemine başlamak için gıda kısıtlı grup için yiyecek miktarını azaltın. Uyuşturucu arama testini yoksunluk sabahı yapın.
14. Gün, fareleri edimsel şartlandırma odalarına geri koyun ve metal yaya takın. İlacın mevcudiyeti hariç olmak üzere, aktif ve aktif olmayan kol tepkilerinin kendi kendine uygulama eğitiminde olduğu gibi aynı sonuçlara sahip olduğu bir veya üç saatlik bir oturuma izin verin. Bu sonuçlar, vücut ağırlıklarının eroin boyunca sabit kaldığını göstermektedir.
Kendi kendine uygulama eğitimi Yoksunluk sırasında, yemeğe sınırsız erişimi olan sıçanlar vücut ağırlıklarını artırırken, yiyecek kısıtlı olanlar vücut ağırlıklarını yaklaşık %10 ila %15 oranında azaltırBurada görüldüğü gibi, infüzyonlar ve aktif kaldıraç tepkileri eğitim günleri boyunca artarken, aktif olmayan kaldıraç tepkileri artmadı. Yoksunluk dönemini takiben, gıda kısıtlı sıçanlara yanıt veren aktif kaldıraç, doymuş sıçanlara göre anlamlı olarak artmıştır. Etkin olmayan kol yanıtı ise minimum düzeydedir ve gruplar arasında karşılaştırılabilir: Bu prosedürü takiben.
İntrakraniyal enjeksiyonlar, mikrodiyaliz, western blotting ve immünohistokimyasal teknikler gibi diğer yöntemler spesifik nörokimyasal ve farmakolojik sistemleri hedeflemek için kullanılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, intravenöz bir kateterin farenin şah damarına cerrahi olarak nasıl implante edileceğini ve ayrıca standart edimsel koşullandırma odalarında eroin kendi kendine uygulama prosedürünün nasıl yürütüleceğini net bir şekilde anlamalısınız.
Related Videos
08:54
Related Videos
21.4K Views
12:44
Related Videos
13.6K Views
02:47
Related Videos
290 Views
11:16
Related Videos
13K Views
07:50
Related Videos
10K Views
07:51
Related Videos
10.9K Views
04:11
Related Videos
17.5K Views
06:11
Related Videos
7.7K Views
10:29
Related Videos
4.5K Views
08:05
Related Videos
2.8K Views